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羊源卷曲乳杆菌DY38的体外益生特性及抗氧化活性研究

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动物营养学报 2025年第02期 1340-1353页

作者：肖春进岳秀英吴晓岚叶忠明杨发龙西南民族大学畜牧兽医学院四川省兽药监察所四川省甘孜藏族自治州畜牧业科学研究所

本试验旨在研究1株羊源卷曲乳杆菌（Lactobacillus crispatus） DY38的体外益生特性及抗氧化活性，为进一步将其开发为羊用微生态制剂奠定基础。测定羊源卷曲乳杆菌DY38株的产酸能力、抑菌能力、耐酸耐胆盐能力、细胞黏附性能及抗氧化... 详细信息

本试验旨在研究1株羊源卷曲乳杆菌（Lactobacillus crispatus） DY38的体外益生特性及抗氧化活性，为进一步将其开发为羊用微生态制剂奠定基础。测定羊源卷曲乳杆菌DY38株的产酸能力、抑菌能力、耐酸耐胆盐能力、细胞黏附性能及抗氧化能力，从而评价其益生特性和抗氧化活性。结果显示：1）羊源卷曲乳杆菌DY38对羊源致病性大肠杆菌、肠炎沙门氏菌和产气荚膜梭菌等均有良好抑菌效果；2）羊源卷曲乳杆菌DY38在pH 2.0条件下的存活率为62.73%，在0.3%胆盐浓度下的存活率为66.85%，具有良好的胃肠道耐受力；3）羊源卷曲乳杆菌DY38对常用抗生素敏感，且无溶血性；4）羊源卷曲乳杆菌DY38的自聚集能力、共聚集能力和表面疏水性分别为64.83%、62.81%和80.69%;5）羊源卷曲乳杆菌DY38对Caco-2细胞的黏附能力较强，且无细胞裂解作用；6）羊源卷曲乳杆菌DY38的胞内提取物具有更强的超氧阴离子自由基清除能力，发酵上清液显示出更高的2,2-二苯基-1-苦酰肼（DPPH）自由基、羟自由基清除能力和还原能力。上述结果表明，羊源卷曲乳杆菌DY38具有良好的益生特性，具有进一步开发成为微生态制剂用于防治羊腹泻等疾病的潜在价值。

关键词：山羊卷曲乳杆菌益生特性抗氧化

复合植物精油和丁酸梭菌对断奶仔猪生长性能以及血浆生化、抗氧化和免疫指标的影响

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动物营养学报 2025年第1期37卷 204-216页

作者：方桂友刘景俞清霞陈鑫珠缪伏荣董志岩福建省农业科学院畜牧兽医研究所福州350003 福州市畜牧站福州350007

本试验旨在探究饲粮添加复合植物精油和丁酸梭菌对断奶仔猪生长性能以及血浆生化、抗氧化和免疫指标的影响。选取250头初始体重为(6.48±0.42)kg的“杜长大”三元杂交断奶仔猪[断奶日龄为(25±3)日龄],随机分成5个组,每组5个重复,每个重... 详细信息

本试验旨在探究饲粮添加复合植物精油和丁酸梭菌对断奶仔猪生长性能以及血浆生化、抗氧化和免疫指标的影响。选取250头初始体重为(6.48±0.42)kg的“杜长大”三元杂交断奶仔猪[断奶日龄为(25±3)日龄],随机分成5个组,每组5个重复,每个重复10头猪(公母各5头)。负对照组(NC组)饲喂低蛋白质氨基酸平衡基础饲粮(不添加抗生素,饲粮粗蛋白质水平为17.72%),正对照组(抗生素组,PC组)饲喂基础饲粮+20 mg/kg硫酸黏杆菌素+50 mg/kg杆菌肽锌+75 mg/kg金霉素,试验1组(T1组)饲喂基础饲粮+500 mg/kg复合植物精油,试验2组(T2组)饲喂基础饲粮+500 mg/kg丁酸梭菌,试验3组(T3组)饲喂基础饲粮+500 mg/kg复合植物精油+500 mg/kg丁酸梭菌。预试期3 d,正试期16 d。结果表明:1)与NC组相比,PC组和T3组平均日增重(ADG)极显著提高(P0.05)。2)与NC组相比,PC组、T1组、T2组和T3组血浆二胺氧化酶(DAO)活性和内毒素含量显著降低(P0.05)。综上所述,在低蛋白质氨基酸平衡饲粮中添加复合植物精油和丁酸梭菌均可提高断奶仔猪ADG,降低腹泻率,改善肠道黏膜屏障功能,并增强机体抗氧化能力和免疫功能,且二者联合添加效果优于单一添加,与复合抗生素效果相近。

