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植物遗传转化技术在药用植物中的研究进展

中国实验方剂学杂志 2025年第2期 323-330页

作者：张昊熙昱林龙飞袁媛刘宇灵李慧中国中医科学院中药研究所江西中医药大学药学院中国中医科学院中药资源中心中国中医科学院中医药健康产业研究所

药用植物种类繁多、杂合度高且育种目标特殊，常规杂交技术难以满足其育种需求。而植物遗传转化技术具有高度选择性，能够特异性地改变植株性状，是药用植物育种研究的重要技术手段。常用的植物遗传转化技术有农杆菌转化法和粒子轰击法... 详细信息

药用植物种类繁多、杂合度高且育种目标特殊，常规杂交技术难以满足其育种需求。而植物遗传转化技术具有高度选择性，能够特异性地改变植株性状，是药用植物育种研究的重要技术手段。常用的植物遗传转化技术有农杆菌转化法和粒子轰击法，农杆菌转化法应用最为广泛，但其特异性强，并非所有药用植物均适用；粒子轰击法无特异性，但其转化效率低、外力损伤细胞及组织等问题也显而易见。随着纳米技术的兴起与发展，新兴的纳米材料介导转化法很好地解决了以上2种技术的难题，但受限于其发展较晚，纳米材料介导遗传物质进入植物细胞的机制尚不明确，因此在药用植物中应用较少。该文就农杆菌转化法、粒子轰击法、纳米材料介导转化法几种常用或新兴的植物遗传转化技术的发展现状及在不同药用植物中的应用情况进行概述，展望了植物遗传转化技术发展趋势及其在药用植物和中药资源未来发展中的应用前景，以期为药用植物的遗传改良和种质创新提供新的技术思路，为中药资源的可持续发展注入新的动力。

关键词：植物遗传转化技术药用植物农杆菌粒子轰击纳米材料基因组编辑

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侯氏黑散组方原则及治疗中风病的机理探究

北京中医药大学学报 2025年

作者：张秋霞赵晖首都医科大学中医药学院中医络病研究北京市重点实验室

侯氏黑散出自《金匮要略?中风历节病脉证并治第五》，被称为治疗中风“第一方”，其治疗中风体现了“补不足，损有余”的治疗原则。基础研究结果表明，侯氏黑散全方可改善血液流变、抗氧化损伤、保护脑缺血损伤后的神经血管单元、促进... 详细信息

侯氏黑散出自《金匮要略?中风历节病脉证并治第五》，被称为治疗中风“第一方”，其治疗中风体现了“补不足，损有余”的治疗原则。基础研究结果表明，侯氏黑散全方可改善血液流变、抗氧化损伤、保护脑缺血损伤后的神经血管单元、促进新生血管成熟、维持脑血管内皮屏障完整等作用。依据“内虚邪中”中风病机理论对侯氏黑散进行拆方研究，即把方中的药物分为菊花、防风、桂枝等风药组和人参、当归、白术等补虚药组，发现风药主要通过下调凋亡蛋白Caspase-3的表达而补虚药则主要通过上调DNA修复蛋白PARP的表达而减少脑缺血损伤；风药可明显下调缺血6 h侧脑室水通道蛋白4（AQP4）表达，但其作用时间窗较短，补虚药调控侧脑室AQP4的时间窗较风药明显滞后。侯氏黑散祛风通络、化痰活血的功效，与脑小血管病早期风痰瘀阻脑络的病机十分吻合，并且可通过降压、降脂，改善患者的血液流变学，减轻血管内皮细胞的病理损伤和功能障碍，无疑是一首预防和治疗早期脑小血管病的安全有效的经方，未来可以侧重探究其治疗脑小血管疾病的分子机制。

关键词：侯氏黑散风药补虚药脑小血管疾病

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长链非编码RNA与骨性关节炎

中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2357-2367页

作者：郑善斌夏天卫孙家豪陈志远曹逊张超沈计荣南京中医药大学南京中医药大学附属医院南京中医药大学第一临床医学院江苏省南京市210000

背景:骨性关节炎作为中老年常见疾病,发病机制尚不清晰。长链非编码RNA通过多种途径参与骨性关节炎发病过程,如调控翻译、促进或者抑制mRNA表达、吸附miRNA等。目的:综述多种长链非编码RNA在骨性关节炎中的作用机制及研究进展。方法:检... 详细信息

