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人类多重剪接RNA结合蛋白类基因的克隆和分析

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江苏医药 2013年第6期39卷 624-628页

作者：张雅娟肖娟娟鲁德意王尉平苏州卫生职业技术学院检验药学系江苏省215009 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院生物化学与分子生物学教研室

目的通过同源筛选的方法拼接并克隆人类多重剪接RNA结合蛋白2(RBPMS2)基因。方法采用同源筛选策略,以人RBPMS2基因作为信息探针,在GeneBank数据库中进行分析,将获得的高度同源的表达序列标签(EST)用VECTOR NTI软件拼接成重叠群。通过UCS... 详细信息

目的通过同源筛选的方法拼接并克隆人类多重剪接RNA结合蛋白2(RBPMS2)基因。方法采用同源筛选策略,以人RBPMS2基因作为信息探针,在GeneBank数据库中进行分析,将获得的高度同源的表达序列标签(EST)用VECTOR NTI软件拼接成重叠群。通过UCSCGenome Blat Server分析,确定RBPMS2基因的染色体定位,SMART网上分析工具进行结构域预测,Unigene数据库进行表达谱分析。结果电子克隆到人类RBPMS2新基因cDNA序列,含完整的开放阅读框(ORF)。RBPMS2基因编码的多肽由209个氨基酸组成,分子量22.5KDa,等电点8.63。SMART分析显示RBPMS2蛋白包含1个RNA识别模体(RRM)结构域。RBPMS2基因位于第15号染色体,定位在15q22.31,由7个外显子和6个内含子组成。电子表达谱分析显示RBPMS2在卵细胞、受精卵、囊胚、不同发育阶段的胚胎、膀胱、肾脏等组织中高表达。结论分析并克隆到了一个新的人类RBPMS2基因。

关键词：多重剪接RNA结合蛋白克隆

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藏茶的化学成分及生物活性研究进展

食品与药品 2017年第4期19卷 295-298页

作者：梁大伟袁野章斌彭裕红王悦秋雅安职业技术学院药学检验系四川雅安625000

藏茶是藏族同胞的主要生活饮品之一,经特殊工艺持久发酵制作而成的藏茶包含多种有益微量元素与活性物质。目前,关于藏茶的化学成分与药理研究还不够深入,但现有研究已证明藏茶具有较好的抗氧化、降血脂、促进胃蛋白酶、润肠通便等生物... 详细信息

藏茶是藏族同胞的主要生活饮品之一,经特殊工艺持久发酵制作而成的藏茶包含多种有益微量元素与活性物质。目前,关于藏茶的化学成分与药理研究还不够深入,但现有研究已证明藏茶具有较好的抗氧化、降血脂、促进胃蛋白酶、润肠通便等生物活性。本文综述了近年对藏茶的化学成分与生物活性研究进展,为其进一步研究与应用提供参考。

关键词：藏茶化学成分生物活性综述

海洋生物碱2,3-二羟基-10-溴吲哚[3,2-a]咔唑的简易合成

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化学研究 2014年第5期25卷 453-455页

作者：梁大伟王悦秋雅安职业技术学院药学检验系四川雅安625000

2,3-二羟基-10-溴吲哚[3,2-a]咔唑(1)是一种从海绵体中提取的具有多种潜在生物活性的天然海洋生物碱.本文作者以3,6-二溴吲哚(2)与5,6-二乙酰氧基吲哚(3)为原料,经过酸催化偶联、分子间成环两步关键反应构建吲哚[3,2-a]咔唑母核;所构建... 详细信息

2,3-二羟基-10-溴吲哚[3,2-a]咔唑(1)是一种从海绵体中提取的具有多种潜在生物活性的天然海洋生物碱.本文作者以3,6-二溴吲哚(2)与5,6-二乙酰氧基吲哚(3)为原料,经过酸催化偶联、分子间成环两步关键反应构建吲哚[3,2-a]咔唑母核;所构建的吲哚[3,2-a]咔唑母核在碱性条件下水解脱去酚羟基上的酯基,即得到目标化合物1,总收率为48%.

关键词：海洋生物碱吲哚咔唑合成

响应面法优化耙耙柑皮果胶超声辅助提取工艺及其抗氧化活性研究

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化学与生物工程 2022年第9期39卷 35-40页

作者：叶群丽冯可梁大伟何靖柳章斌雅安职业技术学院药学与检验学院四川雅安625000

以耙耙柑皮为原料,采用超声协同水浴振荡辅助酸法提取耙耙柑皮果胶,采用单因素实验考察了超声时间、超声温度、液料比、pH值、振荡时间及振荡温度等对果胶提取率的影响,采用响应面法进一步优化提取工艺,并研究了耙耙柑皮果胶的抗氧化活... 详细信息

