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HPLC法同时测定补肾活血散结胶囊中12种成分的含量

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中成药 2024年第1期46卷 1-6页

作者：尹继瑶胡静沈霞崔小敏任慧曲彤李宁鲁文静陈志永屈凯陕西中医药大学陕西咸阳712083 陕西省中医药研究院陕西西安710003 陕西省中医医院陕西西安710003

目的建立HPLC法同时测定补肾活血散结胶囊中没食子酸、原儿茶酸、莫诺苷、马钱苷、獐牙菜苷、芍药苷、金丝桃苷、紫云英苷、丹酚酸B、丹酚酸A、朝藿定C、淫羊藿苷的含量。方法分析采用Agilent 5 TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);... 详细信息

目的建立HPLC法同时测定补肾活血散结胶囊中没食子酸、原儿茶酸、莫诺苷、马钱苷、獐牙菜苷、芍药苷、金丝桃苷、紫云英苷、丹酚酸B、丹酚酸A、朝藿定C、淫羊藿苷的含量。方法分析采用Agilent 5 TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长240 nm。结果12种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9998),平均加样回收率97.11%~101.14%,RSD 0.60%~2.65%。结论该方法简便准确,重复性好,可用于补肾活血散结胶囊的质量控制。

关键词：补肾活血散结胶囊化学成分含量测定 HPLC

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中药人用经验研究质量管理指南

中国中药杂志 2024年第17期49卷 4801-4804页

作者：唐雅琴杨忠奇唐兆安元唯安唐健元邹冲广州中医药大学第一附属医院广东省中医临床研究院湖南中医药大学第一附属医院上海中医药大学附属曙光医院成都中医药大学附属医院江苏省中医院

2023年2月国家药品监督管理局发布《中药注册管理专门规定》,明确提出鼓励在中医临床实践过程中开展高质量的人用经验研究，获得支持中药注册的充分证据；同时提出人用经验研究应符合相关要求，并接受药品注册核查。为规范中药人用经验... 详细信息

2023年2月国家药品监督管理局发布《中药注册管理专门规定》,明确提出鼓励在中医临床实践过程中开展高质量的人用经验研究，获得支持中药注册的充分证据；同时提出人用经验研究应符合相关要求，并接受药品注册核查。为规范中药人用经验研究，获取高质量支持注册申请的人用经验数据，促进研究规范化和标准化，按照国家相关法律法规和国家药品监督管理局药品审评中心人用经验研究技术指导原则要求，充分考虑中医药临床特点，中国药学会中药临床评价专业委员会组织制定《中药人用经验研究质量管理指南》,包括开展人用经验研究医疗机构条件、研究者、申办者、药学关键信息及要求、研究方案、伦理审查要点、研究实施过程的要求、人用经验研究风险管理与受试者保护等内容。该文件经过专家多轮征求意见，最终形成适用于支持药品注册的中药人用经验研究指南性文件，用以指导规范开展中药人用经验研究。

关键词：人用经验质量管理指南

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白杨素的抗癌作用及其机制研究进展

中药材 2024年 2126-2133页

作者：高境媛蒲柯丁辉冯阳施京红陕西中医药大学川北医学院附属医院陕西省中医药研究院西安市第三医院

白杨素是一种存在于木蝴蝶、蜂胶等多种中药材中的黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎、保肝、保护神经等生物活性,在治疗多种疾病方面显示出巨大潜力。近年来白杨素因其显著的抗肿瘤作用引起广泛关注。既往研究表明白杨素可以通过诱导肿瘤... 详细信息

白杨素是一种存在于木蝴蝶、蜂胶等多种中药材中的黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎、保肝、保护神经等生物活性,在治疗多种疾病方面显示出巨大潜力。近年来白杨素因其显著的抗肿瘤作用引起广泛关注。既往研究表明白杨素可以通过诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖转移、抑制肿瘤血管生成等作用在胃肠道癌、肝癌、肺癌、膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、前列腺癌、胶质母细胞瘤等恶性肿瘤中发挥抗肿瘤作用。该综述从白杨素的抗肿瘤特性出发,回顾性地总结了白杨素的药理毒性、抗癌作用与机制及其与不同抗癌药物联用的作用关系,以期为开发新型抗癌药物提供新思路。

关键词：白杨素抗肿瘤作用机制

线粒体凋亡在胃癌中的调控机制及中医药干预研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第14期30卷 259-269页

