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circ-PRKDC通过调控miR-505-3p影响肺癌细胞增殖、凋亡和放射敏感性机制研究

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中华放射肿瘤学杂志 2021年第12期30卷 1309-1315页

作者：袁小笋张蕾饶石磊张凯马慧利李长生张敬伟任中海南阳市中心医院肿瘤内科二病区 473000 南阳市中心医院放疗科 473000

目的探讨circ-PRKDC对肺癌细胞增殖、凋亡和放射敏感性的影响及分子机制。方法培养正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺癌细胞系NCI-H1299、NCI-H2170、NCI-H1975。将NCI-H1299细胞分为si-NC、si-PRKDC、pcDNA-NC、pcDNA-PRKDC、miR-NC、miR-505-3p、anti-miR-NC、anti-miR-505-3p、si-PRKDC+anti-miR-NC、si-PRKDC+anti-miR-505-3p组。RT-qPCR检测circ-PRKDC和miR-505-3p的表达水平;蛋白质印迹法检测蛋白表达;MTT检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;平板克隆形成实验检测细胞放射敏感性;双荧光素酶报告实验检测circ-PRKDC和miR-505-3p的靶向关系。结果与BEAS-2B细胞相比,NCI-H1299、NCI-H2170、NCI-H1975细胞circ-PRKDC表达水平升高(3.65、3.10、2.67∶1.00,P<0.05),miR-505-3p表达水平降低(0.42、0.50、0.54∶1.02,P<0.05)。低表达circ-PRKDC后CyclinD1表达水平降低(0.42∶0.81,P<0.05),Cleaved-caspase-3和γ-H2AX表达水平升高[(0.71∶0.33,P<0.05)和(0.89∶0.465),P<0.05];细胞A值降低(0.413∶0.839,P<0.05);细胞凋亡率升高(20.35∶6.21,P<0.05);细胞存活分数降低(P<0.05);β-catenin表达水平降低(0.35∶0.73,P<0.05)。miR-505-3p高表达后CyclinD1表达水平降低(0.34∶0.83,P<0.05),Cleaved-caspase-3(0.65∶0.32,P<0.05)和γ-H2AX(0.96∶0.45,P<0.05)表达水平升高,细胞A值降低(0.386∶0.851,P<0.05),细胞凋亡率升高(16.38∶6.20,P<0.05),细胞存活分数降低(P<0.05)。与miR-NC比较,miR-505-3p组转染circ-PRKDC野生型报告质粒的细胞荧光素酶活性降低(0.44∶1.00,P<0.05)。下调miR-505-3p能逆转circ-PRKDC低表达对NCI-H1299细胞增殖、凋亡和放射敏感性以及β-catenin表达的影响。结论低表达circ-PRKDC可能通过上调miR-505-3p抑制肺癌细胞增殖,促进凋亡以及增强细胞的放射敏感性,且其可能与Wnt/β-catenin信号通路有关。

关键词： circ-PRKDC基因 miR-505-3p基因细胞增殖细胞凋亡放射敏感性肺癌细胞系

SOCS1的表观遗传学修饰与急性髓系白血病的关系

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中国癌症杂志 2020年第8期30卷 577-585页

作者：张晓慧罗建民索晓慧孙国锋刘洪峰李静牛广旭河北省邯郸市中心医院血液内科河北邯郸056001 河北医科大学第二医院血液内科河北石家庄050000 河北省邯郸市中心医院肿瘤内科河北邯郸056001 河北省邯郸市中心医院病理科河北邯郸056001

背景与目的:细胞因子信号转导抑制因子1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1)是公认的抑癌基因,研究SOCS1基因的表观遗传学修饰与急性髓系白血病发生、发展的关系。方法:采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymeras... 详细信息

