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伯氏疟原虫ANKA株感染小鼠的T细胞、NK细胞及细胞因子变化

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畜牧兽医学报 2022年第11期53卷 4008-4018页

作者：张义伟苏紫薇李其龙陈冉姜宁重要家畜疫病研究教育部重点实验室沈阳农业大学动物科学与医学学院沈阳110866

旨在系统分析伯氏疟原虫感染引起宿主T细胞、NK细胞、Tim-3表达及细胞因子的变化。选取64只雌性C57BL/6小鼠随机分为8组,每组8只,分别于感染后0、4、7、9、11、13、16和19 d获取小鼠脾及外周血免疫细胞,利用流式细胞术检测小鼠主要免疫... 详细信息

旨在系统分析伯氏疟原虫感染引起宿主T细胞、NK细胞、Tim-3表达及细胞因子的变化。选取64只雌性C57BL/6小鼠随机分为8组,每组8只,分别于感染后0、4、7、9、11、13、16和19 d获取小鼠脾及外周血免疫细胞,利用流式细胞术检测小鼠主要免疫细胞亚群及免疫检查点分子Tim-3表达水平的变化;同时检测血清中细胞因子的变化。结果表明,感染疟原虫后,小鼠脾CD3^(+)CD4^(+) T细胞、CD3^(+)CD8^(+) T细胞及NK细胞的比例均逐渐降低(P研究提示了从宿主免疫抑制角度研究疟原虫感染的重要性。

关键词：伯氏疟原虫 T细胞 NK细胞 Tim-3 细胞因子

1株黄曲霉颉颃菌的鉴定及其抑菌活性成分分析

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中国畜牧兽医 2022年第5期49卷 1828-1839页

作者：李天溪党萌龙淼沈阳农业大学动物科学与医学学院重要家畜疫病研究教育部重点实验室沈阳110161

【目的】筛选黄曲霉颉颃菌,探究其最佳培养条件及有效抗菌成分,为实际生产中应用生物防治方法抑制黄曲霉污染提供新的理论依据。【方法】通过平板对峙法及分子生物学鉴定方法对待测菌株进行筛选鉴定。以抑菌率作为衡量标准,判断所得黄... 详细信息

【目的】筛选黄曲霉颉颃菌,探究其最佳培养条件及有效抗菌成分,为实际生产中应用生物防治方法抑制黄曲霉污染提供新的理论依据。【方法】通过平板对峙法及分子生物学鉴定方法对待测菌株进行筛选鉴定。以抑菌率作为衡量标准,判断所得黄曲霉颉颃菌的最佳培养温度、培养时间、接种量、转速、pH及装液量。通过硫酸铵沉淀法从颉颃菌无菌发酵上清液中提取蛋白,观测粗提物对黄曲霉菌丝生长的影响。通过离子交换色谱和凝胶过滤色谱进一步纯化粗提蛋白,并进行质谱测序及序列对比分析,筛选鉴定颉颃菌产生的有效抑菌成分。【结果】筛选到1株解淀粉芽孢杆菌B10(菌种保藏号CCTCCNO:M2018353)。最佳培养条件为温度40℃,培养时间36 h,接种量3%,转速120 r/min,pH 6.0,装液量30 mL,最大抑菌率可达46.56%。其粗提蛋白能有效抑制黄曲霉生长,破坏菌丝正常形态,并从中筛选出几丁质结合蛋白、壳聚糖酶、葡聚糖酶等8种可能的有效抑菌成分。【结论】本试验分离鉴定出1株抑制黄曲霉正常生长发育的解淀粉芽孢杆菌B10,其产生的多种蛋白成分对黄曲霉有显著抑菌活性。

关键词：黄曲霉解淀粉芽孢杆菌筛选鉴定抑菌蛋白分离纯化

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伏马菌素B脱毒研究进展

动物营养学报 2023年

作者：李露露王硕王晓萱龙淼沈阳农业大学动物科学与医学学院重要家畜疫病研究教育部重点实验室农业农村部反刍动物重大疫病防控重点实验室(东部)

伏马菌素B1(FB1)是由镰刀菌产生的水溶性代谢产物,存在于镰刀菌污染了的谷物、油料作物、坚果、饲草和饲料中,是常见的真菌毒素之一。FB1会对神经系统、呼吸系统、消化系统和生殖系统产生不同毒性作用,给农牧业造成不可估量的经济损失... 详细信息

伏马菌素B1(FB1)是由镰刀菌产生的水溶性代谢产物,存在于镰刀菌污染了的谷物、油料作物、坚果、饲草和饲料中,是常见的真菌毒素之一。FB1会对神经系统、呼吸系统、消化系统和生殖系统产生不同毒性作用,给农牧业造成不可估量的经济损失。如何对FB1进行脱毒,以降低其毒性作用,是目前研究的热点。因此,本文对FB1的物理脱毒、化学脱毒、生物脱毒及其应用进行综述,重点对常用于FB1生物脱毒的菌株和酶及其脱毒效果、脱毒机制进行了深入探讨,以期为提高FB1脱毒效率和开发新的FB1脱毒方法提供参考和思路。

