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保护性免疫大鼠结支睾吸虫后吡喹酮化疗效果

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2000年第2期18卷 98-102页

作者： Quan,FS Lee,JS 高丽大学医学院寄生虫学教研室

目的研究吡喹酮与宿主保护性对华支睾吸虫感染的协同作用。方法用粗成虫抗原９ＡＷＡｇ）和排泄分泌抗的（ＥＳＡｇ）免疫大鼠或感染２０条华支睾吸虫囊蚴获得保护性免疫，用５０俱结支睾吸虫囊蚴感染大鼠，用亚致死量吡喹酮（５０... 详细信息

目的研究吡喹酮与宿主保护性对华支睾吸虫感染的协同作用。方法用粗成虫抗原９ＡＷＡｇ）和排泄分泌抗的（ＥＳＡｇ）免疫大鼠或感染２０条华支睾吸虫囊蚴获得保护性免疫，用５０俱结支睾吸虫囊蚴感染大鼠，用亚致死量吡喹酮（５０ｍｇ／ｋｇ）治疗，以回收虫体数观察疗效。统计学上显著性差异用ＰＣ－ＳＡＳ系统的ＡＮＯＶＡ和ＮｐａｒｌｗａｙＫｒｕｓｋａｌ－Ｗａｌｌｉｓ检验法。结果（１）在对照组，ＥＳＡｇ免疫接

关键词：华支睾吸虫吡喹酮化疗效果保护性免疫

间日疟原虫对磺胺多辛-乙胺嘧啶抗药性相关基因的研究进展

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中国血吸虫病防治杂志 2019年第3期31卷 346-352页

作者：邹其成陆凤扬州大学医学院寄生虫学教研室

疟疾是一种严重威胁人类生命健康的寄生虫病。磺胺多辛-乙胺嘧啶可用于儿童和孕妇疟疾间歇性预防性治疗,同时其也作为以青蒿素及其衍生物为基础的联合疗法的一种复方成分而被用于疟疾治疗。恶性疟原虫对磺胺多辛-乙胺嘧啶产生抗药性与... 详细信息

疟疾是一种严重威胁人类生命健康的寄生虫病。磺胺多辛-乙胺嘧啶可用于儿童和孕妇疟疾间歇性预防性治疗,同时其也作为以青蒿素及其衍生物为基础的联合疗法的一种复方成分而被用于疟疾治疗。恶性疟原虫对磺胺多辛-乙胺嘧啶产生抗药性与编码二氢叶酸还原酶(DHPS)和二氢蝶酸合酶(DHFR)的基因发生点突变相关,而药物选择压力亦可导致间日疟原虫上述两个基因发生突变。本文就抗疟药磺胺多辛-乙胺嘧啶的发现、应用、作用和间日疟原虫对其抗性机制及抗性相关基因研究进展作一综述,旨在为抗疟策略的制定提供参考依据。

关键词：间日疟原虫磺胺多辛-乙胺嘧啶二氢叶酸还原酶二氢蝶酸合酶抗药性

弓形虫新基因wx2表位疫苗免疫小鼠的保护研究

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生物化学与生物物理进展 2008年第9期35卷 1051-1058页

作者：谭逵张琼范久波谢荣华蒋立平吴翔舒衡平中南大学湘雅医学院寄生虫学教研室长沙410078

采用生物信息学方法对弓形虫新基因wx2进行表位分析预测,PCR扩增基因中编码2个表位的片段W2b和W2a,成功构建新基因的单表位疫苗质粒pcDNA3-W2b、pcDNA3-W2a和双表位疫苗pcDNA3-W2b2a,接种小鼠,观察表位疫苗的免疫保护作用.将表位疫苗分... 详细信息