以耙耙柑皮为原料,采用超声协同水浴振荡辅助酸法提取耙耙柑皮果胶,采用单因素实验考察了超声时间、超声温度、液料比、pH值、振荡时间及振荡温度等对果胶提取率的影响,采用响应面法进一步优化提取工艺,并研究了耙耙柑皮果胶的抗氧化活性。确定最佳提取工艺条件为:超声时间20 min、超声温度60℃、液料比40∶1(mL∶g)、pH值2.0、振荡时间20 min、振荡温度90℃,在此条件下,果胶提取率达28.42%。抗氧化实验结果表明,耙耙柑皮果胶对DPPH自由基、·O_(2)^(-)和·OH等3种自由基均具有清除能力,当果胶浓度为2.0 mg·mL^(-1)时,对3种自由基的清除率分别为43.9%、53.6%和35.0%。

关键词：耙耙柑皮果胶响应面法超声辅助提取水浴振荡抗氧化活性

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分化抑制因子1在乙型肝炎病毒复制、肝癌细胞增殖和凋亡中的作用及机制研究

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中国比较医学杂志 2020年第2期30卷 90-96页

作者：陆小琴杜锐赵玉强牛司强雅安职业技术学院药学与检验学院四川雅安625000 重庆医科大学附属第一医院医学检验科重庆400016

目的探讨分化抑制因子1(inhibitor of differentiation 1,Id1)在乙型肝炎病毒复制、肝癌细胞增殖和凋亡中的作用及机制。方法使用RNA干扰技术将HepG2.2.15肝癌细胞株的Id1基因沉默,作为siRNA-Id1组;设计无关序列作为siRNA-Control组;使... 详细信息

目的探讨分化抑制因子1(inhibitor of differentiation 1,Id1)在乙型肝炎病毒复制、肝癌细胞增殖和凋亡中的作用及机制。方法使用RNA干扰技术将HepG2.2.15肝癌细胞株的Id1基因沉默,作为siRNA-Id1组;设计无关序列作为siRNA-Control组;使用Pifithrin-α抑制siRNA-Id1细胞中p53的表达,作为siRNA-Id1+Pifithrin-α组;将HepG2.2.15肝癌细胞作为Control组。依次使用qRT-PCR、Western blot、ELISA、MTT、流式细胞术检测乙型肝炎病毒的复制、细胞的增殖和凋亡。结果siRNA-Id1组细胞中Id1 mRNA和蛋白的表达量低于siRNA-Control组(P组相比较,siRNA-Id1组细胞中HBx mRNA和蛋白的表达量降低(P生物学效应(P<0.05)。结论RNA干扰Id1可以降低乙型肝炎病毒的复制,抑制肝癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与p53的过表达有关。

关键词：分化抑制因子1 乙型肝炎病毒肝细胞癌小分子干扰RNA p53

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中药猫人参中的抗肿瘤活性成分

第二军医大学学报 2011年第7期32卷 749-753页

作者：徐一新项昭保陈晓晶陈海生第二军医大学药学院天然药物化学教研室上海200433 上海健康职业技术学院生物医药系上海200237 重庆邮电大学生物信息学院重庆400065

目的对中药猫人参（镊合猕猴桃Actinidia valvataDunn.根）中的抗肿瘤活性成分进行研究。方法运用多种色谱分离方法进行分离纯化,通过1HNMR、13CNMR、MS等波谱技术确定化合物的结构,并采用MTT法测试了部分单体化合物的体外细胞毒活性。... 详细信息

目的对中药猫人参（镊合猕猴桃Actinidia valvataDunn.根）中的抗肿瘤活性成分进行研究。方法运用多种色谱分离方法进行分离纯化,通过1HNMR、13CNMR、MS等波谱技术确定化合物的结构,并采用MTT法测试了部分单体化合物的体外细胞毒活性。结果分离并鉴定了11个化合物,其中10个为三萜类化合物：2α,3α,24-三羟基乌苏烷-12-烯-28-酸（1）,积雪草酸（2）,科罗索酸（3）,2α,3α,23,24-四羟基乌苏烷-12-烯-28-酸（4）,2α,3α,24-三羟基乌苏酸-11-烯-13β,28-内酯（5）,2α,3α,24-三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸（6）,2α,3α,19α,24-四羟基乌苏烷-12-烯-28-酸（7）,2α,3α,24-三羟基乌苏烷-12,20（30）-二烯-28-酸（8）,2α,3β,24-三羟基乌苏烷-12-烯-28-酸（9）,齐墩果酸（10）;1个植物甾醇：β-谷甾醇（11）。采用MTT法测试了化合物1、2、3、4、7对A549（人肺癌细胞）、LOVO（人结肠癌细胞）、HepG2（人肝癌细胞）等3种人肿瘤细胞株的体外细胞毒活性。结论化合物3~8为首次从该植物中分离得到,其中2、3对LOVO和HepG2细胞株有一定的抗肿瘤活性,且随着单体化合物极性的增大,细胞毒活性下降。