背景:骨性关节炎作为中老年常见疾病,发病机制尚不清晰。长链非编码RNA通过多种途径参与骨性关节炎发病过程,如调控翻译、促进或者抑制mRNA表达、吸附miRNA等。目的:综述多种长链非编码RNA在骨性关节炎中的作用机制及研究进展。方法:检索中国知网、万方数据库、维普数据库、PubMed、Web of Science和Sciencedirect数据库,以“osteoarthritis,degenerative joint disease,degenerative arthritis,OA,LncRNA,long non-coding RNA,long noncoding RNA,long intergenic non-coding RNA”为英文检索词,以“骨性关节炎,骨关节炎,OA,长链非编码RNA,长链非编码核糖核酸,LncRNA”为中文检索词,检索1976年至2024年5月发表的所有相关文献,并对其进行筛选、归纳、分析、总结,最后纳入93篇文献进行综述。结果与结论:①收集了目前与骨性关节炎关系研究较多且较深入的25种长链非编码RNA;②长链非编码RNA可以充当miRNA的分子海绵,作为竞争性内源性RNA竞争性吸附miRNA,进而影响下游靶点;③长链非编码RNA可以调控软骨细胞的凋亡与增殖、软骨细胞外基质降解以及炎症反应等生理病理进程;④长链非编码RNA有望成为骨性关节炎临床诊断及治疗预后的生物标志物和潜在治疗靶点,未来可能会成为骨性关节炎临床治疗的新策略。

关键词：骨性关节炎软骨细胞长链非编码RNA 信号传导基因表达综述

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缺氧微环境下补阳还五汤通过抑制BNIP3-PI3K/Akt通路抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的线粒体自噬

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南方医科大学学报 2025年

作者：展俊平黄硕孟庆良范围谷慧敏崔家康王慧莲河南省中医院//河南中医药大学第二附属医院风湿科河南中医药大学骨伤学院

目的在低氧微环境下，以BNIP3-PI3K/Akt信号通路为核心，研究补阳还五汤参与FLS-RA线粒体自噬的调控机制。方法将成纤维样滑膜细胞（FLS）体外培养，分为正常对照组（FLS-RA正常培养）、模型对照组（IL-1β诱导）、补阳还五汤含药血清... 详细信息

目的在低氧微环境下，以BNIP3-PI3K/Akt信号通路为核心，研究补阳还五汤参与FLS-RA线粒体自噬的调控机制。方法将成纤维样滑膜细胞（FLS）体外培养，分为正常对照组（FLS-RA正常培养）、模型对照组（IL-1β诱导）、补阳还五汤含药血清低、中、高干预组（IL-1β诱导+浓度分别为5%、10%、20%含药血清），除正常对照组外，其余组细胞按照10%O2浓度低氧处理。AnnexinV-APC/7-AAD双染测定细胞凋亡和T-AOC试剂盒检测细胞总抗氧化能力。探针分子测定细胞ROS,ATP试剂盒测定细胞ATP水平、线粒体膜电位（Δψm）、细胞Ca2+平衡稳态的变化。Western blotting法检测BNIP3、PI3K、AKT蛋白表达水平，RT-q PCR法检测BNIP3、PI3K、AKT及自噬相关因子LC3、Beclin-1、P62 mRNA的表达。结果补阳还五汤组能够降低细胞的凋亡百分比（P0.05）;LC3的表达仅在中药小剂量组时无显著差异（P>0.05）。结论在低氧环境下，补阳还五汤可能通过抑制BNIP3介导的PI3K/AKT通路，从而抑制了自噬因子的表达。

