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不同发育时期对山茱萸果实品质变化规律的影响

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北方园艺 2022年第2期 103-110页

作者：陈旋勐颜永刚张岗彭亮魏瑶陈莹陕西中医药大学药学院陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西咸阳712046

以不同发育时期的山茱萸果实为试材,采用果实形态结构观察以及植物生理学方法,研究了不同发育时期对山茱萸果实品质变化规律的影响,以期为果实发育过程中的物质积累研究提供参考依据。结果表明:依据果实外部形态及内部结构特征,可以将... 详细信息

以不同发育时期的山茱萸果实为试材,采用果实形态结构观察以及植物生理学方法,研究了不同发育时期对山茱萸果实品质变化规律的影响,以期为果实发育过程中的物质积累研究提供参考依据。结果表明:依据果实外部形态及内部结构特征,可以将山茱萸果实发育划分为3个时期,依次为幼果期、中果期和成熟期。不同发育时期山茱萸果实品质指标呈规律性变化。对果实发育过程中多项品质指标进行综合评价,确定幼果期为山茱萸果实品质形成的关键时期,成熟期果实纵、横径和单果干质量的变化趋于稳定,可以为采收期的确定提供参考依据。

关键词：山茱萸果实发育果实品质

基于化学模式识别分析的黄芩HPLC指纹图谱研究

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时珍国医国药 2022年第1期33卷 130-133页

作者：李璐含王丹阳杨冰月刘欢袁丽张岗彭亮颜永刚陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西西安712046

目的建立黄芩野生和栽培药材的HPLC指纹图谱,并以指纹图谱共有峰数据构建化学模式识别模型,评价不同来源黄芩药材的差异性机制。方法采用高效液相色谱法建立20批不同来源黄芩药材的指纹图谱,构建HPLC-指纹图谱共有模式,整合相似度评价... 详细信息

目的建立黄芩野生和栽培药材的HPLC指纹图谱,并以指纹图谱共有峰数据构建化学模式识别模型,评价不同来源黄芩药材的差异性机制。方法采用高效液相色谱法建立20批不同来源黄芩药材的指纹图谱,构建HPLC-指纹图谱共有模式,整合相似度评价、主成分分析(PCA)和最小偏二乘法-判别分析(PLS-DA)对不同来源黄芩药材进行评价。结果建立了黄芩药材的HPLC指纹图谱,标定了19个共有峰,20批黄芩样品的指纹图谱与对照指纹图谱相似度>0.9。最小偏二乘法-判别分析能对野生与栽培黄芩进行明确的区分,表明导致差异的主要化学标记物为黄芩苷、野黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等6个成分。结论建立的黄芩HPLC指纹图谱,与模式识别方法相结合可为黄芩药材质量评价提供参考。

关键词：黄芩 HPLC指纹图谱化学模式识别

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掌叶大黄种子特性研究及无菌培养体系的构建

中草药 2019年第18期50卷 4430-4437页

作者：黑小斌李依民李欢李元敏沈霞高静彭亮颜永刚张岗陕西中医药大学药学院陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心

目的研究掌叶大黄种子形态和发芽特性并构建无菌苗和愈伤组织培养体系,为其快繁和次生代谢调控研究提供基础。方法从大小、净度、千粒质量、生活力、发芽率及发芽势等方面进行10批掌叶大黄种子特性分析;利用正交试验筛选大黄无菌苗建... 详细信息

目的研究掌叶大黄种子形态和发芽特性并构建无菌苗和愈伤组织培养体系,为其快繁和次生代谢调控研究提供基础。方法从大小、净度、千粒质量、生活力、发芽率及发芽势等方面进行10批掌叶大黄种子特性分析;利用正交试验筛选大黄无菌苗建立的消毒体系及愈伤组织诱导的激素配比;HPLC法分析无菌苗和愈伤组织中10种有效成分的含量。结果 10批不同产地来源掌叶大黄的果实及种子外观形态无显著差异,含水量、生活力、发芽率及发芽势有明显差异,和政县与渭源县大黄发芽特性最高;75%乙醇30 s、10%H2O2 15 min为大黄种子无菌苗建立的最佳消毒组合;愈伤组织诱导最佳激素为6-苄氨基腺嘌呤(1.0 mg/L)+6-糠氨基嘌呤(2.0 mg/L)+1-萘乙酸(1.5 mg/L);不同消毒剂处理种子对无菌苗10种成分的积累无显著影响(P>0.05),愈伤组织可检测出7种有效成分,含量显著低于无菌苗,大黄酚-8-O-葡萄糖苷含量较其他成分高。结论以千粒质量、生活力、发芽率及发芽势等指标明确甘肃和政县与渭源县种子特性优良,成功建立掌叶大黄无菌苗与愈伤组织培养体系,为掌叶大黄下一步研究奠定基础。

