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肺癌细胞膜涂层的DOX和IR820的光热敏感型仿生脂质体用于癌症的化学-光热-光动力治疗

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药学学报 2024年第5期59卷 1430-1440页

作者：李士壮阚玉萍陈铭苏慧阎雪莹黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 哈尔滨市二四二医院黑龙江哈尔滨150040

本研究构建以多柔比星(doxorubicin,DOX)为模型药物、新吲哚菁绿(IR820)为光敏剂、温度敏感脂质体(temperature sensitive liposomes,TSL)为载体,H460-NCI人大细胞肺癌细胞膜涂层的光热敏感脂质体(DOX-IR820-TSL@CCM),用于化学-光热治疗-光动力治疗的多途径高效肿瘤靶向作用。采用逆向蒸发法制备DOX-IR820-TSL,通过裂解、破碎、离心等方法制备癌细胞膜(cancer cell membrane,CCM),采用纳米膜挤压法制备DOX-IR820-TSL@CCM;并对上述脂质体进行表征。最终确定DOX-IR820-TSL的载药条件如下:有机相与水相比例为4.02,二棕榈酰磷脂酰胆碱(dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine,DPPC)用量为10.04 mg,药脂比为0.12DOX-IR820-TSL显著相变温度(T_(m))为43.05℃,DOX-IR820-TSL@CCM平均粒径为153.4 nm,PDI为0.279,zeta电位为-26.2 mV。透射电子显微镜图像在图中显示出均匀的球形结构和半透明膜层。在近红外光照射下,药物释放率达到了63.98%,具有可调节的光热转化能力和产生活性氧的能力。通过SDS-PAGE电泳、Western blot、细胞毒性实验和细胞摄取实验,证明了细胞膜涂层的设计能够很好地保留CD47、N-cadherin、CD44、CD326等相关功能蛋白使DOX-IR820-TSL@CCM具备良好的免疫逃逸、同源黏附和同源靶向作用。本文制备了具有伪装特性和肿瘤靶向性的DOX-IR820-TSL@CCM,可作为一种协同治疗诊断平台用于未来的肺癌治疗。所有动物研究方案均已通过黑龙江中医药大学动物伦理委员会批准(编号为:2022121011)。

关键词：光热敏感脂质体癌细胞膜仿生新吲哚菁绿化学治疗-光热治疗-光动力治疗

中医药调控PI3K/Akt信号通路防治精神分裂症的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第8期30卷 280-289页

作者：吴海源柴剑波于明赵永厚黑龙江中医药大学哈尔滨150040 黑龙江神志医院哈尔滨150040

精神分裂症作为临床中最难治愈的神经精神障碍性疾病之一,主要表现为行为异常及多维度认知功能障碍,本病复发率与致残率逐年攀升,严重影响患者社会功能及生活质量,甚至威胁周围人群的身心健康。目前,临床中精神分裂症的治疗以抗精神病... 详细信息

精神分裂症作为临床中最难治愈的神经精神障碍性疾病之一,主要表现为行为异常及多维度认知功能障碍,本病复发率与致残率逐年攀升,严重影响患者社会功能及生活质量,甚至威胁周围人群的身心健康。目前,临床中精神分裂症的治疗以抗精神病药物联合心理技术治疗为主,存在着长期治疗效果有限且复发率高等问题,中医药治疗本病具有多靶点、多途径、多环节、多层次等特色优势,在精神分裂症的防治及预后过程中起到至关重要的作用。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)广泛存在于细胞且参与调控蛋白合成及组织凋亡等重要过程,蛋白激酶B(Akt)的不同亚型在细胞生长、氧化应激、神经元发育等过程中意义突出。近年来大量研究发现,PI3K/Akt信号通路与精神分裂症密切相关。中药单体及中药复方通过调控PI3K/Akt信号通路主要影响哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、糖原合成酶激酶(GSK)、葡萄糖摄取与转运主要依赖于葡萄糖转运体(GLUT)、核因子E2相关因子2(Nrf2)等关键信号分子,组织细胞内中枢网络并调节神经元突触形成和可塑性,同时调控神经细胞增殖、迁移、凋亡等过程在减轻精神分裂症中发挥着重要作用,具有多靶点、全方位、低毒性等优势。该文梳理并分析阐释中医药干预PI3K/Akt信号通路抗精神分裂症的作用机制,以期为中医药防治精神分裂症提供一定的理论依据与参考。

关键词：精神分裂症中医药磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt) 信号通路研究进展

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乳清浓缩蛋白对松仁蛋白溶解度及其乳液稳定性的影响

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食品科学技术学报 2024年第1期42卷 57-68,105页

