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M2型小胶质细胞移植促进小鼠脊髓损伤修复的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2024年第2期38卷 198-205页

作者：张静张潇月江琪曲迪胡羽生戚超付海涛青岛大学青岛医学院山东青岛266073 青岛大学附属医院运动医学科山东青岛266103

目的探讨M2型小胶质细胞(M2 microglia,M2-MG)移植促进小鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)修复的效果。方法取15只新生2~3 d C57BL/6乳鼠大脑皮质,通过胰蛋白酶消化法分离原代细胞并进行Iba1免疫荧光染色鉴定为MG后,以IL-4极化诱导培... 详细信息

目的探讨M2型小胶质细胞(M2 microglia,M2-MG)移植促进小鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)修复的效果。方法取15只新生2~3 d C57BL/6乳鼠大脑皮质,通过胰蛋白酶消化法分离原代细胞并进行Iba1免疫荧光染色鉴定为MG后,以IL-4极化诱导培养48 h(实验组),通过精氨酸酶1(Arginase 1,Arg-1)、Iba1免疫荧光染色鉴定其是否极化为M2-MG;以正常培养MG作为对照组。另取5只新生1周C57BL/6乳鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)与M2-MG共培养5 d,观测轴突长度;以单纯DRG作为对照。取42只6周龄雌性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(n=6)、SCI组(n=18)及SCI+M2-MG组(n=18)。手术暴露脊柱T10节段后,假手术组仅切除椎板,SCI组及SCI+M2-MG组行SCI造模后,SCI+M2-MG组同时注射M2-MG。术后观测各组小鼠存活情况,并于术后当天(0)、3、7、14、21、28 d采用BMS(Basso Mouse Scale)评分评价小鼠运动功能恢复情况,28 d行足迹实验评价小鼠步态。术后取SCI组及SCI+M2-MG组脊髓组织行免疫荧光染色,其中7、14、28 d胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)染色观测SCI损伤区域面积,28 d神经元核抗原染色观察神经元存活情况,7、14 d GFAP/C3双重荧光染色观察表示A1星形胶质细胞数量变化。结果免疫荧光染色鉴定体外培养细胞为MG且纯度可达90%,经IL-4诱导培养后Arg-1免疫荧光染色示极化为M2表型。M2-MG与DRGs体外共培养5 d后可促进轴突生长(P<0.05)。动物实验示,术后各组小鼠均存活至实验完成。SCI组及SCI+M2-MG组小鼠术后后肢运动功能随时间延长逐渐恢复,其中21、28 d SCI+M2-MG组BMS评分较SCI组更高(P<0.05),28 d时拖曳步态明显减轻,但尚未达假手术组水平。免疫荧光染色示,与SCI组相比,SCI+M2-MG组在7、14、28 d损伤区域面积均缩小,28 d时存活神经元数量增加,7、14 d时A1星形胶质细胞减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论M2-MG移植可促进小鼠SCI神经元存活和轴突再生,改善小鼠后肢运动功能,分析这种神经保护作用与A1星形胶质细胞极化被抑制有关。

关键词：脊髓损伤 M2型小胶质细胞星形胶质细胞细胞移植小鼠

热致自卷曲左旋聚乳酸/聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维血管支架制备及其性能

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纺织学报 2024年第7期45卷 18-23页

作者：于承浩王元非于腾波吴桐青岛大学医学部山东青岛266071 青岛市市立医院山东青岛266071 青岛大学神经再生与康复研究院山东青岛266071

为研究热致自卷曲与生长因子梯度化修饰对血管内皮化的促进作用,使用左旋聚乳酸(PLLA)和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)作为材料,通过静电纺丝技术制备了具有热致自卷曲特性的PLLA/PLGA纳米纤维血管支架。通过静电喷雾技术制备了梯度生长... 详细信息

