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在flashBAC杆状病毒表达系统中制备人GⅡ.4型诺如病毒样颗粒

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微生物学报 2024年

作者：刘志鹏肖锦宁段良伟王琼梓王向鹏新乡医学院医学技术学院河南省免疫与靶向药物重点实验室新乡医学院第三附属医院检验科

【目的】人诺如病毒(human norovirus， HuNoV)是全球范围内引起人急性胃肠炎的主要病原之一，目前尚无有效的疫苗对该病毒进行预防。本研究旨在利用flashBAC杆状病毒表达系统，制备HuNoV病毒样颗粒(virus-like particles， VLP)，为研... 详细信息

【目的】人诺如病毒(human norovirus， HuNoV)是全球范围内引起人急性胃肠炎的主要病原之一，目前尚无有效的疫苗对该病毒进行预防。本研究旨在利用flashBAC杆状病毒表达系统，制备HuNoV病毒样颗粒(virus-like particles， VLP)，为研发HuNoV疫苗奠定基础。【方法】将GⅡ.4型HuNoV的VP1蛋白全长基因序列进行密码子优化后合成，克隆至杆状病毒pBacPAK9转移载体，获得pBacPAK9-8his-VP1重组质粒。酶切、测序鉴定正确后将重组质粒与线性Baculovirus plasmid (Bacmid)共转染SF9细胞，获得含有VP1基因的重组杆状病毒。重组杆状病毒感染Hi-Five (HF)细胞进行表达，利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis， SDS-PAGE)和Western blotting分析VP1蛋白的表达。用镍柱亲和层析方法纯化VP1蛋白；对纯化后的VP1蛋白进行SDS-PAGE和Western blotting检测。使用高效液相色谱(high performance liquid chromatography， HPLC)对纯化的VP1蛋白进行纯度鉴定。利用透射电镜观察VLP。【结果】构建了pBacPAK9-8his-VP1转移质粒，VP1蛋白在HF细胞中主要在细胞质内表达，分子量约为58 kDa。HPLC结果显示VP1蛋白纯度大于99%，透射电镜可以观察到形状规则、大小均一、直径约为30-40 nm的VLP。【结论】利用杆状病毒表达系统制备了GⅡ.4型HuNoV的VLP，为HuNoV疫苗的研发奠定了基础。

关键词：人诺如病毒 VP1蛋白杆状病毒表达系统病毒样颗粒

血栓弹力图预测脓毒症患者预后的Meta分析

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中华急诊医学杂志 2024年第9期33卷 1321-1328页

作者：王诗雨陈蝶王阿蕾李雯吴司棋王艺静曾结黎虹文红英川北医学院附属医院南充637000

目的定量分析脓毒症患者死亡组与生存组之间血栓弹力图(thrombelastography,TEG)和旋转血栓弹力图(rotational thromboelastometry,ROTEM)参数簇的差异。方法系统检索PubMed、Embase、The Cochrane Library、Web of Science、中国知网(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、中文科技期刊全文数据库(VIP)及万方数据库,检索时间和内容为建库至2023年4月20日发表的有关TEG/ROTEM预测脓毒症患者预后的研究。收集纳入文献的作者姓名、发表时间、国家、研究类型、样本量、脓毒症诊断标准、人口学信息、TEG检验时间、脓毒症患者死亡判定时间与研究参数,提取资料后采用纽卡斯尔-渥太华量表对纳入文献进行质量评价。结果共纳入16篇队列研究,共计1864例脓毒症患者,其中死亡组620例,生存组1244例。Meta分析结果显示,脓毒症患者死亡组R/CTi值(n=12,SMD=0.98,95%CI:0.54~1.42,P<0.01)、K值(n=11,MD=0.80,95%CI:0.24~1.35,P<0.01)高于生存组;死亡组α角(n=12,MD=-9.95,95%CI:-14.15~-5.75,P<0.01)、MA/MCFi值(n=13,SMD=-0.84,95%CI:-1.21~-0.47),P<0.01)、CI(n=5,MD=-2.78,95%CI:-3.68~-1.88),P<0.01)低于生存组,差异均具有统计学意义。结论入院TEG/ROTEM能够作为预测脓毒症患者预后的有效预测工具,对临床治疗具有先导意义。

关键词：血栓弹力图脓毒症预后 Meta分析

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迷走神经胆碱能抗炎通路与偏头痛的关系探讨

中国疼痛医学杂志 2024年第2期30卷 114-118,124页

作者：李凤鹏邢红霞靳玫殷闯周立新乡医学院第三附属医院神经内科新乡453003 新乡医学院人体解剖学与组织胚胎学系新乡453003

偏头痛是一种发病率高、致残率高的原发性头痛,发病机制尚未完全明确。近期研究表明,微生物群-肠-脑轴理论可能参与其发病。胆碱能抗炎通路(cholinergicanti-inﬂammatorypathway,CAP),是微生物群-肠-脑轴理论的一个重要研究领域。CAP与... 详细信息