作者：刘文超杨凯赵玉红东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江省林业科学研究所黑龙江哈尔滨150081 黑龙江省森林食品资源利用重点实验室黑龙江哈尔滨150040

为研究蛋白质-蛋白质相互作用对松仁蛋白(PKP)溶解度、结构和乳液性质的影响,以PKP和乳清浓缩蛋白(WPC)为研究对象,采用pH循环法制备PK P-WPC复合蛋白,利用SD S-PAGE、内源性荧光光谱、紫外-可见光谱、圆二色谱、荧光探针和ζ-电位等方... 详细信息

为研究蛋白质-蛋白质相互作用对松仁蛋白(PKP)溶解度、结构和乳液性质的影响,以PKP和乳清浓缩蛋白(WPC)为研究对象,采用pH循环法制备PK P-WPC复合蛋白,利用SD S-PAGE、内源性荧光光谱、紫外-可见光谱、圆二色谱、荧光探针和ζ-电位等方法分析了复合蛋白结构特性和表面特性,再以PK P-WPC复合蛋白为原料,分别制备了油相体积分数为3%、10%和50%的乳液,并对制备的乳液性质进行了检测。结果表明:当WPC与PKP的质量比为1.0∶1.0,且体系pH值经历由7.0到12.0再回到7.0时的1次pH循环后,PKP的水溶性可从48.53%提高到92.43%。SD S-PAGE结果显示,PK P-WPC复合蛋白完整保留了PKP和WPC的亚基。内源性荧光光谱、紫外-可见光谱和圆二色谱结果表明,静电相互作用、疏水相互作用和氢键是驱动PKP和WPC相互作用的主要作用力,PKP与WPC相互作用使复合蛋白具有较高的结构韧性,抵抗酸诱导的构象折叠;WPC的加入改变了PKP的二级结构,α-螺旋、β-转角和无规卷曲结构的含量增加,而β-折叠结构相对含量降低。PK P-WPC复合蛋白具有较高的表面电荷(-34.74 mV)来抵抗蛋白质的聚集。与由PKP制备的乳液相比,由PK P-WPC制备的乳液平均粒径和乳层析指数减小,ζ-电位绝对值增大,稳定性显著提高。乳液的性质因油相体积分数的不同而有较大的差异。油相体积分数为3%的复合乳液液滴小且分布均匀,稳定性好于油相体积分数为10%和50%的复合乳液。通过pH循环法,通过添加WPC,提高了PKP的溶解度,获得了稳定性较佳的PKP乳液,研究可为新型蛋白产品的研发提供理论基础,拓宽松仁蛋白在加工食品中的应用范围,推动PK P-WPC双蛋白乳液研究的发展。

关键词：松仁蛋白乳清浓缩蛋白复合蛋白乳液稳定性溶解度

平欧榛子副产物不同溶剂提取物的生物活性评价及超高效液相色谱-质谱分析

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食品科学 2024年第1期45卷 32-41页

作者：苏可欣赵玉红东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江省森林食品资源利用重点实验室黑龙江哈尔滨150040

采用不同极性溶剂(水、甲醇、80%乙醇溶液和乙酸乙酯)对平欧榛子的副产物(叶、果苞、壳、枝条和种皮)进行酚类物质提取,对其体外抗氧化、降血糖、抗炎活性进行评估,并利用超高效液相色谱-质谱(ultra-high performance liquid chromatogr... 详细信息

采用不同极性溶剂(水、甲醇、80%乙醇溶液和乙酸乙酯)对平欧榛子的副产物(叶、果苞、壳、枝条和种皮)进行酚类物质提取,对其体外抗氧化、降血糖、抗炎活性进行评估,并利用超高效液相色谱-质谱(ultra-high performance liquid chromatography-mass spectrometry,UPLC-MS)联用技术对其多酚类物质进行鉴定。榛子叶和枝条提取物比果苞、壳和种皮提取物具有更强的体外抗氧化、降血糖和抗炎活性,主要与榛子副产物中的总酚和原花青素相关,其中榛子枝条的甲醇提取物中总酚(以干质量中没食子酸质量计)和原花青素(以干质量中原花青素质量计)含量最高,分别为(37.13±0.22)mg/g和(2.27±0.04)mg/g,榛子叶的80%乙醇溶液提取物中的总黄酮(以干质量中芦丁质量计)含量最高,为(18.21±1.37)mg/g。乙酸乙酯提取物的总酚、总黄酮和原花青素含量在相同部位提取物中最低,但是对α-淀粉酶活性和脂氧合酶活性具有显著抑制能力(P<0.05),其中果苞的乙酸乙酯提取物抑制α-淀粉酶的效果最好,叶的乙酸乙酯提取物对脂氧合酶的抑制作用最强。经UPLC-MS分析可知,平欧榛子副产物中的酚类物质以黄酮类化合物居多,另外还含有萜类、生物碱、木脂素和有机酸等多种活性物质。平欧榛子副产物中的活性成分具有应用于功能食品或药品中的潜能。

