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热反应牛骨香精酶解工艺优化及关键气味化合物鉴定

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食品科学技术学报 2024年第1期42卷 126-142页

作者：王海丽关鑫唐源宋焕禄潘文清龚林陈琬盈北京工商大学食品与健康学院北京100048 湖南省嘉品嘉味生物科技有限公司湖南长沙410100

为研究制备热反应牛骨香精的较佳酶解工艺,以牛骨素为原料,选用复合酶,利用单因素实验和响应面试验考察酶解温度、酶解时间、复合酶加酶量及复合酶加酶比例对酶解液水解度和由酶解液与糖、氨基酸等原料经美拉德反应制备的热反应牛骨香... 详细信息

为研究制备热反应牛骨香精的较佳酶解工艺,以牛骨素为原料,选用复合酶,利用单因素实验和响应面试验考察酶解温度、酶解时间、复合酶加酶量及复合酶加酶比例对酶解液水解度和由酶解液与糖、氨基酸等原料经美拉德反应制备的热反应牛骨香精的感官评分的影响,并利用高效液相色谱法测定游离氨基酸质量比,利用全二维气相色谱-嗅闻-质谱技术分析牛骨素酶解前后制备的热反应牛骨香精关键气味化合物的质量比。结果表明,牛骨素的较佳酶解工艺为酶解温度50℃、酶解时间4 h、加酶量1250 U/g、复合风味蛋白酶与复合蛋白酶的加酶比例为3∶2,在此条件下感官评分为8.17分。与牛骨素相比,酶解液中有15种游离氨基酸的质量比显著增加;使用电子鼻和电子舌测定牛骨素和酶解液的气味轮廓和滋味轮廓,发现酶解液的氮氧化物气味特征增强,酶解液的鲜味、浓厚味、咸味特征更明显。使用固相微萃取结合全二维气相色谱-嗅闻-质谱技术,对牛骨素、酶解液分别制备的热反应牛骨香精的关键气味化合物进行分析,共鉴定出挥发性气味化合物164种,包含27种醛类、30种酮类、12种醇类、16种酸类、7种含硫化合物、10种酯类、18种吡嗪类、10种呋喃类、6种噻唑类、4种噻吩类和24种其他类化合物。通过气相色谱-嗅闻分析,嗅闻到74种气味活性化合物;气味活性值(OAV)大于1的关键气味化合物有22种,牛骨素与酶解液分别制备的热反应牛骨香精中最重要的关键气味化合物均为双(2-甲基-3-呋喃基)二硫醚(OAV值分别为13079和8053);与牛骨素制备的热反应牛骨香精相比,酶解液制备的热反应牛骨香精中出现了(E,E)-2,4-癸二烯醛、2-甲基-3-呋喃硫醇、甲基糠基二硫醚、己酸甲硫醇酯、β-石竹烯5种新的关键气味化合物。研究旨在为热反应牛骨香精工业化生产中的酶解工艺提供理论依据。

关键词：酶解工艺热反应牛骨香精气味活性化合物关键气味化合物全二维气相色谱-嗅闻-质谱

基于网络药理学、分子对接和孟德尔随机化探讨拉莫三嗪抗重度抑郁症的作用机制

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中国临床药理学杂志 2024年第7期40卷 1068-1071页

作者：姜金生陈红英王伟权胡海红陈尧欧阳冬生中南大学湘雅医院临床药理研究所湖南长沙410001 长沙易简生物科技有限公司湖南长沙410001

目的探索拉莫三嗪抗重度抑郁症(MDD)的作用机制。方法收集拉莫三嗪的药物靶点与MDD的治疗靶点信息进行交集靶点基因分析和蛋白质-蛋白质相互作用筛选,通过基因本体论和京都基因与基因组百科全书富集分析确定与拉莫三嗪抗MDD相关的各种... 详细信息