为研究热致自卷曲与生长因子梯度化修饰对血管内皮化的促进作用,使用左旋聚乳酸(PLLA)和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)作为材料,通过静电纺丝技术制备了具有热致自卷曲特性的PLLA/PLGA纳米纤维血管支架。通过静电喷雾技术制备了梯度生长因子修饰血管支架内层,并对其自卷曲、微观结构、生物相容性及内皮化功能进行表征。结果表明:制备的PLLA/PLGA血管支架具备多层取向纳米纤维结构,厚度为(6.75±0.4)μm,具有出色的生物相容性,可在37℃条件下自卷曲成管状结构;血管支架内层膜对生长因子成功进行了梯度修饰,修饰后血管支架的细胞迁移距离是未修饰的3.5倍,从而加快了内皮细胞迁移,促进血管内层的快速内皮化。

关键词：静电纺丝血管支架自卷曲左旋聚乳酸聚乳酸-羟基乙酸共聚物

前扣带回至伏隔核GABA能神经通路调控小鼠肠易激综合征及潜在机制研究

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中国病理生理杂志 2024年第5期40卷 815-826页

作者：郭瑞晓高胜利冯旭菲刘华明星孙金秋栾心驰刘震宇刘蔚毅郭菲菲青岛大学基础医学院生理学与病理生理学系山东青岛266071 青岛大学生物医学中心山东青岛266071 青岛大学附属医院消化内科山东青岛266071 青岛大学青岛医学院山东青岛266071

目的:探讨前扣带回(ACC)至伏隔核(NAc)的γ-氨基丁酸(GABA)能神经通路对小鼠肠易激综合征(IBS)的调控作用及潜在机制。方法:(1)慢急性联合应激法(CACS)建立C57BL/6J小鼠IBS模型,分为正常组和IBS组(均n=8),通过行为学测试、肠动力实验和... 详细信息

目的:探讨前扣带回(ACC)至伏隔核(NAc)的γ-氨基丁酸(GABA)能神经通路对小鼠肠易激综合征(IBS)的调控作用及潜在机制。方法:(1)慢急性联合应激法(CACS)建立C57BL/6J小鼠IBS模型,分为正常组和IBS组(均n=8),通过行为学测试、肠动力实验和腹部退缩反射评分观察小鼠IBS样症状。(2)采用荧光金(FG)逆行追踪结合荧光免疫组织化学法检测ACC-NAc的GABA能通路和IBS小鼠ACC中GABA神经元兴奋性(均n=8)。(3)在正常和IBS小鼠NAc分别注射1.5μL生理盐水(NS)、GABA_A受体拮抗剂荷包牡丹碱(BIC)或激动剂异四氢烟酸(Isog),并据此将小鼠分为3组(均n=8):NS组、BIC组和Isog组,观察其IBS样症状。(4)采用化学遗传法将腺相关病毒载体AAV2/9-mDlx-iCre-WPRE-pA定向注射于ACC,AAV2/2Retro Plus-hSyn-DIO-hM3D(Gq)-eGFP-WPRE-pA注射于NAc,小鼠分为4组(均n=8):NS(腹腔注射)+NS(NAc注射)组、NS+BIC组、氯氮平N-氧化物(CNO)+NS组和CNO+BIC组;或AAV2/2Retro-hSyn-DIO-hM4D(Gi)-EGFP-WPRE-pA注射于NAc,小鼠分为3组(均n=8):NS+NS组、NS+BIC组和CNO+NS组,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结肠组织中组胺和5-羟色胺(5-HT)的表达,并观察ACC-NAc的GABA能神经通路对小鼠IBS样症状的影响。结果:CACS诱导小鼠出现IBS样症状;FG逆行追踪结合免疫荧光组织化学实验结果显示,ACC的GABA神经元可以投射至NAc。NAc注射BIC后IBS小鼠的焦虑样行为、腹泻样症状和内脏超敏反应显著减轻(P<0.05)。化学遗传法抑制投射至NAc的ACC内GABA能神经元可显著减轻IBS小鼠的症状(P<0.05)。结论:ACC^(GABA)-NAc神经通路可参与小鼠IBS样症状的调控,其机制可能与肠道组胺和5-HT的释放有关。

