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中国大豆花叶病毒SC7外壳蛋白基因的序列测定及其与美国株系的比较

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病毒学报 2014年第5期30卷 489-494页

作者：蔡春梅姜骁赵春梅马渐新青岛农业大学生命科学学院山东省高校植物生物技术重点实验室

为了探索大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)SC7外壳蛋白(Coat protein,CP)基因序列与病毒致病性作用及其与美国株系的对应关系,本研究通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),克隆了我国SMV SC7株系的CP基因,并测定了其全序列。结果表... 详细信息

为了探索大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)SC7外壳蛋白(Coat protein,CP)基因序列与病毒致病性作用及其与美国株系的对应关系,本研究通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),克隆了我国SMV SC7株系的CP基因,并测定了其全序列。结果表明:CP基因长度为795bp,编码的CP蛋白为265个氨基酸。在致病性反应上,SC7的毒力比美国的毒株更强些。在分子水平上,CP基因核苷酸序列差异为4%~5%,编码的氨基酸序列差异为1%~2%。美国株系N端都存在与蚜传有关的保守基序DAG(Asp-Ala-Gl),但在SC7为DAD(Asp-AlaAsp)。将序列信息与SMV株系在鉴别寄主上的症状反应进行综合分析发现,CP基因的同源性与SMV在鉴别寄主上的致病性反应没有明显关系。

关键词：大豆花叶病毒外壳蛋白序列分析致病性反应

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NO参与AM真菌与烟草共生过程

生态学报 2013年第23期33卷 7583-7589页

作者：王玮赵方贵侯丽霞车永梅刘新青岛农业大学生命科学学院山东省高校植物生物技术重点实验室青岛266109

以烟草(Nicotiana tabacum,品种CF90NF)为材料,利用分光光度法和荧光显微技术结合药理学实验,探讨在AM真菌摩西球囊霉(Glomus mosseae,G.m)与烟草共生过程中一氧化氮(NO)的作用。结果表明,烟草侧根中含有一定水平的内源NO,苗期接种G.m ... 详细信息

以烟草(Nicotiana tabacum,品种CF90NF)为材料,利用分光光度法和荧光显微技术结合药理学实验,探讨在AM真菌摩西球囊霉(Glomus mosseae,G.m)与烟草共生过程中一氧化氮(NO)的作用。结果表明,烟草侧根中含有一定水平的内源NO,苗期接种G.m 10d后,烟草根系NO含量显著增加,侧根中的NO荧光强度也在接种后10d达到最强;一定浓度的NO供体硝普钠(SNP)能促进G.m对烟草的侵染,而NO的清除剂2-4,4,5,5-苯-四甲基咪唑-1-氧-3-氧化物(2-(4-carboxyphenyl)-4,4,5,5-tetramethylimidazoline-1-oxyl-3-oxidepotassium salt,cPTIO)可明显减弱侧根和菌丝中的NO的荧光强度,降低AM真菌的侵染率,表明NO参与G.m与烟草的共生过程;在G.m与烟草的共生过程中,烟草根系硝酸还原酶(NR)活性与Nia-1基因的表达量明显升高,且NR的抑制剂钨酸钠(Na2WO4)可以降低烟草侧根中的荧光强度,但对菌丝中的NO的荧光强度无明显影响。由此推测,来自根系NR途径的NO参与AM真菌与烟草的共生过程,菌丝中可能存在其他来源的NO。

关键词： AM真菌烟草一氧化氮硝酸还原酶

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H_2O_2参与AM真菌与烟草共生过程

生态学报 2012年第19期32卷 6085-6091页

作者：刘洪庆车永梅赵方贵杨凤玲刘新青岛农业大学生命科学学院山东省高校植物生物技术重点实验室青岛266109

以烟草((Nicotiana tabacum,品种CF90NF)为寄主,苗期接种丛枝菌根(AM)真菌摩西球囊霉(Glomus mosseae,G.m),测定G.m与烟草共生过程中烟草根部H2O2含量以及多胺氧化酶(PAO)和过氧化物酶(POD)活性;研究外源H2O2对G.m侵染烟草的影响以及H2O... 详细信息

