头痛宁胶囊对偏头痛大鼠模型和脂多糖诱导神经小胶质细胞的影响及作用机制

作     者：支文冰 刘洋 宗时宇 王春柳 孙婷婷 李晔 刘峰 张红 ZHI Wenbing;LIU Yang;ZONG Shiyu;WANG Chunliu;SUN Tingting;LI Ye;LIU Feng;ZHANG Hong

作者机构：陕西省中医药研究院/陕西省中医医院西安710003 陕西步长制药有限公司西安710075 

出 版 物：《世界中医药》 (World Chinese Medicine)

年 卷 期：2024年第19卷第11期

页      面：1632-1637页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 100706[医学-药理学] 100502[医学-中医临床基础] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家科技重大专项“重大新药创制”项目(2018ZX09721005-004-007) 陕西省科技厅计划重点研发计划项目(2018ZDXM-SF-003、2021ZDLSF-04-06、2022ZDXM-SF-06、2024SF-YBXM-479) 陕西省中医医院苗圃培优项目(2021-13) 陕西省科技计划青年基金项目(2023-JC-QN-0820) 西安市科技计划项目(23Y XY J0165) 

主　　题：偏头痛 头痛宁胶囊 大鼠 神经小胶质细胞 Toll样受体4/核因子κB信号通路 中枢敏化 炎症反应 脂多糖 

摘      要：目的:探讨头痛宁胶囊(TTN)对偏头痛大鼠模型和脂多糖(LPS)诱导神经小胶质细胞的影响及作用机制。方法:将21只无特定病原体(SPF)级斯泼累格·多雷(SD)雄性大鼠按照随机数字表法分为3组,分别为空白组、模型组、头痛宁给药组(TTN给药组)。TTN给药组大鼠给予TTN 640 mg/kg灌胃,空白组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,均1次/d,预给药7 d。末次给药后30 min, TTN给药组和模型组大鼠给予皮下注射硝酸甘油注射液10 mg/kg造模,空白组给予皮下注射等体积生理盐水。用酶联免疫吸附试验法测定大鼠血清5-HT的水平、脑组织中DA。脂多糖(LPS)诱导神经小胶质细胞(BV2)模拟中枢敏化,将细胞分为空白组、脂多糖组和头痛宁高、低剂量给药组,噻唑蓝实验检测TTN和LPS对BV2细胞活力的影响;硝酸还原酶法检测细胞上清中一氧化氮(NO);酶联免疫吸附试验法检测细胞上清中脑源性生长因子(BDNF)、5-HT、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;免疫组织化学法和蛋白质印迹法检测BV2细胞中Toll样受体4(TLR4)和磷酸化p65(p-p65 NF-κB)蛋白表达。结果:模型组大鼠血清5-HT、脑组织中DA水平低(P0.05),TTN给药组血清5-HT、脑组织中DA水平高(P0.05)。TTN(1.25~20μg/mL)及LPS(1、2、4和8μg/mL)对BV2细胞活力无显著影响。与空白组比较,LPS组细胞上清液中BDNF、5-HT水平低(P0.05),NO、IL-6、TNF-α水平高(P0.05),细胞中TLR4、p-p65 NF-κB蛋白表达高(P0.05);与LPS组比较,TTN给药组细胞上清液中BDNF、5-HT水平高(P0.05),NO、IL-6、TNF-α水平高低(P0.05),细胞中TLR4、p-p65 NF-κB蛋白表达低(P0.05)。结论:头痛宁胶囊通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,减轻了LPS诱导的BV2细胞炎症反应,缓解大鼠偏头痛症状。