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包埋培养法筛选白酒窖泥中一株功能细菌

食品科学 2017年第6期38卷 153-159页

作者：宋连宝赵辉黑龙江大学生命科学学院农业微生物技术教育部工程研究中心黑龙江哈尔滨150080

采用微包埋培养法结合流式细胞分选技术,对白酒窖泥中的细菌进行分离和筛选,分离到95株细菌。经菌株生长实验从中筛选出8株生长较缓慢的菌株LS4、LS27、LS32、LS37、LS64、LS66、LS69’、LS85,经气相色谱分析,LS66菌株产白酒香味物质较... 详细信息

采用微包埋培养法结合流式细胞分选技术,对白酒窖泥中的细菌进行分离和筛选,分离到95株细菌。经菌株生长实验从中筛选出8株生长较缓慢的菌株LS4、LS27、LS32、LS37、LS64、LS66、LS69’、LS85,经气相色谱分析,LS66菌株产白酒香味物质较为丰富,确定其为出发菌株。对其进行形态学观察、生理生化和16S r DNA鉴定,该菌株可能为一株窖泥未培养功能菌株uncultured bacterium clone N8-7,对该菌株的培养条件进行初步研究,菌株生长的最适温度、最适p H值和最佳发酵接种量分别为35℃、p H 6.5和4%。

关键词：白酒窖泥细菌微包埋未培养

同源片段长度对副干酪乳杆菌同源重组频率的影响

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中国食品学报 2017年第8期17卷 19-26页

作者：李兴霖孙艳阳王洋由田葛菁萍平文祥黑龙江大学生命科学学院微生物省高校重点实验室哈尔滨150080 农业微生物技术教育工程研究中心哈尔滨150080

目的:探索同源片段大小与副干酪乳杆菌同源重组率之间的关系。方法:分别构建以氨苄青霉素和四环素抗性标记基因为遗传转化筛选标记的,用于敲除prc K,prc R基因的4个同源重组质粒p2NIL-KA(625 bp,650bp),pUC18-KT(1 350 bp,1 350 bp),p2N... 详细信息

目的:探索同源片段大小与副干酪乳杆菌同源重组率之间的关系。方法:分别构建以氨苄青霉素和四环素抗性标记基因为遗传转化筛选标记的,用于敲除prc K,prc R基因的4个同源重组质粒p2NIL-KA(625 bp,650bp),pUC18-KT(1 350 bp,1 350 bp),p2NIL-RT(433 bp,474 bp),pUC18-RT(1 350 bp,1 350 bp),并分别电转化于副干酪乳杆菌HD1.7感受态细胞中,检测筛选同源重组转化子,计算发生同源重组的频率。结果:成功构建同源重组质粒,p2NIL-KA(625 bp,650 bp),pUC18-KT(1 350 bp,1 350 bp),p2NIL-RT(433 bp,474 bp),pUC18-RT(1 350 bp,1 350 bp)同源重组频率分别为0,1.85%,0,1.78%。结论:当同源片段长度为1 350 bp或更长时,可与副干酪乳杆菌染色体进行同源重组。

关键词：副干酪乳杆菌 prcK prcR 同源重组

树干毕赤酵母木糖醇脱氢酶基因表达载体构建及在酿酒酵母中的过表达

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中国食品学报 2015年第11期15卷 29-33页

作者：潘超孙博赵仲阳宋刚葛菁萍黑龙江大学生命科学学院微生物省高校重点实验室哈尔滨150080 农业微生物技术教育部工程研究中心哈尔滨150500

针对树干毕赤酵母xyl2基因设计相应引物。以p-AKRX为骨架载体,通过酶切连接的方式构建1个酿酒酵母工业菌株的表达载体p-AKRX2-2。将该表达载体线性转化酿酒酵母后,测定转化子SUN-Ⅰ木糖醇脱氢酶(XDH)及其表达情况。与原始菌株相比,重组... 详细信息

针对树干毕赤酵母xyl2基因设计相应引物。以p-AKRX为骨架载体,通过酶切连接的方式构建1个酿酒酵母工业菌株的表达载体p-AKRX2-2。将该表达载体线性转化酿酒酵母后,测定转化子SUN-Ⅰ木糖醇脱氢酶(XDH)及其表达情况。与原始菌株相比,重组酿酒酵母中的XDH活力是原始菌株的3.65倍。该重组质粒载体的构建可有效弥补酿酒酵母缺少代谢木糖关键基因的缺陷,为利用木糖高产乙醇酿酒酵母基因工程菌株的构建奠定基础。

