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基于干性指数模型对肉瘤预后、免疫浸润和铁死亡调控的分析

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4151-4160页

作者：魏婧娴孟莲孙皓张田田刘春霞石河子大学医学院病理学系/石河子大学第一附属医院病理科新疆维吾尔自治区石河子市832000 广州医科大学附属第二医院病理科广东省广州市510260

背景:干性指数可能与肉瘤预后、免疫浸润有关,但具体调控机制与特征基因尚不清楚。目的:利用基因干性指数模型探究肉瘤干细胞与患者预后和免疫浸润的关系,并识别肉瘤干细胞铁死亡特征基因。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)中获取肉瘤RNA测... 详细信息

背景:干性指数可能与肉瘤预后、免疫浸润有关,但具体调控机制与特征基因尚不清楚。目的:利用基因干性指数模型探究肉瘤干细胞与患者预后和免疫浸润的关系,并识别肉瘤干细胞铁死亡特征基因。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)中获取肉瘤RNA测序数据及相关临床信息。利用肉瘤干性指数,对获取的肉瘤RNA测序数据进行分组。利用生存数据进行组间预后情况分析,获取组间差异表达基因后进行通路富集和免疫浸润分析。获得铁死亡相关差异基因,构建蛋白互作网络并进行预后相关性分析。培养横纹肌肉瘤细胞系,分为贴壁细胞组和干细胞组,贴壁细胞组不予任何干预,干细胞组通过无血清培养处理以诱导横纹肌肉瘤干细胞富集,qRT-PCR验证干细胞相关标志物、铁死亡相关差异基因以及铁死亡相关标志物的mRNA表达。结果与结论:①以干性指数中位数为界将患者分成高干性指数组和低干性指数组,通过患病风险预测显示高干性指数组患者的无进展生存期低于低干性指数组,提示预后不佳;②GO、KEGG分析显示肉瘤高、低干性指数组差异表达基因参与不同的细胞通路;高干性指数组和低干性指数组之间免疫浸润存在差异;差异基因中有23个铁死亡相关基因,其中9个可构成相关性较强的蛋白互作网络,其中IDO1、IFNG、AQP5高表达的肉瘤患者预后更好,CA9高表达的肉瘤患者预后不佳;③qRT-PCR结果显示,与贴壁细胞组相比,干细胞组干细胞相关标志物NANOG、SOX2和OCT4 mRNA表达显著升高(P<0.05);与贴壁细胞组相比,干细胞组铁死亡相关标志物SLC7A11的mRNA表达显著降低(P<0.05),ACSL4、GPX4、FTH1和COX2的mRNA表达显著升高(P<0.05);与贴壁细胞组相比,干细胞组差异基因CA9的mRNA表达显著降低,IDO1、IFNG、AQP5的mRNA表达显著升高(P<0.05)。经上述生物信息学分析与实验验证,干细胞与肉瘤生存、铁死亡过程密切相关,CA9、IDO1、IFNG、AQP5在肉瘤干细胞中异常表达,可能成为肉瘤诊断标志物和治疗新靶点。

关键词：肉瘤干细胞干性指数铁死亡生存预后免疫浸润

华支睾吸虫ESP刺激胆管上皮细胞产生IL-17A促进肝纤维化的机制研究

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中国病原生物学杂志 2025年第2期 190-194+200页

作者：刘桐彤朱浩王楠王新月胡凤爱曹璋高洪莲刘乃国柏雪莲滨州医学院附属医院医学研究中心滨州医学院附属医院病理科

目的探讨华支睾吸虫感染刺激胆管上皮细胞产生IL-17A激活HSC导致肝纤维化的机制。方法从流行区获取华支睾吸虫感染的患者血清，ELISA法检测IL-17A的表达。人工消化麦穗鱼，分离华支睾吸虫囊蚴，分别灌胃感染新西兰大白兔和BALB/c小鼠... 详细信息

