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耐力运动对老龄慢性心力衰竭大鼠心功能和运动耐力改善的效果及机制

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中国康复医学杂志 2024年第10期 1487-1490页

作者：李慧栾海燕李艳伟锦州医科大学附属第一医院老年医学科锦州医科大学附属第一医院中医科锦州医科大学附属第一医院慢病管理中心

目的：通过构建老龄心力衰竭大鼠模型，探索耐力运动对老龄慢性心力衰竭大鼠心功能改善情况及机制。方法：48只21月龄SPF级雄性Wistar大鼠，随机分为假手术对照组（Sham组）和假手术运动组（Sham+E组）、心衰对照组（HF组）和心衰运动组... 详细信息

目的：通过构建老龄心力衰竭大鼠模型，探索耐力运动对老龄慢性心力衰竭大鼠心功能改善情况及机制。方法：48只21月龄SPF级雄性Wistar大鼠，随机分为假手术对照组（Sham组）和假手术运动组（Sham+E组）、心衰对照组（HF组）和心衰运动组（HF+E组）。Sham组和HF组保持安静状态，Sham+E组和HF+E组进行8周有氧训练。然后检测各组运动耐力的变化、观察心脏功能和结构及心肌组织病理学变化、检测血液中氧化应激指标（NO、MDA、ROS、SOD）及炎性因子（IL-6、TNF-α）的含量。结果：与Sham组相比，Sham+E组运动耐力（力竭距离、力竭时间和最大跑速）明显升高（P<0.05）,HF组显著性下降（P<0.01）。与HF组相比，HF+E组各运动耐力参数均显著性升高（P<0.01）。与Sham组相比，Sham+E组BNP和BW降低（P<0.01）,LVEDd、LVEF、LVW、LVMI增加（P<0.01），而HF组BNP、LVAWDd、LVAWDs、LVPWDd、LVPWDs、LVW、LVMI增加（P<0.01）,LVEDd、LVEF、BW降低（P<0.01）。与HF组相比，HF+E组BNP下降（P<0.01）,LVEDd、LVEF、LVW、LVMI增加（P<0.01）。HE染色提示，HE+E组心肌组织损伤较HE组明显减轻。与Sham组相比，Sham+E组NO和SOD明显升高，MDA和ROS明显降低，HF组NO和SOD显著性降低，MDA和ROS显著性升高。与HF组相比，HF+E组NO和SOD显著性升高，MDA和ROS显著性下降。与Sham组相比，Sham+E组IL-6和TNF-α显著性下降，HF组显著性升高。与HF组相比，HF+E组IL-6和TNF-α显著性下降。结论：耐力运动通过抑制氧化应激及炎症反应，改善老龄心力衰竭大鼠心肌组织损伤、改善心肌重塑、提高心功能，从而提高运动耐力。

关键词：耐力运动老龄慢性心力衰竭大鼠心脏功能氧化应激炎症反应

槐耳清膏通过氧化应激诱导结直肠癌细胞发生线粒体途径凋亡

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中国中药杂志 2024年第12期49卷 3320-3329页

作者：盛宋昊然李玉斌郭家成孟晓岚王晨何淼李玉强孙宏治锦州医科大学附属第一医院辽宁锦州121001 辽宁省肿瘤临床代谢组学重点实验室辽宁锦州121001 锦州医科大学附属第一医院临床生物样本中心辽宁锦州121001

该研究探讨了槐耳清膏通过氧化应激诱导结直肠癌线粒体途径凋亡的具体机制。将HCT116与SW480细胞使用槐耳清膏处理后,通过CCK-8、划痕实验分别检测细胞增殖、迁移能力。Annexin-PE染色检测凋亡细胞。DCFH-DA染色与丙二醛(malondialdehyd... 详细信息

