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逍遥散治疗糖尿病性勃起功能障碍的网络药理学分析及实验

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：卯银辉王卓孙军涛魏志涛王明星杨勇长春中医药大学长春中医药大学附属医院实验中心长春中医药大学附属医院

目的：探讨逍遥散治疗糖尿病性勃起功能障碍（DMED）的作用机制及其主要的活性成分。方法：采用链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠模型，通过海绵体内压/平均动脉压（ICP/MAP）的测量及马松染色对逍遥散进行疗效评价。然后，通过网络药... 详细信息

目的：探讨逍遥散治疗糖尿病性勃起功能障碍（DMED）的作用机制及其主要的活性成分。方法：采用链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠模型，通过海绵体内压/平均动脉压（ICP/MAP）的测量及马松染色对逍遥散进行疗效评价。然后，通过网络药理学和分子对接预测逍遥散治疗DMED的主要活性成分、关键靶点和潜在的信号通路。最后，对预测的结果进行体内外实验验证。结果：ICP/MAP和马松染色的检测结果表明，与正常组比较，模型组大鼠的勃起功能显著降低（P<0.01），平滑肌/胶原纤维的比值显著降低（P<0.01）；经过逍遥散治疗后，与模型组比较，糖尿病大鼠的ICP/MAP值显著升高（P<0.01），平滑肌/胶原纤维的比值显著升高（P<0.01）。网络药理学结果表明，逍遥散通过槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇和豆甾醇等主要活性成分作用于白蛋白（ALB）、蛋白激酶B1（Akt1）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子（TNF）等核心靶点，参与糖尿病并发症中的AGE/RAGE信号通路和PI3K/Akt信号通路的调节。分子对接结果显示，逍遥散的关键成分与核心靶点具有较好的结合能力，其中β-谷甾醇与ALB的结合能力最强。体内实验表明，逍遥散能够显著提高ALB和Akt1在血清中及mRNA的表达，抑制IL-6和TNF-α的表达；显著提高p-PI3K和p-Akt的蛋白及mRNA的表达，抑制RAGE的表达。细胞热迁移实验（CETSA）结果表明，β-谷甾醇可以显著抑制ALB蛋白的降解。结论：逍遥散可能通过调节ALB、Akt1、IL-6、TNF等靶点及RAGE/PI3K/Akt信号通路恢复糖尿病大鼠的勃起功能，其主要的活性成分可能是β-谷甾醇。

关键词：逍遥散糖尿病性勃起功能障碍网络药理学分子对接细胞热迁移

国医大师王烈运用补肾培元法治疗儿科疾病稳定期经验

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中华中医药杂志 2024年第4期39卷 1800-1803页

作者：陈慧丹杨福双孙丽平王烈(指导) 长春中医药大学长春130117 长春中医药大学附属医院儿童诊疗中心长春130021

基于小儿“肾常不足”的生理特性,王烈教授认为小儿在疾病恢复期多呈肾虚状态,将其责之于先天禀赋、他脏所累或久病损肾。故提倡以补肾培元法以扶正固本,以期达到未病先防、瘥后防复之目的。总结王烈教授临证运用补肾培元法治疗儿科疾... 详细信息

基于小儿“肾常不足”的生理特性,王烈教授认为小儿在疾病恢复期多呈肾虚状态,将其责之于先天禀赋、他脏所累或久病损肾。故提倡以补肾培元法以扶正固本,以期达到未病先防、瘥后防复之目的。总结王烈教授临证运用补肾培元法治疗儿科疾病稳定期经验,分别在哮喘稳定期用自拟固哮方以补肾培元,抑痰防哮;反复呼吸道感染稳定期用自拟固防饮以补肾培元,固表实卫;抽动障碍稳定期用自拟滋肾散以补肾培元,安脑充髓;过敏性紫癜稳定期用自拟补肾方以补肾培元,扶正固络。

关键词：儿科疾病王烈补肾培元稳定期名医经验

人参-黄芪药对不同配比化学成分分析及抗氧化活性研究

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中国新药杂志 2024年第11期33卷 1164-1173页

作者：曹国世李波李佳尉忠贤赵彧陈越赵大庆张红印严铭铭长春中医药大学长春130117 长春中医药大学附属医院长春130021 吉林省中药保健食品科技创新中心长春130117

