缺氧微环境下补阳还五汤通过抑制BNIP3-PI3K/Akt通路抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的线粒体自噬

作     者：展俊平 黄硕 孟庆良 范围 谷慧敏 崔家康 王慧莲 ZHAN Junping;HUANG Shuo;MENG Qingliang;FAN Wei;GU Huimin;CUI Jiakang;WANG Huilian

作者机构：河南省中医院//河南中医药大学第二附属医院风湿科河南郑州450002 河南中医药大学骨伤学院河南郑州450008 

出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)

年 卷 期：2025年第45卷第1期

页      面：35-42页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：河南省高等学校重点科研项目计划(22B360006) 河南省中医药科学研究专项课题(2019ZY2060) 河南省卫生健康委员会中医药拔尖人才培养项目资助(豫卫中医函15号) 

主　　题：低氧 补阳还五汤 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞 BNIP3-PI3K/Akt 线粒体自噬 

摘      要：目的在低氧微环境下,以BNIP3-PI3K/Akt信号通路为核心,研究补阳还五汤参与FLS-RA线粒体自噬的调控机制。方法将成纤维样滑膜细胞(FLS)体外培养,分为正常对照组(FLS-RA正常培养)、模型对照组(IL-1β诱导)、补阳还五汤含药血清低、中、高干预组(IL-1β诱导+浓度分别为5%、10%、20%含药血清),除正常对照组外,其余组细胞按照10%O2浓度低氧处理。AnnexinV-APC/7-AAD双染测定细胞凋亡和T-AOC试剂盒检测细胞总抗氧化能力。探针分子测定细胞ROS,ATP试剂盒测定细胞ATP水平、线粒体膜电位(Δψm)、细胞Ca^(2+)平衡稳态的变化。Western blotting法检测BNIP3、PI3K、AKT蛋白表达水平,RT-q PCR法检测BNIP3、PI3K、AKT及自噬相关因子LC3、Beclin-1、P62 mRNA的表达。结果补阳还五汤组能够降低细胞的凋亡百分比(P0.05);LC3的表达仅在中药小剂量组差异无统计学意义(P0.05)。结论在低氧环境下,补阳还五汤可能通过抑制BNIP3介导的PI3K/AKT通路,从而抑制了自噬因子的表达。