偏头痛是一种发病率高、致残率高的原发性头痛,发病机制尚未完全明确。近期研究表明,微生物群-肠-脑轴理论可能参与其发病。胆碱能抗炎通路(cholinergicanti-inﬂammatorypathway,CAP),是微生物群-肠-脑轴理论的一个重要研究领域。CAP与偏头痛发作的头痛症状和消化道症状均有关联。本文就CAP与偏头痛关系的研究进展进行综述,以期为偏头痛发病机制的研究提供新思路。

关键词：偏头痛胆碱能抗炎通路迷走神经刺激 α7烟碱型乙酰胆碱受体

ECMO联合mNGS检测优化救治重度肥胖患者创伤后急性呼吸窘迫综合征合并耐药菌感染1例

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中华急诊医学杂志 2024年第6期33卷 819-821页

作者：陈杰周光居鲁勤吕康张茂温州医科大学附属第三医院温州325200 浙江大学医学院附属第二医院急诊医学科杭州330009

严重创伤患者可并发呼吸功能衰竭甚至急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS),病死率高,救治难度大[1]。肥胖尤其重度肥胖,是创伤后ARDS的危险因素之一,会延长患者的机械通气时间、重症监护时间、总住院时间,肥... 详细信息

严重创伤患者可并发呼吸功能衰竭甚至急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS),病死率高,救治难度大[1]。肥胖尤其重度肥胖,是创伤后ARDS的危险因素之一,会延长患者的机械通气时间、重症监护时间、总住院时间,肥胖患者并发创伤后ARDS给临床救治带来了更大挑战[2]。静脉-静脉体外膜肺氧合(venous–venous extracorporeal membrane oxygenation,VV-ECMO)能够暂时性替代肺脏功能,新近的研究表明,其治疗创伤后ARDS是安全可行的[1]。感染是ECMO应用期间常见的并发症[3],其中呼吸机相关性肺炎是最多发的感染,多数由革兰氏阴性耐药菌导致,包括肠杆菌科、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌[4]。有研究提示ECMO期间耐药菌感染发生和患者预后直接关连[4]。因此,病原体早期识别,准确的覆盖耐药菌是抗感染治疗中的挑战之一。

关键词：急性呼吸窘迫综合征耐药菌感染重度肥胖呼吸功能衰竭体外膜肺氧合 ECMO 重症监护肠杆菌科

多囊卵巢综合征患者健康促进生活方式量表的编制及信效度检验

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中华护理杂志 2024年第4期59卷 438-446页

作者：张宁孙小玲王静王颖捷杨海明沈山梅卢山刘才琪张成果孟芳芳江苏大学鼓楼临床医学院南京市210008 南京大学医学院附属鼓楼医院江北门诊南京大学医学院附属鼓楼医院健康管理中心南京大学医学院附属鼓楼医院内分泌科南京大学医学院附属鼓楼医院心胸外科南京大学医学院附属鼓楼医院急诊医学科

目的编制多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者健康促进生活方式量表,检验其信效度,并初步应用该量表。方法基于Pender健康促进模型,通过文献研究、半结构式访谈、小组讨论构建量表条目池;经过德尔菲专家函询、预调查,... 详细信息

目的编制多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者健康促进生活方式量表,检验其信效度,并初步应用该量表。方法基于Pender健康促进模型,通过文献研究、半结构式访谈、小组讨论构建量表条目池;经过德尔菲专家函询、预调查,形成初始量表。于2022年4月—10月,选取在南京市某三级甲等医院就诊的PCOS患者作为调查对象,第1次纳入316例、第2次纳入358例PCOS患者进行量表项目分析及信效度检验;2022年11月—2023年2月,初步应用量表调查294例PCOS患者健康促进生活方式水平现状。结果PCOS患者健康促进生活方式量表包括5个维度,33个条目。量表水平的内容效度指数为0.942;探索性因子分析提取5个公因子,累计方差贡献率为62.399%。验证性因子分析显示,模型拟合良好。总量表的Cronbach’sα系数为0.930、折半信度为0.842,重测信度为0.888。初步应用结果显示,PCOS患者健康促进生活方式量表总分为(96.925±14.273)分,处于中等水平。结论PCOS患者健康促进生活方式量表信效度较好,可作为医护人员评估PCOS患者健康促进生活方式水平的工具,并能帮助护理人员快速识别患者健康促进生活方式水平等级及各维度情况,以制订个体化的精准健康管理方案。

关键词：多囊卵巢综合征健康促进生活方式量表信度效度护理

^(18)F-FDG PET/CT半定量参数预测临床Ⅰa~Ⅲa期肺腺癌经气腔播散

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中国医学影像技术 2024年第5期40卷 735-739页