关键词：平欧榛子副产物酚类物质生物活性主成分分析相关性分析

中药注射液治疗慢性肺源性心脏病的网状Meta分析

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中国中药杂志 2024年第10期49卷 2798-2817页

作者：班纪芳王贺王卓溪周亚滨客蕊黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150040

基于网状Meta分析系统评价不同中药注射液治疗慢性肺源性心脏病(CPHD)的有效性及安全性。检索中国知网(CNKI)、万方(Wanfang)、维普(VIP)、中国生物医学文献服务系统(SinoMed)、Web of Science、PubMed、EMbase、Cochrane Library数据... 详细信息

基于网状Meta分析系统评价不同中药注射液治疗慢性肺源性心脏病(CPHD)的有效性及安全性。检索中国知网(CNKI)、万方(Wanfang)、维普(VIP)、中国生物医学文献服务系统(SinoMed)、Web of Science、PubMed、EMbase、Cochrane Library数据库建库至2023年10月1日发表的中药注射液治疗CPHD的随机对照试验(RCT)。采用Cochrane系统评价手册5.3版推荐的偏倚风险评估工具对纳入文献进行质量评价,运用Stata 17.0、RevMan 5.4软件对数据进行统计分析。最终纳入103篇RCTs,9 332例患者,涉及13种中药注射液。网状Meta分析结果显示,(1)提高临床总有效率方面,累计概率排名曲线下面积(SUCRA)排名前3的干预措施依次为疏血通注射液+常规西医>川芎嗪注射液+常规西医>心脉隆注射液+常规西医;(2)降低肺动脉压方面,SUCRA排名前3的干预措施依次为丹参川芎嗪注射液+常规西医>川芎嗪注射液+常规西医>参麦注射液+常规西医;(3)提高左心室射血分数(LVEF)方面,SUCRA排名前3的干预措施依次为心脉隆注射液+常规西医>丹红注射液+常规西医>银杏达莫注射液+常规西医;(4)降低脑钠肽(BNP)方面,SUCRA排名前3的干预措施依次为心脉隆注射液+常规西医>银杏达莫注射液+常规西医>丹红注射液+常规西医;(5)提高动脉血氧分压(PaO_(2))、降低动脉二氧化碳分压(PaCO_(2))方面,SUCRA排名前3的干预措施依次为参芎葡萄糖注射液+常规西医>参麦注射液+常规西医>参附注射液+常规西医;(6)提高动脉血氧饱和度(SaO_(2))方面,SUCRA排名前3的干预措施依次为丹参川芎嗪注射液+常规西医>心脉隆注射液+常规西医>参麦注射液+常规西医;(7)提高第1秒用力呼气容积百分比(FEV_(1)%)方面,SUCRA排名前3的干预措施依次为参附注射液+常规西医>丹参酮Ⅱ_(A)磺酸钠注射液+常规西医>参麦注射液+常规西医;(8)提高第1秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV_(1)/FVC)方面,SUCRA排名前3的干预措施依次为丹参川芎嗪注射液+常规西医>疏血通注射液+常规西医>丹红注射液+常规西医;(9)安全性方面,试验组与对照组治疗期间均未出现严重的药物不良反应。综上,在常规西医治疗基础上联合中药注射液能够提高CPHD的综合疗效,降低肺动脉压,改善心肺功能及动脉血气水平。但鉴于纳入文献方法学质量与数量的限制,上述结论有待更多设计严谨且高质量的RCT进一步验证。

关键词：慢性肺源性心脏病中药注射液网状Meta分析

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基于PI3K/AKT/GSK-3β信号通路探讨EA改善APP/PS1双转基因小鼠认知功能障碍的内在机制

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中国药理学通报 2024年第1期40卷 90-98页

作者：仲丽丽路鑫于颖赵秦妍张静刘彤慧倪雪妍车艳玲吴丹刘宏黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学基础医学院黑龙江哈尔滨150040

目的探讨鞣花酸(ellagicacid,EA)对APP/PS1双转基因小鼠认知功能的影响,并基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶-3(PI3K/AKT/GSK-3β)信号通路探讨鞣花酸对双转基因小鼠海马氧化应激水平的调节机制。方法将32只SPF级6月龄APP/... 详细信息