关键词：伏马菌素B 饲料脱毒微生物酶

解淀粉芽孢杆菌B10抑制黄曲霉生长活性物质克隆表达及作用效果研究

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动物营养学报 2023年第12期35卷 8024-8035页

作者：李天溪龙淼沈阳农业大学动物科学与医学学院农业农村部反刍动物重大疫病防控重点实验室(东部)重要家畜疫病研究教育部重点实验室沈阳110000

本试验旨在从解淀粉芽孢杆菌B10中克隆表达出能够抑制黄曲霉生长的活性物质,验证其黄曲霉抑制活性,明确其抗菌作用方式。试验通过克隆表达及亲和层析纯化操作成功得到重组1,3-1,4-β-D-葡聚糖4-葡聚糖水解酶(B10-Glu)及抗菌肽LCI(B10-LC... 详细信息

本试验旨在从解淀粉芽孢杆菌B10中克隆表达出能够抑制黄曲霉生长的活性物质,验证其黄曲霉抑制活性,明确其抗菌作用方式。试验通过克隆表达及亲和层析纯化操作成功得到重组1,3-1,4-β-D-葡聚糖4-葡聚糖水解酶(B10-Glu)及抗菌肽LCI(B10-LCI),并对二者基本生物学信息进行分析。平板抑菌试验验证抑菌活性后,探究B10-Glu、B10-LCI最小抑菌浓度(MIC)及环境条件对二者抑菌效果的影响。通过电镜观察、细胞膜通透性及线粒体膜电位变化、活性氧(ROS)含量及过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性检测,探究B10-Glu、B10-LCI黄曲霉抑制方式。结果表明:1)B10-Glu及B10-LCI的表观分子质量分别为25及12 ku,与预测分子质量较为接近。B10-LCI最佳诱导条件为16℃诱导16 h,B10-Glu为25℃诱导12 h。2)B10-Glu及B10-LCI对黄曲霉均有清晰明显的抑制效果,抑菌圈半径分别为1.14及1.17 cm。MIC分别为0.94及0.96μg/mL。3)B10-Glu及B10-LCI均能抑制黄曲霉孢子形成;破坏其菌丝形态及细胞内部结构;提高黄曲霉细胞膜通透性,致使细胞内容物流失;破坏线粒体等细胞器,促使ROS积累并降低细胞抗氧化水平。综上所述,B10-Glu及B10-LCI能通过抑制黄曲霉生长繁殖过程、破坏其细胞结构来发挥二者的优良抗黄曲霉作用效果。

关键词：解淀粉芽孢杆菌黄曲霉生长抑制葡聚糖水解酶抗菌肽LCI

探究式教学法在“畜牧微生物学”实验课中的应用及思考

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微生物学通报 2024年第4期51卷 1101-1108页

作者：陈晓月刘金玲张欢文雪霞韩杰重要家畜疫病研究教育部重点实验室农业农村部反刍动物重大疫病防控重点实验室(东部)沈阳农业大学动物科学与医学学院辽宁沈阳110161

畜牧微生物学是一门理论和实践并重的课程,强调学生实践能力的培养。传统的教学法不能满足培养创新人才的需求。为提高教学效果,提升学生运用微生物知识分析和解决实际问题的能力,将探究式教学法引入实验教学中。通过制定不同类型的探... 详细信息

畜牧微生物学是一门理论和实践并重的课程,强调学生实践能力的培养。传统的教学法不能满足培养创新人才的需求。为提高教学效果,提升学生运用微生物知识分析和解决实际问题的能力,将探究式教学法引入实验教学中。通过制定不同类型的探究任务替代传统实验内容,调动学生参与探究过程,并配套评价体系,实现学生独立完成探究任务的目的。经过四轮教学摸索,初步形成了“基本技能培训—任务制定—项目实施—任务评价”四环节的实验课教学模式。该模式更能激发学生的创新动力,提高学生的科研素质和综合能力。

关键词：畜牧微生物学探究式教学法创新动力

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虾青素的生物学功能及其在畜禽生产中的应用

动物营养学报 2023年第12期35卷 7617-7624页

作者：石阳井锶源王晓萱龙淼沈阳农业大学动物科学与医学学院重要家畜疫病研究教育部重点实验室农业农村部反刍动物重大疫病防控重点实验室(东部)沈阳110161

虾青素是一种广泛存在于海藻、真菌和甲壳类动物中的天然类胡萝卜素,具有广泛的生物学活性,如抗氧化、抗炎、抗肿瘤、免疫调节和神经保护等。虾青素是一种天然抗氧化剂,能够降低机体患病风险,在无抗、安全和绿色养殖中具有巨大潜力与应... 详细信息

