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Zeste基因同源蛋白2对非小细胞肺癌吉西他滨耐药性的影响

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中华实验外科杂志 2020年第8期37卷 1481-1484页

作者：王运翟展艺赵冲申国庆徐敬敬甘文云刘辉李海明李春苗赵丽敏黄淮学院附属驻马店市中心医院呼吸重症医学科 463000 黄淮学院附属驻马店市中心医院呼吸与危重症科 463000 河南省人民医院郑州大学人民医院河南大学人民医院呼吸与危重症医学科 450003

目的探讨Zeste基因同源蛋白2(EZH2)对非小细胞肺癌吉西他滨耐药性的影响及其机制。方法2019年1月至12月,采用吉西他滨(GCB)浓度梯度递增法建立非小细胞肺癌A549耐药细胞株A549/GCB。采用转染试剂将EZH2短发夹RNA(shRNA)和对照shRNA转染... 详细信息

目的探讨Zeste基因同源蛋白2(EZH2)对非小细胞肺癌吉西他滨耐药性的影响及其机制。方法2019年1月至12月,采用吉西他滨(GCB)浓度梯度递增法建立非小细胞肺癌A549耐药细胞株A549/GCB。采用转染试剂将EZH2短发夹RNA(shRNA)和对照shRNA转染至A549/GCB,分别作为对照组和EZH2 KD组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析GCB处理对A549和A549/GCB以及对照组和EZH2 KD组细胞增殖能力的影响;采用流式细胞术分析各组细胞凋亡水平;将对照组和EZH2 KD组细胞接种裸鼠,采用GCB治疗,分析小鼠肿瘤体积变化;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析EZH2下游蛋白SLFN11和CDKN1 C表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果10μmol/L GCB对A549细胞增殖抑制率[(76.59±5.96)%]明显高于A549/GCB细胞抑制率[(40.29±4.39)%],差异有统计学意义(t=3.109,P<0.05)。10μmol/L GCB处理A549 A549细胞凋亡率[(78.99±8.51)%]明显高于A549/GCB细胞[(25.36±4.31)%],差异有统计学意义(t=4.945,P<0.05)。10μmol/L GCB处理的对照组细胞增殖抑制率[(45.33±6.12)%]明显低于EZH2 KD组细胞抑制率[(74.12±5.12)%],差异有统计学意义(t=3.036,P<0.05)。体内移植瘤实验证实,经10 mg/kg GCB治疗30 d后,对照组肿瘤体积[(1025.87±90.59)mm^3]明显高于EZH2 KD组肿瘤体积[(498.85±45.33)mm^3],差异有统计学意义(t=5.041,P<0.05)。10μmol/L GCB处理的对照组细胞凋亡率[(29.51±5.87)%]明显低于EZH2 KD组细胞[(54.36±7.11)%],差异有统计学意义(t=3.557,P<0.05)。与对照组细胞SLFN11和CDKN1 C蛋白表达水平(0.48±0.11、0.56±0.13),EZH2 KD组细胞SLFN11和CDKN1 C蛋白表达水平(1.18±0.13、1.25±0.17)显著增加,差异有统计学意义t=3.110、3.214,P<0.05)。结论EZH2蛋白通过调节SLFN11和CDKN1 C蛋白表达水平,介导非小细胞肺癌对GCB的耐药性。

关键词：非小细胞肺癌吉西他滨耐药性增殖凋亡

重组人Siglec-1蛋白的制备及基于超滤亲和-液质联用技术天然配体的筛选

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药物评价研究 2024年第7期47卷 1556-1562页

作者：曹娟杨忠杰郑奕杨雷李森森黄淮学院医学院河南驻马店463000 黄淮学院附属驻马店市中心医院河南驻马店463000 漯河市中心医院药学部河南漯河462000

目的构建唾液酸免疫球蛋白凝集素1(Siglec-1)原核表达载体,表达纯化Siglec-1重组蛋白,构建超滤亲和-液质联用技术(UF-LC-MS)筛选Siglec-1蛋白天然配体。方法利用DNA重组技术构建Siglec-1重组蛋白原核表达载体,转化到BL21(DE3)感受态细... 详细信息