目的探讨鞣花酸(ellagicacid,EA)对APP/PS1双转基因小鼠认知功能的影响,并基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶-3(PI3K/AKT/GSK-3β)信号通路探讨鞣花酸对双转基因小鼠海马氧化应激水平的调节机制。方法将32只SPF级6月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分为4组,即APP/PS1组、APP/PS1+EA组、APP/PS1+LY294002组、APP/PS1+EA+LY294002组,每组8只,另外选取8只SPF级C57BL/6J野生型小鼠(Wildtype)作为空白对照组,即WT组。APP/PS1+EA组给予50mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃EA;APP/PS1+LY294002组予以1.5mg·kg^(-1)·d^(-1)腹腔注射PI3K抑制剂LY294002;APP/PS1+EA+LY294002组予以50mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃EA,同时按1.5mg·kg^(-1)·d^(-1)腹腔注射LY294002;WT组和APP/PS1组于相同时间点灌胃等体积10%二甲基亚砜(DMSO)。每日给药1次,连续给药60天。Morris水迷宫检测小鼠学习和记忆能力,免疫组化、蛋白免疫印迹法检测PI3K、AKT、GSK-3β相关蛋白的表达,透射电镜观察小鼠海马组织超微结构变化。结果与WT组相比,其他四组的逃避潜伏期均增长(P<0.05),穿越平台次数明显减少(P<0.01);APP/PS1组、APP/PS1+LY294002组和APP/PS1+EA+LY294002组中的PI3K、AKT蛋白表达量显著降低(P<0.01),GSK-3β表达量显著升高(P<0.01);APP/PS1+EA组的PI3K表达量降低(P<0.05),AKT表达量显著降低(P<0.01),GSK-3β表达量升高(P<0.05);与WT组相比,APP/PS1组海马神经元细胞数目较少,线粒体结构破坏,大部分线粒体出现肿胀,线粒体的内膜和外模不完整,部分线粒体嵴消失,微管、微丝缠结,排列紊乱,而APP/PS1+EA组神经元细胞数较APP/PS1组增多,线粒体结构较清晰,可见清楚的线粒体嵴,线粒体轻度水肿。微管、微丝排列较整齐有序。结论鞣花酸改善AD模型小鼠的学习和记忆能力、减少海马神经元细胞损伤和凋亡,其作用机制可能是通过调节PI3K、AKT、GSK-3β等相关蛋白降低AD模型小鼠海马氧化应激水平。

关键词： APP/PS1双转基因小鼠阿尔茨海默病鞣花酸磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B 糖原合成酶激酶-3

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基于CNN-GRU-AE的蓝莓货架期预测模型研究

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食品科学 2024年第13期45卷 229-238页

作者：张润泽冯国红付晟宏王宏恩高珊朱玉杰刘中深东北林业大学机电工程学院黑龙江哈尔滨150040 东北林业大学土木与交通学院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江农业工程职业学院生物制药学院黑龙江哈尔滨150025

为探究贮藏于不同温度条件下蓝莓的品质变化及货架期,以‘自由’蓝莓为研究对象,测定其在0、4、25℃条件下的颜色参数、质量损失率、腐败率、质地参数等共计21个品质指标。通过5种具有自带特征选择功能的机器学习算法,筛选出7个影响货... 详细信息

为探究贮藏于不同温度条件下蓝莓的品质变化及货架期,以‘自由’蓝莓为研究对象,测定其在0、4、25℃条件下的颜色参数、质量损失率、腐败率、质地参数等共计21个品质指标。通过5种具有自带特征选择功能的机器学习算法,筛选出7个影响货架期的关键特征作为模型的输入变量,构建基于注意力(attention,AE)机制的卷积神经网络(convolutional neural network,CNN)和门控循环单元(gated recurrent unit,GRU)的蓝莓货架期预测模型。结果表明,与原始GRU相比,CNN-GRU-AE模型的平均绝对误差、均方误差和平均绝对百分比误差分别降低了75.83%、91.46%、61.58%,决定系数增加了2.25%。说明添加注意力机制并与CNN结合后的GRU模型显著提高了货架期的预测精度。本研究可为蓝莓在不同贮藏温度条件下的货架期制定提供理论支持,并为剩余货架期的预测提供技术帮助。

关键词：蓝莓货架期预测卷积神经网络门控循环单元注意力机制

中医药调控NF⁃κB相关信号通路干预溃疡性结肠炎相关性癌变的研究进展

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中国中药杂志 2024年第6期49卷 1455-1466页

作者：张钰异王浩王思琳周春航宋宁宁程丽敏黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学第一附属医院黑龙江哈尔滨150040