目的:比较不同配比人参-黄芪药对中指标性成分差异,探究其抗氧化活性。方法:制备人参、黄芪提取物及不同配伍比例(1∶1,1∶2,1∶4,m/m)的人参-黄芪药对提取物,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和2,2'-... 详细信息

目的:比较不同配比人参-黄芪药对中指标性成分差异,探究其抗氧化活性。方法:制备人参、黄芪提取物及不同配伍比例(1∶1,1∶2,1∶4,m/m)的人参-黄芪药对提取物,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸+[2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline)-6-sulfonate+,ABTS+]和等化学法检测人参-黄芪药对清除自由基能力;建立H_(2)O_(2)诱导的HepG2细胞氧化损伤模型,通过荧光探针法与ELISA法分析人参-黄芪药对对HepG2细胞模型中氧化因子分泌水平的影响;建立D-半乳糖诱导小鼠衰老模型分析人参-黄芪药对不同配比的体内抗氧化活性;采用紫外分光光度法和HPLC-ELSD法,分析比较各提取物中活性成分(总酚酸、总皂苷、总多糖、总黄酮、总蛋白)及7种主要化学成分的含量差异。结果:人参-黄芪药对不同配比提取物,均显示出较好的抗氧化活性,人参-黄芪(1∶2)药对具有较强的清除自由基能力。体外细胞模型实验中,人参-黄芪药对给药后可显著提高细胞活力、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)含量,降低丙二醛(malondialdehyde,MDA)浓度,其中,人参-黄芪(1∶2)给药浓度为400μg·mL^(-1)时,细胞活力最高可达(92.88±2.81)%。体内实验表明,人参-黄芪(1∶2)可以增强模型小鼠血液和肝脏中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶含量,降低丙二醛浓度。人参-黄芪药对活性成分分析结果表明,人参-黄芪(1∶2)配比时总黄酮和总皂苷含量最高。结论:与单药材提取物相比,人参-黄芪药对不同配比提取物均具有良好的清除自由基能力及体内体外抗氧化作用,其中人参-黄芪(1∶2)药对的抗氧化活性最好。

关键词：人参黄芪药对化学成分抗氧化活性

原发性骨质疏松症中医证候分布频率的Meta分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 111-117页

作者：吴海龙常天瀛卢焱罗宗键冷向阳廖星长春中医药大学长春130117 长春中医药大学循证医学中心长春130117 长春中医药大学附属医院长春130021 中国中医科学院中医临床基础医学研究所北京100700

目的:运用循证医学方法,系统评价我国原发性骨质疏松症(POP)中医证候分布情况,了解其证候分布规律。方法:检索中国知识基础设施工程(CNKI)、维普中文科技期刊数据库(VIP)、万方数据知识服务平台(WanFang)及中国生物医学文献数据库(CBM)... 详细信息

目的:运用循证医学方法,系统评价我国原发性骨质疏松症(POP)中医证候分布情况,了解其证候分布规律。方法:检索中国知识基础设施工程(CNKI)、维普中文科技期刊数据库(VIP)、万方数据知识服务平台(WanFang)及中国生物医学文献数据库(CBM),获得代表性文献,各个数据库检索时间均为1994年世界卫生组织定义骨质疏松症诊断标准至2023年5月1日。由2位研究者根据筛选标准独立筛选文献、提取资料并交叉核对,采用R 4.1.3软件进行Meta分析并进行亚组分析。结果:共纳入56篇中文文献,涉及14415例患者。证候标准化分类后排除11篇文献,最终纳入的45篇中文文献的Meta分析结果显示,12723例患者肝肾阴虚证、脾肾阳虚证、肾虚血瘀证的证候分布频率分别为27%[95%置信区间(CI)0.24~0.31]、32%(95%CI 0.29~0.36)、36%(95%CI 0.30~0.42)。亚组分析结果显示,上述3种中医证候在南北方分布差异具有统计学意义(P中医证候骨折发生率分别为肝肾阴虚证15%(95%CI 0.09~0.24)、脾肾阳虚证20%(95%CI 0.12~0.30)、肾虚血瘀证31%(95%CI 0.25~0.39)。结论:POP患者的证候分布以肾虚为主,兼见肝脾功能失调。肝肾阴虚证、脾肾阳虚证、肾虚血瘀证均是POP及骨质疏松性骨折发生的主要证候,且肾虚血瘀证与骨质疏松性骨折的发病关系最为密切。纳入研究间证候判定参考标准不一致,未来要重点围绕其判定标准,获得共识性研究结果;同时,开展大样本的证候调研,获得具有代表性的研究结果,为临床实践和研究提供依据。