目的探讨华支睾吸虫感染刺激胆管上皮细胞产生IL-17A激活HSC导致肝纤维化的机制。方法从流行区获取华支睾吸虫感染的患者血清，ELISA法检测IL-17A的表达。人工消化麦穗鱼，分离华支睾吸虫囊蚴，分别灌胃感染新西兰大白兔和BALB/c小鼠，无菌分离小鼠肝脏和血清。ELISA法、Western blot和免疫组化法检测小鼠血清和肝脏中IL-17A的表达；ESP刺激人胆管癌细胞RBE,分别应用qRT-PCR和Western blot检测RBE细胞IL-17A的表达。收集RBE细胞培养上清加入LX-2细胞培养体系，qRT-PCR和Western blot检测LX-2细胞的α-SMA和Collagen-I的表达。结果华支睾吸虫感染患者血清IL-17A水平显著高于健康体检者(t=6.536,P<0.01)。被感染的小鼠血清和肝脏中IL-17A的表达水平显著高于正常对照组(t=12.98,P<0.01;t=4.155,P<0.05)。免疫组化结果显示，感染小鼠的肝胆管上皮中IL-17A表达量增多(t=10.80,P<0.01)。ESP刺激后，RBE细胞的IL-17A表达水平显著升高(均P<0.01)。RBE细胞培养上清加入LX-2细胞培养体系后，α-SMA和Collagen-I的表达水平显著高于对照组(均P<0.01)。结论华支睾吸虫可以刺激胆管上皮细胞产生IL-17A,进一步促进炎症并激活HSC产生胶原沉积，从而促进肝纤维化的进展。

关键词：华支睾吸虫分泌代谢产物白介素17A 肝纤维化

Wnt/β-catenin信号通路在miR-21介导的非小细胞肺癌顺铂耐药性中的作用

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西安交通大学学报(医学版) 2025年

作者：郑传会林莉汪霞王乃刚南京医科大学第二附属医院病理科山东省立医院菏泽医院重症医学科

目的探究microRNA-21-5p（miR-21）在非小细胞肺癌顺铂（cisplatin，CDDP）耐药性中的作用和机制。方法通过RT-qPCR检测非小细胞肺癌患者癌组织和癌旁组织中miR-21的表达。用非小细胞肺癌细胞系H1299和H1975构建非小细胞肺癌CDDP耐药... 详细信息

目的探究microRNA-21-5p（miR-21）在非小细胞肺癌顺铂（cisplatin，CDDP）耐药性中的作用和机制。方法通过RT-qPCR检测非小细胞肺癌患者癌组织和癌旁组织中miR-21的表达。用非小细胞肺癌细胞系H1299和H1975构建非小细胞肺癌CDDP耐药细胞H1299/CR和H1975/CR，CCK-8检测各组细胞在CDDP处理时的细胞活性，流式细胞术分析细胞凋亡。双荧光素酶检测H1299细胞中miR-21与PTEN的作用关系，RT-qPCR检测miR-21表达，Western blotting检测PTEN和PTEN下游Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达。用H1299和H1299/CR构建荷瘤裸鼠模型，验证miR-21对非小细胞肺癌CDDP治疗敏感性的影响。结果非小细胞肺癌患者癌组织miR-21的表达显著高于癌旁组织（P<0.001）。与H1299和H1975细胞相比，耐药细胞H1299/CR和H1975/CR中miR-21表达显著升高（P<0.05）。H1299/CR和H1975/CR细胞经过inhibitor转染后用不同浓度的CDDP处理，CCK-8检测显示，CDDP≥12 μmol/L时，与inhibitor NC组相比，miR-21 inhibitor组细胞活性显著降低（P<0.001）；流式细胞仪检测显示，与未处理组相比，CDDP组和miR-21 inhibitor组细胞凋亡率无显著变化，CDDP+miR-21 inhibitor组细胞凋亡率显著升高（P<0.001）。H1299和H1975细胞转染miR-21模拟分子（miR-21 mimic）后，用不同浓度的CDDP处理细胞时，CDDP≥12 μmol/L，与miR-21 mimic组相比，mimic-NC组的细胞活性显著降低（P<0.05）。Target scan网站预测显示miR-21与PTEN的3′-UTR区域结合。双荧光素酶检测表明miR-21和PTEN的蛋白表达存在靶向调控关系。PTEN过表达（PTEN-OE）与miR-21 mimic共转染H1299细胞，Western blotting检测显示，与mimic-NC组相比，miR-21 mimic组PTEN表达降低，p-β-catenin（Ser552 、Ser675）和β-catenin表达升高；与miR-21 mimic组相比，miR-21 mimic+H1299/PTEN组PTEN表达升高，p-β-catenin（Ser552、Ser675）和β-catenin水平降低。流式细胞术检测结果显示，mimic-NC组细胞经过CDDP处理后细胞凋亡率显著升高（P<0.05）。使用H1299构建的荷瘤裸鼠模型，对模型鼠进行miR-21 mimic和CDDP注射治疗，计算不同时间肿瘤大小，结果显示，在治疗5 d后，对照+CDDP组肿瘤生长缓慢，各时间点肿瘤小于对照组；miR-21+CDDP组各时间点肿瘤大于对照+CDDP组。TUNEL免疫荧光检测显示，对照+CDDP组肿瘤组织细胞凋亡较对照组增加；miR-21+CDDP组肿瘤组织细胞凋亡较对照+CDDP组降低。在H1299/CR构建的荷瘤裸鼠模型中，治疗5 d后，H1299/CR/CDDP组的肿瘤小于H1299/C组，H1299/CR/CDDP +inhibitor组肿瘤小于H1299/CR/CDDP组；TUNEL免疫荧光检测显示，与H1299/CR组相比，H1299/CR/CDDP组肿瘤组织细胞凋亡增加，与H1299/CR/CDDP组相比，H1299/CR/CDDP +inhibitor组肿瘤组织细胞凋亡进一步增加。结论在非小细胞肺癌中，miR-21过表达抑制PTEN表达，激活Wnt/β-catenin通路参与非小细胞肺癌CDDP耐药性的发生，抑制肿瘤细胞miR-21表达将增强肿瘤细胞对CDDP的敏感性。