目的构建唾液酸免疫球蛋白凝集素1(Siglec-1)原核表达载体,表达纯化Siglec-1重组蛋白,构建超滤亲和-液质联用技术(UF-LC-MS)筛选Siglec-1蛋白天然配体。方法利用DNA重组技术构建Siglec-1重组蛋白原核表达载体,转化到BL21(DE3)感受态细胞中表达Siglec-1重组蛋白,通过Ni柱亲和色谱柱进行蛋白纯化,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分析Siglec-1重组蛋白纯度。建立UF-LC-MS技术研究金银花、甘草、迷迭香、菊苣中6个主要组分绿原酸、迷迭香酸、阿魏酸、甘草酸、甘草次酸、菊苣酸对Siglec-1蛋白的亲和力,通过比较样品组和蛋白变性组超滤液中待测物的峰面积,计算各待测物特异结合率。结果经双酶切及测序鉴定证明,重组表达质粒pET-22b-Siglec-1-His构建正确;纯化的人Siglec-1重组蛋白质量分数达90%以上;建立了UF-LC-MS筛选体系,筛选出甘草次酸可与Siglec-1蛋白特异性结合。结论成功表达了高纯度、高产量的人Siglec-1重组蛋白,筛选出甘草次酸可与Siglec-1蛋白特异性结合。

关键词：唾液酸免疫球蛋白凝集素1 重组蛋白超滤亲和-液质联用甘草次酸天然配体

Ferrostatin-1对脊髓损伤大鼠的治疗作用及其机制

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中华实验外科杂志 2023年第6期40卷 1079-1082页

作者：田力升陈长胜王冠王腾黄淮学院附属驻马店市中心医院创伤骨科驻马店463500 黄淮学院附属驻马店市中心医院脊柱外科驻马店463500

目的:探讨Ferrostatin-1对脊髓损伤大鼠的治疗作用和作用机制。方法:30只大鼠(河南省实验动物中心)按照数字表法分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。模型组和治疗组大鼠采用20 g的撞击针实施脊柱打击伤,对照组仅行脊柱暴露,不打击。... 详细信息

目的:探讨Ferrostatin-1对脊髓损伤大鼠的治疗作用和作用机制。方法:30只大鼠(河南省实验动物中心)按照数字表法分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。模型组和治疗组大鼠采用20 g的撞击针实施脊柱打击伤,对照组仅行脊柱暴露,不打击。治疗组大鼠经腹腔注射5 mg/kg Ferrostatin-1,模型组和对照组大鼠经腹腔注射等体积生理盐水。3组大鼠治疗6 d后,采用Basso、Beattie和Bresnahan(BBB)评分评定3组大鼠后肢功能恢复情况;采用试剂盒检测3组大鼠组织内谷胱甘肽的相对含量;蛋白质印迹法(Western blot)分析3组大鼠组织GPX4和4HNE的表达水平;免疫荧光和尼氏染色分析各组大鼠神经元的存活和数量。组间计量数据比较采用单因素方差分析。结果:治疗组大鼠脊髓提取液中GSH水平[(61.80±7.28)μmol/L]低于模型组[(32.90±6.24)μmol/L],差异有统计学意义(t=9.525,P<0.05)。治疗组大鼠脊髓组织中GPX4蛋白表达水平(1.20±0.05)明显高于模型组(0.82±0.08),差异有统计学意义(t=9.131,P<0.05)。治疗组大鼠脊髓组织中4HNE蛋白表达水平(0.93±0.29)明显低于模型组(1.40±0.09),差异有统计学意义(t=9.525,P<0.05)。治疗组大鼠神经元标志物NeuN阳性率[(51.70±8.58)%]高于模型组[(30.70±9.29)%],差异有统计学意义(t=28.020,P<0.05)。治疗组大鼠尼氏小体数量[(21.50±2.17)个]高于模型组[(15.30±1.49)个],差异有统计学意义(t=7.434,P<0.05)。治疗组大鼠BBB评分(15.60±1.71)高于模型组(7.70±2.36),差异有统计学意义(t=8.569,P<0.05)。结论:Ferrostatin-1可显著抑制脊髓损伤大鼠神经细胞的铁死亡,保护神经元,进而促进大鼠运动能力恢复。

关键词： Ferrostatin-1 脊髓损伤铁死亡神经元

药物治疗前后RA患者DCE-MRI参数变化及对骨侵蚀情况的影响

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影像科学与光化学 2023年第1期41卷 136-141页

作者：郑奕江迎春杨豪董战军陈艳李思强黄淮学院医学院河南驻马店463000 黄淮学院生物与食品工程学院河南驻马店463000 驻马店市中心医院河南驻马店463000