作者：陈露露陈玉婵宋忠阳赵海宏张茂福张志明甘肃省中医药大学甘肃中医药大学附属医院甘肃省中医院

胃癌（GC）是世界上最常见癌症之一，其症状隐匿不显，发病机制复杂且尚未明确，具有高发病率、高死亡率、预后不良等特点。线粒体凋亡作为经典细胞凋亡途径之一，在GC逃避细胞凋亡中被广泛描述，可通过氧化应激、细胞周期、线粒体膜电... 详细信息

胃癌（GC）是世界上最常见癌症之一，其症状隐匿不显，发病机制复杂且尚未明确，具有高发病率、高死亡率、预后不良等特点。线粒体凋亡作为经典细胞凋亡途径之一，在GC逃避细胞凋亡中被广泛描述，可通过氧化应激、细胞周期、线粒体膜电位、线粒体易位等机制介导线粒体凋亡参与GC增殖、侵袭及转移等过程，同时也是中医药（TCM）干预恢复GC线粒体功能的潜在靶点之一。TCM基于“中医脾-线粒体相关”理论，阐述脾虚失荣、癌毒内结是线粒体凋亡之根本，确立以“健脾复其本、抗癌解毒攻其根”为基本治疗原则，通过抑制氧化应激、促进细胞周期停滞、下调线粒体膜电位等多种途径促进线粒体凋亡，改善GC能量代谢障碍、恢复线粒体结构及功能，有效干预GC的发生发展，具有不良反应小、耐药性低的独特优势。但线粒体凋亡在GC中的作用机制及TCM干预线粒体凋亡治疗GC的作用靶点尚缺乏系统性评述。因此，该文从线粒体凋亡对GC的发生发展的影响及TCM干预线粒体凋亡治疗GC的作用进行系统性整理、归纳，以期为GC的治疗及进一步的研究提供一定的文献及理论参考依据。

关键词：胃癌(GC) 细胞凋亡线粒体中医药研究进展

头痛宁胶囊对偏头痛大鼠模型和脂多糖诱导神经小胶质细胞的影响及作用机制

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世界中医药 2024年第11期19卷 1632-1637页

作者：支文冰刘洋宗时宇王春柳孙婷婷李晔刘峰张红陕西省中医药研究院/陕西省中医医院西安710003 陕西步长制药有限公司西安710075

目的:探讨头痛宁胶囊(TTN)对偏头痛大鼠模型和脂多糖(LPS)诱导神经小胶质细胞的影响及作用机制。方法:将21只无特定病原体(SPF)级斯泼累格·多雷(SD)雄性大鼠按照随机数字表法分为3组,分别为空白组、模型组、头痛宁给药组(TTN给药组)。... 详细信息

目的:探讨头痛宁胶囊(TTN)对偏头痛大鼠模型和脂多糖(LPS)诱导神经小胶质细胞的影响及作用机制。方法:将21只无特定病原体(SPF)级斯泼累格·多雷(SD)雄性大鼠按照随机数字表法分为3组,分别为空白组、模型组、头痛宁给药组(TTN给药组)。TTN给药组大鼠给予TTN 640 mg/kg灌胃,空白组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,均1次/d,预给药7 d。末次给药后30 min, TTN给药组和模型组大鼠给予皮下注射硝酸甘油注射液10 mg/kg造模,空白组给予皮下注射等体积生理盐水。用酶联免疫吸附试验法测定大鼠血清5-HT的水平、脑组织中DA。脂多糖(LPS)诱导神经小胶质细胞(BV2)模拟中枢敏化,将细胞分为空白组、脂多糖组和头痛宁高、低剂量给药组,噻唑蓝实验检测TTN和LPS对BV2细胞活力的影响;硝酸还原酶法检测细胞上清中一氧化氮(NO);酶联免疫吸附试验法检测细胞上清中脑源性生长因子(BDNF)、5-HT、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;免疫组织化学法和蛋白质印迹法检测BV2细胞中Toll样受体4(TLR4)和磷酸化p65(p-p65 NF-κB)蛋白表达。结果:模型组大鼠血清5-HT、脑组织中DA水平低(P<0.05),TTN给药组血清5-HT、脑组织中DA水平高(P<0.05)。TTN(1.25~20μg/mL)及LPS(1、2、4和8μg/mL)对BV2细胞活力无显著影响。与空白组比较,LPS组细胞上清液中BDNF、5-HT水平低(P<0.05),NO、IL-6、TNF-α水平高(P<0.05),细胞中TLR4、p-p65 NF-κB蛋白表达高(P<0.05);与LPS组比较,TTN给药组细胞上清液中BDNF、5-HT水平高(P<0.05),NO、IL-6、TNF-α水平高低(P<0.05),细胞中TLR4、p-p65 NF-κB蛋白表达低(P<0.05)。结论:头痛宁胶囊通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,减轻了LPS诱导的BV2细胞炎症反应,缓解大鼠偏头痛症状。