溃疡性结肠炎是以慢性、反复发作性和非特异性为特征的肠道炎症疾病,难以治愈,并有恶化为相关性肿瘤的风险,长期持续的慢性炎症刺激能增加癌变的风险,信号途径作为调节肿瘤微环境的关键一环,核因子⁃κB(NF⁃κB)不仅是肠道炎症重要的调... 详细信息

溃疡性结肠炎是以慢性、反复发作性和非特异性为特征的肠道炎症疾病,难以治愈,并有恶化为相关性肿瘤的风险,长期持续的慢性炎症刺激能增加癌变的风险,信号途径作为调节肿瘤微环境的关键一环,核因子⁃κB(NF⁃κB)不仅是肠道炎症重要的调节因子,还能作为其他信号途径的下游因子来共同调节,如TLR4、MAPK、STAT、PI3K等途径。目前已有大量动物实验研究证明了中药可通过干预NF⁃κB相关信号通路减轻炎症反应,改善肠道炎症,进而抑制炎症向肿瘤的进展。该文就NF⁃κB相关串扰通路关系及中医药对其干预机制的研究作一综述,以期为临床溃疡性结肠炎治疗及相关性癌变预防策略的优化提供借鉴与参考。

关键词：溃疡性结肠炎溃疡性结肠炎相关性癌(UCRCC) NF⁃κB 中医药

基于牛乳外泌体与脂质体的杂化外泌体制备及其负载青藤碱治疗类风湿性关节炎的药效学研究

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中国中药杂志 2024年第15期49卷 4069-4077页

作者：文武龙张炜烨贺雨欣孙鑫刘铭于洲波任鹏飞梁霄杨婧王锐黑龙江中医药大学药学院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学基础医学院黑龙江哈尔滨150040

研究乳源性外泌体与脂质体进行膜融合得到的杂化外泌体装载青藤碱(sinomenine,SIN)后对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗效果。通过蔗糖密度梯度离心法从鲜牛乳中提取外泌体,采用乳化蒸发-低温固化法制备脂质体,共孵育法进行膜融合后对... 详细信息

研究乳源性外泌体与脂质体进行膜融合得到的杂化外泌体装载青藤碱(sinomenine,SIN)后对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗效果。通过蔗糖密度梯度离心法从鲜牛乳中提取外泌体,采用乳化蒸发-低温固化法制备脂质体,共孵育法进行膜融合后对杂化外泌体进行表征:透射电镜检测形貌,纳米粒度电位仪检测粒径与电位,蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测膜融合前后外泌体膜表面特征蛋白CD63和TSG101的表达。超声法装载青藤碱后,酶标仪检测其载药量与包封率。胶原抗体诱导法建立CIA大鼠模型,药效实验设对照组、模型组、SIN组、SIN-脂质体组、SIN-乳外泌体组、SIN-杂化外泌体组及阳性药(地塞米松)组。记录给药期间大鼠体质量变化,以足肿胀度、免疫器官指数、关节炎指数、微循环指标变化、滑膜组织病理学检查、血清炎症因子水平变化为指标进行药效学研究。透射电镜结果显示,杂化外泌体与乳外泌体外观均呈茶托状,共孵育后外泌体粒径由(97.92±3.42)nm增长到(132.70±4.07)nm,Zeta电位由(-2.01±0.33)mV变为(-17.90±2.13)mV,WB结果显示CD63与TSG101蛋白在乳外泌体及杂化外泌体中均正常表达。酶标仪测定乳外泌体包封率31.64%±2.48%、载药量2.35%±0.52%,杂化外泌体包封率48.21%±3.12%、载药量3.17%±0.36%。药效学结果显示,与模型组相比,各给药组一般情况及足肿胀度、关节炎指数及免疫器官指数均得到显著改善(P<0.05,P<0.01),微血管综合评分及血管阻力显著下降(P<0.05,P<0.01),血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)炎症因子水平显著降低(P<0.01),滑膜组织的病变得到一定程度的改善。同时与SIN组、SIN-脂质体组及SIN-乳外泌体组相比,SIN-杂化外泌体组具备更平稳持久的药效。该研究将乳源性外泌体与脂质体共孵育得到的杂化外泌体成功改善了外泌体载药量小与脂质体生物相容性差等问题,负载青藤碱的杂化外泌体对CIA大鼠有着良好的疗效,可有效解决青风藤等疗效佳但生物半衰期短的问题,为传统中药的新发展及类风湿性关节炎等疾病的治疗提供了新思路。

关键词：外泌体脂质体膜融合青藤碱类风湿性关节炎