关键词：树干毕赤酵母酿酒酵母载体构建木糖醇脱氢酶

酒曲果胶酯酶产生菌降低白酒中甲醇含量的研究

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中国食品学报 2019年第8期19卷 97-104页

作者：周姝颖杨青杨赵辉黑龙江大学农业微生物技术教育部工程研究中心哈尔滨150500 黑龙江大学生命科学学院黑龙江省普通高校微生物重点实验室哈尔滨150080

从优质酒曲中分离筛选出产果胶酶菌株89株,通过测定酶活力,筛选出果胶酯酶酶活较低的菌株。将优选菌株进行白酒发酵试验,通过气相色谱分析,确定产甲醇量低的1株细菌。对其进行形态学观察,生理生化指标和16S r DNA鉴定,确定该菌株为解淀... 详细信息

从优质酒曲中分离筛选出产果胶酶菌株89株,通过测定酶活力,筛选出果胶酯酶酶活较低的菌株。将优选菌株进行白酒发酵试验,通过气相色谱分析,确定产甲醇量低的1株细菌。对其进行形态学观察,生理生化指标和16S r DNA鉴定,确定该菌株为解淀粉芽孢杆菌,将其命名为ZS04。以不同接种量添加菌株ZS04,做白酒液态发酵试验。通过菌株菌群优势抑制酒曲中其它果胶降解菌的生长,从而降低发酵液中甲醇含量。当接种量为3%时甲醇含量最低为0.313 mg/100 mL,比对照组降低66.03%。当接种量为0.5%时甲醇含量为0.705 mg/100 m L,比对照组低20.96%,乙醇含量比对照组高5.77%。

关键词：果胶酯酶甲醇酒曲

东北膜荚黄芪内生细菌的分离及其活性代谢物分析

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中国食品学报 2019年第3期19卷 299-305页

作者：翟李欣徐慧超李伟郑雪郑春英黑龙江大学农业微生物技术教育部工程研究中心哈尔滨150500 黑龙江大学生命科学学院黑龙江省普通高校微生物重点实验室哈尔滨150080

研究北芪内生细菌及其次生代谢产物,旨在深入开发新资源。采用平板分离法从北芪中分离内生细菌,利用滤纸片法测定北芪内生细菌的抑菌活性。以芒柄花素及北芪生药为对照,采用HPLC法分析北芪内生细菌活性代谢物。同时对筛选出的目的菌株... 详细信息

研究北芪内生细菌及其次生代谢产物,旨在深入开发新资源。采用平板分离法从北芪中分离内生细菌,利用滤纸片法测定北芪内生细菌的抑菌活性。以芒柄花素及北芪生药为对照,采用HPLC法分析北芪内生细菌活性代谢物。同时对筛选出的目的菌株结合形态特征观察、生理生化试验及16S rDNA序列分析进行菌种鉴定。所得北芪内生细菌中,有31株内生细菌发酵液对11株试验菌表现出不同的抑菌活性,占总分离菌株的86.11%。HPLC分析表明,2株内生细菌发酵产物与北芪生药样品在相同保留时间内有相应的色谱峰出现,其中菌株HX8经鉴定为甲基营养型芽孢杆菌。北芪内生细菌具有较好的抑菌活性,其中内生细菌HX8发酵产生北芪活性成分或类似化合物,这为利用内生菌发酵生产北芪活性成分提供了新思路和途径。

关键词：黄芪内生细菌抑菌活性活性代谢物

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群体感应调控下的乳酸菌细菌素合成

食品与生物技术学报 2020年第11期39卷 12-17页

作者：宋刚曹春振杨志馨潘月葛菁萍黑龙江大学农业微生物技术教育部工程研究中心黑龙江哈尔滨150080 黑龙江大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150080

细菌素是一种在新陈代谢过程中由核糖体合成的具有抑菌作用的抗菌肽,因此被作为天然、无毒抗菌剂并广泛应用到食品行业中。群体感应是细菌细胞间通过对自诱导物浓度的感知,从而对基因表达进行调控的行为,现已证明乳酸菌的群体感应是细... 详细信息

细菌素是一种在新陈代谢过程中由核糖体合成的具有抑菌作用的抗菌肽,因此被作为天然、无毒抗菌剂并广泛应用到食品行业中。群体感应是细菌细胞间通过对自诱导物浓度的感知,从而对基因表达进行调控的行为,现已证明乳酸菌的群体感应是细菌素合成的关键调控机制。作者主要综述了目前乳酸菌细菌素的研究现状、细菌素的系统分类、群体感应信号的转导机制及其对乳酸菌细菌素合成的调节,以促进对细菌素的研究及应用。

关键词：细菌素群体感应信号分子调控

融合魏斯氏菌胞外多糖的分离纯化及其生化特性

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食品科学 2020年第1期41卷 9-15页

作者：姜静杜仁鹏郭尚旭赵丹黑龙江大学生命科学学院微生物省高校重点实验室黑龙江哈尔滨150080 农业微生物技术教育部工程研究中心黑龙江哈尔滨150080

从自制水果发酵液中分离筛选得到一株高产胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)的乳酸菌,经生理生化实验、形态学观察及分子生物学实验鉴定该菌株为融合魏斯氏菌(Weissella confusa)。以该菌株为供试菌进行产糖发酵及分离纯化EPS,并测定EP... 详细信息