该研究探讨了槐耳清膏通过氧化应激诱导结直肠癌线粒体途径凋亡的具体机制。将HCT116与SW480细胞使用槐耳清膏处理后,通过CCK-8、划痕实验分别检测细胞增殖、迁移能力。Annexin-PE染色检测凋亡细胞。DCFH-DA染色与丙二醛(malondialdehyde, MDA)、谷胱甘肽(glutathione, GSH)检测评估细胞氧化应激损伤水平。MitoSOX、JC-1探针分别靶向线粒体活性氧(mitochondria reactive oxygen species, mtROS)与线粒体膜电位(mitochondria membrane potential, MMP)以检测细胞线粒体损伤。Western blot(WB)测定线粒体途径凋亡蛋白与PTEN诱导的推定蛋白激酶1(PTEN-induced putative kinase 1,PINK1)、E3泛素蛋白连接酶Parkin蛋白的表达量。实验表明,在不同浓度槐耳清膏作用下,HCT116、SW480细胞的增殖与迁移能力都受到了抑制,且其可以激活线粒体途径凋亡。与对照组相比,槐耳处理组中结直肠癌细胞的活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平升高,MDA上升且GSH下降,提示其发生氧化应激损伤。槐耳处理组的结直肠癌细胞内mtROS上升,MMP下降,表明线粒体损伤。WB实验结果表明,槐耳清膏抑制PINK1/Parkin通路,阻碍了受损线粒体的清除并促进线粒体途径凋亡。该研究表明,槐耳清膏对结直肠癌细胞造成氧化应激与线粒体损伤,抑制PINK1/Parkin通路并促进结直肠癌细胞线粒体途径凋亡。

关键词：槐耳氧化应激结直肠癌线粒体凋亡

PD-1/PDL-1在原因不明复发性流产患者T细胞、Tregs和Bregs细胞中的表达及意义

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中华检验医学杂志 2024年第6期47卷 678-685页

作者：陈葆国干军郑瑞章卫国俞依妮温州医科大学附属台州医院中心实验室临海317000

目的探讨程序性死亡因子1(PD-1)/程序性死亡因子配体1(PDL-1)在原因不明复发性流产(URSA)患者T细胞、调节性T细胞(Tregs)、调节性B细胞(Bregs)中的表达及意义。方法收集2020年2月至2022年2月在温州医科大学附属台州医院就诊的42例URSA... 详细信息

目的探讨程序性死亡因子1(PD-1)/程序性死亡因子配体1(PDL-1)在原因不明复发性流产(URSA)患者T细胞、调节性T细胞(Tregs)、调节性B细胞(Bregs)中的表达及意义。方法收集2020年2月至2022年2月在温州医科大学附属台州医院就诊的42例URSA患者为患者组,34名健康孕妇(正常妊娠组)和30名未孕健康体检者(对照组),进行回顾性分析。采用流式细胞术检测外周血PD-1/PDL-1在Tregs细胞、Bregs细胞和[T细胞、B细胞和自然杀伤细胞(TBNK)]淋巴细胞亚群中的表达,以及血清辅助T细胞1[γ干扰素(IFN-γ)、α肿瘤坏死因子(TNF-α)]Th1/辅助T细胞2[白介素4(IL-4)、IL-6和IL-10]Th2/辅助T细胞17(IL-17)Th17细胞因子表达水平。对患者进行淋巴细胞免疫治疗,治疗结束检测患者PD-1/PD-L1水平变化及随访记录妊娠结局。多组间比较用方差分析,URSA患者治疗前后比较用配对t检验,各检测指标相关性用双变量相关分析法。结果PD-1/PDL-1在URSA患者组外周血Tregs、Bregs细胞和T淋巴细胞亚群中的表达显著低于正常妊娠组,差异有统计学意义(均P0.05)。结论PD-1/PDL-1在URSA患者外周血Tregs、Bregs细胞和T细胞亚群中低表达,造成Th1/Th2、Tregs/Th17平衡失调,母胎免疫耐受损害而导致妊娠失败,其可能是潜在的治疗靶点。