关键词：偏头痛头痛宁胶囊大鼠神经小胶质细胞 Toll样受体4/核因子κB信号通路中枢敏化炎症反应脂多糖

阿帕替尼联合卡瑞利珠单抗治疗中晚期肝细胞癌的疗效及其对患者免疫功能、肿瘤标志物的影响

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中国普通外科杂志 2024年第7期33卷 1070-1077页

作者：黄大伟江诗怡厉晶萍常玉娟蒋满红湖北省中医院/湖北中医药大学附属医院/湖北省中医药研究院肝病科湖北武汉430074 湖北省中医院/湖北中医药大学附属医院/湖北省中医药研究院肿瘤科湖北武汉430074 湖北省中医院/湖北中医药大学附属医院/湖北省中医药研究院湖北时珍试验室湖北武汉430074 湖北省中医院/湖北中医药大学附属医院/湖北省中医药研究院中医肝肾研究及应用重点试验室湖北武汉430074

背景与目的:近年来靶向药物治疗迅速发展,已成为治疗晚期肝细胞癌(HCC)的重要手段。但一线靶向药物索拉非尼治疗HCC应答率低,靶向药物治疗HCC的临床方案仍是一个需要不断提高的难题。本研究探讨阿帕替尼联合卡瑞利珠单抗治疗中晚期HCC... 详细信息

背景与目的:近年来靶向药物治疗迅速发展,已成为治疗晚期肝细胞癌(HCC)的重要手段。但一线靶向药物索拉非尼治疗HCC应答率低,靶向药物治疗HCC的临床方案仍是一个需要不断提高的难题。本研究探讨阿帕替尼联合卡瑞利珠单抗治疗中晚期HCC的临床疗效,以及对患者免疫功能、肿瘤标志物影响。方法:回顾性分析2022年5月—12月湖北省中医院收治的137例中晚期不可切除的HCC患者临床资料,其中61例单纯口服阿帕替尼治疗(靶向组),76例在口服阿帕替尼基础上,同时给予卡瑞利珠单抗静脉滴注(靶免组)。比较两组客观缓解率(ORR)与疾病控制率(DCR);T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+))、甲胎蛋白(AFP)、高尔基体蛋白73(GP-73)、甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)水平;肝肾功能指标与不良反应情况;随访12个月,统计两组患者的无进展生存(PFS)情况。结果:治疗前,两组患者的一般资料、肝肾功能指标、免疫与肿瘤标志物水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。治疗后,靶免组ORR与DCR均高于靶向组(40.79%vs.16.39%,P=0.02;60.53%vs.39.34%,P=0.014);靶免组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于靶向组,CD8^(+)低于靶向组(均P0.05)。两组均随访12个月,靶免组中位PFS明显长于靶向组(10个月vs.6个月,χ^(2)=9.954,P<0.05)。结论:阿帕替尼联合卡瑞利珠单抗治疗HCC可上调T淋巴细胞水平,降低肿瘤标志物水平,有效延长生存时间,疗效优于单纯靶向治疗,且安全性良好。

关键词：癌,肝细胞抗肿瘤联合化疗方案阿帕替尼卡瑞利珠

黄连解毒汤对脂多糖诱导的小鼠急性肾损伤治疗作用及机制

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中草药 2024年第3期55卷 853-860页

作者：熊致立王瑞朱晓云付彤飞李成银吴俊松王林群沈银峰巴元明湖北中医药大学中医临床学院湖北武汉430000 湖北省中医院湖北中医药大学附属医院湖北省中医药研究院湖北武汉430000

目的研究黄连解毒汤对脂多糖诱导的小鼠急性肾损伤的作用及作用机制。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和黄连解毒汤低、中、高剂量(50、100、150 mg/kg)组,每组8只。连续ig黄连解毒汤3 d,末次给药2 h后,ip脂多糖(10 mg/kg)... 详细信息