关键词： miR-21 非小细胞肺癌顺铂顺铂耐药性 PTEN Wnt/β-catenin通路

高温需求因子A1在甲状腺髓样癌组织中的表达及其临床意义

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现代肿瘤医学 2025年第1期 38-44页

作者：眭怡群夏维苏州大学附属第二医院病理科

目的:评估高温需求因子A1(high-temperature requirement factor A1,HTRA1)在甲状腺髓样癌(medullarythyroid carcinoma, MTC)组织中的表达，并探讨其与临床病理特征、预后及肿瘤免疫的关系。方法:采用免疫组化法检测26例MTC组织中HTRA... 详细信息

目的:评估高温需求因子A1(high-temperature requirement factor A1,HTRA1)在甲状腺髓样癌(medullarythyroid carcinoma, MTC)组织中的表达，并探讨其与临床病理特征、预后及肿瘤免疫的关系。方法:采用免疫组化法检测26例MTC组织中HTRA1蛋白的表达。分析HTRA1蛋白表达与临床病理特征及预后的相关性。通过生物信息学揭示HTRA1表达与肿瘤免疫的相关性。结果:HTRA1蛋白在MTC组织中主要定位于细胞浆，而在正常甲状腺组织中主要定位于细胞核。与正常甲状腺组织相比，MTC组织中HTRA1蛋白表达上调。临床病理分析显示，HTRA1蛋白表达与甲状腺被膜外侵犯、桥本氏甲状腺炎及患者的无复发生存期有关。HTRA1蛋白、术前血清降钙素及癌胚抗原的联合检测对甲状腺被膜外侵犯、肿瘤大小、肿瘤T分期及患者无复发生存期的预测价值较高。免疫浸润分析显示，HTRA1表达主要与免疫抑制细胞有关。肿瘤免疫功能障碍和排斥(tumor immune dysfunction and exclusion, TIDE)算法揭示，MTC中HTRA1表达与TIDE评分、免疫功能障碍评分、免疫排斥评分和癌相关成纤维细胞水平呈正相关；与微卫星不稳定性呈负相关。基因集富集分析结果显示，MTC中HTRA1表达主要与细胞外基质及其相关信号通路有关。结论:HTRA1可能成为MTC新的治疗靶点。HTRA1与肿瘤免疫功能的关联可能有助于MTC的免疫治疗。

关键词： HTRA1 甲状腺髓样癌肿瘤免疫细胞外基质

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甲状腺内胸腺癌1例

临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2025年第01期 87-90页

作者：赖小龙许贞菊吴策王小雅周学燕邱杰青岛大学附属医院耳鼻咽喉头颈外科青岛大学附属医院病理科

甲状腺内胸腺癌(intrathyroid thymic carcinoma, ITTC)是一种罕见的甲状腺肿瘤，缺乏典型的临床表现及影像学特征，术前诊断较为困难，根治性手术治疗是其首选的治疗方式，术后是否辅以放化疗，尚无明确结论。本文报道1例ITTC患者，分... 详细信息

甲状腺内胸腺癌(intrathyroid thymic carcinoma, ITTC)是一种罕见的甲状腺肿瘤，缺乏典型的临床表现及影像学特征，术前诊断较为困难，根治性手术治疗是其首选的治疗方式，术后是否辅以放化疗，尚无明确结论。本文报道1例ITTC患者，分析该病例临床资料并结合相关文献，探讨ITTC的临床表现、诊疗及预后。

关键词：甲状腺内胸腺癌甲状腺显示胸腺样分化癌甲状腺

新型超声快速处理活检标本保存不同年限对DNA质量的影响

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中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2655-2660页