关键词：复合植物精油丁酸梭菌断奶仔猪生长性能血浆生化指标抗氧化免疫

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稳定表达小反刍兽疫病毒N蛋白的THP-1细胞系的建立与应用

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中国兽医科学 2025年

作者：李玲霞张旭辉令小东韩生义吴锦艳尚佑军青海大学农牧学院青海大学畜牧兽医科学院中国农业科学院兰州兽医研究所

旨在利用慢病毒载体构建一种稳定表达小反刍兽疫病毒（PPRV）N蛋白的THP-1细胞系，并验证该细胞系在PPRV激活炎症反应中的作用。首先采用PCR技术扩增N基因，进而构建慢病毒表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-Puro-N。随后将该载体与... 详细信息

旨在利用慢病毒载体构建一种稳定表达小反刍兽疫病毒（PPRV）N蛋白的THP-1细胞系，并验证该细胞系在PPRV激活炎症反应中的作用。首先采用PCR技术扩增N基因，进而构建慢病毒表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-Puro-N。随后将该载体与慢病毒包装质粒pLP1、pLP2和pLP/VSVG共同转染至HEK293T细胞，通过包装获得表达N蛋白的慢病毒。接着将慢病毒感染THP-1细胞，再使用嘌呤霉素筛选，之后利用细胞有限稀释法得到稳定表达N蛋白的THP-1细胞系，最后采用ELISA和Western-blot检测该细胞系对PPRV激活炎症反应的影响。结果表明，成功构建了THP-1-N细胞系，不仅该细胞系活力较好，而且具备稳定传代的能力。且稳定表达N蛋白的THP-1细胞可显著促进由PPRV感染所诱导的IL-1β表达，进而激活炎症反应。综上所述，成功建立了一种能够稳定表达N蛋白的THP-1细胞系，为PPRV感染及致病机制研究提供了重要的生物材料。

关键词：小反刍兽疫病毒 N蛋白慢病毒细胞系炎症小体

不同品种鸡产蛋性能、蛋品质及营养成分比较分析

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饲料研究 2025年 56-61页

作者：顾玲荣石福岳徐建峰王胜明罗琰陈万辉谭朝兴朱丽超甘肃省畜牧兽医研究所康县畜牧兽医站康县大堡镇畜牧兽医站

试验旨在探究不同品种鸡产蛋性能、蛋品质及营养成分的差异。试验选择20周龄体况良好的静原鸡、太平鸡、海兰褐蛋鸡各120只，按照品种分为3组，每组6个重复，每个重复20只蛋鸡。采用常规方法测定太平鸡、静原鸡、海兰褐蛋鸡的蛋品质、... 详细信息

试验旨在探究不同品种鸡产蛋性能、蛋品质及营养成分的差异。试验选择20周龄体况良好的静原鸡、太平鸡、海兰褐蛋鸡各120只，按照品种分为3组，每组6个重复，每个重复20只蛋鸡。采用常规方法测定太平鸡、静原鸡、海兰褐蛋鸡的蛋品质、常规营养成分、氨基酸含量、脂肪酸含量等。预试期14 d，正式试验期120 d。结果显示：与海兰褐蛋鸡相比，静原鸡、太平鸡平均蛋重显著降低（P所含必需氨基酸（EAA）、总脂肪酸（TFA）及不饱和脂肪酸（USFA）含量高于海兰褐蛋鸡和静原鸡。研究表明，3个品种鸡蛋营养价值均较高，但太平鸡蛋品质及营养价值优于静原鸡和海兰褐蛋鸡。