关键词：猕猴桃科猫人参镊合猕猴桃化学成分抗肿瘤药

(5R)-1-(2,3-二羟基丙基)-5-异丙基-3-取代苯基-2-硫代-4-咪唑烷酮衍生物的合成

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山东化工 2019年第6期48卷 6-8页

作者：梁大伟叶群丽雅安职业技术学院药学与检验学院四川雅安625000

咪唑烷酮结构具有重要的生物活性,广泛的存在于已上市药物及临床活性分子中。本文以L-缬氨酸与取代异氰酸苯酯为主要原料,经2步反应,设计合成了6个新型的2-硫代-4-咪唑烷酮衍生物,其结构经~1H NMR与MS确证。可作为候选化合物进行进一步... 详细信息

咪唑烷酮结构具有重要的生物活性,广泛的存在于已上市药物及临床活性分子中。本文以L-缬氨酸与取代异氰酸苯酯为主要原料,经2步反应,设计合成了6个新型的2-硫代-4-咪唑烷酮衍生物,其结构经~1H NMR与MS确证。可作为候选化合物进行进一步化学结构修饰与活性筛选研究。

关键词：咪唑烷酮合成表征

4-(4’-取代苯基)氨基-6,7-二甲氧基喹唑啉衍生物的合成与抗肿瘤活性研究

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化学试剂 2019年第12期41卷 1233-1238页

作者：王悦秋梁大伟魏雯雅安职业技术学院药学与检验学院四川雅安625000 四川省肿瘤医院肿瘤内科四川成都610041

4-(4’-羟基苯基)氨基-6,7-二甲氧基喹唑啉(WHI-P131)作为重要的JAK3激酶抑制剂,可用于治疗肿瘤及自身免疫性疾病。以临床药物WHI-P131为先导化合物,设计并合成了10个未见报道的标题化合物,其结构经IR、1HNMR与MS确证。采用MTT法,初步... 详细信息

4-(4’-羟基苯基)氨基-6,7-二甲氧基喹唑啉(WHI-P131)作为重要的JAK3激酶抑制剂,可用于治疗肿瘤及自身免疫性疾病。以临床药物WHI-P131为先导化合物,设计并合成了10个未见报道的标题化合物,其结构经IR、1HNMR与MS确证。采用MTT法,初步评价了10个新的衍生物对人宫颈癌细胞Hela、人肝癌细胞Hep G2、人肺癌细胞A549、人乳腺癌细胞MCF-7与人结肠癌细胞HCT116的体外增殖抑制作用。结果表明,4’位羟基引入酰胺基团后对上述5种癌细胞的抑制作用优于母药WHI-P131,是一类潜在的抗肿瘤活性分子。

关键词：喹唑啉衍生物药物设计合成 JAK3 抑制剂抗肿瘤活性

基于转录组测序的金钱蒲类黄酮生物合成基因的表达分析

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福建农业学报 2023年第8期38卷 924-931页

作者：陈钰马良饶雪娥何舒澜福建卫生职业技术学院药学院福建福州350101

【目的】高通量测序获取金钱蒲(Acorus gramineus)7个不同组织转录组信息,为不同组织中类黄酮化学成分合成差异提供分子信息,进而在分子水平上研究金钱蒲不同组织内类黄酮化学成分合成差异。【方法】利用高通量测序技术平台完成金钱蒲7... 详细信息

【目的】高通量测序获取金钱蒲(Acorus gramineus)7个不同组织转录组信息,为不同组织中类黄酮化学成分合成差异提供分子信息,进而在分子水平上研究金钱蒲不同组织内类黄酮化学成分合成差异。【方法】利用高通量测序技术平台完成金钱蒲7个不同部位的转录组测序,对unigenes进行功能注释,借助注释结果挖掘类黄酮生物合成通路,筛选通路中的差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs)并进行表达量分析。【结果】共获得高质量数据39.91~42.97 M,总碱基量为5.98~6.45 Gb,Q30碱基百分比大于94.05%,GC含量为47.81%~50.32%。18616条unigenes在GO数据库中获得62506个注释,根据功能划分为细胞组分、分子功能及生物过程三大类,分别对应6、14、21个亚类,大量基因分布在细胞解剖实体、连接、催化活性和细胞过程等亚类中。10124条unigenes富集在KEGG数据库的5大类19个亚类中,从其中筛选出4条类黄酮生物合成途径,14个关键酶,63个差异表达酶基因。这些基因在金钱蒲7个组织中具有表达差异性,表明这些结构基因在类黄酮生物合成过程中于不同部位发挥作用。【结论】研究结果丰富了金钱蒲的遗传信息,也为进一步解析金钱蒲类黄酮生物合成基因功能提供参考依据。

关键词：金钱蒲转录组类黄酮基因表达量