采用生物信息学方法对弓形虫新基因wx2进行表位分析预测,PCR扩增基因中编码2个表位的片段W2b和W2a,成功构建新基因的单表位疫苗质粒pcDNA3-W2b、pcDNA3-W2a和双表位疫苗pcDNA3-W2b2a,接种小鼠,观察表位疫苗的免疫保护作用.将表位疫苗分别通过肌肉注射免疫小鼠,对照组注射pcDNA3空质粒.ELISA法检测血清IgG抗体水平,取脾细胞用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群.各组小鼠末次免疫后第4周每只小鼠经腹腔注射弓形虫速殖子500个,观察小鼠的生存时间.结果显示,pcDNA3-W2a2b双表位疫苗组小鼠血清IgG抗体水平显著高于对照组(P<0.05),且pcDNA3-W2a2b双表位疫苗组小鼠脾细胞CD4+T与CD8+T淋巴细胞比值明显低于两单表位疫苗组,pcDNA3-W2a2b双表位疫苗组小鼠存活时间明显长于两单表位疫苗组(P<0.05).实验结果表明,弓形虫新基因wx2表位疫苗能够诱导小鼠产生抗弓形虫感染保护性免疫,并且弓形虫pcDNA3-W2b2a双表位疫苗的免疫保护性优于pcDNA3-W2b、pcDNA3-W2a两单表位疫苗.

关键词：弓形虫表位疫苗重组质粒 B细胞表位保护力

周期型马来丝虫复合基因重组质粒和相应表达蛋白的免疫学研究

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中华地方病学杂志 2014年第3期33卷 280-285页

作者：王慧方政徐倩陆施娟钱一言徐怿琳方浩徐邦生南通大学医学院寄生虫学教研室 226001

目的构建周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂／3-磷酸甘油醛脱氢酶（BmcPI／，BmGAPDH）复合基因重组质粒，并转染人宫颈癌细胞（Hela）进行重组蛋白表达。将重组质粒和相应表达蛋白进行免疫学研究比较。为研制新型的抗丝虫基因工程疫... 详细信息

目的构建周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂／3-磷酸甘油醛脱氢酶（BmcPI／，BmGAPDH）复合基因重组质粒，并转染人宫颈癌细胞（Hela）进行重组蛋白表达。将重组质粒和相应表达蛋白进行免疫学研究比较。为研制新型的抗丝虫基因工程疫苗提供理论及实验依据。方法扩增周期型马来丝虫目的编码基因。将目的基因片段和载体分别双酶切后进行连接，构建复合基因重组质粒pcDNA3．1（＋）-BmCPI/BmGAPDH，鉴定后转染Hela细胞，以G418筛选转染细胞，进而通过RT-PCR和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）鉴定G418筛选后的单克隆抗性细胞株。亲和层析纯化所表达的重组蛋白并通过免疫蛋白印迹法（Westernblot）对纯化的重组蛋白进行生物学鉴定。60只BALB／c小鼠分5组，每组12只，第2、4、6周分别免疫1次。磷酸盐缓冲液（PBS）对照组为注射PBS100μl；空质粒／CpG对照组为注射pcDNA3．1100μg和CpG30μg；复合重组质粒／CpG组为注射pcDNA3．1-BmCPI／BmGAPDH100μg和CpG30μ；复合重组蛋白／CpG组为注射pcDNA3．1-BmCPI／BmGAPDH复合重组蛋白50P-g和CpG30μg；复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组前2次注射pcDNA3．1-BmCPI／BmGAPDH100μg和CpG30μg；后1次注射pcDNA3．1-BmCPI／BmGAPDH复合重组蛋白50μ和CpG30μg。用RT—PCR方法检测肌肉组织内目的基因；用酶联免疫吸附试验（ELISA）、特异性增殖试验（MTT法）分别检测免疫小鼠血清抗体效价、T淋巴细胞刺激增殖指数和血清中细胞因子干扰素（INF）-γ、白细胞介素（IL）-4水平。结果复合重组质粒pcDNA3．1（＋）-BmCPI／BmGAPDH免疫小鼠后，从小鼠肌肉组织扩增出目的基因。复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组小鼠免疫4、6周后血清抗体效价（1695．12±1．43、3199．63±1．34）均高于复合重组质粒／CpG组（712．69±1．08、1510．08±1．43，P均〈0．05）和复合重组蛋白／CpG组（800．02±1．34、1510．08±1．43，P均〈0．05）；第6周的复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组小鼠淋巴细胞刺激增殖指数（1．629±0．235）高于复合重组蛋白组（1．248±0．110，P〈0．05）；免疫4、6周后，复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组和复合重组质粒／CpG组小鼠血清IFN-γ水平[（101．660±5．101）、（178．265±7．139）mg／L，（102．067±3．722）、（115．148±6．031）mg／L]均高于复合重组蛋白组[（75．438±2．102）、（82．004±3．777）mg／L，P均〈0．05]；免疫后6周，复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组和复合重组蛋白／CpG组的小鼠血清IL-4水平[（75．385±3．318）、（46．363±3．672）mg／L]均明显高于复合重组质粒／CpG组[（36．691±3．443）mg／L，P均〈0．05）。结论pcDNA3．1-BmCPL／BmGAPDH核酸疫苗和相应蛋白疫苗均可诱导BALB／c小鼠产生特异性体液和细胞免疫应答反应。核酸疫苗-蛋白疫苗联合免疫效果有明显的优势。