背景与目的:细胞因子信号转导抑制因子1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1)是公认的抑癌基因,研究SOCS1基因的表观遗传学修饰与急性髓系白血病发生、发展的关系。方法:采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MS-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)、体外细胞培养、药物干预、细胞增殖检测、基因敲除等技术,分析2016年2月—2018年12月邯郸市中心医院血液内科和河北省医科大学第二医院血液内科收治的110例急性髓系白血病患者及白血病细胞系U937和THP-1中SOCS1基因的表达、甲基化状态和疾病发生、发展的关系。同时分析SOCS1表观遗传学改变相关基因DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)和DNMT3a及组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylase 1,HDAC1)基因的变化。结果:在急性髓系白血病初治组和复发难治组中SOCS1基因甲基化率显著高于缓解组和正常对照组(48%和80%vs 0%和0%),其mRNA表达、蛋白水平显著低于其他两组,而DNMT1、DNMT3a和HDAC1表达却与SOCS1基因表达呈负相关。SOCS1的甲基化与治疗后完全缓解(complete remission,CR)率呈负相关。药物干预白血病细胞系后,随DNMT1、DNMT3a和HDAC1表达下降和SOCS1基因表达恢复,肿瘤细胞的生长受到抑制。结论:SOCS1基因的甲基化、组蛋白去乙酰化导致基因表达沉默,最终促进急性髓系白血病细胞的生长增殖。

关键词：急性髓系白血病细胞因子信号转导抑制因子1 甲基化 DNA甲基转移酶1 DNA甲基转移酶3a 组蛋白去乙酰化酶1

circLPAR3靶向miR-1238对食管癌细胞放射敏感性的影响

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中华放射肿瘤学杂志 2022年第1期31卷 71-78页

作者：袁小笋张蕾饶石磊张凯马慧利李长生张敬伟任中海南阳市中心医院肿瘤内科二病区南阳473000 南阳市中心医院放疗科南阳473000

目的探讨circLPAR3对食管癌细胞放射敏感性的影响及作用机制。方法收集37例食管癌患者的癌组织和癌旁组织, 体外培养食管癌细胞系Eca-109、EC9706和KYSE30及食管上皮细胞HET-1A, RT-qPCR法检测组织和细胞中circLPAR3和miR-1238的表达水... 详细信息

目的探讨circLPAR3对食管癌细胞放射敏感性的影响及作用机制。方法收集37例食管癌患者的癌组织和癌旁组织, 体外培养食管癌细胞系Eca-109、EC9706和KYSE30及食管上皮细胞HET-1A, RT-qPCR法检测组织和细胞中circLPAR3和miR-1238的表达水平。以Eca-109细胞为研究对象, 转染circLPAR3 siRNA、miR-1238模拟物或共转染circLPAR3 siRNA与miR-1238抑制剂。用细胞克隆实验检测沉默circLPAR3、过表达miR-1238或同时沉默circLPAR3和miR-1238对Eca-109细胞放射敏感性的影响。4 Gy照射沉默circLPAR3、过表达miR-1238或同时沉默circLPAR3和miR-1238的Eca-109细胞, CCK-8法(A值)、流式细胞术、蛋白印迹法分别检测沉默circLPAR3、过表达miR-1238或同时沉默circLPAR3和miR-1238联合4 Gy照射对Eca-109细胞增殖、凋亡及相关蛋白CyclinD1、p21、Bcl-2和Bax表达的影响。双荧光素酶报告基因实验和RNA Pull down实验验证circLPAR3和miR-1238调控关系。结果与癌旁组织比较, 食管癌组织中circLPAR3表达升高(P<0.05), miR-1238表达降低(P<0.05)。与HET-1A细胞比较, Eca-109、EC9706和KYSE30细胞中circLPAR3表达升高(均P<0.05), miR-1238表达降低(均P<0.05)。沉默circLPAR3、过表达miR-1238降低了Eca-109细胞存活分数(均P<0.05), 放射增敏比分别为1.21、1.75。沉默circLPAR3、过表达miR-1238降低了Eca-109细胞A值、CyclinD1和Bcl-2蛋白表达(均P<0.05), 而提高了Eca-109细胞凋亡率、p21和Bax蛋白表达(均P<0.05)。沉默circLPAR3、过表达miR-1238联合4 Gy照射后Eca-109细胞A值、CyclinD1和Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05), Eca-109细胞凋亡率、p21和Bax蛋白表达升高(均P<0.05)。circLPAR3在Eca-109细胞中靶向结合并负调控miR-1238的表达。同时沉默miR-1238、circLPAR3表达后Eca-109细胞存活分数较只沉默circLPAR3时升高, 放射增敏比为0.59。沉默miR-1238逆转了沉默circLPAR3联合4 Gy照射对Eca-109细胞增殖和凋亡的影响。结论 circLPAR3在食管癌组织和细胞系中呈高表达, 沉默其表达可靶向上调miR-1238抑制食管癌Eca-109细胞增殖, 促进其凋亡, 并增强细胞放射敏感性。

