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基于p38 MAPK信号通路探讨电针对大鼠失神经骨骼肌萎缩的影响

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中国针灸 2025年第01期 61-70页

作者：邱玮唐成林廖偲杨云昊杨燕杨康彭万春重庆医科大学中医药学院中医药防治代谢性疾病重庆市重点实验室

目的：观察电针对失神经骨骼肌萎缩大鼠步态、氧化应激、炎性反应及蛋白质降解的影响，探讨电针缓解失神经骨骼肌萎缩的可能机制。方法：将40只8周龄雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、p38MAPK抑制剂组，每组10只。模型组、... 详细信息

目的：观察电针对失神经骨骼肌萎缩大鼠步态、氧化应激、炎性反应及蛋白质降解的影响，探讨电针缓解失神经骨骼肌萎缩的可能机制。方法：将40只8周龄雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、p38MAPK抑制剂组，每组10只。模型组、电针组、p38 MAPK抑制剂组予手术横断右侧坐骨神经构建大鼠失神经骨骼肌萎缩模型，假手术组仅暴露神经，不离断。造模成功1 d后，电针组大鼠予电针干预，穴取右侧“环跳”“足三里”，选择连续波，频率2 Hz，电流1 mA，每次15 min，每天1次，每周6次；p38 MAPK抑制剂组予SB203580(5 mg/kg)腹腔注射，每天1次，每周6次，共干预3周。干预结束后，采用Cat Walk XT 10.6动物步态分析仪评定大鼠步行功能。取材后计算大鼠腓肠肌湿重比；HE染色观察大鼠腓肠肌肌纤维形态与横截面积；ELISA法检测大鼠腓肠肌白细胞介素（IL）-6、IL-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α含量；生化羟胺法检测大鼠腓肠肌超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量；免疫组化法和Western blot法检测大鼠腓肠肌p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）、磷酸化（p）-p38 MAPK、肌肉萎缩盒F基因（Atrogin-1）、肌肉环状指基因1(Murf-1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)的表达。结果：与假手术组比较，模型组大鼠站立持续时间、摆动时间、步行周期增加（P<0.001），最大接触时间的足印面积、打印面积、最大接触时间的平均强度、平均强度、摆动速度、步周长减少（P<0.001），腓肠肌湿重比和肌纤维横截面积降低（P<0.001），腓肠肌IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA含量升高（P<0.001）,SOD含量降低（P<0.001），腓肠肌p-p38 MAPK、Atrogin-1、Murf-1阳性表达和蛋白表达升高（P<0.001）,Nrf2、HO-1阳性表达和蛋白表达降低（P<0.001）；与模型组比较，电针组和p38MAPK抑制剂组大鼠站立持续时间、摆动时间、步行周期减少（P<0.01），最大接触时间的足印面积、打印面积、最大接触时间的平均强度、平均强度、摆动速度、步周长增加（P<0.01），腓肠肌湿重比和肌纤维横断面积增加（P<0.01,P<0.05），腓肠肌IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA含量降低（P<0.05,P<0.01）,SOD含量升高（P<0.01,P<0.05），腓肠肌p-p38 MAPK、Atrogin-1、Murf-1阳性表达和蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）,Nrf2、HO-1阳性表达和蛋白表达升高（P<0.01,P<0.05）。结论：电针可能通过介导失神经骨骼肌萎缩大鼠骨骼肌p38MAPK信号通路，进而抑制氧化应激、炎性反应和蛋白质降解，缓解骨骼肌萎缩。

关键词：失神经骨骼肌萎缩电针 p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路步态分析氧化应激炎性反应

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红外热成像在肺部疾病应用的新进展

中国全科医学 2025年第8期28卷 1012-1016+1022页

作者：杨佳诺王冠理杨佳夫何嘉豪陈舒敏沈毅李娟任妮刘春丽邓方阁广州医科大学附属第一医院广州呼吸健康研究院呼吸内科汕头大学医学院附属肿瘤医院放射科

红外热成像作为一种具备无创性、无辐射性的非接触式临床检测技术，通过检测人体表面温度并重建温度分布图像，可以早期识别多种疾病，并实现早期诊断及干预。本文着重回顾了红外热成像在急性呼吸道传染性疾病、睡眠呼吸暂停综合征、中... 详细信息