关键词：蛋品质营养成分太平鸡静原鸡海兰褐蛋鸡

GM-CSF和IL-6的免疫佐剂活性及对小鼠生长性能、血液指标的影响

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饲料工业 2025年第1期46卷 95-102页

作者：成伟伟容维中杨明李元新赵子惠陈伯祥王佳周瑶甘肃省畜牧兽医研究所甘肃平凉744000

为验证粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素6(IL-6)的免疫佐剂活性以及研究其对小鼠生长性能、血液指标的影响,试验扩增了GM-CSF基因和IL-6基因,并将GMCSF基因和IL-6基因分别克隆至载体p CDNA3.1-His-C和p ET-32a(+),且诱... 详细信息

为验证粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素6(IL-6)的免疫佐剂活性以及研究其对小鼠生长性能、血液指标的影响,试验扩增了GM-CSF基因和IL-6基因,并将GMCSF基因和IL-6基因分别克隆至载体p CDNA3.1-His-C和p ET-32a(+),且诱导表达了IL-6蛋白。将构建的GM-CSF基因的重组载体、诱导表达的IL-6重组蛋白联合畜禽疫病防控技术研发课题组前期构建的TGEV DNA疫苗载体p-N-His分组免疫小鼠(设置p-N-His为对照),运用间接ELISA检测了特异性抗体水平。将构建的重组载体、诱导表达的重组蛋白和PBS分组免疫小鼠,测定了小鼠的生长性能、血清指标和免疫器官指数。结果显示,克隆的GM-CSF和IL-6基因大小分别为579 bp和576 bp,成功构建了真核表达载体p-GM-CSF和原表达载体p ET-IL-6,诱导表达的IL-6重组蛋白大小为38 ku。载体p-GM-CSF、IL-6蛋白联合p-N-His免疫小鼠后,p-N-His+p-GM-CSF、p-N-His+IL-6蛋白和p-N-His均刺激机体产生了特异性抗体,且p-N-His+IL-6蛋白抗体水平高于p-N-His+p-GM-CSF(P0.05),但IL-6蛋白组小鼠的葡萄糖显著升高(P0.05)。文章以p-N-His为靶载体验证出GM-CSF和IL-6具有较强免疫佐剂活性,且IL-6蛋白的效果强于GM-CSF。p-GM-CSF和IL-6蛋白能够提升小鼠的生长性能指标,对血液指标和免疫器官指数影响不大。

关键词：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子白细胞介素6 免疫佐剂活性生长性能血液指标

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羊板粪与颗粒有机肥配施对木里矿区退化草地植被及土壤特性的影响

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西南农业学报 2025年

作者：于中阳胡生斌安晓婷杨明春姚喜喜苏晓燕李长慧青海大学农牧学院青海大学畜牧兽医科学院

【目的】为提高木里矿区退化草地的土壤肥力，筛选出最佳羊板粪与颗粒有机肥配施量，促进矿区可持续修复。【方法】以高寒矿区退化草地为研究对象，选用羊板粪与颗粒有机肥作为试验材料，探讨羊板粪与颗粒有机肥配施对土壤养分、酶活性... 详细信息

【目的】为提高木里矿区退化草地的土壤肥力，筛选出最佳羊板粪与颗粒有机肥配施量，促进矿区可持续修复。【方法】以高寒矿区退化草地为研究对象，选用羊板粪与颗粒有机肥作为试验材料，探讨羊板粪与颗粒有机肥配施对土壤养分、酶活性与植被特性的影响。【结果】羊板粪与颗粒有机肥配施可显著降低土壤容重和pH，提高土壤含水量，Y3K3处理土壤含水量高达50.55%，较Y0K0显著增加了3.24倍。羊板粪与颗粒有机肥配施还显著增加土壤有机质、全碳、全氮、全磷、硝态氮和速效磷含量，提高土壤酶活性，其中Y2K3处理土壤全碳含量最高，为125.7 g/kg，显著高于Y0K0；Y2K2处理下土壤脲酶活性最高，较Y0K0处理提高37.3%，差异显著。羊板粪、颗粒有机肥分别单施也可提高上述养分含量，但提高效果显著低于二者配施。相关性分析表明，土壤养分含量与土壤酶活性（脲酶、碱性磷酸酶、过氧化氢酶、碱性蛋白酶）、植被特性（株高、盖度、密度）之间存在显著正相关性，与土壤容重、土壤pH之间存在显著负相关性。RDA分析不同施肥处理，土壤硝态氮和全氮是影响植被特性的主要环境因子；植被特性与pH和土壤容重呈负相关，与其他土壤因子均呈正相关。【结论】在高寒矿区退化草地上分别施用颗粒有机肥15 t/hm2、羊板粪200 t/hm2对土壤和植被群落修复效果最好。