关键词：马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂 3-磷酸甘油醛脱氢酶复合基因表达蛋白免疫

丙烯硫脲对日本血吸虫感染小鼠肝脏病变的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2001年第6期19卷 351-353页

作者：何立蒋明森蔡国斌杨孟祥易新元曾宪芳武汉大学医学院寄生虫学教研室中南大学湘雅医学院寄生虫学教研室长沙410078

目的　观察丙烯硫脲对日本血吸虫感染小鼠肝脏病变的影响。方法　小鼠感染日本血吸虫尾蚴 2 2d后 ,隔日一次按 30 0mg/kg腹腔注射酚酶抑制剂丙烯硫脲 ,至感染后 4 2d剖杀动物 ,观察日本血吸虫感染小鼠肝脏的病理变化。结果　与感染对照... 详细信息

目的　观察丙烯硫脲对日本血吸虫感染小鼠肝脏病变的影响。方法　小鼠感染日本血吸虫尾蚴 2 2d后 ,隔日一次按 30 0mg/kg腹腔注射酚酶抑制剂丙烯硫脲 ,至感染后 4 2d剖杀动物 ,观察日本血吸虫感染小鼠肝脏的病理变化。结果　与感染对照组相比 ,实验组小鼠肝脏表现为散在分布的炎性细胞浸润灶 ,中心未见虫卵 ,仅见一些颗粒状物质。其平均直径和面积均较感染对照组的典型虫卵肉芽肿显著减小 (P <0 .0 1)。结论　感染小鼠腹腔注射丙烯硫脲后肝脏内未见虫卵肉芽肿的形成。

关键词：日本血吸虫丙烯硫脲肝脏病理变化感染

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广州血管圆线虫成虫的扫描电镜观察

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1989年第1期7卷 32-34页

作者：许世锷丁步兰陆秀君沈浩贤张大鹏肖永康汕头大学医学院寄生虫学教研室广州医学院寄生虫学教研室汕头大学医学院电镜室

应用扫描电镜对广州血管圆线虫的成虫进行了全面观察。该虫头部顶面有一个口腔,周围有两圈感觉乳突,每圈6个,但外圈的已退化而不很明显。在内圈侧乳突的外侧,有一对头感器开口。体壁表面有环状横纹,两横纹间有纵行皱襞。雄虫尾部两根交... 详细信息

应用扫描电镜对广州血管圆线虫的成虫进行了全面观察。该虫头部顶面有一个口腔,周围有两圈感觉乳突,每圈6个,但外圈的已退化而不很明显。在内圈侧乳突的外侧,有一对头感器开口。体壁表面有环状横纹,两横纹间有纵行皱襞。雄虫尾部两根交合刺的形态结构明显不同,根据其形态特征,我们分别称之为管状交合刺及槽状交合刺。当管状交合刺被包于槽状交合刺中时,外观似为一根:而当其从槽中脱出时,则外观为两根。此外,对雄虫的交合伞及雌虫尾部的结构也进行了描述。

关键词：血管圆线虫线虫电镜

广州血管圆线虫幼虫和幼龄成虫的扫描电镜观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1990年第4期8卷 291-293页

作者：丁步兰许世锷沈浩贤陆秀君张大鹏广州医学院寄生虫学教研室汕头大学医学院寄生虫学教研室汕头大学医学院电镜室

应用扫描电镜对广州血管圆线虫各期幼虫和幼龄成虫的体表结构进行了观察.它的口腔在第1、2期幼虫时呈闭合的“Y”形,到幼龄成虫时才发育成熟。口腔周围有内外两圈乳突。每圈各6个;随着虫体的发育,外圈乳突逐渐退化,至成虫时已不易见到。... 详细信息