作者：石晨曦朱卫东李三恩李秀明师逢丁亚云苏州大学附属第一医院病理科江苏省苏州市215000 苏州市立医院本部皮肤科江苏省苏州市215000

背景:新型超声组织处理技术越来越多地被用来进行分子生物学分析,研究新型超声处理不同存储年限组织DNA的质量,对进一步分子检测的标本质控具有重要意义。目的:探讨新型超声处理活检标本存储不同年限对DNA质量的影响,以期为分子检测探... 详细信息

背景:新型超声组织处理技术越来越多地被用来进行分子生物学分析,研究新型超声处理不同存储年限组织DNA的质量,对进一步分子检测的标本质控具有重要意义。目的:探讨新型超声处理活检标本存储不同年限对DNA质量的影响,以期为分子检测探索最佳的标本存储时间。方法:收集40例乳腺穿刺小活检组织,采用超声技术制作石蜡标本,按照存储年限分为4组:3-5年组及>5年组,每组10例,对石蜡标本进行切片,每张切片厚3μm,切片10-15张,提取DNA后通过Nanophotometer N60超微量分光光度计和Qubit 4.0荧光计检测DNA的质量浓度,记录A_(260)/A_(280)比值判定DNA的纯度,利用全自动毛细管电泳核酸分析仪(Qsep 100)检测DNA片段完整性,以评估DNA片段的质量。结果与结论:4组样本A_(260)/A_(280)均值在1.8-2.0之间,达到纯度要求,无明显差异。4组样本的DNA质量浓度(Qubit浓度)均值分别为30.39,14.33,2.52,1.95 ng/μL;DNA的平均N/Q比值分别为6.48,14.18,24.56,29.86;DNA质量数均值分别为5.64,1.76,1.24,0.80;大片段占比均值分别为56.08%,17.72%,12.68%,7.90%。PCR检测内控基因Ct均值分别为15.32,17.09,18.39,21.24。与<1年组相比,其余3组DNA浓度显著降低,N/Q比值显著增加,DNA质量数和大片段占比均值显著降低,Ct值升高,差异有显著性意义(P<0.05)。实验结果表明,对于新型超声处理活检标本,应优先选择存储<1年的样本进行日常分子检测,储存3年内的样本可满足二代测序等检测要求,5年内样本仅可尝试进行PCR等检测,存储超过5年的样本不建议进行后续分子检测。

关键词：超声处理存储年限 DNA质量片段完整性降解程度二代测序

乳腺癌组织内环氧化酶-2、人表皮生长因子受体2表达情况及其临床意义

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大医生 2025年第1期10卷 19-21页

作者：王军马洁王文超仪征市人民医院病理科江苏扬州211400

目的探讨乳腺癌组织内环氧化酶-2(COX-2)、人表皮生长因子受体2(c-erbB-2)的表达情况及临床意义,为临床提供参考。方法选取2022年3月至2024年3月仪征市人民医院收治的50例乳腺癌患者为观察组,另选取同期于仪征市人民医院进行体检的40... 详细信息

目的探讨乳腺癌组织内环氧化酶-2(COX-2)、人表皮生长因子受体2(c-erbB-2)的表达情况及临床意义,为临床提供参考。方法选取2022年3月至2024年3月仪征市人民医院收治的50例乳腺癌患者为观察组,另选取同期于仪征市人民医院进行体检的40例健康体检者为对照组,进行回顾性分析。比较观察组乳腺癌组织及对照组正常乳腺组织中COX-2、c-erbB-2的表达情况;比较观察组不同病理特征患者COX-2、c-erbB-2的表达情况。结果观察组研究对象COX-2、c-erbB-2阳性率均高于对照组(均P<0.05)。Ⅲ~Ⅳ期的观察组患者乳腺癌组织中COX-2阳性率高于Ⅰ~Ⅱ期的观察组患者,低分化的观察组患者乳腺癌组织中COX-2阳性率高于中高分化的观察组患者,有淋巴结转移的观察组患者乳腺癌组织中COX-2、c-erbB-2阳性率高于无淋巴结转移患者(均P<0.05)。结论 COX-2、c-erbB-2的表达情况与乳腺癌的发生、发展存在一定联系,临床应给予监测。

关键词：乳腺癌环氧化酶人表皮生长因子受体2 病理特征

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丹参酮ⅡA对冷冻保存小鼠卵巢的保护机制

中国组织工程研究 2025年

作者：吴小绸王慧颖王婕张彩凤侯雁云金波北京中医药大学深圳医院(龙岗)妇科北京中医药大学深圳医院(龙岗)病理科

背景：卵巢组织玻璃化冻存是保存生育力的重要方法之一。丹参酮ⅡA具有多种药理活性，包括抗氧化、抑制炎症反应、减少凋亡等，但其作为卵巢组织玻璃化冷冻保护添加剂的作用尚不清楚。目的：探讨丹参酮ⅡA对小鼠卵巢组织冷冻保存的保护... 详细信息