虾青素是一种广泛存在于海藻、真菌和甲壳类动物中的天然类胡萝卜素,具有广泛的生物学活性,如抗氧化、抗炎、抗肿瘤、免疫调节和神经保护等。虾青素是一种天然抗氧化剂,能够降低机体患病风险,在无抗、安全和绿色养殖中具有巨大潜力与应用前景。目前,对虾青素的研究已经表明其在畜禽生产上的应用潜力。本文主要综述了虾青素的主要生物学功能及其在畜禽生产中应用的研究进展,以期为虾青素作为功能性饲料添加剂在畜牧生产上的研究与应用提供参考。

关键词：虾青素生物学功能动物生产应用

弓形虫MIC1蛋白在杆状病毒系统中的表达及活性分析

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华中农业大学学报 2024年第1期43卷 210-218页

作者：李响张小涵李美琪陈冉冯颖李林桑晓宇杨娜沈阳农业大学动物科学与医学学院/重要家畜疫病研究教育部重点实验室沈阳110866 辽宁成大生物股份有限公司沈阳110179

为构建可溶性表达弓形虫MIC1蛋白质的重组杆状病毒株并分析重组蛋白质的活性,通过PCR扩增弓形虫mic1基因的编码序列并连接到pFastBac 1质粒中,将重组的转移质粒转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒,转染Sf9细胞后连续培养... 详细信息

为构建可溶性表达弓形虫MIC1蛋白质的重组杆状病毒株并分析重组蛋白质的活性,通过PCR扩增弓形虫mic1基因的编码序列并连接到pFastBac 1质粒中,将重组的转移质粒转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒,转染Sf9细胞后连续培养3代获得重组杆状病毒株。结果显示,Sf9细胞在感染后的第3天出现典型的细胞病变;间接免疫荧光和Western blot试验结果表明MIC1重组蛋白质在感染的Sf9细胞中成功可溶性表达;纯化的MIC1重组蛋白质不仅具有结合唾液酸乳糖的能力,同时能够刺激Balb/c小鼠产生较高水平的特异性抗体(>1∶25600)。以上结果表明,通过杆状病毒表达系统可获得具有生物学活性的弓形虫MIC1重组蛋白质。

关键词：弓形虫 MIC1蛋白杆状病毒系统活性分析

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赭曲霉毒素A对动物的危害及脱毒研究进展

动物营养学报 2024年第1期36卷 107-114页

作者：王晓萱赵琳琳李露露龙淼沈阳农业大学动物科学与医学学院重要家畜疫病研究教育部重点实验室农业农村部反刍动物重大疫病防控重点实验室(东部)沈阳110161

赭曲霉毒素A(OTA)是一种由曲霉或青霉产生的次级代谢产物,广泛污染谷物、水果和坚果等农产品和饲料,造成严重的经济损失。此外,越来越多的证据表明,OTA通过多种毒性作用(肾毒性、肝毒性、肠毒性、致癌性、致畸性和免疫毒性)对人类和动... 详细信息

赭曲霉毒素A(OTA)是一种由曲霉或青霉产生的次级代谢产物,广泛污染谷物、水果和坚果等农产品和饲料,造成严重的经济损失。此外,越来越多的证据表明,OTA通过多种毒性作用(肾毒性、肝毒性、肠毒性、致癌性、致畸性和免疫毒性)对人类和动物的健康造成巨大威胁。因此,研究OTA的毒性机制,从多方面寻求解毒方法迫在眉睫。本文综述了OTA对动物的危害及其脱毒方法,重点讨论了各种OTA脱毒方法的优势和劣势,并对提高OTA脱毒效率的方法进行了深入探讨,以期降低饲料OTA的含量,有助于减少OTA对动物健康造成的危害。

关键词：赭曲霉毒素A 危害脱毒方法

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伏马菌素B_(1)脱毒研究进展

动物营养学报 2024年第1期36卷 115-123页

作者：李露露王硕王晓萱龙淼沈阳农业大学动物科学与医学学院重要家畜疫病研究教育部重点实验室农业农村部反刍动物重大疫病防控重点实验室(东部)沈阳110161

伏马菌素B_(1)(FB_(1))是由镰刀菌产生的水溶性代谢产物,存在于镰刀菌污染了的谷物、油料作物、坚果、饲草和饲料中,是常见的真菌毒素之一。FB_(1)会对神经系统、呼吸系统、消化系统和生殖系统产生不同毒性作用,给农牧业造成不可估量的... 详细信息

伏马菌素B_(1)(FB_(1))是由镰刀菌产生的水溶性代谢产物,存在于镰刀菌污染了的谷物、油料作物、坚果、饲草和饲料中,是常见的真菌毒素之一。FB_(1)会对神经系统、呼吸系统、消化系统和生殖系统产生不同毒性作用,给农牧业造成不可估量的经济损失。如何对FB_(1)进行脱毒,以降低其毒性作用,是目前研究的热点。因此,本文对FB_(1)的物理脱毒、化学脱毒、生物脱毒及其应用进行综述,重点对常用于FB_(1)生物脱毒的菌株和酶及其脱毒效果、脱毒机制进行了深入探讨,以期为提高FB_(1)脱毒效率和开发新的FB_(1)脱毒方法提供参考和思路。

关键词：伏马菌素B_(1) 饲料脱毒微生物酶