丹参酮ⅡA对冷冻保存小鼠卵巢的保护机制

作     者：吴小绸 王慧颖 王婕 张彩凤 侯雁云 金波 

作者机构：北京中医药大学深圳医院(龙岗)妇科 北京中医药大学深圳医院(龙岗)病理科 

出 版 物：《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2025年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：深圳市“医疗卫生三名工程”项目资助(SZZYSM202311019),项目负责人:王慧颖 深圳市龙岗区医疗卫生技术攻关项目(LGKCYLWS2023002),项目负责人:王慧颖 深圳市龙岗区科技创新局医疗卫生科技计划项目(LGKCYLWS2021000019),项目负责人:王慧颖 育龙计划-三龙人才项目(2023-BUCMSZYLRC13),项目负责人:吴小绸 山东银丰生命科学研究项目资助(KJKHX2023001),项目负责人:王慧颖 

主　　题：丹参酮ⅡA 小鼠卵巢 冷冻保存 氧化应激 核因子E2相关因子2(Nrf2) 血红素加氧酶1(HO-1) 工程化组织构建 

摘      要：背景：卵巢组织玻璃化冻存是保存生育力的重要方法之一。丹参酮ⅡA具有多种药理活性，包括抗氧化、抑制炎症反应、减少凋亡等，但其作为卵巢组织玻璃化冷冻保护添加剂的作用尚不清楚。目的：探讨丹参酮ⅡA对小鼠卵巢组织冷冻保存的保护作用。方法：获取25只6周龄雌性KM小鼠的卵巢组织，随机分为5组，每组10个卵巢：新鲜组不进行冷冻保存，冷冻对照组使用玻璃化冷冻保护剂，0.5,2.5,5μmol/L丹参酮ⅡA组分别使用含0.5,2.5,5μmol/L丹参酮ⅡA的玻璃化冷冻保护剂，置于液氮中冷冻保存。保存3 d后取出冻存管解冻，采用苏木精-伊红染色观察各组卵巢组织及卵泡形态，分析卵泡形态正常率及存活率；通过酶联免疫法检测卵巢内超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、丙二醛、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素17水平；采用RT-qPCR和Western blot检测小鼠卵巢内核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid derived 2-like 2,Nrf2)和血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)的m RNA及蛋白表达。结果与结论：(1)与新鲜组比较，冷冻对照组卵巢内各级卵泡形态异常、卵泡存活率下降(P 0.05)，超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性下降(P 0.05)，丙二醛、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素17水平均升高(P 0.05),Nrf2、HO-1的mRNA及蛋白表达均下降(P 0.05)；(2)与冷冻对照组比较，不同浓度丹参酮ⅡA均可改善卵巢内各级卵泡形态、提升卵泡存活率，提升超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性，降低丙二醛、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素17水平，提升Nrf2、HO-1的mRNA及蛋白表达，并且呈现浓度依赖性，以5μmol/L丹参酮ⅡA的作用最显著；(3)结果表明，丹参酮ⅡA可能通过介导Nrf2/HO-1信号通路降低小鼠卵巢组织的氧化应激水平和炎症反应，减轻小鼠卵巢玻璃化冷冻保存而出现的生殖损伤。