以烟草((Nicotiana tabacum,品种CF90NF)为寄主,苗期接种丛枝菌根(AM)真菌摩西球囊霉(Glomus mosseae,G.m),测定G.m与烟草共生过程中烟草根部H2O2含量以及多胺氧化酶(PAO)和过氧化物酶(POD)活性;研究外源H2O2对G.m侵染烟草的影响以及H2O2清除剂和合成抑制剂对烟草侧根H2O2含量及烟草侧根和菌丝中H2O2荧光强度的影响,以探究H2O2在AM真菌侵染烟草过程中的作用。结果表明,接种G.m 20d后烟草侧根中出现H2O2含量的猝发,一定浓度的外源H2O2促进G.m对烟草的侵染,而H2O2清除剂抗坏血酸(AsA)显著削弱烟草侧根和菌丝中的H2O2荧光强度,降低G.m对烟草的侵染率,表明H2O2参与G.m与烟草共生过程;在G.m与烟草共生过程中,PAO和POD活性显著升高,PAO抑制剂二氨基十二烷(DADD)和POD抑制剂水杨羟肟酸(SHAM)显著降低烟草侧根中H2O2荧光强度,对菌丝中H2O2荧光强度无显著影响,表明烟草根部和G.m均可产生H2O2,PAO和POD参与烟草侧根中H2O2的合成,菌丝中可能存在其他来源的H2O2。

关键词： H2O2 AM真菌烟草多胺氧化酶过氧化物酶

G蛋白位于H_2O_2上游参与H_2S诱导的拟南芥气孔关闭过程

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植物生理学报 2013年第2期49卷 181-187页

作者：张丹丹车永梅侯丽霞赵方贵刘新山东省高校植物生物技术重点实验室青岛农业大学生命科学学院山东青岛266109

硫化氢(H2S)可诱导拟南芥气孔关闭。本文以拟南芥野生型及其G蛋白α亚基缺失突变体(Atgpa1-3、Atgpa1-4)和β亚基缺失突变体(Atagb1-1、Atagb1-2)为材料,研究了G蛋白在H2S诱导拟南芥气孔关闭中的作用及其与H2O2的关系。结果表明,H2S可... 详细信息

硫化氢(H2S)可诱导拟南芥气孔关闭。本文以拟南芥野生型及其G蛋白α亚基缺失突变体(Atgpa1-3、Atgpa1-4)和β亚基缺失突变体(Atagb1-1、Atagb1-2)为材料,研究了G蛋白在H2S诱导拟南芥气孔关闭中的作用及其与H2O2的关系。结果表明,H2S可诱导野生型拟南芥气孔关闭及G蛋白α亚基(GPA)和β亚基(AGB)基因表达量增加,但对Atgpa1-3、Atgpa1-4、Atagb1-1和Atagb1-2叶片气孔运动无显著影响;G蛋白激活剂霍乱毒素(CTX)增强H2S诱导拟南芥气孔关闭的作用,而其抑制剂百日咳毒素(PTX)能够阻断H2S的诱导作用,表明G蛋白参与H2S诱导的拟南芥气孔关闭过程。同时,H2S诱导野生型拟南芥叶片及气孔保卫细胞H2O2含量升高,但对Atgpa1-3、Atgpa1-4、Atagb1-1和Atagb1-2无显著作用。CTX促进拟南芥叶片及气孔保卫细胞中H2O2积累,而PTX抑制H2S引起的拟南芥叶片及气孔保卫细胞中H2O2含量的升高。由此说明,G蛋白位于HO上游参与HS诱导的拟南芥气孔关闭过程。

关键词： G蛋白硫化氢过氧化氢气孔关闭

牡丹病程相关蛋白1表达载体的构建及遗传转化

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植物生理学报 2013年第11期49卷 1267-1272页