从自制水果发酵液中分离筛选得到一株高产胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)的乳酸菌,经生理生化实验、形态学观察及分子生物学实验鉴定该菌株为融合魏斯氏菌(Weissella confusa)。以该菌株为供试菌进行产糖发酵及分离纯化EPS,并测定EPS的化学组成、溶解性、持水性、乳化性、抑菌性及抗氧化能力。结果表明,总糖、蛋白质、糖醛酸质量分数分别为(93.67±2.08)%、(0.32±0.01)%和(6.01±0.34)%。溶解率和持水率分别为(98.78±1.37)%和(426.03±7.26)%。此外,该EPS展现出良好的乳化性、抑菌性和体外抗氧化活性,且随着EPS质量浓度的升高,作用效果越强。

关键词：融合魏斯氏菌胞外多糖分离纯化生化特性

假肠膜明串珠菌HDL-3胞外多糖的分离纯化及结构性质分析

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食品工业科技 2022年第21期43卷 115-122页

作者：赵丹曹慧莹孙梦于连升杜仁鹏农业微生物技术教育部工程研究中心黑龙江哈尔滨150500 黑龙江大学生命科学学院微生物省高校重点实验室黑龙江哈尔滨150080

从东北自然酸菜发酵液中分离筛选出一株高产胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)的乳酸菌,通过16S rDNA分析将该菌株鉴定为假肠膜明串珠菌(Leuconostoc pseudomesenteroides)HDL-3。利用该菌株进行发酵产EPS、分离纯化EPS,并解析EPS的结... 详细信息

从东北自然酸菜发酵液中分离筛选出一株高产胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)的乳酸菌,通过16S rDNA分析将该菌株鉴定为假肠膜明串珠菌(Leuconostoc pseudomesenteroides)HDL-3。利用该菌株进行发酵产EPS、分离纯化EPS,并解析EPS的结构和性质。结果表明,EPS是由α-(1,6)糖苷键连接而成的线性葡聚糖,分子量为1.581×106 Da。EPS呈现表面光滑、有光泽、紧凑的片状非晶体结构。溶解率和持水率分别为98.63%±1.03%和401.30%±4.92%。此外,该EPS表现出非牛顿流体的剪切稀释特征,粘度与浓度呈正相关、与温度和pH呈负相关,不仅对大豆油、葵花籽油和苯具有较强的乳化能力,还对DPPH和ABTS自由基具有良好的清除能力。

关键词：假肠膜明串珠菌胞外多糖分离纯化结构性质

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紫苏籽多糖分离纯化及抗肿瘤活性

食品科学 2022年第15期43卷 158-165页

作者：刘子坤尹贺杨安皓安绮沄李冲伟金涛黑龙江大学农业微生物技术教育部工程研究中心黑龙江哈尔滨150500 黑龙江大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150080 哈尔滨美苏生物科技开发有限公司黑龙江哈尔滨150080

为了探究紫苏籽多糖(Perilla frutescens seed polysaccharide,PFSP)的抗肿瘤活性,利用传统方法从紫苏籽中提取粗多糖,利用DEAE-52纤维素和葡聚糖G-100柱层析分离纯化获得紫苏籽多糖,并测定该多糖对H22荷瘤小鼠免疫系统的影响。结果表明... 详细信息

为了探究紫苏籽多糖(Perilla frutescens seed polysaccharide,PFSP)的抗肿瘤活性,利用传统方法从紫苏籽中提取粗多糖,利用DEAE-52纤维素和葡聚糖G-100柱层析分离纯化获得紫苏籽多糖,并测定该多糖对H22荷瘤小鼠免疫系统的影响。结果表明,紫苏籽粗多糖得率为8.38%,分离纯化后得到3个组分,分别命名为PFSP-1、PFSP-2和PFSP-3。PFSP-1由甘露糖、半乳糖、木糖及阿拉伯糖(物质的量之比为0.01∶0.06∶0.11∶0.81)组成,PFSP-2由甘露糖、木糖及阿拉伯糖(物质的量之比为0.28∶0.28∶0.41)组成,PFSP-3由鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖及阿拉伯糖(物质的量之比为0.013∶0.024∶0.040∶0.080∶0.120∶0.700)组成;3个组分均具有多糖特征吸收峰,为吡喃环型多聚糖。抗肿瘤实验表明,PFSP-2抑瘤率显著高于PFSP-1和PFSP-3(P研究发现,与模型组相比,PFSP-2可显著降低乳酸脱氢酶、醛缩酶和白细胞介素(interleukin,IL)-10质量浓度(P<0.05),提高IL-2、肿瘤坏死因子α质量浓度(P<0.05),下调抗凋亡蛋白Bcl-2和上调促凋亡蛋白Bax表达(P<0.05),说明PFSP-2通过提高小鼠自身免疫能力抑制体内肿瘤细胞的生长。

关键词：紫苏籽多糖分离纯化免疫抗肿瘤活性