关键词：掌叶大黄种子发芽无菌苗愈伤组织大黄酚-8-O-葡萄糖苷

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黄芩不同种源对其药材品质的影响

中草药 2021年第7期52卷 2091-2098页

作者：王丹阳李璐含王祥安佳张岗高静颜永刚王昌利陕西中医药大学药学院陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西咸阳712046

目的筛选出适合陕西渭北汉源地区生长的黄芩优良种质。方法将收集河北、山西、山东、陕西、安徽、甘肃、河南、内蒙古8个省份38批样品种质种植于淳化县种植基地,通过外观指数、药典常规项、含量测定3方面指标观测,综合评价药材品质,进... 详细信息

目的筛选出适合陕西渭北汉源地区生长的黄芩优良种质。方法将收集河北、山西、山东、陕西、安徽、甘肃、河南、内蒙古8个省份38批样品种质种植于淳化县种植基地,通过外观指数、药典常规项、含量测定3方面指标观测,综合评价药材品质,进一步筛选出适合陕西渭北汉源地区生长的黄芩优良种质。结果不同省份产的黄芩样品外观分布有显著性差异;样品均符合《中国药典》2020年版的规定,其中河北产黄芩种源样品醇溶性浸出物水平最高,含水量最低,总灰分符合要求;山西与河北产黄芩总成分含量最高。结论综合评价得河北产黄芩种质种植后所得药材品质更为优良。

关键词：黄芩种质药材品质外观指数含量测定

掌叶大黄RpNAC1基因的克隆、亚细胞定位及表达分析

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中草药 2021年第23期52卷 7302-7308页

作者：梁小燕李元敏李依民李慧杜鹃张明英高静彭亮张岗陕西中医药大学药学院陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西西安712046

目的克隆掌叶大黄Rheumpalmatum转录因子基因Rp NAC1,进行生物信息学、亚细胞定位及表达模式分析。方法根据转录组中一个NAC unigene,利用RT-PCR克隆开放阅读框(open reading frame,ORF)。通过生物信息软件预测基因编码蛋白的理化性质... 详细信息

目的克隆掌叶大黄Rheumpalmatum转录因子基因Rp NAC1,进行生物信息学、亚细胞定位及表达模式分析。方法根据转录组中一个NAC unigene,利用RT-PCR克隆开放阅读框(open reading frame,ORF)。通过生物信息软件预测基因编码蛋白的理化性质、结构域等分子特征。采用DNAStar 6.0和MEGA 7.0分别进行氨基酸序列比对和进化分析。构建绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体,以农杆菌侵染烟草叶片的瞬时表达法分析亚细胞定位。运用q RT-PCR检测基因表达模式。结果分离到Rp NAC1基因,ORF(1269 bp),编码一个由422个氨基酸组成的蛋白质,相对分子质量47070,等电点5.80,包含一个保守NAC结构域(32~181),与多种植物NAC蛋白一致性较高(62.42%~88.7%),聚在植物NAC分子进化树的NAC2分支,与甜菜NAC(XP;10694507)亲缘关系较近。Rp NAC1-GFP融合蛋白定位在烟草细胞核内。Rp NAC1基因在一年生植株根中表达量最高,根茎中表达量最低,相对表达量分别为叶中的5.37、0.012倍;该基因响应200μmol/L赤霉素(gibberellin,GA3)处理后在24 h内总体上调,200μmol/L茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,Me JA)处理1 h和12 h基因显著上调,200μmol/L水杨酸(salicylic acid,SA)处理12 h显著诱导基因表达,200μmol/L脱落酸(abscisic acid,ABA)处理抑制基因表达,200μmol/L乙烯(ethylene,ET)处理未见明显变化。结论获得掌叶大黄Rp NAC1基因序列及表达特征,为进一步研究其在蒽醌类成分合成与积累中的转录调控作用提供支撑。

关键词：掌叶大黄 NAC转录因子基因克隆表达模式激素

基于血管内皮生长因子信号通路/肿瘤坏死因子信号通路的桃核承气汤防治脑卒中双向调节分子网络机制

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药学学报 2020年第5期55卷 898-906页

作者：裴丽珊沈霞颜永刚张岗彭亮王艳霞平凡陕西中医药大学药学院陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西咸阳712046

脑卒中长期以来损害着人类的健康,由于其发病机制复杂,目前尚无令人满意的治疗策略。桃核承气汤在临床上对脑卒中疗效显著。本研究通过TCMSP、TCMIP、BATMAN-TCM和TCMID数据库进行成分收集,采用PharmMapper、BATMAN-TCM数据库进行靶点... 详细信息