作者：杨德翠郑国生青岛农业大学生命科学学院山东省高校植物生物技术重点实验室山东青岛266109

为了对牡丹病程相关蛋白1(PsPR1)基因功能进行研究,构建了PsPR1基因超表达载体pBI121-PsPR1,通过农杆菌介导法将PsPR1基因转入普通烟草NC89中。经过抗性筛选和RT-PCR分子检测,获得含PsPR1转基因植株。对转化烟草的T0代植株进行抗病性鉴... 详细信息

为了对牡丹病程相关蛋白1(PsPR1)基因功能进行研究,构建了PsPR1基因超表达载体pBI121-PsPR1,通过农杆菌介导法将PsPR1基因转入普通烟草NC89中。经过抗性筛选和RT-PCR分子检测,获得含PsPR1转基因植株。对转化烟草的T0代植株进行抗病性鉴定,发现转PsPR1基因烟草能轻微增强对烟草黑胫病的抗性,说明PsPR1基因具有抗烟草黑胫病原菌(Phytophthora parasitica ***)的功能。

关键词：牡丹病程相关蛋白1 载体构建遗传转化

ABC转运体位于H2S上游参与盐胁迫诱导的拟南芥气孔关闭

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植物生理学报 2014年第4期50卷 401-406页

作者：吴延朋李洪旺侯丽霞张丹丹刘新青岛农业大学生命科学学院、山东省高校植物生物技术重点实验室山东青岛266109

本文以拟南芥野生型、ABC转运体缺失突变体(Atmrp4、Atmrp5和Atmrp4/5)为材料研究了硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)和ABC转运体在盐胁迫诱导拟南芥气孔关闭中的作用及其相互关系。结果表明,盐胁迫能够引起拟南芥叶片AtMRP4及AtMRP5表达... 详细信息

本文以拟南芥野生型、ABC转运体缺失突变体(Atmrp4、Atmrp5和Atmrp4/5)为材料研究了硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)和ABC转运体在盐胁迫诱导拟南芥气孔关闭中的作用及其相互关系。结果表明,盐胁迫能够引起拟南芥叶片AtMRP4及AtMRP5表达量显著升高,诱导野生型拟南芥叶片气孔关闭,但对Atmrp4、Atmrp5及Atmrp4/5气孔开度无显著影响;而ABC转运体抑制剂格列本脲(glibenclamide,Gli)可减弱盐胁迫诱导的拟南芥气孔关闭的作用,表明ABC转运体参与盐胁迫诱导的拟南芥气孔关闭过程。盐胁迫能够引起野生型拟南芥H_2S合成相关酶L-/D-半胱氨酸脱巯基酶(L-/D-CDes)活性及H_2S含量显著升高,而ABC转运体抑制剂格列本脲处理后则没有这种变化,同时盐胁迫也不能引起Atmrp4、Atmrp5及Atmrp4/5的L-/D-CDes活性及H_2S含量显著升高,表明ABC转运体位于H_2S上游参与盐胁迫诱导气孔关闭过程。

关键词：硫化氢 ABC转运体盐胁迫气孔关闭

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葡萄VvBAP1基因的克隆及表达特性分析

植物生理学报 2014年第6期50卷 829-834页

作者：张广科肖培连侯丽霞王文杰马倩刘新青岛农业大学生命科学学院山东省高校植物生物技术重点实验室山东青岛266109

以抗性葡萄品种‘F-242’组培苗为材料,利用同源克隆法克隆了葡萄VvBAP1基因。测序结果显示,VvBAP1扩增片段大小为531 bp,可编码176个氨基酸序列。利用生物信息学分析VvBAP1基因编码的蛋白序列显示,该蛋白分子量为19.43kDa,含有保守的... 详细信息

以抗性葡萄品种‘F-242’组培苗为材料,利用同源克隆法克隆了葡萄VvBAP1基因。测序结果显示,VvBAP1扩增片段大小为531 bp,可编码176个氨基酸序列。利用生物信息学分析VvBAP1基因编码的蛋白序列显示,该蛋白分子量为19.43kDa,含有保守的钙离子依赖性的C2结构域;等电点pI为9.42;不稳定系数为37.09,推测为稳定的亲水性蛋白;含有多个丝氨酸/苏氨酸磷酸化位点。实时荧光定量PCR表明,该基因在根茎叶中均有表达,其中在叶片中表达量较高;盐胁迫、低温等逆境因子及逆境相关的信号物质,如水杨酸和一氧化氮均可诱导VvBAP1的表达,其中低温对其表达量影响更为显著,推测该基因参与了葡萄抵御逆境胁迫的过程,尤其是与低温相关的过程。