关键词：复发性流产程序性死亡因子1 程序性死亡因子配体1 调节性B细胞调节性T细胞

运用微流控技术分析虫草素对剪切诱导血小板聚集和活化的抑制效果

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中国药学杂志 2024年第6期59卷 541-548页

作者：高雪梅张天聪黄小静宦宣容李远重庆医科大学附属永川医院中心实验室重庆402160

目的分析虫草素对不同非生理性剪切率诱导的血小板聚集和活化的抑制效果。方法采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷-玻璃微通道芯片。收集健康志愿者枸橼酸钠抗凝全血,用钙黄绿素对血小板进行染色标记,并以虫草素体外孵育后,分别以14.7... 详细信息

目的分析虫草素对不同非生理性剪切率诱导的血小板聚集和活化的抑制效果。方法采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷-玻璃微通道芯片。收集健康志愿者枸橼酸钠抗凝全血,用钙黄绿素对血小板进行染色标记,并以虫草素体外孵育后,分别以14.7和50μL·min^(-1)流过带有0.5 mm长的80%狭窄的通道150 s,同时用荧光显微镜实时拍摄血小板在微通道表面的黏附聚集图像;用Image J分析荧光图片,以血小板表面覆盖率作为血小板聚集的量化指标。流式细胞术分析虫草素对血小板钙离子动员,单核细胞-血小板聚集体的抑制效果,并通过凝血检测和溶血实验对虫草素出血风险以及血液相容性做评估。结果虫草素可抑制剪切诱导的血小板聚集。在14.7和50μL·min^(-1)条件下,血小板聚集均可被虫草素抑制。虫草素抑制血小板钙离子动员和单核细胞-血小板聚集具有剪切力相关性,并且对外源性凝血途径和内源性凝血途径无影响,具有良好血液相容性。结论虫草素可有效抑制剪切率诱导的血小板聚集,是一种有潜力的抗血小板药物。

关键词：血小板聚集微流控技术壁剪切率虫草素

过敏性鼻炎和哮喘患者外周血及致敏小鼠血液或肺组织B细胞中TLR9的表达研究

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西安交通大学学报(医学版) 2024年第2期45卷 250-257页

作者：田慧梅何韶衡张慧云锦州医科大学基础医学院免疫教研室锦州医科大学附属第一医院变态反应与临床免疫中心

目的探究过敏性鼻炎(allergy rhinitis, AR)、过敏性哮喘(allergy asthma, AA)、AR合并AA(AR combined with AA,ARA)患者外周血和致敏小鼠血液或肺组织B淋巴细胞(B细胞)中Toll样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)的表达及过敏原对其表达的影响。方法招募来自锦州医科大学附属第一医院门诊和发作急性期住院的100例志愿者，包括点刺实验阴性的19例健康对照(health control, HC)志愿者、点刺实验阳性的40例AR患者、26例AA患者、15例ARA患者。流式分析仪检测经屋尘螨过敏原提取物(home dust mite allergen extract, HDME)、大籽蒿过敏原提取物(Artemisia sieversiana wild allergen extract, ASWE)、梧桐过敏原提取物(Platanus pollen allergen extract, PPE)刺激前后患者外周血B细胞中TLR9的表达；并采用野生(WT)小鼠和FcεRI基因敲除(FcεRI-KO)小鼠建立AR和AA致敏模型，检测过敏原以及FcεRI对B细胞中TLR9表达的影响。结果 AR、AA、ARA患者外周血B细胞中TLR9的表达和平均荧光强度(mean fluorescence intensity, MFI)均较HC组有所增高；过敏原激发后，AR、AA患者血液B细胞中TLR9的表达和MFI升高(P<0.05)。WT小鼠和FcεRI-KO小鼠与NS对照组相比，过敏原激发后，AR、AA小鼠外周血B细胞TLR9+高表达，但差异无统计学意义，而几乎每组MFI均升高；与NS对照组相比，过敏原激发后FcεRI基因敲除的AA小鼠肺组织中TLR9+B细胞表达差异无统计学意义，但其MFI升高。FcεRI-KO小鼠与WT小鼠相比，过敏原激发后B细胞中TLR9+MFI较低。结论 B细胞中TLR9可能参与AR、AA的发生，检测B细胞中TLR9的表达可能成为诊断AR、AA的新方向。