脑卒中长期以来损害着人类的健康,由于其发病机制复杂,目前尚无令人满意的治疗策略。桃核承气汤在临床上对脑卒中疗效显著。本研究通过TCMSP、TCMIP、BATMAN-TCM和TCMID数据库进行成分收集,采用PharmMapper、BATMAN-TCM数据库进行靶点的预测和筛选,使用R语言包clusterProfiler对靶点进行功能富集分析,最后应用GEO数据库和分子对接对关键靶点进行验证。结果显示,桃核承气汤51个活性成分可能通过调控内皮型一氧化氮合酶(NOS3)、环加氧酶2 (PTGS2)和基质金属蛋白酶9 (MMP9)等15个关键靶点,影响血管内皮生长因子信号通路等发挥预防脑卒中的作用,影响肿瘤坏死因子信号通路等发挥治疗脑卒中的作用。GEO数据分析表明,桃核承气汤防治脑卒中的关键靶点:雄激素受体(AR)、胱天蛋白酶8 (CASP8)、细胞间黏附分子1 (ICAM1)、白细胞介素1β(IL1B)、丝裂原活化蛋白激酶14 (MAPK14)、MMP9、髓过氧化物酶(MPO)、过氧化物酶体增生激活受体γ(PPARG)、PTGS2和细胞肿瘤抗原p53 (TP53)为上调基因;血清白蛋白(ALB)、雌激素受体1 (ESR1)、NOS3、转录因子p65 (RELA)和原癌基因络氨酸蛋白激酶Src (SRC)为下调基因。GEO分析说明,桃核承气汤可能通过下调ESR1、NOS3来预防脑卒中,通过上调ICAM1、IL1B、MAPK14、MMP9、PPARG、PTGS2和TP53,下调RELA、SRC来治疗脑卒中。本研究发现桃核承气汤在脑卒中防治过程中通过多基因和多途径发挥双向调节作用,为脑卒中治疗提供新的策略。

关键词： GEO数据集桃核承气汤脑卒中双向调节分子机制

北柴胡、紫花阔叶柴胡叶绿体全基因组解析及柴胡属药用植物叶绿体基因组比较与系统发育分析

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药学学报 2021年第2期56卷 618-629页

作者：张明英张雨曲李依民高静沈霞杨新杰颜永刚王昌利张岗陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西西安712046

柴胡属(Bupleurum L.)是伞形科(Apiaceae)中具有重要经济价值的药用类群。本研究利用Illumina HiSeq X Ten平台测序获得北柴胡(B.chinense DC.)和紫花阔叶柴胡(B.boissieuanum H.Wolff)的叶绿体全基因组序列,对其进行了组装、注释和特... 详细信息

柴胡属(Bupleurum L.)是伞形科(Apiaceae)中具有重要经济价值的药用类群。本研究利用Illumina HiSeq X Ten平台测序获得北柴胡(B.chinense DC.)和紫花阔叶柴胡(B.boissieuanum H.Wolff)的叶绿体全基因组序列,对其进行了组装、注释和特征分析,并与同属已发表的叶绿体全基因组进行了比较和系统发育分析。北柴胡和紫花阔叶柴胡叶绿体全基因组大小分别为155458、155800 bp,均为由一个大单拷贝区(large single copy,LSC;85343、85804 bp)、一个小单拷贝区(small single copy,SSC;17495、17410 bp)和一对反向重复区(inverted repeat,IRa/IRb;26310、26293 bp)构成的环状四分体结构;两者分别注释得到129个基因,包括84个蛋白编码基因、37个tRNA基因和8个rRNA基因;此外,两者重复序列的类型与分布模式相似,但数量有所差异。比较基因组学分析结果表明,柴胡属植物叶绿体全基因组大小、结构、GC含量及基因组成和排列顺序等在种内、种间均高度保守,IRs区未出现明显扩张或收缩;序列的种间变异高于种内,非编码序列(包括基因间区和内含子)变异高于编码基因序列,LSC和SSC区序列变异高于IRs区;此外,筛选到11条核苷酸多样性较高的种间高变异序列,分别位于LSC和SSC区。系统发育分析结果强烈支持柴胡属为单系,其中,北柴胡同种不同个体聚为一支,并与紫花鸭跖柴胡(B.commelynoideum H.Boissieu)亲缘关系最近,而紫花阔叶柴胡与三岛柴胡(B.falcatum L.)亲缘关系更近。本研究将为柴胡属药用植物的分类鉴定、系统发育及资源开发利用等相关研究提供基础。