目的探索拉莫三嗪抗重度抑郁症(MDD)的作用机制。方法收集拉莫三嗪的药物靶点与MDD的治疗靶点信息进行交集靶点基因分析和蛋白质-蛋白质相互作用筛选,通过基因本体论和京都基因与基因组百科全书富集分析确定与拉莫三嗪抗MDD相关的各种生物途径,用分子对接技术对筛选的核心靶点进行初步验证,使用OpenGWAS数据库中的γ-氨基丁酸受体相关蛋白样1(GABARAPL1)和MDD的全基因组关联分析数据进行孟德尔随机化进一步验证。结果确定了与拉莫三嗪抗MDD相关的生物途径,包括γ-氨基丁酸(GABA)能突触、尼古丁成瘾、谷氨酸能突触、逆行内源性大麻素信号传导等生物途径。分子对接显示:拉莫三嗪与GABRA1、GABRB2、GABRA6、GABRD、GABRG2、GABRG1、GABRA5、GABRA4、GABRB3和GABRA2受体的结合能均≤-5.8kCal·mol^(-1),其中GABRB3受体与拉莫三嗪的结合能最强,为-9.5kCal·mol^(-1)。GABARAPL1全基因组关联分析数据中,303个单核苷酸多态性与GABARAPL1相关(P<5×10^(-6)),经筛选保留了15个单核苷酸多态性用于孟德尔随机化分析,分析结果表明,GABA受体可能是MDD的重要治疗靶点。结论拉莫三嗪可能通过作用于GABA受体产生抗MDD的作用,为进一步的拉莫三嗪抗MDD临床应用提供了研究基础。

关键词：拉莫三嗪重度抑郁症网络药理学分子对接孟德尔随机化

黑水虻成虫的触角感器超微结构及其对气味物质的嗅觉反应

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昆虫学报 2024年第6期67卷 806-815页

作者：王鑫桐周琼田苏周凯灵杨自强湖南师范大学生命科学学院长沙410081 宁乡丰裕生物科技有限公司长沙410600

【目的】明确黑水虻Hermetia illucens成虫触角感器的超微结构,探究其雌雄成虫对气味物质的嗅觉反应。【方法】利用透射电子显微镜观察黑水虻成虫触角感器的超微结构,再分别采用触角电位测量系统和Y型嗅觉仪测试雌雄成虫对异戊酸、乳酸... 详细信息

【目的】明确黑水虻Hermetia illucens成虫触角感器的超微结构,探究其雌雄成虫对气味物质的嗅觉反应。【方法】利用透射电子显微镜观察黑水虻成虫触角感器的超微结构,再分别采用触角电位测量系统和Y型嗅觉仪测试雌雄成虫对异戊酸、乳酸、乙酸乙酯和壬醛4种气味物质的触角电位(electroantennogram, EAG)反应和行为响应。【结果】黑水虻成虫触角上的毛形感器表皮壁厚,壁上无孔,内部感器淋巴液中有神经树突;腔锥形感器腔内有多分支的锥形突起,锥形突起的表皮壁薄,壁上有微孔,内部感器淋巴液中有神经树突。EAG测试结果表明,所测试的4种气味物质在各浓度下都能引起雌雄黑水虻成虫明显的EAG反应,不同气味物质引起的反应随浓度变化呈现不同趋势。其中,雌雄成虫对异戊酸的EAG反应均最大,二者的EAG反应相对值均随浓度升高而升高;雌成虫对乳酸的EAG反应随浓度升高先升高后降低,雄成虫对乳酸的EAG反应趋势则相反;对于乙酸乙酯和壬醛两种气味物质的EAG反应,随着测试浓度的升高,黑水虻雌成虫的EAG反应呈现出先降低后升高的趋势,而雄成虫的EAG反应则各不相同且无规律。行为选择测试结果表明,0.001-0.1μg/μL乳酸对黑水虻雌成虫有显著的吸引作用,0.1μg/μL异戊酸对雄成虫有显著的吸引作用。【结论】黑水虻成虫触角鞭节上的毛形感器可能为温湿度感器,腔锥形感器可能为嗅觉感器。黑水虻雌雄成虫的触角均对高浓度的异戊酸比较敏感;低浓度的乳酸、异戊酸对黑水虻成虫具有一定的引诱作用,有作为引诱剂成分的潜力。