关键词：低氧补阳还五汤类风湿关节炎滑膜成纤维细胞 BNIP3-PI3K/Akt 线粒体自噬

骨髓微环境中不同细胞对多发性骨髓瘤骨病外泌体环状RNA的贡献及相互作用

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中国组织工程研究 2025年

作者：于漫亚崔兴山东中医药大学第一临床学院山东中医药大学第二附属医院肿瘤中心

背景：多发性骨髓瘤骨病是多发性骨髓瘤的严重并发症，其发病机制与骨髓微环境失调密切相关。外泌体环状RNA因高稳定性、高丰度、高特异性、高保守性等特点，正逐渐成为液体活检的焦点。在多发性骨髓瘤骨病中，外泌体环状RNA的作用尚缺... 详细信息

背景：多发性骨髓瘤骨病是多发性骨髓瘤的严重并发症，其发病机制与骨髓微环境失调密切相关。外泌体环状RNA因高稳定性、高丰度、高特异性、高保守性等特点，正逐渐成为液体活检的焦点。在多发性骨髓瘤骨病中，外泌体环状RNA的作用尚缺乏相关研究。随着单细胞测序技术的发展，明确骨髓微环境中各类型细胞对多发性骨髓瘤骨病相关外泌体环状RNA的贡献及相互作用，有助于为多发性骨髓瘤骨病的诊疗提供新的生物标志物。目的：初步明确多发性骨髓瘤骨病相关外周血外泌体环状RNA的骨髓微环境来源细胞，并在单细胞水平上探究骨髓微环境中各细胞相互作用对多发性骨髓瘤骨病的影响。方法：对6例多发性骨髓瘤骨病患者和5名健康志愿者的外周血外泌体进行高通量测序，筛选差异环状RNA，并进行GO和KEGG富集分析。从GEO数据库中获取多发性骨髓瘤骨病患者的骨髓单细胞测序数据集GSE271107，对其中的4例多发性骨髓瘤骨病患者数据进行整合，完成质控和过滤后，利用Harmony法去除批次效应，UMAP进行亚群聚类，SingleR自动注释后手动矫正细胞群，CellChat对单细胞测序数据中的细胞间通讯进行推断和可视化，分析配体、受体间的相互作用。结果与结论：(1)相较于健康志愿者，多发性骨髓瘤骨病患者外周血外泌体中1 265个环状RNA表达水平显著上调；(2)GO和KEGG分析差异环状RNA的亲本基因主要富集在神经系统发育、癌症中的通路、PI3K-Akt信号通路、Hippo信号通路、致心律失常性右心室心肌病、扩张型心肌病等，这与骨髓瘤细胞的增殖、黏附、迁移、归巢，以及多发性骨髓瘤相关并发症(如多发性骨髓瘤骨病、周围神经病变、心脏事件)关系密切；(3)多发性骨髓瘤骨病相关差异环状RNA的亲本基因主要来源于骨髓微环境中的T细胞/自然杀伤细胞、B细胞和单核/巨噬细胞，通过调节多种细胞因子的分泌影响破骨细胞功能；(4)单核细胞/巨噬细胞作为破骨细胞前体细胞与骨髓瘤细胞及其他免疫细胞间均有相互作用，MIF通路是其参与的主要通路。以上结果初步明确了多发性骨髓瘤骨病相关外周血外泌体环状RNA的骨髓微环境来源细胞，并发现单核/巨噬细胞与骨髓瘤细胞及免疫细胞间的MIF通路配体-受体相互作用可能是多发性骨髓瘤骨病发生的重要因素。

关键词：多发性骨髓瘤骨病外泌体环状RNA 单细胞测序骨髓微环境破骨细胞 PI3K-Akt信号通路 Hippo信号通路工程化外泌体

雌激素受体α激活腺苷酸活化蛋白激酶信号通路促进成骨细胞的增殖与分化

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中国组织工程研究 2025年

作者：杨锋龙欢杨冯春张桂鑫姜涛陈庆真邵敏广州中医药大学第三附属医院广州中医药大学第三临床医学院广州中医药大学广东省第二中医院

背景：研究表明，雌激素受体α可作为上游蛋白，调节腺苷酸活化蛋白激酶的表达及磷酸化水平，激活雌激素受体α-腺苷酸活化蛋白激酶通路可促进成骨增殖分化。目的：通过成骨细胞系、分子生物学层面探讨雌激素受体α调控腺苷酸活化蛋白... 详细信息