目的研究黄连解毒汤对脂多糖诱导的小鼠急性肾损伤的作用及作用机制。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和黄连解毒汤低、中、高剂量(50、100、150 mg/kg)组,每组8只。连续ig黄连解毒汤3 d,末次给药2 h后,ip脂多糖(10 mg/kg)建立急性肾损伤模型。检测血清中肌酐和尿素氮水平;苏木素-伊红(HE)和高碘酸-席夫(PAS)染色检测肾组织病理变化;免疫组化法检测肾组织B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达;TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡情况;Western blotting检测肾组织磷酸酯酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、p-PI3K和p-Akt蛋白表达。结果黄连解毒汤明显降低急性肾损伤小鼠血清中尿素氮及肌酐水平(P<0.01、0.001),改善肾脏组织病理变化,抑制肾组织细胞凋亡,上调肾组织PI3K、Akt蛋白表达(P<0.05),下调PTEN、p-PI3K、p-Akt蛋白表达(P<0.05)。结论黄连解毒汤通过调控PTEN/PI3K/Akt通路抑制细胞凋亡,进而缓解急性肾损伤。

关键词：黄连解毒汤急性肾损伤炎症反应细胞凋亡磷酸酯酶与张力蛋白同源物/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路咖啡酸小檗碱黄芩素

芪仙通络方对脑梗死大鼠健侧皮质脊髓束重塑及运动功能恢复的影响及机制

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中药新药与临床药理 2024年第9期35卷 1319-1328页

作者：周胜强伍大华李博陈彦君黄佳王琦曾雯谭玲娟邓奕辉刘芳湖南省中医药研究院附属医院湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学中山大学附属第三医院肇庆医院

目的观察芪仙通络方对脑梗死大鼠健侧皮质脊髓束（CST）重塑与运动功能恢复的影响，并从神经重塑相关调控因子角度探讨其潜在分子机制。方法采用线栓法复制大脑中动脉阻塞（MCAO）大鼠模型。将50只模型复制成功的大鼠随机分为模型组... 详细信息

目的观察芪仙通络方对脑梗死大鼠健侧皮质脊髓束（CST）重塑与运动功能恢复的影响，并从神经重塑相关调控因子角度探讨其潜在分子机制。方法采用线栓法复制大脑中动脉阻塞（MCAO）大鼠模型。将50只模型复制成功的大鼠随机分为模型组、胞磷胆碱组(0.054 g·kg-1)及芪仙通络方低、中、高剂量组(7.83、15.66、31.32 g·kg-1)，每组10只，另设假手术组（10只）。术后第3天开始灌胃干预，每日1次，连续26 d。于术后第3、14、28天采用Longa评分法评价大鼠粗略运动功能，走横木试验（BWT）评分法评价大鼠精细运动功能；术后第14天健侧运动皮层注射神经示踪剂生物素葡聚糖胺（BDA），顺行示踪皮质脊髓束。术后第28天，采用免疫组化法检测健侧运动皮层及颈髓后索生长相关蛋白43（GAP-43）、BDA阳性纤维表达；免疫荧光法检测颈髓灰质内BDA阳性纤维与突触前标志蛋白囊泡谷氨酸转运体1（VGLUT1）共定位面积；Western Blot法检测健侧运动皮层中脑源性神经营养因子（BDNF）、胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）、神经生长因子（NGF）以及神经重塑抑制因子勿动蛋白A（Nogo-A）、少突胶质细胞髓鞘糖蛋白（OMgp）和髓鞘相关糖蛋白（MAG）的表达；Pearson相关分析法分析Longa评分、BWT评分与BDA/VGLUT1共定位面积的相关性。结果与假手术组比较，模型组大鼠运动功能缺损明显，各时间点Longa评分明显升高（P<0.01）,BWT评分明显降低（P<0.05,P<0.01），健侧运动皮层及颈髓的GAP-43蛋白表达水平明显升高（P<0.05），颈髓后索越边纤维数量明显增加（P<0.05），颈髓灰质内的BDA/VGLUT1共定位面积明显增加（P<0.05），健侧运动皮层中BDNF、GDNF、NGF蛋白表达明显上调（P<0.05），而Nogo-A、OMgp、MAG蛋白表达明显下调（P<0.05）。与模型组比较，各给药组大鼠MCAO术后第14、28天的Longa评分均显著降低（P<0.01）,BWT评分均显著升高（P<0.01），健侧运动皮层及颈髓的GAP-43蛋白表达水平均显著升高（P<0.01），颈髓后索越边纤维数量显著增加（P<0.01），颈髓灰质内的BDA/VGLUT1共定位面积均显著增加（P<0.01），健侧运动皮层中BDNF、GDNF、NGF蛋白表达均显著上调（P<0.05,P<0.01），而Nogo-A、OMgp、MAG蛋白表达均明显下调（P<0.05），其中高剂量组作用最明显。Longa评分与BDA/VGLUT1共定位面积显著负相关（r=-0.89,P<0.01），而BWT评分与BDA/VGLUT1共定位面积显著正相关（r=0.84,P<0.01）。结论芪仙通络方可促进MCAO大鼠脑梗死后健侧CST重塑，进而改善运动功能，其分子机制可能与调节健侧运动皮层神经重塑相关调控因子的表达有关。