关键词：原发性骨质疏松症(POP) 中医证候系统综述 Meta分析横断面研究循证医学方法骨折

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鹿茸水溶性蛋白的结构表征与抗疲劳活性研究

中国医院药学杂志 2024年

作者：潘黛安刘那王思明白雪媛唐晓雷刘诗超长春中医药大学附属医院实验中心长春中医药大学东北亚中医药研究院长春中医药大学药学院

目的：本研究旨在探索鹿茸水溶性蛋白的结构特征，分析其抗疲劳的作用功效。方法：以梅花鹿鹿茸为原料，通过碱提酸沉法提取了鹿茸水溶性蛋白，通过SDS-PAGE凝胶电泳结合考马斯亮蓝染色法检测其分子量分布，通过高效液相色谱法分析其氨... 详细信息

目的：本研究旨在探索鹿茸水溶性蛋白的结构特征，分析其抗疲劳的作用功效。方法：以梅花鹿鹿茸为原料，通过碱提酸沉法提取了鹿茸水溶性蛋白，通过SDS-PAGE凝胶电泳结合考马斯亮蓝染色法检测其分子量分布，通过高效液相色谱法分析其氨基酸组成，采用紫外光谱、圆二色光谱、红外光谱、内源荧光光谱等光谱学方法，以及扫描电子显微镜检测其结构特征和微观分子形态，利用大鼠力竭游泳实验评价其抗疲劳活性。结果：鹿茸水溶性蛋白的主要分子量分布为（80～43）×103，以及小于14.4×103，其中含有丰富的谷氨酸、赖氨酸、天冬氨酸和亮氨酸，以及丰富的必需氨基酸。鹿茸水溶性蛋白具有明显的蛋白质特征结构，包含丰富的α-螺旋结构，具有良好的蛋白稳定性，微观形态多呈片状和无规则树枝状。其能够明显延长大鼠的力竭游泳时间，降低血液中尿素氮和乳酸的含量，增加肝糖原和肌糖原的累积，提高乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）的活性，降低丙二醛（malondialdehyde，MDA）的含量。结论：鹿茸水溶性蛋白的分子特征可能是其具有良好抗疲劳活性的结构基础。

关键词：鹿茸蛋白结构表征抗疲劳

基于UHPLC-MS/MS法分析补肾利咽汤物质基准的特征图谱暨多指标成分的筛选与含量测定研究

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世界科学技术-中医药现代化 2024年第3期26卷 704-720页

作者：赵威马永璠刘忠义宋丽敏刘艳华张守琳初洪波长春中医药大学药学院长春130117 长春中医药大学第一附属医院长春130021 长春中医药大学第一附属医院实验中心长春130021

目的采用超高效液相-质谱(UHPLC-MS/MS)法同时测定补肾利咽汤(BSLYT)中化学成分,建立BSLYT物质基准的高效液相色谱指纹图谱及莫诺苷、马钱苷、木蝴蝶苷A、木蝴蝶苷B、黄芩苷、落新妇苷等6种主要成分的含量测定方法,为质量控制提供参考... 详细信息

目的采用超高效液相-质谱(UHPLC-MS/MS)法同时测定补肾利咽汤(BSLYT)中化学成分,建立BSLYT物质基准的高效液相色谱指纹图谱及莫诺苷、马钱苷、木蝴蝶苷A、木蝴蝶苷B、黄芩苷、落新妇苷等6种主要成分的含量测定方法,为质量控制提供参考。方法利用质谱数据,建立指纹图谱。用外标法计算BSLYT样品中主要成分的含量,并结合化学计量学方法分析不同批次样品的差异。结果质谱共指认出了69种化合物,经过与高效液相色谱比对,共指认出13种化合物。15批BSLYT物质基准特征图谱的相似度在0.90以上,共指认了27个共有峰。聚类分析(CA)将物质基准分为2类,即S1、S2、S5、S8、S9、S13、S15为一类,S3、S4、S6、S7、S10-S12、S16为一类。通过主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLSDA),筛选出影响物质基准分类的化学成分,分别归属于木蝴蝶、山茱萸和土茯苓。多指标成分含量测定6个成分,分别为莫诺苷、马钱苷、木蝴蝶苷A、木蝴蝶苷B、黄芩苷、落新妇苷含量范围分别在0.31%-0.51%、0.12%-0.22%、0.09%-0.19%、0.09%-0.24%、0.07%-0.18%、0.08%-0.29%。结论本文建立的指纹图谱和多指标含量测定方法准确、稳定,为补肾利咽汤的物质基准及相关制剂的质量控制提供依据。