关键词：前扣带回伏隔核 γ-氨基丁酸焦虑样行为肠易激综合征内脏超敏反应

iPS细胞向内皮分化过程中Wnt信号对组蛋白去乙酰化酶5的调控

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第6期40卷 838-847页

作者：唐琦凯王雨晴张菲雨伍浩鹏张婉怡李涛湖南师范大学医学院检验系长沙410013 湖南师范大学医学院长沙410013

HDAC(histone deacetylase)是一类可对蛋白质进行去乙酰化修饰的表观修饰酶,通过改变细胞核内组蛋白乙酰化状态,调控启动子活化水平,从而影响下游基因的表达水平,但其在内皮分化过程中的表达变化尚不清楚。本研究利用3阶段法诱导hiPSCs... 详细信息

HDAC(histone deacetylase)是一类可对蛋白质进行去乙酰化修饰的表观修饰酶,通过改变细胞核内组蛋白乙酰化状态,调控启动子活化水平,从而影响下游基因的表达水平,但其在内皮分化过程中的表达变化尚不清楚。本研究利用3阶段法诱导hiPSCs向内皮细胞定向分化,利用qRT-PCR检测Ⅰ类HDAC(HDAC 1、2)、Ⅱ类HDAC(HDAC 4、5)基因的表达变化。研究发现,HDAC5分子在内皮分化中有着显著的表达变化,在中胚层分化阶段下调90%(P<0.01),在血管前体阶段上调至3.7倍(P<0.01),继而在内皮晚期分化阶段下调70%(P<0.01)。免疫印迹结果进一步证实,HDAC5蛋白在内皮分化过程中存在阶段性表达变化。机制研究中显示,HDAC5中胚层分化阶段的变化受Wnt信号调控。通过CHIR99021处理以及Wnt3a质粒过表达,激动Wnt信号通路,会引起HDAC5下调。通过IWP-2抑制Wnt信号通路,会促进HDAC5表达恢复。此外研究发现,HDAC5主要定位于细胞核,IWP-2恢复HDAC5表达,但大部分滞留在胞浆。进一步研究显示,中胚层分化阶段HDAC5下调与中胚层分化标志物BraT的表达启动相关。通过HDAC抑制剂BML210处理发现,其可以促进早期中胚层分化,干扰血管前体细胞的内皮分化,增强内皮晚期阶段分化。总体而言,内皮诱导分化过程中,HDAC5有着显著的阶段性表达改变。Wnt信号激活是调控HDAC5在中胚层分化阶段下调的主要机制。

关键词：人诱导多能干细胞内皮细胞组蛋白去乙酰化酶表达调控 Wnt信号

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肿瘤相关巨噬细胞:调节肿瘤微环境的新靶点

中国肺癌杂志 2024年第3期27卷 231-240页

作者：周银雪任敦强毕焕焕易冰倩张彩王红梅孙家兴青岛大学附属医院呼吸与危重症医学科青岛266000 青岛大学医学部青岛266000

肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)在肺癌免疫微环境中扮演着重要的角色。它们通过自身的表型和吞噬功能的变化,在肺癌的发生和进展中发挥作用,通过促进肺癌免疫抑制型微环境的形成和肿瘤异常血管的生长加速肺癌的侵... 详细信息

肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)在肺癌免疫微环境中扮演着重要的角色。它们通过自身的表型和吞噬功能的变化,在肺癌的发生和进展中发挥作用,通过促进肺癌免疫抑制型微环境的形成和肿瘤异常血管的生长加速肺癌的侵袭和扩散。巨噬细胞在应对不同刺激时,可以极化为具有不同功能和特征的亚型,分为抗肿瘤M1型和促肿瘤的M2型。在肿瘤组织中,TAM通常极化为交替活化型的M2表型,表现出对肿瘤免疫的抑制作用。本文综述了抗血管生成药物在调节TAM表型方面的作用,它们可以通过将M2型TAM重编程为M1型来发挥抗肿瘤作用。同时,TAM的功能改变在抗血管生成治疗和免疫治疗策略中也起到重要作用。研究证实,TAM通过极化及功能改变可能成为调节肿瘤微环境的新靶点,开辟肺癌治疗的新途径。