关键词：芪仙通络方脑梗死皮质脊髓束神经重塑运动功能大鼠

石见穿外泌体通过诱导肝癌细胞铁死亡及凋亡抑制肿瘤生长

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中草药 2024年第19期 6622-6635页

作者：王智槟杨仁义张婧婷陈红瑶吴玲卢芳国曾普华湖南中医药大学湖南省中西医结合医院(湖南省中医药研究院附属医院)

目的探究石见穿来源外泌体（Salvia chinensis-derived nanoparticles,SDNPs）诱导SK-Hep-1肝癌细胞及其皮下移植瘤铁死亡和凋亡的作用机制。方法分别采用超高速离心法和聚乙二醇（polyethylene glycol,PEG）沉淀法提取SDNPs，利用纳... 详细信息

目的探究石见穿来源外泌体（Salvia chinensis-derived nanoparticles,SDNPs）诱导SK-Hep-1肝癌细胞及其皮下移植瘤铁死亡和凋亡的作用机制。方法分别采用超高速离心法和聚乙二醇（polyethylene glycol,PEG）沉淀法提取SDNPs，利用纳米颗粒跟踪分析技术和透射电子显微镜对SDNPs进行表征检测，BCA法测定SDNPs蛋白浓度；以SK-Hep-1肝癌细胞系为研究对象，将细胞分为对照组和SDNPs低、高剂量（15、30μg/mL）组以及索拉非尼（100 nmol/L）组，采用CCK-8法、EdU法和集落实验检测肝癌细胞增殖情况，通过划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力，流式细胞术检测细胞凋亡情况，透射电镜检测肝癌细胞超微结构变化，荧光法检测胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平，比色法检测细胞中亚铁离子（Fe2+）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平，Western blotting法检测胱氨酸转运蛋白系统（system xc-，x CT）、谷胱甘肽过氧化酶4（glutathione peroxidase 4,GPX4）和酰基辅酶A合成酶长链家族成员4（acyl-CoA synthetase 4,ACSL4）蛋白表达；通过SK-Hep-1肝癌细胞系皮下移植构建裸鼠成瘤模型，将裸鼠随机分为对照组、石见穿（0.147 g/g）组和SDNPs ig给药组（SDNPs-ig,50μg/g）、ip给药组（SDNPs-ip,50μg/g）、尾iv给药组（SDNPs-tiv,50μg/g）以及索拉非尼（30μg/g）组，每组5只，观察SDNPs对SK-Hep-1肝癌细胞系皮下移植瘤的影响，苏木素-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色观察肿瘤以及心、肝、肺和肾组织病理变化，免疫组织化学染色（immunohistochemistry,IHC）检测SK-Hep-1肝癌细胞系皮下移植瘤细胞增殖情况。结果超高速离心法和PEG沉淀法均能提取SDNPs，但得到的SDNPs粒径峰度不统一，超高速离心法粒径集中在（144.8±79.7）nm,PEG沉淀法粒径集中在88、157和202 nm;SDNPs能够被肝癌细胞摄取，与对照组比较，SDNPs能显著抑制肝癌细胞的增殖（P<0.01）、迁移（P<0.01）和侵袭（P<0.001），诱导肝癌细胞线粒体结构变化，导致细胞内ROS及Fe2+、MDA水平显著上升（P<0.05、0.001）,GSH水平下降（P<0.01、0.001），并下调铁死亡相关蛋白x CT、GPX4（P<0.05、0.01、0.001）表达，上调ACSL4蛋白的表达（P<0.001），诱导肝癌细胞铁死亡；与对照组比较，石见穿组、索拉非尼组以及SDNPs-ip、SDNPs-tiv组的移植瘤体积明显减小（P<0.05、0.01），而SDNPs-ig组的移植瘤体积则无明显差异；IHC结果表明，与对照组比较，SDNPs-ig组Ki-67和x CT蛋白表达无明显变化，其他组以上蛋白表达均显著下降（P<0.01、0.001）；各组小鼠心、肝、肺和肾组织无明显病理改变。结论 SDNPs能被肝癌细胞摄取，并抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭，限制肝癌细胞皮下移植瘤的生长，其机制可能与改变肝癌细胞线粒体功能、导致胞内过氧化物积累、诱发细胞铁死亡和凋亡有关。

关键词：石见穿外泌体肝细胞癌铁死亡凋亡