背景：研究表明，雌激素受体α可作为上游蛋白，调节腺苷酸活化蛋白激酶的表达及磷酸化水平，激活雌激素受体α-腺苷酸活化蛋白激酶通路可促进成骨增殖分化。目的：通过成骨细胞系、分子生物学层面探讨雌激素受体α调控腺苷酸活化蛋白激酶的分子机制及对成骨细胞增殖、分化的影响。方法：(1)将传代的MC3T3-E1小鼠胚胎成骨细胞分3组：空白对照组、mock组(转染pCDNA3.1对照质粒)、雌激素受体α组(转染pCDNA3.1-雌激素受体α过表达质粒)，RT-qPCR和Western blot法检测肝激酶B1、CaMKKβ和腺苷酸活化蛋白激酶α1 mRNA、蛋白及磷酸化水平。(2)ChIP-qPCR证明雌激素受体α与肝激酶B1启动子互作；双荧光素酶实验证明雌激素受体α与肝激酶B1启动子区域互作激活其转录表达。(3)细胞分3组：mock+shNC组、雌激素受体α+shNC组、雌激素受体α+shLKB1组，采用Western blot检测细胞中肝激酶B1、磷酸化肝激酶B1、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α1蛋白的表达水平变化。(4)细胞分4组：mock组、雌激素受体α组、雌激素受体α+5μmol/L Compound C(腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂)组、雌激素受体α+10μmol/L Compound C组，Western blot法检测腺苷酸活化蛋白激酶信号通路相关蛋白和成骨分化相关蛋白的表达。细胞转染24 h后给予成骨诱导14 d，检测各组细胞碱性磷酸酶染色及活性情况。成骨诱导21d采用茜素红染色检测矿化结节形成情况。(5)按分组转染及不同浓度腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂预处理，通过CCK8检测细胞活力。结果与结论：(1)雌激素受体α能激活MC3T3-E1细胞中腺苷酸活化蛋白激酶信号通路；(2)雌激素受体α可促进肝激酶B1转录介导腺苷酸活化蛋白激酶信号通路激活；(3)雌激素受体α通过激活腺苷酸活化蛋白激酶信号通路促进MC3T3-E1细胞增殖分化，腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂干预下腺苷酸活化蛋白激酶α1、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α、骨保护素、骨桥蛋白、Runx2蛋白表达下调，成骨细胞活力下降；(4)结果说明，雌激素受体α可通过肝激酶B1启动子激活腺苷酸活化蛋白激酶通路，促进成骨细胞增殖和成骨分化，起到防治骨质疏松症的作用。

关键词：绝经后骨质疏松症雌激素受体α过表达 AMPK 信号通路肝激酶B1 工程化组织构建

经血源性干细胞联合补肾活血类中药治疗子宫内膜功能减退类疾病的研究进展

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中国全科医学 2025年

作者：孙宇辰石雅馨师伟山东中医药大学第一临床医学院山东中医药大学附属医院妇科

在传统治疗策略对子宫内膜功能减退类疾病治疗效果受限的环境下，细胞疗法尤其是干细胞技术在创新性与疗效上展示着显著潜力。本综述深入讨论了经血源性干细胞（MenSCs）的研究进展以及其与补肾活血类中药联合治疗的成果与前景，从方药... 详细信息

在传统治疗策略对子宫内膜功能减退类疾病治疗效果受限的环境下，细胞疗法尤其是干细胞技术在创新性与疗效上展示着显著潜力。本综述深入讨论了经血源性干细胞（MenSCs）的研究进展以及其与补肾活血类中药联合治疗的成果与前景，从方药和MenSCs角度探讨二者治疗子宫内膜功能减退类疾病的机制，进而对MenSCs与补肾活血类中药在创新性领域应用治疗该病症提出可行性探讨。本文旨在综述干细胞疗法的疗效，希望可以推动再生医学与中医药学、材料学的深度融合，从而开辟更为全面且个性化的治疗新策略。