关键词：补肾利咽汤物质基准超高效液相-质谱指纹图谱含量测定化学计量学

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国医大师王烈教授中药外治小儿疾病经验

时珍国医国药 2024年第5期35卷 1224-1226页

作者：薛志龙杨福双孙丽平王烈长春中医药大学中医学院吉林长春130117 长春中医药大学附属医院儿童诊疗中心吉林长春130021

总结国医大师王烈教授中药外治小儿疾病经验。临证时注重外治法的运用,临床常应用单味或复方中药外治小儿疾病:土茯苓敷涌泉穴治疗感冒发热、郁金敷涌泉穴或五倍子敷神阙穴治疗汗证、吴茱萸敷涌泉穴治疗口疮、芦荟敷涌泉穴治疗便秘、丁... 详细信息

总结国医大师王烈教授中药外治小儿疾病经验。临证时注重外治法的运用,临床常应用单味或复方中药外治小儿疾病:土茯苓敷涌泉穴治疗感冒发热、郁金敷涌泉穴或五倍子敷神阙穴治疗汗证、吴茱萸敷涌泉穴治疗口疮、芦荟敷涌泉穴治疗便秘、丁香敷神阙穴治疗睾丸鞘膜积液、治哮膏敷涌泉穴治疗哮喘、苍术膏敷神阙穴治疗厌食、治遗膏敷神阙穴治疗遗尿、分消膏敷神阙穴和涌泉穴治疗肾病水肿。

关键词：中药外治法名医经验王烈

炙甘草汤加减联合PD-1治疗晚期NSCLC(气阴两虚型)的疗效

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中国肿瘤临床 2024年第9期51卷 461-466页

作者：丁欢陈卓于洪鹏冯卓仕丽长春中医药大学附属医院肺病肿瘤血液中心·肺病科长春市130000 吉林省肿瘤医院中西医结合科长春中医药大学中医学院

目的:分析炙甘草汤加减联合程序性死亡受体1(programmed cell death protein-1,PD-1)治疗晚期非小细胞肺癌(nonsmall cell lung cancer,NSCLC)(气阴两虚型)的临床疗效。方法:回顾性分析2020年12月至2022年12月就诊于吉林省肿瘤医院、长... 详细信息

目的:分析炙甘草汤加减联合程序性死亡受体1(programmed cell death protein-1,PD-1)治疗晚期非小细胞肺癌(nonsmall cell lung cancer,NSCLC)(气阴两虚型)的临床疗效。方法:回顾性分析2020年12月至2022年12月就诊于吉林省肿瘤医院、长春中医药大学附属医院的晚期NSCLC(气阴两虚型)患者72例,随机分为两组各36例,对照组(PD-1单抗)、治疗组(PD-1单抗联合炙甘草汤加减)。主要观察指标为免疫功能(CD3^(+)、CD3^(+)/CD4^(+)、CD3^(+)/CD8^(+))和生存质量评分(KPS),次要观察指标为客观缓解率(objective response rate,ORR)、中医症候积分、血清肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白片段(CYFRA211)、免疫相关不良反应(胃肠毒性、肺毒性、肝毒性、甲状腺毒性)发生率。结果:治疗组在调节免疫功能CD3^(+)、CD3^(+)/CD4^(+)、CD3^(+)/CD8^(+),提高患者生存质量在T3时间点、T4时间点、降低肿瘤标志物CEA、CY211、改善中医证候咳嗽、乏力、心悸、腹泻的症状和减少免疫相关性肺炎、腹泻方面,均优于对照组(P0.05)。结论:炙甘草汤加减联合PD-1治疗晚期NSCLC的患者,可以显著增强免疫功能,提高临床疗效,减少免疫相关不良反应且安全性较好。