关键词： Toll样受体(TLR9) B淋巴细胞(B细胞) 过敏性鼻炎(AR) 过敏性哮喘(AA)

IS91的遗传特点及其与细菌耐药关系的研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第8期44卷 727-733页

作者：熊在坤陈如才赵彩冰王鹏飞昆明医科大学第二附属医院中心实验室昆明650101

细菌抗生素耐药已成为当今世界面临的严峻问题,携带耐药基因的可移动遗传元件(mobile genetic elements,MGEs)在同种或不同种细菌之间的快速传播加速了耐药性的形成,这给临床治疗细菌感染带来了巨大挑战。插入序列(insertion sequence,... 详细信息

细菌抗生素耐药已成为当今世界面临的严峻问题,携带耐药基因的可移动遗传元件(mobile genetic elements,MGEs)在同种或不同种细菌之间的快速传播加速了耐药性的形成,这给临床治疗细菌感染带来了巨大挑战。插入序列(insertion sequence,IS)是最简单的MGE,其编码一个转座酶基因且它的两侧存在反向末端重复序列。IS91家族是目前已知的26种插入序列家族成员之一,其名下现有34名家族成员。近期研究表明,IS91家族的许多成员与抗生素耐药性密切相关,因此本文将从IS91家族的发现、遗传特征、IS91与插入序列共同区(ISCR)的异同以及其与耐药和毒力基因传播的关系等方面展开综述,以期为未来细菌耐药性研究提供参考。

关键词：细菌耐药插入元件 IS91家族插入序列共同区(ISCR)

科罗索酸抑制NLRP3介导的细胞焦亡减轻阿霉素诱导的心肌细胞损伤

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中药药理与临床 2024年

作者：郭珊珊贾享贺武斌杨秋实王一黄建华锦州医科大学附属第一医院外科学重点实验室

目的：探讨科罗索酸对阿霉素诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法：采用1 μmol/L阿霉素和不同浓度的科罗索酸共同处理H9c2心肌细胞24 h。使用噻唑蓝法（MTT法）检测H9c2心肌细胞的活性；通过扫描电子显微镜观察细胞形态；... 详细信息

目的：探讨科罗索酸对阿霉素诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法：采用1 μmol/L阿霉素和不同浓度的科罗索酸共同处理H9c2心肌细胞24 h。使用噻唑蓝法（MTT法）检测H9c2心肌细胞的活性；通过扫描电子显微镜观察细胞形态；检测阿霉素对H9c2心肌细胞中乳酸脱氢酶（LDH）释放水平；使用二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH-DA）染色荧光检测活性氧（ROS）生成水平；通过蛋白免疫印迹法（WesternBlot）检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、细胞凋亡相关的斑点样蛋白（ASC）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶（CASPASE-1）、白介素-1β（IL-1β）、IL-18蛋白表达，并使用 NLRP3激动剂尼日利亚菌素钠（Nig）进一步验证科罗索酸与NLRP3介导的细胞焦亡的关系。结果：与正常对照组相比，模型对照组H9c2心肌细胞的细胞活力显著降低（P<0.01），LDH释放增多（P<0.01），H9c2心肌细胞内ROS生成增加（P<0.01)，细胞焦亡相关蛋白NLRP3、ASC、CASPASE-1、IL-1β、IL-18表达上调（P<0.01）；与模型对照组相比，科罗索酸处理后，H9c2心肌细胞活力显著升高（P<0.01），LDH释放减少（P<0.01），H9c2心肌细胞内ROS生成显著降低（P<0.01），细胞焦亡相关蛋白NLRP3、ASC、CASPASE-1、IL-1β、IL-18表达显著下调（P<0.01）。结论：科罗索酸能抑制阿霉素诱导的H9c2 心肌细胞损伤，其机制可能与减少ROS生成及抑制NLRP3介导的细胞焦亡有关。