关键词： circLPAR3基因 miR-1238基因细胞增殖细胞凋亡放射敏感性食管癌组织食管癌细胞系

膜型基质金属蛋白酶-2(MT2-MMP)在NSCLC组织中的表达及临床意义研究

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现代肿瘤医学 2021年第17期29卷 3035-3038页

作者：木亚林岳恺李明南阳市中心医院肿瘤内科三病区河南南阳473000

目的:探讨MT2-MMP在NSCLC组织中的表达情况,与NSCLC临床病理特征之间的关系及MT2-MMP对NSCLC预后的价值。方法:收集2015年01月至2018年06月于我院外科接受手术治疗的NSCLC患者的NSCLC组织及其癌旁正常肺组织各89例。采用免疫组化SP法检... 详细信息

目的:探讨MT2-MMP在NSCLC组织中的表达情况,与NSCLC临床病理特征之间的关系及MT2-MMP对NSCLC预后的价值。方法:收集2015年01月至2018年06月于我院外科接受手术治疗的NSCLC患者的NSCLC组织及其癌旁正常肺组织各89例。采用免疫组化SP法检测NSCLC组织及其癌旁正常肺组织中MT2-MMP的表达水平。统计分析MT2-MMP蛋白与NSCLC患者临床病理特征、预后之间的相关性。结果:MT2-MMP在NSCLC组织中高表达62.9%(56/89)显著高于癌旁正常组织5.6%(5/89),差异有统计学意义(P肿瘤分化程度及淋巴结转移有关(P肿瘤直径、组织学类型、临床TNM分期无关(P>0.05)。生存曲线分析提示MT2-MMP高表达组生存率显著低于低表达组(χ^(2)=4.536,P=0.033)。Cox单因素分析结果显示:吸烟、TNM分期Ⅲ-Ⅳ期、低中分化、淋巴结转移、MT2-MMP高表达是影响NSCLC患者预后的危险因素(P<0.05);多因素分析结果显示:TNM分期Ⅲ-Ⅳ期、低中分化、淋巴结转移、MT2-MMP高表达是NSCLC患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:MT2-MMP高表达与NSCLC患者的不良预后有关,提示MT2-MMP有可能作为NSCLC患者的预后标志物及临床检测或联合检测的指标,提高临床诊断率。

关键词： MT2-MMP 非小细胞肺癌临床病理特征预后

番茄红素对糖尿病大鼠肾脏炎症抑制作用的研究

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中药药理与临床 2016年第2期32卷 79-82页

作者：刘艳峰邯郸市中心医院肾内科邯郸056001

目的:研究番茄红素(Lycopene,LP)对糖尿病大鼠肾脏炎症的抑制作用。方法:通过高脂高糖饮食加腹腔注射链脲佐菌素的方法制备糖尿病大鼠模型,取80只模型随机分为糖尿病模型组,盐酸二甲双胍200mg/kg治疗组和番茄红素(5、10、20mg/kg)治疗组... 详细信息

目的:研究番茄红素(Lycopene,LP)对糖尿病大鼠肾脏炎症的抑制作用。方法:通过高脂高糖饮食加腹腔注射链脲佐菌素的方法制备糖尿病大鼠模型,取80只模型随机分为糖尿病模型组,盐酸二甲双胍200mg/kg治疗组和番茄红素(5、10、20mg/kg)治疗组,并另取16只同龄大鼠设为正常对照组;各组大鼠每天灌胃给药治疗一次,疗程4周。治疗满疗程后,通过血糖仪测定各组大鼠空腹血糖水平,称量体重并计算肾脏指数;测量24h尿量及24h尿蛋白量(UPro),测定各组大鼠血清中血尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)含量;测定各组大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量;酶联免疫法测定各组大鼠血浆中血浆C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平;RT-PCR法测定各组大鼠肾脏组织中AKT、bax和bcl-2 mRNA表达,并计算bax/bcl-2比值;通过PAS染色观察肾脏组织病理形态学变化。结果:与糖尿病模型组相比,番茄红素10、20 mg/kg治疗组大鼠体重显著升高、肾脏指数显著降低,20 mg/kg治疗组空腹血糖水平显著降低;番茄红素10、20 mg/kg治疗组大鼠24h尿量显著减少且UPro显著降低,血清中BUN、SCr含量显著降低,TC、TG含量显著降低;番茄红素10、20 mg/kg治疗组大鼠血浆中CRP、TNF-α、IL-1β、IL-6、ICAM-1水平均显著降低;番茄红素10、20 mg/kg治疗组肾脏组织中bax mRNA表达显著降低和bcl-2mRNA表达显著升高,bax/bcl-2比值显著降低,其中20 mg/kg治疗组AKT mRNA表达显著升高;番茄红素治疗组肾小球及肾脏组织病变均明显改善,其中以20 mg/kg治疗组效果最为显著。结论:番茄红素能够剂量依赖性地降低血糖、改善血脂,降低炎性介质水平,降低细胞间黏附分子,改善肾脏组织病变,提示番茄红素对糖尿病大鼠肾脏组织炎症具有剂量依赖性的抑制作用。