背景：卵巢组织玻璃化冻存是保存生育力的重要方法之一。丹参酮ⅡA具有多种药理活性，包括抗氧化、抑制炎症反应、减少凋亡等，但其作为卵巢组织玻璃化冷冻保护添加剂的作用尚不清楚。目的：探讨丹参酮ⅡA对小鼠卵巢组织冷冻保存的保护作用。方法：获取25只6周龄雌性KM小鼠的卵巢组织，随机分为5组，每组10个卵巢：新鲜组不进行冷冻保存，冷冻对照组使用玻璃化冷冻保护剂，0.5,2.5,5μmol/L丹参酮ⅡA组分别使用含0.5,2.5,5μmol/L丹参酮ⅡA的玻璃化冷冻保护剂，置于液氮中冷冻保存。保存3 d后取出冻存管解冻，采用苏木精-伊红染色观察各组卵巢组织及卵泡形态，分析卵泡形态正常率及存活率；通过酶联免疫法检测卵巢内超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、丙二醛、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素17水平；采用RT-qPCR和Western blot检测小鼠卵巢内核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid derived 2-like 2,Nrf2)和血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)的m RNA及蛋白表达。结果与结论：(1)与新鲜组比较，冷冻对照组卵巢内各级卵泡形态异常、卵泡存活率下降(P <0.05)，超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性下降(P <0.05)，丙二醛、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素17水平均升高(P <0.05),Nrf2、HO-1的mRNA及蛋白表达均下降(P <0.05)；(2)与冷冻对照组比较，不同浓度丹参酮ⅡA均可改善卵巢内各级卵泡形态、提升卵泡存活率，提升超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性，降低丙二醛、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素17水平，提升Nrf2、HO-1的mRNA及蛋白表达，并且呈现浓度依赖性，以5μmol/L丹参酮ⅡA的作用最显著；(3)结果表明，丹参酮ⅡA可能通过介导Nrf2/HO-1信号通路降低小鼠卵巢组织的氧化应激水平和炎症反应，减轻小鼠卵巢玻璃化冷冻保存而出现的生殖损伤。

关键词：丹参酮ⅡA 小鼠卵巢冷冻保存氧化应激核因子E2相关因子2(Nrf2) 血红素加氧酶1(HO-1) 工程化组织构建

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富血小板血浆及水凝胶治疗脊髓损伤

中国组织工程研究 2025年第10期29卷 2189-2200页

作者：赵文琪于海驰宋艺儒袁天阳刘钦毅吉林大学白求恩第二临床医学院吉林省长春市130012 吉林大学第二医院吉林省长春市130041

背景:大量文献报道了富血小板血浆、水凝胶治疗脊髓损伤的作用及其机制,但较少文章归纳总结它们治疗脊髓损伤的策略。目的:归纳总结脊髓损伤的病理进程,富血小板血浆和水凝胶单独及联合应用修复脊髓损伤的策略。方法:应用计算机检索Pub ... 详细信息

背景:大量文献报道了富血小板血浆、水凝胶治疗脊髓损伤的作用及其机制,但较少文章归纳总结它们治疗脊髓损伤的策略。目的:归纳总结脊髓损伤的病理进程,富血小板血浆和水凝胶单独及联合应用修复脊髓损伤的策略。方法:应用计算机检索Pub Med和中国知网数据库建库至2024年3月之前发表的文献,中文检索词为“脊髓损伤,富血小板血浆,水凝胶”,英文检索词为“spinal cord injury,spinal cord,Platelet-rich plasma,hydrogel,angiogenesis,neuralgia,combination therapy”,按照纳入和排除标准对文献进行筛选,最终纳入128篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)富血小板血浆的分类复杂多样,在脊髓损伤的修复性治疗应用中的效果也是各有不同,但都表现出一定的积极的效果,即具有一定的促进轴突再生、刺激血管生成、治疗神经性疼痛等作用;(2)富血小板血浆的作用主要得益于其所含的生长因子等成分;(3)水凝胶的种类也很多,在脊髓损伤的修复性治疗中主要起到填充、模拟细胞外基质、搭载药物与生物产品、作为支架搭载细胞等作用;(4)与单一的治疗方式相比,富血小板血浆和水凝胶联合治疗可更有效地促进神经再生和脊髓功能的恢复。

关键词：脊髓损伤原发性损伤继发性损伤富血小板血浆水凝胶血管再生轴突再生神经疼痛联合治疗