关键词：葡萄 VvBAP1 基因克隆表达特性分析

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AM真菌提高烟草钾含量机制的初步研究

植物生理学报 2014年第7期50卷 1002-1008页

作者：赵方贵王玮车永梅侯丽霞刘新青岛农业大学生命科学学院山东省高校植物生物技术重点实验室山东青岛266109

以烟草和AM真菌菌株摩西球囊霉(Glomous mosseae,G.m)为材料,研究了不同外界K+浓度条件下AM真菌对烟草生长、K+含量以及根中K+-通道基因NtKT1、NtKT2和转运体基因NtHAK1、NtHA1相对表达量的影响。结果表明,在低钾和常钾条件下,接种G.m... 详细信息

以烟草和AM真菌菌株摩西球囊霉(Glomous mosseae,G.m)为材料,研究了不同外界K+浓度条件下AM真菌对烟草生长、K+含量以及根中K+-通道基因NtKT1、NtKT2和转运体基因NtHAK1、NtHA1相对表达量的影响。结果表明,在低钾和常钾条件下,接种G.m均可提高烟草的株高,增加根系长度,提高烟草根部和叶片中的K+含量,在低钾条件下接种G.m使烟草根部和叶片的K+含量分别提高了50.5%和24.5%。在常钾条件下,接种G.m 50 d后烟草根系中NtKT1和NtKT2的相对表达量显著提高;而低钾条件下,钾转运体基因NtHAK和NtHA1的相对表达量显著升高。由此推测,AM真菌能够调控烟草根中K+-通道基因和钾转运体基因的表达进而促进其对K+的吸收。

关键词：摩西球囊霉钾钾通道基因钾转运体基因烟草

H_2S位于H_2O_2下游参与乙烯诱导拟南芥气孔关闭过程

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植物生理学报 2012年第12期48卷 1193-1199页

作者：侯智慧车永梅王兰香侯丽霞刘新青岛农业大学生命科学学院、山东省高校植物生物技术重点实验室山东青岛266109

H2O2和H2S是植物体内重要的信号分子,二者均参与乙烯诱导的拟南芥气孔关闭过程。以拟南芥野生型及其突变体为材料研究了H2O2和H2S在乙烯诱导拟南芥气孔关闭过程中的相互关系。结果表明,乙烯能够诱导野生型拟南芥叶片H2S含量及L-/D-半胱... 详细信息

H2O2和H2S是植物体内重要的信号分子,二者均参与乙烯诱导的拟南芥气孔关闭过程。以拟南芥野生型及其突变体为材料研究了H2O2和H2S在乙烯诱导拟南芥气孔关闭过程中的相互关系。结果表明,乙烯能够诱导野生型拟南芥叶片H2S含量及L-/D-半胱氨酸脱巯基酶(L-/D-CDes)活性显著增加,促进气孔关闭,但对H2O2合成突变体AtrbohD、AtrbohF、Atpao2和Atpao4植株叶片无显著作用;乙烯亦可引起H2S合成突变体Atl-cdes和Atd-cdes气孔保卫细胞H2O2水平的显著增加,但对其气孔运动没有显著作用。此外,H2O2清除剂和合成抑制剂均能抑制乙烯诱导的拟南芥叶片H2S含量和L-/D-CDes活性的增加及气孔开度的减小;而H2S清除剂和合成抑制剂虽能抑制乙烯诱导的气孔关闭,却不能改变乙烯对拟南芥叶片气孔保卫细胞H2O2的作用效应。由此表明H2S位于H2O2下游介导乙烯诱导拟南芥气孔关闭过程。

关键词：硫化氢过氧化氢乙烯气孔关闭