红外热成像作为一种具备无创性、无辐射性的非接触式临床检测技术，通过检测人体表面温度并重建温度分布图像，可以早期识别多种疾病，并实现早期诊断及干预。本文着重回顾了红外热成像在急性呼吸道传染性疾病、睡眠呼吸暂停综合征、中医肺疾病研究、新生儿重症监护以及肺栓塞早期筛查等肺部疾病领域中的应用及取得的相关研究进展，具有重要的临床指导意义。红外热成像技术作为一种功能性成像，核心优势在于“早”，不同于疾病过程结构性的改变，疾病早期常出现血流动力学紊乱、局部炎症等所致局部异常温度分布的功能性改变，借助基于热敏性的红外热成像技术可以实现疾病的早期诊断、早期干预以及动态监测等。

关键词：肺疾病红外热成像睡眠呼吸暂停综合征肺栓塞检测技术

RNA干扰抑制CD133表达对CD133^+肝癌干细胞增殖和化疗敏感性的影响

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南方医科大学学报 2012年第12期32卷 1741-1747页

作者：兰曦王勇曹姝邹冬玲李芳李少林重庆医科大学放射医学教研室重庆400016

目的利用慢病毒介导的RNA干扰技术下调CD133+HepG2肝癌干细胞中CD133的表达,探讨其对肝癌干细胞增殖及化疗敏感性的影响。方法利用流式分选技术筛选CD133+HepG2细胞并检测分选前后CD133表达量,体外成球及体内成瘤实验鉴定其"干性";随后... 详细信息

目的利用慢病毒介导的RNA干扰技术下调CD133+HepG2肝癌干细胞中CD133的表达,探讨其对肝癌干细胞增殖及化疗敏感性的影响。方法利用流式分选技术筛选CD133+HepG2细胞并检测分选前后CD133表达量,体外成球及体内成瘤实验鉴定其"干性";随后以CD133 mRNA编码序列为干扰靶点,采用慢病毒介导的shRNA转染CD133+细胞。应用RT-PCR和Western Blot检测CD133 mRNA及蛋白表达,克隆形成实验检测转染前后细胞增殖情况,CCK-8法和流式细胞仪检测在化疗药物顺铂作用下转染前后细胞的生长抑制率及凋亡情况。结果分选前后CD133表达率分别为(3.36±1.80)%,(88.74±3.19)%;CD133+细胞相对于CD133-细胞有更强的体外成球和体内成瘤能力;转染CD133 shRNA后的细胞CD133 mRNA表达明显受到抑制(P<0.05),蛋白表达水平降低,增殖能力显著下降(P<0.01)。顺铂对转染CD133 shRNA后细胞生长抑制作用明显提高(P<0.01),且其在顺铂作用下的凋亡率也显著增加(P<0.05)。结论慢病毒介导的shRNA能显著下调CD133+肝癌干细胞CD133基因的表达,抑制其增殖并提高其对顺铂的敏感性。

关键词： CD133 CD133+肝癌干细胞 RNA干扰顺铂

Ezrin在高、低转移潜能乳腺癌细胞中的表达及其意义

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肿瘤 2009年第6期29卷 503-507页

作者：蔡辉张涛汤为学李少林重庆医科大学放射医学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院肿瘤科重庆400016 重庆医科大学病理生理学教研室重庆400016

目的:探讨埃兹蛋白(Ezrin)对人高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:采用乳腺癌细胞系MDA-MB-435s,利用细胞穿透人工基底膜能力的差异筛选出具有高、低转移潜能的乳腺癌细胞系,采用免疫组织化学法、RT-PCR、Wes... 详细信息