关键词：黑水虻透射电子显微镜嗅觉感器触角电位行为选择嗅觉反应

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P2X受体调节剂的作用机制与最新研究进展

生命科学 2024年第2期36卷 159-167页

作者：张萌卢向阳田云杨晓娜湖南农业大学生物科学技术学院长沙410128 湖南绿蔓生物科技股份有限公司长沙410013 湖南甜蔓生物科技有限公司永州425900

ATP激活的配体门控阳离子通道P2X受体参与多种生理病理功能,是一类重要的新药靶标。目前发现的多种靶向P2X受体的小分子药物多数因结果未达到预期或存在明显的副作用而止步于临床研究。明确的调节机制可为靶向P2X受体的理性药物设计提... 详细信息

ATP激活的配体门控阳离子通道P2X受体参与多种生理病理功能,是一类重要的新药靶标。目前发现的多种靶向P2X受体的小分子药物多数因结果未达到预期或存在明显的副作用而止步于临床研究。明确的调节机制可为靶向P2X受体的理性药物设计提供新的方向,从而提高药物发现概率和有效性。本文就P2X受体调节剂的作用机制进行综述,并对靶向P2X受体的小分子药物最新研究进展进行总结。

关键词：离子通道 P2X受体变构调节

非洲猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测方法的建立

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动物医学进展 2024年第3期45卷 42-47页

作者：林彦星翁巧玉阮周曦吴江黄超华金业陈鹏张彩虹杨俊兴曹琛福史卫军刘建利花群义深圳海关动植物检验检疫技术中心广东深圳518045 湖南普简生物科技有限公司湖南长沙410013 深圳市心月生物科技有限公司广东深圳518000

为建立一种非洲猪瘟病毒抗体阻断ELISA检测方法,以原核表达ASFV p72重组蛋白作为包被抗原,HRP标记的p72特异性单克隆抗体作为酶标抗体,建立了非洲猪瘟病毒抗体阻断酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法。结果显示,该方法中血清以1∶10稀释,... 详细信息

为建立一种非洲猪瘟病毒抗体阻断ELISA检测方法,以原核表达ASFV p72重组蛋白作为包被抗原,HRP标记的p72特异性单克隆抗体作为酶标抗体,建立了非洲猪瘟病毒抗体阻断酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法。结果显示,该方法中血清以1∶10稀释,酶标单抗以1∶6000稀释,临界值为50.12%。该方法特异性强,与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)阳性血清无交叉反应。对强阳性血清的最低稀释度为1∶640,弱阳性血清的最低稀释度为1∶10,具有较高的敏感性;重复性好,批内和批间变异系数均小于5%。应用所建立的方法与商品化同类检测试剂盒对174份血清进行检测,ASFV抗体阳性符合率为100%,阴性符合率为96.75%,总符合率为97.28%。建立的阻断ELISA方法可用于非洲猪瘟病毒抗体检测。

关键词：非洲猪瘟病毒 p72蛋白单克隆抗体阻断酶联免疫吸附试验

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金线莲发酵液的抗氧化和美白功效研究

日用化学工业（中英文） 2024年第6期54卷 656-662页

作者：陈来成陈冬杰邹洁丁红叶宇鹏杨占红广州麻尚会生物科技有限公司广东广州510800 福建靖芝莲生物科技有限公司福建漳州363600 中南大学化学化工学院湖南长沙410083

为开发金线莲发酵提取物在化妆品领域的应用,筛选合适的乳酸菌与酵母菌,对金线莲水提液与水提后滤渣酶解液分别进行发酵,结果表明:在采用Gb-12、Mls-34与CC-1三种菌株进行不同的单菌、复合菌发酵方式中,金线莲水提液经Mls-34与CC-1联合... 详细信息