本文探究类风湿关节炎(RA)药物治疗前后动态增强磁共振成像(DCE-MRI)定量参数变化及对骨侵蚀情况的影响。选取112例RA患者,于药物治疗前后行DCE-MRI检查测量定量参数[最大增强(Emax)、最大相对增强(REmax)、相对增强(RE)、最大强化斜率(... 详细信息

本文探究类风湿关节炎(RA)药物治疗前后动态增强磁共振成像(DCE-MRI)定量参数变化及对骨侵蚀情况的影响。选取112例RA患者,于药物治疗前后行DCE-MRI检查测量定量参数[最大增强(Emax)、最大相对增强(REmax)、相对增强(RE)、最大强化斜率(Slopemax)],比较有反应和无反应患者治疗前后DCE-MRI定量参数、骨侵蚀评分。结果显示,无反应者治疗前、治疗后Emax、REmax、RE、Slopemax均高于有反应者,治疗前后Emax、REmax、RE、Slopemax变化值均低于有反应者(P<0.05)。治疗前后Emax、REmax、RE、Slopemax变化值均与RA患者药物治疗反应性呈正相关(P<0.05)。治疗前Emax、REmax、RE、Slopemax联合预测RA药物治疗反应性为无反应的曲线下面积(AUC)为0.901(95%CI:0.830~0.949)。无反应者治疗前、治疗后骨侵蚀评分均高于有反应者,治疗前后骨侵蚀评分变化值低于有反应者(P<0.05)。治疗前后Emax、REmax、RE、Slopemax变化值均与RA患者骨侵蚀评分变化值呈正相关(P<0.05)。可见,治疗前DCE-MRI定量参数Emax、REmax、RE、Slopemax能预测RA药物治疗反应性,且各参数变化值与骨侵蚀变化情况密切相关。

关键词：类风湿关节炎动态增强磁共振成像疗效骨侵蚀

阿司匹林调控NLRP3/caspase-1/GSDMD通路介导的焦亡途径减轻脂多糖诱导的急性肺损伤研究

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中国药学杂志 2023年第4期58卷 347-355页

作者：杨迪郭越张鹏刘琦任明芬黄淮学院直属附属驻马店市中心医院急诊科河南驻马店463000 郑州市中心医院慢性呼吸与危重症医学科郑州450001 郑州大学第一附属医院呼吸内科郑州450000 新乡医学院第二附属医院心血管内科河南新乡453000

目的探究阿司匹林(aspirin)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)时细胞焦亡的影响及机制。方法动物实验将SD大鼠分为对照组(control)、模型组(model)、模型+阿司匹林组(model+aspirin),每组各10只。采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)腹腔注射复制ALI大鼠模型。细胞实验将人支气管上皮细胞(BEAS-2B)分为control组、LPS组及LPS+aspirin组。HE染色观察肺组织形态、测定肺湿/干质量比(W/D)、酶联免疫吸附法(ELISA)测定乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)含量、碘化丙啶(PI)染色检测细胞焦亡率、Western blot检测NLRP3/caspase-1/GSDMD通路蛋白表达。利用Lipofectamine®2000构建NLRP3过表达,检测过表达对aspirin抑制LPS诱导BEAS-2B细胞焦亡及NLRP3/caspase-1/GSDMD通路的影响。结果与control组相比,model组大鼠肺组织出现明显病理损伤,W/D,IL-1β、IL-18含量以及NLRP3、cleaved-caspase-1、GSDMD-N蛋白表达均明显增加。Aspirin处理后能够改善ALI大鼠肺组织损伤,降低上述指标。与动物实验结果一致,LPS能够激活NLRP3/caspase-1/GSDMD通路诱导的BEAS-2B焦亡。Aspirin处理后能够抑制LPS对BEAS-2B细胞焦亡作用。与LPS+aspirin组相比,过表达NLRP3能够逆转aspirin对LPS诱导BEAS-2B细胞焦亡作用,促进NLRP3、cleaved-caspase-1、GSDMD-N蛋白表达。结论Aspirin能够通过调控NLRP3/caspase-1/GSDMD通路并抑制LPS诱导的ALI细胞焦亡,改善肺损伤。

关键词：急性肺损伤阿司匹林焦亡 NOD样受体蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1/消皮素D通路