目的:探讨埃兹蛋白(Ezrin)对人高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:采用乳腺癌细胞系MDA-MB-435s,利用细胞穿透人工基底膜能力的差异筛选出具有高、低转移潜能的乳腺癌细胞系,采用免疫组织化学法、RT-PCR、Western印迹法和放射免疫显像(radioimmunoimaging,RII)方法检测Ezrin蛋白在高、低转移潜能乳腺癌细胞中的表达情况。采用MTT法检测细胞增殖能力及黏附率。结果:经人工基底膜成功分离出具有高、低转移潜能的MDA-MB-435s细胞。高转移潜能MDA-MB-435s细胞中Ezrin在基因和蛋白水平的表达均显著高于低转移潜能的MDA-MB-435s细胞,差异有统计学意义(P值均肿瘤部位的放射性浓聚要强于接种低转移潜能MDA-MB-435s细胞的裸鼠肿瘤部位,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:Ezrin在高转移潜能乳腺癌细胞中的表达水平明显高于低转移潜能细胞,2者的增殖、黏附和侵袭力都有明显差异,上述结果为Ezrin用于乳腺癌的诊断和治疗提供了理论依据。

关键词：乳腺肿瘤肿瘤转移 Ezrin

^(99)Tc^m-EGF的直接法合成及其在荷C6动物体内生物学分布

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核化学与放射化学 2008年第1期30卷 34-38页

作者：董孟杰李少林任庆兰黄家君吴国清重庆医科大学核医学教研室重庆400016

探索用99Tcm直接标记表皮生长因子(EGF)的方法并研究其在荷C6动物体内的生物学分布特点。巯基乙醇(20 mL/L)10μL还原EGF(2.5μg);含0.5μg SnCl2的亚甲基二膦酸盐(MDP)溶液将还原高价锝使之与还原EGF的巯基结合,放化纯度大于95%,标记... 详细信息

探索用99Tcm直接标记表皮生长因子(EGF)的方法并研究其在荷C6动物体内的生物学分布特点。巯基乙醇(20 mL/L)10μL还原EGF(2.5μg);含0.5μg SnCl2的亚甲基二膦酸盐(MDP)溶液将还原高价锝使之与还原EGF的巯基结合,放化纯度大于95%,标记物稳定性较好,在6 h内放化纯度大于95%。通过内皮细胞培养进行99Tcm-EGF的生物活性鉴定,显示EGF在锝标记前后生物学活性未见明显改变(P>0.05)9。9Tcm-EGF在荷瘤鼠体内生物学分布显示肝、脾、肾等组织放射性分布较高,瘤区放射性较高,而脑组织最低,4 h瘤与正常组织放射性摄取比值(Tumor/Normal Tissue)为2.25,SPECT全身显像显示瘤组织放射性核素浓聚。因此直接合成的99Tcm-EGF可望成为特异性诊断高表达EGFR肿瘤的SPECT分子显像剂。