关键词：番茄红素糖尿病肾脏炎症抑制

阿帕替尼联合替雷利珠单抗治疗一线化疗失败的晚期胃癌患者疗效分析

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中国医师杂志 2024年第7期26卷 1060-1065,1070页

作者：张媛媛刘雪利张蕾张晓光成彦培邯郸市中心医院肿瘤内二科邯郸056000 邯郸市中心医院临检科邯郸056000

目的探讨阿帕替尼联合替雷利珠单抗治疗一线化疗失败的晚期胃癌患者的临床疗效,以及对患者外周血肿瘤血管生成调节因子水平和远期生存的影响。方法前瞻性选择邯郸市中心医院2020年1月至2021年12月收治的144例一线化疗失败的晚期胃癌患... 详细信息

目的探讨阿帕替尼联合替雷利珠单抗治疗一线化疗失败的晚期胃癌患者的临床疗效,以及对患者外周血肿瘤血管生成调节因子水平和远期生存的影响。方法前瞻性选择邯郸市中心医院2020年1月至2021年12月收治的144例一线化疗失败的晚期胃癌患者作为研究对象,按随机数字表法分为两组,每组72例。其中对照组单用替雷利珠单抗治疗,观察组采用阿帕替尼联合替雷利珠单抗治疗,连续治疗4个疗程后观察两组近期疗效。比较治疗前后两组血清肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA)199、CA724、CA125]、肿瘤血管生成调节因子[血管内皮生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)]水平,以及生活质量评分。对所有患者进行长期追踪随访,统计两组远期生存情况。比较两组不良反应情况。结果观察组客观缓解率、疾病控制率(51.39%、80.56%)均显著高于对照组(31.94%、61.11%,均P肿瘤标志物和血管生成调节因子水平,提高近期抗肿瘤疗效,给患者带来更多生存获益。

关键词：胃肿瘤阿帕替尼替雷利珠单抗血管生成调节因子

抑癌基因SOCS1、SOCS3的甲基化与急性髓系白血病患者治疗转归及预后的关联分析

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山东大学学报（医学版） 2021年第3期59卷 67-73页

作者：张晓慧罗建民索晓慧孙国锋李静邯郸市中心医院血液内科河北邯郸056001 河北省医科大学第二医院血液内科河北石家庄050000 邯郸市中心医院肿瘤内科河北邯郸056001

目的探讨抑癌基因细胞因子信号转导抑制因子1和3(SOCS1、SOCS3)的甲基化与急性髓系白血病(AML)患者临床治疗效果及预后的关系。方法采用RT-qPCR、甲基化特异性PCR和蛋白质印迹法检测80例初治AML患者及20例正常对照者SOCS1、SOCS3基因的... 详细信息