作者：王珍珍李啸天牟兴宇曾钰龍崇维霞秦杰黎祖国赵雪芹伍杨徐翠萍付巍桂林医学院附属医院核医学科广西桂林541000 桂林医学院附属医院放射科广西桂林541000

目的观察^(18)F-FDG PET/CT半定量参数预测临床Ⅰa~Ⅲa期肺腺癌经气腔播散(STAS)的价值。方法回顾性收集85例于术前接受^(18)F-FDG PET/CT检查的Ⅰa~Ⅲa期肺腺癌患者,根据病理显示有无STAS分为阳性组(n=23)及阴性组(n=62);比较组间临床... 详细信息

目的观察^(18)F-FDG PET/CT半定量参数预测临床Ⅰa~Ⅲa期肺腺癌经气腔播散(STAS)的价值。方法回顾性收集85例于术前接受^(18)F-FDG PET/CT检查的Ⅰa~Ⅲa期肺腺癌患者,根据病理显示有无STAS分为阳性组(n=23)及阴性组(n=62);比较组间临床及PET/CT所见,并以logistic分析观察其预测STAS的效能。结果组间患者性别、癌胚抗原、临床分期、病理分级、微乳头状生长及其占比差异均有统计学意义(P均<0.05)。阳性组最大、平均及峰值标准摄取值(SUV max、SUV mean、SUV peak),最大、平均及峰值瘦体标准摄取值(SUL_(max)、SUL_(mean)、SUL_(peak))和病灶糖酵解总量(TLG)均显著高于阴性组(P均<0.05)。性别、微乳头状生长方式占比、SUV max及SUL_(max)均为Ⅰa~Ⅲa期肺腺癌STAS的独立危险因素,以之预测STAS的曲线下面积(AUC)分别为0.666、0.912、0.839及0.842;其联合预测的AUC为0.957。结论^(18)F-FDG PET/CT参数SUV max及SUL_(max)有助于预测临床Ⅰa~Ⅲa期肺腺癌STAS;进一步联合性别及微乳头状生长方式占比可提高诊断效能。

关键词：肺肿瘤腺癌肿瘤转移正电子发射断层显像体层摄影术,X线计算机氟脱氧葡萄糖F18

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獐牙菜苦苷对放射性肺损伤的防护作用

中华放射医学与防护杂志 2024年第6期44卷 472-481页

作者：王瑾瑜公利鑫赵哲张甘李静怡成都医学院第二附属医院·核工业四一六医院核应激医学中心成都610051 成都医学院检验医学院成都610500

目的探讨獐牙菜苦苷对电离辐射所致肺损伤的防护作用和机制。方法实验将人支气管上皮细胞(Beas⁃2B)和人胚肺成纤维细胞(HELF)分为对照组、10 Gy X射线照射组、照射+獐牙菜苦苷组,检测獐牙菜苦苷对X射线照射后的影响。检测射线暴露后细... 详细信息

目的探讨獐牙菜苦苷对电离辐射所致肺损伤的防护作用和机制。方法实验将人支气管上皮细胞(Beas⁃2B)和人胚肺成纤维细胞(HELF)分为对照组、10 Gy X射线照射组、照射+獐牙菜苦苷组,检测獐牙菜苦苷对X射线照射后的影响。检测射线暴露后细胞的乳酸脱氢酶(LDH)释放量、细胞的增殖情况、DNA损伤水平、活性氧(ROS)水平、脂质过氧化物水平、铁离子水平、铁死亡相关蛋白SLC7A11(xCT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GPX4)含量变化。为了验证獐牙菜苦苷在体内对放射性肺损伤是否具有防护作用,建立放射性肺损伤小鼠模型,将C57BL/6J雄性小鼠分为对照组、照射组、照射+獐牙菜苦苷组,每组5只,对小鼠胸部进行15 Gy X射线照射,照射后30 d收集小鼠肺组织及血清。观察受照小鼠肺组织病理变化、肺组织氧化应激水平及肺组织中γ⁃H2AX、GPX4含量变化和炎性因子水平变化。结果与照射组相比,照射+獐牙菜苦苷组(130μmol/l)细胞的增殖率及克隆形成率明显上升(Beas⁃2B:t=5.50~5.92,P<0.05;HELF:t=3.79~5.51,P<0.05);LDH释放率、ROS含量、脂质过氧化物水平及铁离子含量显著降低(Beas⁃2B:t=3.00~16.99,P<0.05;HELF:t=4.10~10.97,P<0.05)。DNA损伤水平显著下降(Beas⁃2B:t=5.69~8.27,P<0.05;HELF:t=3.44~14.77,P<0.05)。xCT和GPX4蛋白表达发生上调(Beas⁃2B:t=2.90~3.27,P<0.05;HELF:t=3.01~7.07,P<0.05)。体内实验中,与照射组相比,獐牙菜苦苷预处理可有效提升小鼠肺组织中GSH和GPX4含量(t=2.31~2.65,P<0.05),降低MDA和γ⁃H2AX含量(t=2.71~4.19,P<0.05),同时降低小鼠血清中IL⁃6及IL⁃1β水平(t=3.16~4.56,P<0.05)。结论獐牙菜苦苷可以通过降低电离辐射诱导的DNA损伤和氧化应激水平,从而对电离辐射引起的肺损伤发挥防护作用,为研发新型放射性肺损伤防护剂提供思路。