关键词：表皮生长因子表皮生长因子受体 ^90Tc^mO4^- 放射性标记

5-AIQ对大肠癌细胞系HT-29细胞PARP活性抑制的生物学作用

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癌症 2007年第6期26卷 566-571页

作者：郝兰香王娅兰蔡莉李园园重庆医科大学病理教研室重庆400016

背景与目的:聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶[poly(adenosine 5′-diphosphate ribose)polymerase,PARP]抑制剂5-氨基异喹啉酮(5-aminoisoquinolinone,5-AIQ)在炎症中具重要作用,但在肿瘤中的作用尚不清楚。本研究初步探讨5-AIQ对大肠癌PARP活性抑制的生物学作用。方法:链霉生物素-过氧化物酶法(Streptavidin-Peroxidase,SP)免疫组化法和免疫荧光双标法用于检测人大肠癌组织聚(腺苷二磷酸核糖)[poly(adenosine 5′-diphosphate ribose),PAR],及其与P-选择素(P-selectin)、细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的共表达,大肠癌切缘肠粘膜为对照。通过粘附实验观察5-AIQ对结肠癌HT-29细胞系与人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)粘附的影响;同时采用SP法观察5-AIQ对HT-29细胞PAR、P-selectin和ICAM-1表达的影响。结果:45例大肠癌组织中,PAR阳性率(77.8%,35/45)明显高于对照肠粘膜(10.0%,1/10)(P<0.05);其中伴转移者PAR阳性率(86.7%,26/30)高于不伴转移者(60.0%,9/15)。PAR阳性与P-selectin和ICAM-1表达相关。结肠癌HT-29细胞与HUVEC粘附实验显示,5-AIQ浓度为100、300、500μmol/L时,细胞粘附率分别为56.79%、46.31%和39.77%,明显低于对照组(未加5-AIQ者)(粘附率为100%)。经5-AIQ处理的HT-29细胞PAR、P-selectin和ICAM-1表达HSCOR得分分别为1.41±0.12、1.57±0.13和1.23±0.13,明显低于未经5-AIQ处理的HT-29细胞(HSCOR得分分别为2.61±0.10、2.73±0.16和2.30±0.12)(P<0.05)。结论:大肠癌组织内PARP活性增强。PARP抑制剂5-AIQ可抑制大肠癌HT-29细胞与HUVEC的粘附,并可抑制大肠癌HT-29细胞PAR、P-selectin和ICAM-1表达。

关键词： 5-AIQ PARP 大肠肿瘤 HT-29细胞 HUVEC

γ分泌酶抑制剂阻断Notch1信号通路对人结肠癌耐药细胞化疗敏感性的影响

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中国生物制品学杂志 2012年第1期25卷 23-28页

作者：胡敏李少林袁犁王勃重庆医科大学放射医学教研室重庆400016

目的探讨应用γ分泌酶抑制剂(Gamma-secretase inhibitor,GSI)阻断Notch1信号通路后对人结肠癌耐药细胞株SW480/L-OHP化疗敏感性的影响。方法应用人结肠癌细胞系SW480,以反复诱导、逐渐递增奥沙利铂(L-OHP)浓度的方法,体外构建耐药细胞... 详细信息

目的探讨应用γ分泌酶抑制剂(Gamma-secretase inhibitor,GSI)阻断Notch1信号通路后对人结肠癌耐药细胞株SW480/L-OHP化疗敏感性的影响。方法应用人结肠癌细胞系SW480,以反复诱导、逐渐递增奥沙利铂(L-OHP)浓度的方法,体外构建耐药细胞株SW480/L-OHP。采用CCK-8法检测细胞株对L-OHP的耐药指数,RT-PCR法检测survivin、notch1、hes1、cyclinD1基因mRNA的转录,Western blot检测Notch1和Hes1蛋白的表达。将耐药细胞分成对照组、L-OHP组(3.0μmol/L)、GSI组(10μmol/L)和GSI+L-OHP组,分别处理后,检测各组细胞的抑制率、凋亡率及survivin、notch1、hes1、cyclinD1基因mRNA的转录水平和Notch1、Nicd、Hes1蛋白的表达水平。结果与SW480亲本细胞相比,SW480/L-OHP细胞中survivin、notch1、hes1和cyclinD1基因mRNA转录水平及Notch1和Hes1蛋白表达水平均上调。GSI组耐药细胞的增殖受到抑制,GSI+L-OHP组抑制作用更明显;GSI组耐药细胞survivin、hes1、cyclinD1基因mRNA转录水平下调,Nicd和Hes1蛋白表达水平下调,GSI+L-OHP组下调更明显。结论 GSI通过阻断Notch1胞内段Nicd的释放,影响下游Hes1基因和蛋白的表达,从而抑制SW480/L-OHP细胞增殖,提高其化疗敏感性;且与L-OHP联合使用具有协同作用。

关键词：结肠肿瘤抗药性,肿瘤 Notch1 γ分泌酶抑制剂

^(131)I标记CD133单链抗体对人肝癌CD133^+ HepG2干细胞的抑制作用

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中国肿瘤生物治疗杂志 2014年第1期21卷 7-13页