人参皂苷Rg1通过调控AMPK/NLRP3通路介导的细胞焦亡抑制大鼠肺纤维化研究

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中草药 2023年第3期54卷 841-848页

作者：邓宏哲陈昆李鹏朱清海黄淮学院直属附属驻马店市中心医院普外腹腔镜、减重与代谢外科河南驻马店463000 黄淮学院化学与制药工程学院河南驻马店463003

目的探究人参皂苷Rg_(1)对大鼠肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)的影响及作用机制。方法50只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg_(1)(72 mg/kg)组、腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)激动剂(200 mg/kg)组、人参皂苷Rg_(1)(72 mg/kg)+AMPK抑制剂(20 mg/kg)组,每组10只。除对照组外,其余各组大鼠气管内注射博来霉素(5 mg/kg)构建大鼠PF模型。造模成功后2 d开始给药,连续给药28 d后检测大鼠肺功能指标;采用苏木素-伊红(HE)、Masson染色观察肺组织病理变化;采用免疫组化检测肺组织I型胶原(collagen I)和α-肌动球蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达;采用试剂盒测定肺组织羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β和IL-18水平;采用Western blotting检测肺组织p-AMPK/AMPK、NOD样蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cysteinasparate protease-1,Caspase-1)、消皮素D(gasdermin D,GSDMD)、IL-1β和IL-18蛋白表达。结果与模型组比较,人参皂苷Rg_(1)和AMPK激动剂组大鼠肺功能指标明显升高(P<0.05),肺纤维化程度改善,肺指数及肺组织Hyp、TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-18水平均明显降低(P<0.05),肺组织collagen I、α-SMA、NLRP3、cleaved Caspase-1/pro Caspase-1、GSDMD-N/GSDMD、IL-1β和IL-18蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),p-AMPK/AMPK蛋白表达升高(P<0.05)。与人参皂苷Rg_(1)组比较,人参皂苷Rg_(1)+AMPK抑制剂组大鼠肺功能指标降低(P<0.05),肺纤维化程度加重,肺指数及肺组织Hyp、TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-18水平均明显增加(P<0.05),肺组织collagen I、α-SMA、NLRP3、cleaved Caspase-1/pro Caspase-1、GSDMD-N/GSDMD、IL-1β和IL-18蛋白表达升高(P<0.05),p-AMPK/AMPK表达降低(P<0.05)。结论人参皂苷Rg_(1)能够抑制AMPK/NLRP3介导的细胞焦亡改善博来霉素诱导的大鼠PF。

关键词：人参皂苷Rg_(1) 肺纤维化博来霉素细胞焦亡 AMPK/NLRP3通路

经皮冠状动脉腔内成形术治疗急性心肌梗死的效果及对内皮功能和心功能的影响

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中华实验外科杂志 2023年第4期40卷 738-741页

作者：张月婷李新春关玲霞冯世军李鹏黄淮学院附属驻马店市中心医院介入手术室驻马店463000 黄淮学院附属驻马店市中心医院心血管内一科驻马店463000 黄淮学院附属驻马店市中心医院心脏大血管外科驻马店463000 黄淮学院附属附属驻马店市中心医院急诊科驻马店463000

目的探讨经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)治疗急性心肌梗死(AMI)的效果及对内皮功能和心功能的影响。方法选取2020年5月至2022年9月黄淮学院附属驻马店市中心医院收治的98例急性心肌梗死患者作为研究对象,采用随机数字表法将患者分为对照... 详细信息