关键词：科罗索酸阿霉素细胞焦亡 H9c2心肌细胞 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3

PCOS患者妊娠期过量睾酮影响男性子代生殖发育的机制研究进展

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中华生殖与避孕杂志 2024年第5期44卷 541-547页

作者：连超周宇居蓉陈建泉南京医科大学附属江宁医院中心实验室南京210000 南京医科大学附属江宁医院妇产科南京210000

多囊卵巢综合征患者典型特征之一是体内高雄激素分泌。其妊娠期母体过量睾酮水平不仅影响女性后代生殖健康,也影响男性后代生殖健康。本文主要针对PCOS患者妊娠期母源性睾酮暴露影响男性胎儿生殖发育及精子发生的机制进行综述,为妊娠期... 详细信息

多囊卵巢综合征患者典型特征之一是体内高雄激素分泌。其妊娠期母体过量睾酮水平不仅影响女性后代生殖健康,也影响男性后代生殖健康。本文主要针对PCOS患者妊娠期母源性睾酮暴露影响男性胎儿生殖发育及精子发生的机制进行综述,为妊娠期高雄激素影响男性后代生殖健康的机制研究与临床干预提供参考。

关键词：睾酮精子发生多囊卵巢综合征 cAMP反应元件结合蛋白

Circ0005512促进雌性大鼠脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞焦亡

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中国组织工程研究 2024年第31期28卷 5029-5035页

作者：张妍张文凯张雯秀刘涛马子谦陈学明首都医科大学附属北京潞河医院中心实验室首都医科大学附属北京潞河医院骨中心

背景：神经炎症是导致继发性脊髓损伤的重要因素，小胶质细胞/巨噬细胞焦亡是介导脊髓损伤后神经炎症的重要部分，研究显示脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞发生焦亡，但circ RNA对脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞焦亡的调控机制尚不清楚... 详细信息

背景：神经炎症是导致继发性脊髓损伤的重要因素，小胶质细胞/巨噬细胞焦亡是介导脊髓损伤后神经炎症的重要部分，研究显示脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞发生焦亡，但circ RNA对脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞焦亡的调控机制尚不清楚。目的：探讨circ0005512在脊髓损伤后调节小胶质细胞/巨噬细胞焦亡中的作用和机制。方法：将雌性Wistar大鼠随机分为假手术组和脊髓损伤组，BBB评分评估运动功能，苏木精-伊红染色检测脊髓空洞面积，二代测序筛选脊髓组织中差异表达的circ RNA,Real-time PCR验证circ0005512的表达。免疫荧光、Western blot、ELISA、Real-time PCR检测脊髓损伤大鼠的细胞焦亡情况以及脂多糖诱导的小胶质细胞系HAPI细胞的焦亡情况，基因敲降验证circ RNA0005512对小胶质细胞焦亡的调控作用。结果与结论：(1)脊髓损伤7 d后，脊髓损伤部位出现明显空洞，脊髓损伤后即刻大鼠运动功能完全缺失，随着时间的推移，脊髓损伤组大鼠运动功能逐渐部分恢复，BBB评分与假手术组比较有显著差异；(2)二代测序筛选到circ0005512明显上调，且在动物模型和细胞模型中均得到了验证；(3)免疫荧光、Western blot、Real-time PCR、ELISA实验证实脊髓损伤组织和脂多糖诱导的HAPI细胞中焦亡标志物(NLRP3、GSDMD、caspase-1)均明显上调；(4)在脂多糖诱导HAPI细胞中敲降circ0005512后，细胞焦亡标志物NLRP3明显下调；(5)以上结果表明circ0005512促进大鼠脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞焦亡。

关键词：脊髓损伤 circRNA 小胶质细胞巨噬细胞焦亡 NLRP3

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