关键词：子宫内膜功能减退类疾病经血源性干细胞补肾活血类中药综述

基于网络药理学和转录组学探讨活心丸防治心力衰竭机制

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医药导报 2025年

作者：刘想陈科翰郑楚瑶廖弈秋王羚郦广州中医药大学中药学院广州白云山医药集团股份有限公司白云山制药总厂

目的基于网络药理学和转录组学分析探讨活心丸（HXP）防治心力衰竭（HF）的作用机制。方法采用皮下注射异丙肾上腺素（ISO）制备小鼠 HF 模型，将小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组(沙库巴曲缬沙坦钠，60 mg·kg-1)、... 详细信息

目的基于网络药理学和转录组学分析探讨活心丸（HXP）防治心力衰竭（HF）的作用机制。方法采用皮下注射异丙肾上腺素（ISO）制备小鼠 HF 模型，将小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组(沙库巴曲缬沙坦钠，60 mg·kg-1)、活心丸小剂量组(31.2 mg·kg-1)，活心丸大剂量组(62.4 mg·kg-1)。连续 21 d 皮下注射 ISO(5 mg·kg-1)进行造模，同时各组小鼠灌胃相应剂量药物进行治疗。用彩色多普勒超声成像系统检测小鼠心功能；酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定血清环磷酸腺苷（cAMP）、N 端 B 型利钠肽原（NT-proBNP）及 B 型利钠肽（BNP）水平；苏木素-伊红（HE）染色和马松（Masson）染色法评价心肌组织病理形态，计算胶原容积分数（CVF）；网络药理学结合转录组学预测 HXP 防治 HF潜在靶点和信号通路，采用分子生物学手段进行验证。结果与正常对照组比较，模型对照组左室收缩末期内径（LVESd）及左室舒张末期内径（LVEDd）升高（P<0.01），左室射血分数（LVEF）和左室短轴缩短率（LVFS）降低（P<0.01），血清 BNP、NT-proBNP、cAMP 含量上升（P<0.01），心肌组织间胶原纤维增多，CVF 值升高（P<0.01）。与模型对照组比较，HXP小、大剂量组和阳性对照组 LVESd、LVEDd 下降（P<0.01），LVEF、LVFS 上升（P<0.01）；血清 BNP、NT-proBNP、cAMP 水平下降（P<0.05）；心肌组织纤维化程度减轻，CVF 下降（P<0.01）。网络药理学与转录组学联合分析，共预测出HXP 防治 HF 关键靶点10 个：CACNA1H、SCN10A、FGF12、PVALB、ACAN、LGALS3、SERPINE1、MMP3、GSTM1、VDR。蛋白免疫印迹法（WB）结果显示，与正常对照组比较，模型对照组心肌组织蛋白激酶 A（PKA）和 cAMP 反应元件结合蛋白（CREB）蛋白活化水平升高（P<0.01）；与模型对照组比较，HXP 小、大剂量组和阳性对照组心肌组织 PKA、CREB 蛋白活化水平下降（P<0.05）。结论 HXP 对 ISO 诱导小鼠心力衰竭具有改善作用，该作用可能涉及众多靶点及 cAMP/PKA 信号通路。

关键词：活心丸心力衰竭网络药理学转录组学环磷酸腺苷/蛋白激酶A信号通路

OBE视域下护理硕士专业学位研究生循证实践能力培养的路径探析

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卫生职业教育 2025年第2期 4-7页

作者：杨永樊杭孟媛张江银谭思连王嘉孺韦嘉雯张瑛韩叶芬陈玲杨连招广西中医药大学广西中医药大学赛恩斯新医药学院

循证实践能力作为护理硕士专业学位研究生的核心能力之一，不仅能为其提供重要的科学方法和指导，还能帮助其日后临床合理应用专业资源进行科学的护理决策。在OBE（基于学习产出的教育模式）视域下，结合循证护理教学实践，探析提升护... 详细信息

循证实践能力作为护理硕士专业学位研究生的核心能力之一，不仅能为其提供重要的科学方法和指导，还能帮助其日后临床合理应用专业资源进行科学的护理决策。在OBE（基于学习产出的教育模式）视域下，结合循证护理教学实践，探析提升护理硕士专业学位研究生循证实践能力的路径。

关键词： OBE 循证护理护理硕士专业学位研究生循证实践能力