关键词：颗粒有机肥羊板粪土壤理化性质高寒矿区

氮磷配施提高燕麦-箭筈豌豆混播草地生产力及肥料利用率

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草业科学 2025年

作者：苏乐乐王曌敏刘勇朱军仝宗永秦燕青海大学畜牧兽医科学院(青海省畜牧兽医科学院)青海省青藏高原优良牧草种质资源利用重点实验室嘉峪关恒禾园林科技有限公司草地农业生态系统国家重点实验室兰州大学草地农业科技学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

肥料利用率是反映养分投入、产出和平衡关系的动态参数，也是衡量区域尺度上肥料施用效果的一项重要指标。本试验以高寒区燕麦（Avena sativa L.）―箭筈豌豆（Vicia sativa L.）1︰1混播草地为研究对象，设置4种施肥措施，分别为单施... 详细信息

肥料利用率是反映养分投入、产出和平衡关系的动态参数，也是衡量区域尺度上肥料施用效果的一项重要指标。本试验以高寒区燕麦（Avena sativa L.）―箭筈豌豆（Vicia sativa L.）1︰1混播草地为研究对象，设置4种施肥措施，分别为单施氮肥（N）、单施磷肥（P）、氮磷肥配施（NP）和不施肥（CK），并通过对混播草地植物干草产量、形态特征及氮磷含量和积累量的测定分析，探讨不同氮磷添加处理对草地生产力和化肥利用率的影响。研究结果表明：1. 混播草地中，N和NP处理促进燕麦生长发育，NP处理下燕麦生物量、相对生长速率、分蘖数和叶面积均最高，分别高于对照169.9%、20.1%、32.5%和57.2%；与对照相比，N和NP处理下箭筈豌豆生物量显著降低70.1%和26.6%，分枝数显著增加31.1%和51.1%，N处理下箭筈豌豆相对生长速率显著降低26.3%。2. 施氮肥（N、NP）处理下混播草地燕麦、箭筈豌豆氮含量大于不施氮处理（CK、P），施磷肥（P、NP）处理下混播草地植物磷含量大于不施磷处理（CK、N）。3种施肥处理均显著增加燕麦氮、磷积累量；N处理降低箭筈豌豆氮、磷积累量，P处理增加箭筈豌豆氮、磷积累量。3. 氮磷配施提高混播草地植物的养分利用率，其中，氮磷肥配施处理下偏生产力、农学利用率、表观利用率分别比单施氮肥和单施磷肥处理提高了63.5%、204.5%、133.7%和17.2%、59.1%、40.4%。因此，氮磷肥配施可以达到增加混播草地牧草产量、提高化肥利用率的双重效果。

关键词：混播草地生物量氮积累量磷积累量化肥利用率

牦牛源大肠杆菌OmpA外膜蛋白的原核表达及免疫效果评价

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中国兽医学报 2025年第03期 458-465+472页

作者：章石楠韩生义石田李淑萍胡国元高瑞田嘉琪周雯雯李生庆青海大学农牧学院青海省畜牧兽医科学院青海省动物疫病病原诊断与绿色防控技术研究重点实验室

用生物信息学软件将本实验室分离的Escherichia coli QML2206-1(*** QML2206-1)株与不同菌种的外膜蛋白A(OmpA)蛋白氨基酸序列进行同源性分析，并对OmpA蛋白进行理化性质分析、跨膜结构和信号肽预测、B细胞抗原表位预测、二级和三级结... 详细信息