关键词：肿瘤相关巨噬细胞极化抗血管生成治疗肺肿瘤

注射式微流控芯片全集成核酸分析系统与精准医疗应用

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中国激光 2024年第9期51卷 190-199页

作者：黄琴黄乐阳靳翔宇毛则尹邓安妮吕文琦钟豪王铈弘石艺璇陈家辉黄世光黄国亮清华大学医学院生物医学工程系北京100084

核酸检测方法可快速鉴定特异基因指标,但其广泛应用受限于多种仪器设备串行使用以及对操作人员的高专业技术要求。本团队开发了一套注射式微流控芯片全集成核酸分析系统,该系统主要包含两大模块,分别是可以为不同类型临床样本提供多种... 详细信息

核酸检测方法可快速鉴定特异基因指标,但其广泛应用受限于多种仪器设备串行使用以及对操作人员的高专业技术要求。本团队开发了一套注射式微流控芯片全集成核酸分析系统,该系统主要包含两大模块,分别是可以为不同类型临床样本提供多种核酸提取方法的全自动注射式核酸提取模块,以及基于微流控芯片的微纳体系多指标联合并行检测等温扩增核酸检测模块。这两大模块既可以单独发挥各自的功能,也可以组合成全集成注射式微流控芯片核酸分析系统,形成全集成自动化、微纳反应体系、快速、多指标联合并行检测的核酸检测分析平台。采用本团队开发的注射式微流控芯片全集成核酸分析系统,分别对热带念珠菌标准株培养菌液和64例外阴阴道念珠菌感染疾病的临床拭子样本进行检测。结果显示:本系统对菌液的最低检测限为3.95×102 CFU/mL,而且样品制备更方便快捷,仅需1次加样操作,核酸提取时间为10 min;64例临床样本检测效果与金标准培养法相比,卡方检验为1,Kappa值为0.950,说明两种方法无显著差异,且一致性很高。本团队开发的注射式微流控芯片全集成核酸分析系统,可以为临床多指标微纳体系核酸快速检测提供一个可靠的平台,为临床医疗应用提供精准快检技术与便捷分析仪器支撑。

关键词：医用光学注射式微流控芯片全集成核酸分析系统精准医疗应用

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胆管支架联合光动力和(或)射频消融治疗在肝外胆管癌中的应用

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中华消化内镜杂志 2024年第3期41卷 230-235页

作者：王佳金立鹏丛羽晨张航孟毓珊谢丛毛庆东薛魁金綦鹏何宝国鞠辉毛涛魏良洲田字彬曹彬青岛大学附属医院消化内科、青岛大学医学部青岛266000

为探讨内镜下胆管支架置入后行光动力治疗(photodynamic therapy,PDT)和(或)射频消融术(radiofrequency ablation,RFA)在不可切除肝外胆管癌(extrahepatic cholangiocarcinoma,EHCC)姑息治疗中的应用,回顾性分析了2017年1月至2023年1月在青岛大学附属医院消化内科治疗的5例EHCC患者的临床资料。5例患者均先接受胆管支架置入治疗,支架置入后6个月内接受PDT和(或)RFA。5例患者手术均成功。治疗后,5例患者血清胆红素水平均明显下降,术后恢复良好,1~3 d即好转出院。1例患者出现感染性并发症,其余均未发生不良事件。胆管支架治疗先于PDT和(或)RFA对EHCC进行姑息治疗,为后续PDT和(或)RFA顺利进行创造良好条件,可明显提高手术成功率,快速有效解除管腔梗阻,减少术后不良事件的发生,缩短术后恢复时间。

关键词：胆管肿瘤光动力治疗射频消融术支架

计算机导航辅助与单纯关节镜下重建后交叉韧带胫骨骨道术中应用效果比较

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中国修复重建外科杂志 2024年第2期38卷 155-161页

作者：曲迪张静李利平付海涛张东芳唐新宇韩新坤戚超青岛大学青岛医学院山东青岛266073 青岛市中心医院骨科山东青岛266042 青岛大学附属医院运动医学科山东青岛266103