关键词：晚期NSCLC 气阴两虚型炙甘草汤 PD-1

铁皮石斛多糖通过调节肠菌代谢物对老年小鼠肠道黏膜屏障损伤的改善作用

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吉林大学学报(医学版) 2024年

作者：李宏王慧王隶书王超楠徐晓浩孙立伟长春中医药大学药学院长春中医药大学附属医院实验中心吉林省中医药科学院新药研究开发中心

目的：探讨铁皮石斛多糖(DOP)对老年小鼠肠道黏膜屏障损伤的保护作用，并阐明其可能的作用机制。方法：选择10只雌性5月龄C57BL/6小鼠为年轻组，将20只C57BL/6小鼠(15月龄)随机分为老年组和老年鼠DOP (200 mg·kg-1·d-1)处理组(DOP组)... 详细信息

目的：探讨铁皮石斛多糖(DOP)对老年小鼠肠道黏膜屏障损伤的保护作用，并阐明其可能的作用机制。方法：选择10只雌性5月龄C57BL/6小鼠为年轻组，将20只C57BL/6小鼠(15月龄)随机分为老年组和老年鼠DOP (200 mg·kg-1·d-1)处理组(DOP组)，每组10只。DOP组小鼠采用DOP灌胃，检测各组小鼠体质量、摄食量和悬挂时间；苏木精-伊红(HE)染色观察各组小鼠肠道和脾脏组织病理形态表现；免疫组织化学染色检测各组小鼠肠道组织中闭锁小带蛋白-1 (ZO-1)和黏蛋白2 (MUC2)的表达情况。制备肠菌代谢物培养基(IBMM)干预秀丽线虫(C. elegans)，将C. elegans随机分为年轻IBMM组(Young-IBMM)、老年IBMM组(Aged-IBMM)和DOP-IBMM组，采用免疫荧光法分析各组C. elegans第1和12天的肠道脂褐素累积水平；亮蓝染色评估各组C. elegans第1和12天的肠道渗漏情况。制备IBMM干预Caco-2细胞，将Caco-2细胞分为Young-IBMM组、Aged-IBMM组和DOP-IBMM组，Westernblotting法检测各组Caco-2细胞中ZO-1、闭合蛋白(Occludin)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白细胞介素6 (IL-6)、磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)和肌球蛋白轻链激酶(MLCK)蛋白表达水平。结果：与年轻组比较，老年组小鼠体质量增加(P<0.05)，摄食量降低(P<0.05)，悬挂时间变短(P<0.05)；与老年组比较，DOP组小鼠体质量明显减轻(P<0.01)，摄食量增加(P<0.05)，悬挂时间明显延长(P<0.01)。HE染色，与年轻组比较，老年组小鼠肠黏膜厚度变薄，杯状细胞减少，肠绒毛长短不一且排列无序，脾脏表面可见大量铁血黄素存在，红髓内细胞成分减少，白髓内动脉周围淋巴鞘和淋巴小结残存或几乎消失；与老年组比较，DOP组小鼠肠黏膜厚度增加，杯状细胞增多，肠绒毛长度一致且排列整齐，脾脏红髓整体功能改善，白髓成分增加。免疫组织化学染色，与年轻组比较，老年组小鼠肠道组织中ZO-1和MUC2蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.001)；与老年组比较，DOP组小鼠肠道组织中ZO-1和MUC2蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.001)。免疫荧光法，与Young-IBMM组比较，Aged-IBMM组C. elegans肠道内脂褐素累积水平明显升高(P<0.001)；与Aged-IBMM组比较，DOP-IBMM组C. elegans肠道内脂褐素累积水平明显降低(P<0.001)。亮蓝染色法，与Young-IBMM组比较，Aged-IBMM组C. elegans亮蓝染料渗漏至线虫全身，肠道结构变得模糊不清，不易观察；与AgedIBMM组比较，DOP-IBMM组C. elegans亮蓝染料渗漏减少。Western blotting法，与Young-IBMM组比较，Aged-IBMM组Caco-2细胞中TNF-α、IL-6、p-MLC和MLCK蛋白表达水平明显升高(P<0.01或P<0.001),ZO-1和Occludin蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)；与Aged-IBMM组比较，DOP-IBMM组Caco-2细胞中TNF-α、IL-6、p-MLC和MLCK蛋白表达水平明显降低(P<0.01),ZO-1和Occludin蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论：DOP对老年小鼠肠道黏膜屏障损伤有改善作用，其作用机制可能与通过调节肠菌代谢物、抑制p-MLC/MLCK通路、恢复紧密连接复合物表达、降低肠道炎症水平、进而改善肠道屏障损伤有关。

关键词：铁皮石斛多糖自然衰老小鼠肠道屏障肠菌代谢物