目的探讨经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)治疗急性心肌梗死(AMI)的效果及对内皮功能和心功能的影响。方法选取2020年5月至2022年9月黄淮学院附属驻马店市中心医院收治的98例急性心肌梗死患者作为研究对象,采用随机数字表法将患者分为对照组和PTCA组,每组患者各49例。PTCA组患者实施PTCA进行治疗,对照组患者则给予常规静脉溶栓治疗。比较两组患者治疗后的临床疗效及不良事件发生。采用超声心动图检测两组患者左心室舒张末容积(LVEDV)、左心室收缩末容积(LVESV)、左心室射血分数(LVEF)水平;采用一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、血管性假血友病因子(vWF)检测试剂盒检测两组患者血清NO、ET-1、vWF水平。组间计量数据比较采用t检验。结果PTCA组患者的临床治疗总有效率[46例(93.88%)]明显高于对照组患者[38例(77.55%)],差异有统计学意义(t=5.333,P<0.05)。PTCA组患者LVEDV[(136.01±4.46)ml]、LVESV[(69.68±2.06)ml]水平明显低于对照组患者LVEDV[(155.24±4.87)ml]、LVESV水平[(82.41±2.37)ml],差异有统计学意义(t=20.41、28.36,P<0.05);PTCA组患者LVEF[(59.60±2.12)%]水平明显高于对照组患者[(50.67±1.47)%],差异有统计学意义(t=24.25,P<0.05)。PTCA组患者血清NO浓度[(62.31±3.53)μmol/L]明显高于对照组患者[(49.93±2.78)μmol/L],差异有统计学意义(t=19.30,P<0.05);PTCA组患者血清ET-1浓度[(62.37±2.91)ng/L]、vWF浓度[(6.64+0.26)ng/ml]明显低于对照组患者血清ET-1浓度[(72.73±2.68)ng/L]、vWF浓度[(8.01±0.21)ng/ml],差异有统计学意义(t=18.34、29.26,P<0.05)。PTCA组患者治疗后不良事件的总发生率[3例(6.12%)]明显低于对照组患者[8例(20.41%)],差异有统计学意义(t=4.188,P<0.05)。结论PTCA的实施可显著提升急性心肌梗死的临床治疗疗效,有效改善患者的心功能和血管内皮功能,并降低患者的不良事件发生率。

关键词：经皮冠状动脉腔内成形术急性心肌梗死心功能血管内皮功能

基于AMPK/ULK1介导的自噬通路探究牛蒡子苷元对骨关节炎大鼠软骨细胞焦亡的影响

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中国药学杂志 2023年第20期58卷 1839-1848页

作者：蔡猛陈文恒徐琳琳张永宁驻马店市中心医院骨科河南驻马店463000 河南医学高等专科学校郑州450053 黄淮学院医学院河南驻马店463003

目的探讨牛蒡子苷元(arctigenin,ARG)对骨关节炎(osteoarthritis,OA)大鼠软骨细胞焦亡的作用及调控机制。方法实验1:选取雄性,SPF级SD大鼠50只,随机分为假手术组(sham)、OA组、ARG低剂量组(ARG⁃L,7.5 mg·kg^(-1))、ARG高剂量组(ARG⁃H,30 mg·kg^(-1))、塞来昔布组(celecoxib,24 mg·kg^(-1)),每组各10只。除sham组外,其余各组大鼠均采用改良Hulth法建立大鼠OA模型。造模成功后,各组大鼠给予相应的药物或生理盐水灌胃,每日1次,连续干预8周。组织病理学染色观察大鼠软骨组织病理形态学变化并进行Mankin′s评分;碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色检测大鼠软骨细胞焦亡指数;Western blot检测细胞焦亡相关标志蛋白、腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)/UNC⁃51样激酶1(UNC⁃51⁃like kinase 1,ULK1)通路以及自噬相关标志蛋白表达;免疫荧光检测微管相关蛋白轻链3(microtubule⁃associated proteins light chain 3,LC3)表达。实验2:SD大鼠随机分为sham组、OA组、ARG组(30 mg·kg^(-1))、AMPK激动剂组(200 mg·kg^(-1))、ARG+AMPK抑制剂组(20 mg·kg^(-1)),每组各10只。除sham组外,其余各组大鼠均采用改良Hulth法建立大鼠OA模型。造模成功后,各组大鼠给予相应的药物干预,每日1次,连续干预8周。组织病理学染色观察大鼠软骨组织病理形态学变化并进行Mankin′s评分;PI染色检测大鼠软骨细胞焦亡指数;Western blot检测细胞焦亡相关标志蛋白、AMPK/ULK1通路以及自噬相关标志蛋白表达;透射电镜观察自噬小体形成。结果与sham组相比,OA组大鼠关节软骨组织损伤严重,且Mankin′s评分,细胞焦亡指数,细胞焦亡相关标志蛋白表达,p⁃AMPK/AMPK、p⁃ULK1/ULK1、LC3⁃II/LC3⁃I和苄氯素⁃1(Beclin⁃1)表达均显著降低(P<0.05)。与OA组相比,ARG⁃L、ARG⁃H组及celecoxib组大鼠关节软骨组织损伤减轻,且Mankin′s评分,细胞焦亡指数,细胞焦亡相关蛋白表达,p⁃AMPK/AMPK、p⁃ULK1/ULK1、LC3⁃II/LC3⁃I和Beclin⁃1表达均显著升高(P<0.05)。与ARG组相比,ARG+AMPK抑制剂组大鼠关节软骨组织损伤加重,且Mankin′s评分,细胞焦亡指数,细胞焦亡相关标志蛋白表达,p⁃AMPK/AMPK、p⁃ULK1/ULK1、LC3⁃II/LC3⁃I和Beclin⁃1表达均显著降低(P<0.05)。与OA组相比,AMPK激动剂组能够发挥与ARG相同的保护效应。结论ARG能够抑制OA大鼠软骨细胞焦亡,其机制与激活AMPK/ULK1通路介导的细胞自噬相关。