用生物信息学软件将本实验室分离的Escherichia coli QML2206-1(*** QML2206-1)株与不同菌种的外膜蛋白A(OmpA)蛋白氨基酸序列进行同源性分析，并对OmpA蛋白进行理化性质分析、跨膜结构和信号肽预测、B细胞抗原表位预测、二级和三级结构预测；将OmpA基因片段与pET-32a载体连接，构建原核表达载体，在BL21(DE3)进行原核表达并优化表达条件后用镍柱亲和纯化系统进行纯化；将纯化后的重组蛋白与弗氏佐剂充分混匀后免疫小鼠，利用ELISA方法检测小鼠特异性IgG抗体水平及小鼠血清中细胞因子CD4、CD8、IL-4的表达水平，并通过小鼠攻毒保护试验评价其免疫保护效果。结果显示，OmpA蛋白为亲水性蛋白，无跨膜结构域，二级结构主要由无规则卷曲(47.98%)和α-螺旋(29.77%)构成，有12个能与B细胞产生的抗体结合的抗原表位。经原核表达成功获得相对分子质量约为55 kDa的重组蛋白OmpA,且在37℃、IPTG浓度0.000 4 mol/L诱导6 h的表达量最高。重组蛋白免疫小鼠后血清特异性IgG抗体效价最高可达1∶32 000;与对照组相比，免疫小鼠血清中CD4、CD8及IL-4的表达水平均有升高。用最小致死量(minimum lethal dose, MLD)、2倍最小致死量(2MLD)攻毒后小鼠存活率分别为80%、40%。结果表明，OmpA重组蛋白具有良好的抗原性和一定的免疫保护作用。该研究为下一步基于OmpA蛋白的牦牛适用性***基因工程亚单位疫苗的研制提供了技术依据。

关键词：牦牛源大肠杆菌 OmpA蛋白原核表达生物信息学分析免疫保护效果

青海海北地区牦牛病毒性腹泻病毒流行病学调查及5′-UTR遗传进化分析

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中国畜牧兽医 2025年第3期52卷 1241-1249页

作者：林伟山马豆豆雷萌桐魏斌李国才王光华王戈平简莹娜李秀萍青海大学畜牧兽医科学院西宁810016 青海省动物疾病病原诊断与绿色防控技术研究重点实验室西宁810016 青海省西宁市湟源县畜牧兽医站西宁812100

【目的】了解青海省海北地区牦牛群中牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的流行情况及遗传学分子特征。【方法】对采集自青海海北地区的148份腹泻牦牛粪便样品提取病毒RNA并反转录合成cDNA,以其为模板扩增BVDV 5′-UT... 详细信息

【目的】了解青海省海北地区牦牛群中牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的流行情况及遗传学分子特征。【方法】对采集自青海海北地区的148份腹泻牦牛粪便样品提取病毒RNA并反转录合成cDNA,以其为模板扩增BVDV 5′-UTR保守区域,建立特异性检测牦牛BVDV的实时荧光定量PCR方法,并以该方法对青海海北地区牦牛养殖场BVDV感染情况进行检测。选取4份BVDV阳性样品,对BVDV 5′-UTR区域序列进行PCR扩增和测序,与NCBI中不同亚型BVDV以及同属病毒毒株进行相似性比对,并基于BVDV 5′-UTR区域进行遗传进化分析。【结果】本研究基于BVDV 5′-UTR成功建立实时荧光定量PCR检测方法,标准曲线相关系数(R^(2))为0.997,标准品浓度为2.69×10^(2)~2.69×10^(9)拷贝/μL时具有良好的线性关系,最小检出限为2.69×10^(2)拷贝/μL。重复性试验结果显示,变异系数均青海省海北地区门源县、祁连县、海晏县和湟源县的腹泻牦牛粪便样品进行检测,结果显示,BVDV阳性率分别为45.00%、36.00%、30.77%和29.00%。BVDV 5′-UTR序列比对结果显示,分离获得的4株牦牛源BVDV与伊朗、美国的BVDV-1a亚型毒株聚集在同一个独立分支,核苷酸序列相似性为76.6%~99.7%。【结论】本研究明确了BVDV-1a型是导致青海省海北地区牦牛腹泻的重要病原之一,为该地区牦牛养殖场及时、有效地采取防控措施提供了科学依据,同时丰富了当地BVDV的分子流行病学调查数据,为该地区牛病毒性腹泻病的防控及疫苗研发提供了理论基础。

关键词：牦牛牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 流行病学实时荧光定量PCR 遗传进化分析