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粪肠球菌介导的日本血吸虫重组疫苗的构建、鉴定及表达

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中华地方病学杂志 2023年第3期42卷 173-177页

作者：李文桂欧兴坤何爱琳重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016

目的:构建粪肠球菌(Efs)介导的日本血吸虫(Sj)重组疫苗(rEfs-Sj26GST疫苗),并研究Sj26GST-GST融合蛋白在重组疫苗中的表达情况。方法:将pGEX-Sj26GST重组质粒电穿孔转化Efs ATCC47077株感受态,构建rEfs-Sj26GST疫苗,提取质粒进行PCR鉴定... 详细信息

目的:构建粪肠球菌(Efs)介导的日本血吸虫(Sj)重组疫苗(rEfs-Sj26GST疫苗),并研究Sj26GST-GST融合蛋白在重组疫苗中的表达情况。方法:将pGEX-Sj26GST重组质粒电穿孔转化Efs ATCC47077株感受态,构建rEfs-Sj26GST疫苗,提取质粒进行PCR鉴定;经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blot)对表达产物进行分析和鉴定。结果:经PCR鉴定,扩增出大小约676 bp的片段,与Sj26GST扩增片段长度相符。经SDS-PAGE分析,得到相对分子质量约52 × 10 3的条带,与Sj26GST-GST融合蛋白条带相符。Western blot结果显示,rEfs-Sj26GST疫苗表达的Sj26GST-GST融合蛋白可被Sj感染者血清特异性识别。结论:成功构建了rEfs-Sj26GST疫苗,Sj感染者血清可特异性识别重组疫苗表达的Sj26GST-GST融合蛋白。

关键词：粪肠球菌日本血吸虫重组疫苗 Sj26GST-GST融合蛋白

铜绿假单胞菌重组Bb(pGEX-OprF-I)疫苗诱导的保护力及细胞免疫应答

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中国病原生物学杂志 2019年第11期14卷 1282-1285页

作者：梁诚诚李文桂重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所

目的研究铜绿假单胞菌重组Bb(pGEX-OprF-I)疫苗免疫及PA01株攻击小鼠后,其诱导产生的保护力及细胞免疫应答。方法将21只BALB/c小鼠随机分为3组,分别为疫苗组、空载体对照组和Bb对照组,取5×10^8菌落形成单位(CFU)疫苗经口灌胃,每周3次,... 详细信息

目的研究铜绿假单胞菌重组Bb(pGEX-OprF-I)疫苗免疫及PA01株攻击小鼠后,其诱导产生的保护力及细胞免疫应答。方法将21只BALB/c小鼠随机分为3组,分别为疫苗组、空载体对照组和Bb对照组,取5×10^8菌落形成单位(CFU)疫苗经口灌胃,每周3次,连续3周。初次免疫后4周用5×10^7 CFU的PA01株进行滴鼻攻击。攻击后2 d杀鼠,取肺,计数肺细菌负荷;取脾,制备脾细胞悬液,MTT法检测脾细胞增殖情况,流式细胞术检测脾CD4^+、CD8^+ T细胞亚群变化和脾细胞凋亡。结果与两个对照组的肺细菌菌落数(7.37±0.89)×10^8 CFU和(7.42±0.80)×10^8 CFU相比,免疫小鼠的菌落数量(0.27±0.02)×10^8 CFU减少;疫苗组的脾细胞增殖活性增强;CD4^+ T细胞比例增加;脾细胞凋亡率降低。结论铜绿假单胞菌重组Bb(pGEX-OprF-I)疫苗可诱导小鼠产生一定的保护力和有效的细胞免疫应答。

关键词：铜绿假单胞菌重组Bb(pGEX-OprF-I)疫苗免疫

细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的动态观察

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免疫学杂志 2009年第1期25卷 31-33,38页

作者：李文桂朱佑明王鸿重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所

目的动态观察细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的变化。方法疫苗分别采用口服灌胃和鼻腔内接种免疫Balb/c鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16和18周各剖杀4只小鼠取脾,分离脾细胞,用EgAg或ConA刺激培养,收集脾... 详细信息