关键词：柴胡属叶绿体基因组简单重复序列序列变异系统发育

3种药用植物根际土壤水浸液对远志种子及其幼苗的化感作用

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中国实验方剂学杂志 2020年第23期26卷 161-170页

作者：雷瑞祥杨冰月魏艳妮曹福麟樊一聪伍莎莎张岗顔永刚彭亮胡本祥陕西中医药大学药学院陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西咸阳712046

目的:探究地黄、半夏和菘蓝3种药用植物根际土壤水浸液对于远志种子萌发和幼苗生长的化感作用,筛选出适合与远志进行轮作的倒茬品种,为解决远志的连作障碍问题提供一定的科学依据。方法:采用生物测定方法,研究地黄、半夏和菘蓝3种药用... 详细信息

目的:探究地黄、半夏和菘蓝3种药用植物根际土壤水浸液对于远志种子萌发和幼苗生长的化感作用,筛选出适合与远志进行轮作的倒茬品种,为解决远志的连作障碍问题提供一定的科学依据。方法:采用生物测定方法,研究地黄、半夏和菘蓝3种药用植物根际土壤水浸液在0.3,0.6,0.9 g·mL-1质量浓度下对于远志种子萌发和幼苗生长的影响。结果:地黄、半夏根际土壤水浸液对远志种子最终发芽率、发芽势、发芽指数均基本表现出低促高抑的浓度效应,而菘蓝根际土壤水浸液则具有显著的化感抑制作用;3种根际土壤水浸液对远志幼苗生长指标均表现出显著的化感抑制作用,其中,地黄根际土壤水浸液与其余两种水浸液相比对于远志幼苗的株高和根长的抑制作用最小;0.3 g·mL-1地黄土壤水浸液处理下,远志幼苗的光合色素含量、脯氨酸(Pro)含量、可溶性糖含量最高,可溶性蛋白含量较高,H2O2含量较低;0.9 g·mL-1地黄土壤水浸液处理下,远志幼苗的过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性最高,过氧化氢酶(CAT)活性较低、丙二醛(MDA)含量最低。结论:综合以上实验数据和化感综合效应分析,地黄根际土壤水浸液在一定程度上对于远志种子的萌发具有促进作用,且奠定了幼苗抗逆生化的基础,所以3种药用植物中,地黄更适合与远志进行轮作。

关键词：远志种子萌发根际土壤水浸液化感作用

茉莉酸甲酯诱导下远志幼苗转录组分析及三萜类生物合成途径关键酶基因挖掘

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中草药 2020年第9期51卷 2517-2529页

作者：彭亮颜永刚陈莹沈霞高静李依民张岗张明英胡本祥杨冰月孙静陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西西安712046

目的获得远志Polygala tenuifolia响应茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)处理的转录组学信息,挖掘远志三萜类化合物骨架生物合成的关键酶基因。方法以生长30 d的远志组培苗为材料,分别用无菌水(CK)、50μmol/L MeJA、100μmol/LMeJA处... 详细信息

目的获得远志Polygala tenuifolia响应茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)处理的转录组学信息,挖掘远志三萜类化合物骨架生物合成的关键酶基因。方法以生长30 d的远志组培苗为材料,分别用无菌水(CK)、50μmol/L MeJA、100μmol/LMeJA处理24h,采用Illunima HiseqTM2000150PE进行转录组测序,使用Trinity软件完成Unigene的denovo拼接,基于BLAST实现Unigene的分类、功能注释、代谢通路分析、蛋白功能注释、差异基因分析和筛选等。结果最终获得52.19 Gb数据,通过de novo拼接注释得到Unigene 54426条,平均长度为1604 bp,注释成功率100%。通过对MeJA处理前后基因进行差异分析,共筛选出差异基因3390个,其中有1287个上调,2103个下调,且以100μmol/L MeJA处理的差异基因总数及上调数最高。KEGG富集分析表明,差异基因主要富集于苯丙烷类生物合成、半胱氨酸与蛋氨酸代谢、淀粉蔗糖代谢、光合生物的固碳作用、萜类骨架生物合成等KEGG通路中。找到与远志三萜类骨架生物合成相关的基因59条,其中AACT、HMGS、HMGR、MK、PMK、MPD、DXS、IDI、FPPS、SQS、SE和β-AS受MeJA诱导后表达量上调。结论对MeJA处理后的远志幼苗转录组进行分析,获得远志三萜类骨架生物合成相关的候选基因,MeJA可以诱导其三萜类骨架合成相关基因的表达,为远志的分子生物学研究提供了丰富的数据资源,也为后期开展远志三萜皂苷类化合物次生代谢途径解析奠定了基础。

关键词：远志转录组茉莉酸甲酯三萜类 Unigene