粪肠球菌介导的日本血吸虫重组疫苗的构建、鉴定及表达
Construction,identification and expression of recombinant Schistosoma japonicum vaccine mediated by Enterococcus faecalis作者机构:重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016
出 版 物:《中华地方病学杂志》 (Chinese Journal of Endemiology)
年 卷 期:2023年第42卷第3期
页 面:173-177页
学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金(30801052、30671835、30500423、30200239)
主 题:粪肠球菌 日本血吸虫 重组疫苗 Sj26GST-GST融合蛋白
摘 要:目的:构建粪肠球菌(Efs)介导的日本血吸虫(Sj)重组疫苗(rEfs-Sj26GST疫苗),并研究Sj26GST-GST融合蛋白在重组疫苗中的表达情况。方法:将pGEX-Sj26GST重组质粒电穿孔转化Efs ATCC47077株感受态,构建rEfs-Sj26GST疫苗,提取质粒进行PCR鉴定;经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blot)对表达产物进行分析和鉴定。结果:经PCR鉴定,扩增出大小约676 bp的片段,与Sj26GST扩增片段长度相符。经SDS-PAGE分析,得到相对分子质量约52 × 10 3的条带,与Sj26GST-GST融合蛋白条带相符。Western blot结果显示,rEfs-Sj26GST疫苗表达的Sj26GST-GST融合蛋白可被Sj感染者血清特异性识别。 结论:成功构建了rEfs-Sj26GST疫苗,Sj感染者血清可特异性识别重组疫苗表达的Sj26GST-GST融合蛋白。