目的动态观察细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的变化。方法疫苗分别采用口服灌胃和鼻腔内接种免疫Balb/c鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16和18周各剖杀4只小鼠取脾,分离脾细胞,用EgAg或ConA刺激培养,收集脾细胞培养上清液,用试剂盒检测脾细胞培养上清液的IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平,同时设有PBS对照。结果口服免疫组的IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平分别在免疫后4～10周、2～10周、2～18周和10周升高,分别在免疫后10、10、6和10周达最高水平;鼻腔内接种组的IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平分别在免疫后2～18周、2～10周、2～18周和10周升高,分别在免疫后10、8、12和10周达最高水平。结论细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗在免疫早期(2～10周)可诱导小鼠脾细胞产生Th1和Th2混合型细胞因子。

关键词：细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗细胞因子

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载体介导的猪瘟病毒囊膜蛋白疫苗的研制现状

中国病原生物学杂志 2023年第1期18卷 105-110,116页

作者：李文桂陈雅棠重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016

猪瘟病毒(CSFV)是一种常见的猪场感染病毒,常引起猪瘟,其防治疫苗研制备受关注。囊膜蛋白是一种有效的疫苗候选分子,本文综述伪狂犬病毒(rPRV-E2)、鸡痘病毒(rFPV-E0/E2)、Semliki森林病毒(rSFV-E2)、水疱性口炎病毒(rVSV-E2)、猪痘病毒... 详细信息

猪瘟病毒(CSFV)是一种常见的猪场感染病毒,常引起猪瘟,其防治疫苗研制备受关注。囊膜蛋白是一种有效的疫苗候选分子,本文综述伪狂犬病毒(rPRV-E2)、鸡痘病毒(rFPV-E0/E2)、Semliki森林病毒(rSFV-E2)、水疱性口炎病毒(rVSV-E2)、猪痘病毒(rSPV-E2)、腺病毒(rAdV-E2)、牛痘病毒(rVV-E2)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(rPRRSV-E2)、杆状病毒(rBuV-E2)、猪霍乱沙门氏菌(rSc-E2)、鼠伤寒沙门氏菌(rSt-E2)、干酪乳杆菌(rLc-VP2-E290/E2-Tα1)、根癌农杆菌(rAt-E2)和酵母(rPP-E2)等载体介导的CSFV囊膜蛋白疫苗的构建及其免疫机制等方面研制现状。

关键词：猪瘟病毒囊膜蛋白疫苗综述

慢性乙型肝炎合并高脂血症患者的抗病毒治疗管理

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国际流行病学传染病学杂志 2024年第3期51卷 205-210页

作者：童可欣黄文祥重庆医科大学附属第一医院老年科重庆400010

我国60岁以上人群HBV感染率最高, 该人群也是动脉粥样硬化性心血管疾病的高发人群, 需注意血脂管理。研究发现, 抗病毒治疗对HBV感染者的血脂水平可能有影响。本文通过对已有的相关文献进行综述, 探讨血脂异常和降脂药物对于HBV感染者... 详细信息

我国60岁以上人群HBV感染率最高, 该人群也是动脉粥样硬化性心血管疾病的高发人群, 需注意血脂管理。研究发现, 抗病毒治疗对HBV感染者的血脂水平可能有影响。本文通过对已有的相关文献进行综述, 探讨血脂异常和降脂药物对于HBV感染者预后的影响, 以及抗病毒治疗对于血脂和动脉粥样硬化性心血管疾病的影响, 以期能为CHB合并血脂异常患者的临床管理提供思路。

关键词：乙型肝炎慢性核苷(酸)类似物心血管疾病血脂抗病毒治疗

铜绿假单胞菌重组质粒pGEX-OprF-I构建、鉴定及其在大肠埃希菌中的表达效率

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中国病原生物学杂志 2019年第5期14卷 534-538页

作者：梁诚诚李文桂重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所

目的构建并鉴定铜绿假单胞菌重组质粒pGEX-OprF-I,观察其在大肠埃希菌中的表达效率。方法以铜绿假单胞菌PA01株的DNA为模板,PCR扩增OprF和OprI抗原编码基因,采用基因拼接法(gene SOEing)剪切OprF和OprI得到OprF-I融合基因,酶切后与表达... 详细信息