为开发金线莲发酵提取物在化妆品领域的应用,筛选合适的乳酸菌与酵母菌,对金线莲水提液与水提后滤渣酶解液分别进行发酵,结果表明:在采用Gb-12、Mls-34与CC-1三种菌株进行不同的单菌、复合菌发酵方式中,金线莲水提液经Mls-34与CC-1联合发酵后,其多酚含量、抗氧化活性与美白活性提升最高。金线莲酶解液经CC-1单菌发酵后,其多酚含量提升最高,DPPH自由基与ABTS自由基清除率分别提高了56.30%和85.58%,而羟自由基清除率和总还原力有所下降,而金线莲酶解液经Mls-34与CC-1联合发酵后,其美白活性提升最高。

关键词：金线莲发酵液化妆品抗氧化美白

“饲料禁抗”后规模猪场猪传染性胸膜肺炎的血清学调查和分析

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中国兽医杂志 2024年第10期60卷 48-54页

作者：高梦丽廖荣莉李贺柳泰卿任科唐红剑郑金余兴龙湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128 湖南兀邦生物科技有限公司湖南长沙410128

为了解“饲料禁抗”后规模猪场中猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)的流行情况,本试验于2021―2023年在16个未免疫疫苗的APP阳性规模猪场采集不同生产阶段猪群的2286份血清样本,应用间接ELISA进行抗体检测。结果显示:(1)16个规模猪场血清... 详细信息

为了解“饲料禁抗”后规模猪场中猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)的流行情况,本试验于2021―2023年在16个未免疫疫苗的APP阳性规模猪场采集不同生产阶段猪群的2286份血清样本,应用间接ELISA进行抗体检测。结果显示:(1)16个规模猪场血清样本的APP抗体总阳性率为61.2%(1399/2286),高于文献报道的“饲料禁抗”前猪群阳性率(20%~53%);(2)在不同生产阶段的猪群中,母猪APP抗体阳性率最高(92.4%,545/590),其次为哺乳期仔猪(87.6%,227/259),而后从高到低依次是育肥后期、保育期和育肥中期猪群,APP抗体阳性率分别为63.6%(361/568)、43.7%(129/295)和35.3%(122/346),育肥早期猪群的APP抗体阳性率最低,为6.6%(15/228);(3)初产母猪的APP抗体阳性率(73.8%)明显低于其他胎次母猪(96.3%~97.4%);(4)猪只的APP母源抗体随着日龄的增长而下降,基本在90日龄时降到最低,此后猪群因APP感染而导致APP抗体水平和阳性率均开始缓慢上升,到肥猪出栏前仍一直上升。结果表明,饲养密度增加和推迟肥猪出栏是导致规模猪场APP感染大幅上升的重要因素。

关键词：猪传染性胸膜肺炎饲料禁抗规模猪场血清学调查

紫花地丁对热应激下肉鸡生长性能、肉品质和肠道菌群的改善作用

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畜牧兽医学报 2024年第6期55卷 2761-2774页

作者：王吉周馨妍郭芳瑞徐秋容武东怡毛妍袁志航易金娥文利新邬静湖南农业大学动物医学院畜禽保健湖南省工程研究中心长沙410128 长沙绿叶生物科技有限公司长沙410100

旨在评估紫花地丁(Viola yedoensis Makino,VYM)对热应激下AA肉鸡生长性能、肉品质和肠道菌群的改善作用。将60只1日龄雄性AA肉鸡随机分为6个组,分别为:对照组(NT组),高剂量紫花地丁组(NT+VYM-H组);热应激组(HS组),低、中、高剂量紫花... 详细信息