关键词：獐牙菜苦苷放射性肺损伤 DNA损伤铁死亡

中性粒细胞胞外诱捕网在炎症相关疾病及肿瘤中的作用

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生命科学 2024年第6期36卷 857-866页

作者：曾田一李丹常文科郝永伟杨志军解丽芹新乡医学院生命科学技术学院新乡453003 新乡医学院第三附属医院新乡453003

当外源病原体入侵或机体自身发生某种炎症时,中性粒细胞会释放一种类似于纤维网状结构的物质,即中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)。NETs在机体中发挥杀灭病原体及参与免疫应答的生理作用,同时在肿瘤发生发展... 详细信息

当外源病原体入侵或机体自身发生某种炎症时,中性粒细胞会释放一种类似于纤维网状结构的物质,即中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)。NETs在机体中发挥杀灭病原体及参与免疫应答的生理作用,同时在肿瘤发生发展的不同阶段也发挥着促进肿瘤细胞增殖或远端扩散的作用。本文综述了NETs的形成、NETs在炎症相关疾病及肿瘤发生发展过程中的作用机制的研究进展,并探讨了NETs作为靶点的治疗策略。

关键词：中性粒细胞胞外诱捕网炎症相关疾病肿瘤治疗靶点

经颈静脉肝内门体分流术治疗肝硬化食管胃静脉曲张出血伴肌肉减少症患者远期预后分析

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中华肝脏病杂志 2024年第8期32卷 744-752页

作者：王曦旋张明尹晓春高波顾丽红李炜肖江强张松张玮张鑫邹晓平王雷诸葛宇征张峰南京大学医学院附属鼓楼医院消化内科南京210000 东南大学医学院第二临床医学院南京210000 南京大学医学院附属鼓楼医院临床营养科南京210000 南京大学医学院附属鼓楼医院医学影像科南京210000

目的探讨经颈静脉肝内门体分流术(TIPS)是否能改善肝硬化食管胃静脉曲张破裂出血(EGVB)合并肌肉减少症患者的预后。方法采用回顾性队列研究,选择2017年1月至2019年12月接受标准治疗或TIPS治疗的肝硬化EGVB患者,共464例。治疗后长期进行... 详细信息

目的探讨经颈静脉肝内门体分流术(TIPS)是否能改善肝硬化食管胃静脉曲张破裂出血(EGVB)合并肌肉减少症患者的预后。方法采用回顾性队列研究,选择2017年1月至2019年12月接受标准治疗或TIPS治疗的肝硬化EGVB患者,共464例。治疗后长期进行规律随访。主要结局是无移植生存期;次要终点为再出血、显性肝性脑病(OHE)。对所得数据进行统计学分析。连续变量资料组间比较使用t检验、Wilcoxon秩和检验,分类变量组间比较使用χ^(2)检验或Fisher确切概率法检验。结果纳入研究患者的年龄(55.27±13.86)岁,男性286例。203例患者合并肌肉减少症,261例患者为非合并肌肉减少症。中位随访时间为43个月;2组患者随访时间差异无统计学意义。整体队列中,TIPS组与标准治疗组患者的无移植生存期差异无统计学意义(HR=1.31,95%CI:0.97~1.78,P=0.08)。对于合并肌肉减少症的肝硬化患者,TIPS组无移植生存期较长(中位生存期:47.76个月与52.45个月,χ^(2)=4.09;HR=1.55,95CI:1.01~2.38,P=0.04)。对于非合并肌肉减少症的患者,2种治疗患者的无移植生存期差异无统计学意义(HR=1.22,95%CI:0.78~1.88,P=0.39)。无论是否合并肌肉减少症,TIPS均可延长患者的无再出血时间(非合并肌肉减少症患者:中位再出血时间分别为39.48个月与53.61个月,χ^(2)=18.68;HR=2.47,95CI:1.67~3.65,P0.05)。结论在合并肌肉减少症的肝硬化伴EGVB患者的二级预防中,相较标准治疗,TIPS可明显延长患者的无移植生存期;而在非合并肌肉减少症的肝硬化EGVB患者中其优势并不突出。

关键词：肝硬化食管胃静脉曲张出血肌肉减少症经颈静脉肝内门体分流术治疗