目的构建并鉴定铜绿假单胞菌重组质粒pGEX-OprF-I,观察其在大肠埃希菌中的表达效率。方法以铜绿假单胞菌PA01株的DNA为模板,PCR扩增OprF和OprI抗原编码基因,采用基因拼接法(gene SOEing)剪切OprF和OprI得到OprF-I融合基因,酶切后与表达载体pGEX-1λT连接,构建重组质粒pGEX-OprF-I并转化入大肠埃希菌中,抽提质粒进行双酶切和PCR鉴定。重组菌用异丙硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,采用SDS-PAGE和western blot分析和鉴定表达产物。结果基因拼接法获得1289 bp的OprF-I融合基因;其连接产物经双酶切和PCR鉴定证实该基因成功插入pGEX-1λT中。重组质粒转化DE3后经IPTG诱导,SDS-PAGE检测显示重组菌表达预期约68×10~3的融合蛋白,该蛋白约占菌体总量的18%。Western blot检测Pa感染的鼠血清可特异性识别该融合蛋白。结论成功构建并鉴定了铜绿假单胞菌重组质粒pGEX-OprF-I,转化大肠埃希菌后高效表达OprF-I融合蛋白,该蛋白具有反应原性。

关键词：铜绿假单胞菌重组质粒PGEX-OprF-I 大肠埃希菌表达效率

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细粒棘球绦虫Eg95疫苗研究进展

中国人兽共患病学报 2006年第11期22卷 1070-1072,1077页

作者：李文桂陈雅棠重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所

囊型包虫病(Cystic echinococcosis,CE)是由细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)的续绦期幼虫寄生在人体肝、肺等脏器引起的一种严重危害人体健康的人畜共患寄生虫病,是中国卫生部规划防治的五大寄生虫病之一.

关键词：细粒棘球绦虫 Eg95 人畜共患寄生虫病囊型包虫病疫苗人口流动中国卫生部人体健康

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隐孢子虫分子生物学研究进展

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1995年第2期13卷 145-149页

作者：马良陈雅棠重庆医科大学传染病寄生虫病研究所

隐孢子虫（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）为一属主要寄生于消化道上皮引起人和多种动物腹泻的原虫，因其在婴幼儿、免疫缺陷患者，尤其是获得性免疫缺陷综合征（ＡＩＤＳ）病人中感染率较高且危害严重而倍受人们重视。近年来国外一... 详细信息

隐孢子虫（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）为一属主要寄生于消化道上皮引起人和多种动物腹泻的原虫，因其在婴幼儿、免疫缺陷患者，尤其是获得性免疫缺陷综合征（ＡＩＤＳ）病人中感染率较高且危害严重而倍受人们重视。近年来国外一些学者相继利用核酸限制性片段长度多...

关键词：隐孢子虫分子生物学

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营养因素与结核病患者预后相关研究进展

中国感染与化疗杂志 2024年第3期24卷 366-370页

作者：谭隽怡向明确李天驹石小枫重庆医科大学附属第二医院感染科重庆400010 重庆医科大学第二临床学院重庆市第九人民医院感染科

结核病(tuberculosis)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染引起的一种慢性传染性疾病,已存在数千年,并将持续成为主要的全球公共卫生问题。根据世界卫生组织(WHO)发布的《2022年全球结核病报告》显示,2021年共计报告... 详细信息

结核病(tuberculosis)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染引起的一种慢性传染性疾病,已存在数千年,并将持续成为主要的全球公共卫生问题。根据世界卫生组织(WHO)发布的《2022年全球结核病报告》显示,2021年共计报告新发结核病1060万例,死亡160万例,其中中国的结核病负担在报告结核病数据的国家和地区中排第三[1]。因社会、环境等因素的变化,其中营养不良的风险在逐渐扩大,结核病的防治工作仍面临更严峻的挑战。而营养不良也被认为是结核病复发的独立危险因素,是治疗失败的重要、潜在可逆的危险因素[2]。

关键词：结核病营养不良抗结核治疗预后