目的比较计算机导航辅助与单纯关节镜下重建后交叉韧带(posterior cruciate ligament,PCL)胫骨骨道的术中应用效果。方法回顾分析2021年6月—2022年6月收治且符合选择标准的73例PCL撕裂患者临床资料,其中34例采用导航辅助关节镜下行PCL... 详细信息

目的比较计算机导航辅助与单纯关节镜下重建后交叉韧带(posterior cruciate ligament,PCL)胫骨骨道的术中应用效果。方法回顾分析2021年6月—2022年6月收治且符合选择标准的73例PCL撕裂患者临床资料,其中34例采用导航辅助关节镜下行PCL胫骨骨道重建(导航组),39例采用单纯关节镜下行PCL胫骨骨道重建(对照组)。两组患者性别、年龄、身体质量指数、损伤侧别、受伤至手术时间及术前后抽屉试验、膝关节活动度(range of motion,ROM)、Tegner评分、Lysholm评分、国际膝关节文献委员会(IKDC)评分等基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。记录并比较两组围术期指标(手术时间及导针钻孔次数);于术后1 d MRI上测量移植物与胫骨骨道间角度及冠状位、矢状位、横断位上胫骨骨道出口位置;术前及末次随访时采用膝关节ROM、Tegner评分、Lysholm评分及IKDC评分评价临床疗效。结果导航组手术时间较对照组短,术中导针钻孔次数较对照组少,差异均有统计学意义(P0.05);但导航组移植物与胫骨骨道间角度大于对照组(P0.05)。两组膝关节ROM、Tegner评分、Lysholm评分及IKDC评分均较术前显著改善(P0.05)。结论计算机导航辅助关节镜下PCL胫骨骨道重建可快速且准确地制备具有良好位点及方向的骨道,术后功能评分与单纯关节镜下行PCL胫骨骨道重建效果相当。

关键词：后交叉韧带重建计算机导航关节镜胫骨骨道

植物源养发精华液对小鼠毛发生长的促进功能及机制研究

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中成药 2024年第2期46卷 601-605页

作者：王苏华邢光伟李芳周结张宇张冉董丽华肖钊朱薛羽王强陆荣柱江苏大学医学院预防医学与卫生检验系江苏镇江212013

目的评价植物源养发精华液对脱毛小鼠毛发生长的促进功能,并探讨其作用机制。方法采用脱毛膏法建立脱毛小鼠模型,将养发精华液涂抹于小鼠的脱毛处,连续21 d,观察小鼠脱毛处皮肤颜色、毛发长度和质量的变化;丙酸睾酮诱导建立雄激素性脱... 详细信息

目的评价植物源养发精华液对脱毛小鼠毛发生长的促进功能,并探讨其作用机制。方法采用脱毛膏法建立脱毛小鼠模型,将养发精华液涂抹于小鼠的脱毛处,连续21 d,观察小鼠脱毛处皮肤颜色、毛发长度和质量的变化;丙酸睾酮诱导建立雄激素性脱毛小鼠模型,养发精华液连续处理28 d,观察小鼠脱毛处皮肤颜色、毛发长度和质量的变化,检测小鼠血清、皮肤组织睾酮(T)、5-二氢睾酮(DHT)、雌二醇(E_(2))、肝细胞生长因子(HGF)水平,并采用Western blot法检测β-catenin和GSK-3β蛋白表达。结果植物源养发精华液可促进脱毛膏脱毛小鼠和雄激素性脱毛小鼠新生毛发的生长,增加毛发长度和质量(P<0.05);同时,养发精华液可降低雄激素性脱毛模型小鼠血清和皮肤组织T、DHT水平(P<0.05),增加皮肤组织β-catenin蛋白表达(P<0.05),降低GSK-3β蛋白表达(P<0.05)。结论植物源养发精华液对脱毛膏法脱毛小鼠和雄激素性脱发小鼠的毛发生长均具有促进作用,其机制可能与降低体内雄激素水平,激活Wnt/β-catenin信号通路,从而激活小鼠皮肤毛囊,促进血液循环,加快黑色素生成有关。

关键词：养发精华液脱毛模型丙酸睾酮毛发生长 Wnt/β-catenin信号通路