关键词：骨关节炎牛蒡子苷元软骨细胞焦亡自噬腺苷酸活化蛋白激酶/UNC⁃51样激酶1通路

微小RNA-590-3p靶向叉头框蛋白A2对肿瘤细胞增殖和转移特性的影响

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中华实验外科杂志 2023年第6期40卷 1091-1094页

作者：耿玲付小春耿旭景黄淮学院附属驻马店市中心医院生殖医学科驻马店463000 黄淮学院附属驻马店市中心医院妇科驻马店463000 郑州大学第二附属医院生殖医学部郑州450014

目的:探讨微小RNA(miRNA,miR)-590-3p靶向叉头框蛋白A2(FOXA2)对肿瘤细胞增殖和转移特性的影响。方法:采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析人卵巢上皮细胞HOSEpiC和卵巢癌细胞skov3中miR-590-3p水平;将人浆液性卵巢癌细胞系skov3随机分... 详细信息

目的:探讨微小RNA(miRNA,miR)-590-3p靶向叉头框蛋白A2(FOXA2)对肿瘤细胞增殖和转移特性的影响。方法:采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析人卵巢上皮细胞HOSEpiC和卵巢癌细胞skov3中miR-590-3p水平;将人浆液性卵巢癌细胞系skov3随机分为对照组和观察组,分别采用miRNA对照和miR-590-3p抑制剂转染skov3细胞,72 h后采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验和体外移植瘤实验分析两组细胞的增殖能力;采用Transwell和蛋白质印迹法(Western blot)分析两组细胞迁移、侵袭和上皮间质转化能力;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-590-3p的靶基因,Western blot分析两组细胞靶基因表达以及增殖和迁移相关蛋白表达水平。计量数据比较采用t检验。结果:人卵巢上皮细胞HOSEpiC miR-590-3p表达水平(0.77±0.14)明显低于卵巢癌细胞skov3 miR-590-3p表达水平(1.22±0.15),差异有统计学意义(t=5.450,P<0.05)。对照组细胞48 h吸光度值(2.06±0.13)明显高于观察组(1.37±0.12),差异有统计学意义(t=9.279,P<0.05)。对照组细胞克隆形成数量[(125.83±12.19)个]明显高于观察组[(103.67±10.04)个],差异有统计学意义(t=3.169,P<0.05)。对照组细胞肿瘤体积[(976.68±79.77)mm 3]明显高于观察组[(718.60±52.52)mm 3],差异有统计学意义(t=6.619,P<0.05)。对照组细胞肿瘤肿瘤[(4.42±0.51)g]明显高于观察组[(2.74±0.33)g],差异有统计学意义(t=6.807,P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(134.50±9.89)个]明显高于观察组[(108.17±7.63)个],差异有统计学意义(t=5.163,P<0.05)。对照组细胞侵袭数量[(93.83±5.31)个]明显高于观察组[(73.29±5.21)个],差异有统计学意义(t=6.414,P<0.05)。对照组细胞上皮细胞标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平(0.67±0.13)明显低于观察组(1.25±0.12),差异有统计学意义(t=7.763,P<0.05)。对照组细胞间质细胞标志物β-连环蛋白(β-catenin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平(1.25±0.12、1.22±0.13)明显高于观察组(0.92±0.06、0.69±0.07),差异有统计学意义(t=6.091、8.993,P<0.05)。FOXA2是miR-590-3p的靶基因。对照组细胞FOXA2蛋白表达水平(1.21±0.13)明显低于观察组(2.16±0.14),差异有统计学意义(t=12.200,P<0.05)。结论:miR-590-3p沉默可显著促进靶蛋白FOXA2表达,抑制卵巢癌细胞增殖和转移能力。

关键词：微小RNA-590-3p 叉头框蛋白A2 卵巢癌增殖转移