作者：侯妍利陈兴月段丽群唐敏康强强舒锦李少林重庆医科大学放射医学教研室重庆400016

目的:研究131I标记CD133单链抗体(single chain rariable fragment,ScFv)在体外对人肝癌CD133+HepG2干细胞的抑制作用。方法:免疫磁珠分选HepG2细胞,流式细胞术检测分选前后HepG2细胞的CD133表达率,克隆形成实验及体内成瘤实验验证CD133... 详细信息

目的:研究131I标记CD133单链抗体(single chain rariable fragment,ScFv)在体外对人肝癌CD133+HepG2干细胞的抑制作用。方法:免疫磁珠分选HepG2细胞,流式细胞术检测分选前后HepG2细胞的CD133表达率,克隆形成实验及体内成瘤实验验证CD133+HepG2细胞的"干性"。氯胺T法131I标记CD133 ScFv并测定标记率、比活度、放射性浓度。将分选出的CD133+HepG2细胞分为131I-CD133抗体治疗组、131I治疗组、CD133抗体治疗组和131I+CD133抗体治疗组,MTT法检测各组中对CD133+HepG2细胞生长抑制的最适剂量和不同药物在12、48、72 h三个时间点对CD133+HepG2干细胞的生长抑制作用,流式细胞术检测各组细胞周期的变化。结果:分选的HepG2细胞的CD133表达率显著高于未分选细胞[(97.71±1.13)%vs(1.52±0.78)%,t=1.13、P=0.000]。CD133+HepG2细胞相对于CD133-HepG2细胞具有更强的体外成球、克隆形成能力[(45.03±1.35)%vs(7.4±0.54)%;t=3.92,P=0.000]和体内成瘤能力。131I-CD133 ScFv的标记率为88.92%,放射化学纯度为98.63%。当131I为3.7 MBq/100μl、CD133抗体为1μg/100μl时,对CD133+HepG2细胞的抑制率最高,达(89.58±0.74)%;在此剂量下131I-CD133 ScFv治疗组对CD133+HepG2细胞生长抑制率显著高于其余各实验组,且呈时间依赖性。131I-CD133 ScFv治疗组G0/G1期细胞比例为(27.50±1.12)%,较其余各组均明显减少(P<0.05)。结论:成功制备的131I-CD133 ScFv在体外能有效抑制人肝癌CD133+HepG2干细胞的生长。

关键词：肝癌干细胞 CD133 ^131I 单克隆抗体单链抗体

膝关节置换术中胫骨截骨厚度对胫骨截面的生物力学影响

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医用生物力学 2017年第2期32卷 148-153页

作者：陈清盛华均李杏芮郭玲杨清华朱淑娟吕发金重庆医科大学解剖学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院放射科重庆400042

目的获得不同截骨厚度及不同活动状态下胫骨截面的生物力学情况,为临床膝关节置换术截骨厚度及指导患者术后活动提供理论基础。方法重建下肢骨性三维立体模型,依据全膝关节置换术截骨原则将胫骨近端分别截骨0、5、7、9 mm,对截骨后胫骨... 详细信息

目的获得不同截骨厚度及不同活动状态下胫骨截面的生物力学情况,为临床膝关节置换术截骨厚度及指导患者术后活动提供理论基础。方法重建下肢骨性三维立体模型,依据全膝关节置换术截骨原则将胫骨近端分别截骨0、5、7、9 mm,对截骨后胫骨模型进行材料属性赋值,并分析站立、慢步、快跑、上楼4种活动状态下胫骨截面的应力、应变情况。结果在相同活动状态下,随着截骨厚度的增加,胫骨截骨面的最大应力和位移呈增长趋势。在同一截骨厚度下,随着活动强度的增强,胫骨截面的最大应力和位移总体上呈增长趋势。结论临床全膝关节置换术时胫骨截骨厚度越大、术后活动强度越强,胫骨截面的应力及应变越大。术中应避免过多截骨、术后应避免高强度活动,可减少胫骨平台的应力及应变,有利于假体的长期寿命。

关键词：全膝关节置换术截骨厚度胫骨生物力学