应用扫描电镜对广州血管圆线虫各期幼虫和幼龄成虫的体表结构进行了观察.它的口腔在第1、2期幼虫时呈闭合的“Y”形,到幼龄成虫时才发育成熟。口腔周围有内外两圈乳突。每圈各6个;随着虫体的发育,外圈乳突逐渐退化,至成虫时已不易见到。第4期幼虫才明显看到。头感器开口两个,位于内侧乳突的外缘。在虫体前端腹面有一个排泄孔开口,仅在第3期幼虫观察到。雄虫的交合伞自第3期幼虫开始形成,到第25d的幼龄成虫才发育完成,本文对交合伞的形成过程进行了描述。雌虫的生殖孔在第1期幼虫即能见到,但要到第4期幼虫才开始出现肛孔,两者到第11d的幼龄成虫才发育完成。

关键词：广州血管圆线虫幼虫扫描电镜

日本血吸虫感染小鼠脾细胞IL-2及IFN-γ动态观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1995年第1期13卷 35-38页

作者：刘莉沈一平管晓虹章子豪孙邦华扬州大学医学院寄生虫学教研室南京医科大学寄生虫学教研室

本文观察８ｗｋ龄Ｃ５７ＢＬ／６小鼠感染日本血吸虫尾蚴后不同时期脾细胞经ＳＥＡ或ＣｏｎＡ刺激，体外诱生的ＩＬ－２和ＩＦＮ－γ活性变化。结果表明两种细胞因子活性均在感染后第４－６ｗｋ开始上升，第６—８ｗｋ达高峰，第１２—... 详细信息

本文观察８ｗｋ龄Ｃ５７ＢＬ／６小鼠感染日本血吸虫尾蚴后不同时期脾细胞经ＳＥＡ或ＣｏｎＡ刺激，体外诱生的ＩＬ－２和ＩＦＮ－γ活性变化。结果表明两种细胞因子活性均在感染后第４－６ｗｋ开始上升，第６—８ｗｋ达高峰，第１２—１４ｗｋ恢复至感染前水平。ＩＦＮ－γ高峰时间略先于ＩＬ－２。非特异性刺激原诱生组和特异性刺激原诱生组各阶段细胞因子活性动态基本一致，前组活性高于后组。提示ＩＦＮ－γ与ＩＬ－２活性与血吸虫卵肉芽肿的诱导、成熟与维持有密切关系。

关键词：日本血吸虫细胞因子感染白细胞介素2

周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶基因原核和真核表达质粒的构建

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中国地方病学杂志 2007年第6期26卷 639-642页

作者：方政黄为群陈阳谢东方姜声扬吴建军南通大学医学院寄生虫学教研室 226001

目的构建我国流行的周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶(BmCP)基因原核和真核表达质粒,为进一步研究奠定基础。方法从周期型马来丝虫虫体中提取总RNA,反转录成cDNA,设计合成引物,以cDNA为模板,通过PCR从cDNA中扩增出目的基因,扩增产物经初步... 详细信息

目的构建我国流行的周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶(BmCP)基因原核和真核表达质粒,为进一步研究奠定基础。方法从周期型马来丝虫虫体中提取总RNA,反转录成cDNA,设计合成引物,以cDNA为模板,通过PCR从cDNA中扩增出目的基因,扩增产物经初步鉴定后将其克隆人pMD18-T载体.进行双酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性重组质粒,进行测序分析和同源性比较。阳性克隆的质粒亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+).转化感受态大肠埃希菌(***)DH5α,筛选阳性克隆,用PCR和双酶切鉴定阳性重组子。结果RT-PCR扩增出1条约1201 bp的特异性条带,重组质粒双酶切和以质粒为模板的PCR结果与预期相符,DNA序列分析与GenBank已知的基因序列同源性为99%。构建了真核重组表达质粒peDNA3.1-BmCP。结论成功构建了周期型BmCP原核和真核重组表达质粒,为进一步研究该基因的功能提供了条件。

关键词：马来丝虫半胱氨酸蛋白酶基因原核表达真核表达质粒