旨在评估紫花地丁(Viola yedoensis Makino,VYM)对热应激下AA肉鸡生长性能、肉品质和肠道菌群的改善作用。将60只1日龄雄性AA肉鸡随机分为6个组,分别为:对照组(NT组),高剂量紫花地丁组(NT+VYM-H组);热应激组(HS组),低、中、高剂量紫花地丁热应激组(HS+VYM-L、HS+VYM-M和HS+VYM-H组,紫花地丁添加量分别为0.5%、1.5%、4.5%),2~42 d,热应激组肉鸡暴露于高温中,紫花地丁组全程饲喂添加相应剂量紫花地丁的日粮。所有肉鸡均在42日龄时屠宰,对生长性能、血清生化指标、肉品质、十二指肠形态、酶活性相关基因表达水平以及肠道菌群组成等进行检测。结果显示,在热应激条件下,与热应激组相比,1.5%紫花地丁组肉鸡29~42 d平均日增重显著升高,料重比显著降低(P<0.05);热应激条件下,添加紫花地丁显著降低肉鸡35 d血清HSP70水平(P<0.05),添加0.5%紫花地丁显著提高十二指肠脂肪酶活性(P<0.05),与肉鸡胸肌生肌因子相关的Pax3、Pax7、Myog、Myod、Myf5 mRNA表达显著上调(P<0.05),与十二指肠消化吸收功能相关的Pparα、Fatp1、B^(0)at1、Pept1、Cat1、Eaat3 mRNA表达显著上调(P<0.05);在热应激条件下,添加1.5%的紫花地丁显著降低了肉鸡的肌肉剪切力、肉色(P<0.05);盲肠中,紫花地丁显著提高了肠道菌群的丰富度和多样性(P<0.05),在门水平上,增加了拟杆菌门的丰度,且与肌肉pH(45 min)呈显著正相关;属水平上,降低了Subdoligranulum属丰度,且与十二指肠淀粉酶活性呈显著负相关。综上,在本试验条件下,日粮中补充1.5%和4.5%紫花地丁可有效减轻热应激导致的肉鸡生长性能和肉品质的降低,并能够调节其肠道菌群的平衡。本研究为紫花地丁在肉鸡生产中的应用提供了科学依据,对家禽养殖临床中热应激的防治具有参考意义。

关键词：紫花地丁热应激肉鸡生长性能肉品质肠道菌群

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检测非洲猪瘟病毒抗原的双抗体夹心ELISA方法的建立

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中国兽医学报 2024年第1期44卷 7-11页

作者：林彦星翁巧玉吴江黄超华史卫军金业陈鹏张彩虹杨俊兴阮周曦曹琛福陈兵曾少灵花群义深圳海关动植物检验检疫技术中心广东深圳518045 湖南普简生物科技有限公司湖南长沙410013 深圳市心月生物科技有限公司广东深圳518000

利用非洲猪瘟病毒(ASFV)p72蛋白不同抗原表位的2株单克隆抗体,1株作为捕获抗体,另1株用辣根过氧化物酶(HRP)标记后作为检测抗体,采用方阵法对ELISA反应条件进行优化,建立了检测ASFV抗原的双抗体夹心ELISA方法。结果显示,该方法中捕获抗... 详细信息

利用非洲猪瘟病毒(ASFV)p72蛋白不同抗原表位的2株单克隆抗体,1株作为捕获抗体,另1株用辣根过氧化物酶(HRP)标记后作为检测抗体,采用方阵法对ELISA反应条件进行优化,建立了检测ASFV抗原的双抗体夹心ELISA方法。结果显示,该方法中捕获抗体包被质量浓度为1.25 mg/L,酶标单克隆抗体的最适稀释度为1∶4000。通过试验确定该方法的临界值为0.299,当样品D_(450)值≥0.3,且P/N大于2时,判定为阳性。该双单抗夹心ELISA方法可特异性检测ASFV抗原,其他抗原检测结果均为阴性,特异性强;重复性好,批内和批间变异系数(CV)均小于8%。应用本研究建立的方法与荧光PCR方法同时对225份临床样品进行检测,总符合率为96.89%。结果表明,本研究建立的双抗体夹心ELISA方法可用于ASFV抗原的大量样品检测,为ASF防控提供了技术支持。

关键词： ASFV 单克隆抗体双抗体夹心ELISA