目的探讨抑癌基因细胞因子信号转导抑制因子1和3(SOCS1、SOCS3)的甲基化与急性髓系白血病(AML)患者临床治疗效果及预后的关系。方法采用RT-qPCR、甲基化特异性PCR和蛋白质印迹法检测80例初治AML患者及20例正常对照者SOCS1、SOCS3基因的甲基化状态及表达水平,利用R+G显带法检测染色体核型。将AML组分别根据SOCS1、SOCS3基因是否存在甲基化分为SOCS1甲基化组(n=39)和SOCS1非甲基化组(n=41);SOCS3甲基化组(n=44)和SOCS3非甲基化组(n=36)。比较两组年龄、性别、AML分型的差异。同时比较双基因甲基化组(n=29)、单一基因甲基化组(n=25)和双非甲基化组(n=26)中融合基因、染色体核型、治疗缓解率和AML预后分层的差别。结果AML组SOCS1、SOCS3基因甲基化率高于正常对照组(48.75%vs 0,55%vs 0),而基因的mRNA表达AML组[SOCS1:0.080(0.003,1.090);SOCS3:0.140(0.002,1.044)]较正常对照组[SOCS1:1.677(0.422,1.972);SOCS3:2.395±1.540]明显下降(P<0.001)。初治AML患者中,SOCS1、SOCS3甲基化组基因的mRNA及蛋白表达水平均低于非甲基化组和正常对照组(P<0.001),AML预后不良因素WT1/ABL基因突变高于非甲基化组(χ^(2)=9.674,P=0.008),治疗缓解率低于非甲基化组(χ^(2)=10.583,P=0.005)。基因甲基化与预后分层的分析结果显示,SOCS1、SOCS3的甲基化状态与分子遗传学(χ^(2)=6.137,P=0.046)预后不良相关,双非甲基化状态与细胞遗传学(χ^(2)=6.675,P=0.036)、分子遗传学(χ^(2)=9.693,P=0.008)预后良好相关。结论SOCS1、SOCS3的甲基化可导致基因表达沉默,与AML的不良治疗转归及预后均有相关性。

关键词： SOCS1基因 SOCS3基因急性髓系白血病甲基化 WT1/ABL基因 FLT3-ITD基因

注射用紫杉醇(白蛋白结合型)联合放疗治疗不同分子亚型老年乳腺浸润性小叶癌的效果及预后影响因素分析

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药物评价研究 2022年第7期45卷 1368-1375页

作者：李静王志芬李颖刘峥邯郸市中心医院肿瘤三科河北邯郸056001 河北医科大学第四医院肿瘤内科河北石家庄050011

目的探讨注射用紫杉醇(白蛋白结合型)联合放疗治疗不同分子亚型老年乳腺浸润性小叶癌患者的临床效果及预后的影响因素。方法选择2016—2017年于邯郸市中心医院和河北医科大学第四医院就诊的晚期乳腺浸润性小叶癌患者200例进行前瞻性研... 详细信息

目的探讨注射用紫杉醇(白蛋白结合型)联合放疗治疗不同分子亚型老年乳腺浸润性小叶癌患者的临床效果及预后的影响因素。方法选择2016—2017年于邯郸市中心医院和河北医科大学第四医院就诊的晚期乳腺浸润性小叶癌患者200例进行前瞻性研究。按随机数字表法将患者随机分为对照组和试验组,每组100例,根据分子亚型又将两组分别分为Luminal A型、Luminal B型、HER-2过表达型和三阴型。对照组采用每天1次,每次1.8~2.0 Gy的常规分割放疗方案,每周照射5 d,共放疗25~28次。试验组放疗方式同对照组,在放疗期间给予注射用紫杉醇(白蛋白结合型),剂量为260mg·m^(−2),静脉滴注30 min,每3周给药1次,至放疗结束。分析比较两组患者近期疗效、治疗后1年乳房外形评级情况、5年无病生存率及复发率,记录治疗期间不良反应发生情况。结果试验组三阴型、HER-2过表达型、Luminal B型、Luminal A型患者的总有效率(RR,60.00%、53.85%、83.33%、88.10%)均显著高于对照组同亚型的RR(10.00%、14.29%、62.50%、73.17%),差异显著(P三阴型、HER-2过表达型、Luminal B型、Luminal A型患者的肿瘤控制率(DCR,80.00%、84.62%、93.33%、100.00%)均显著高于对照组同亚型的DCR(20.00%、50.00%、81.25%、92.68%),差异显著(P三阴型、HER-2过表达型、Luminal B型、Luminal A型患者治疗后1年乳房外形优良率均高于对照组同亚型(P0.05),试验组与对照组的血液学异常不良反应发生率分别为56.84%、53.61%(P>0.05)。结论注射用紫杉醇(白蛋白结合型)联合放疗能有效提升不同分子亚型老年乳腺浸润性小叶癌患者的近期疗效,改善治疗后1年乳房外形评级,提高患者5年无病生存率,安全性较高。而影响患者预后的主要因素为年龄、分子分型、治疗措施,临床上应考虑采取有效措施来改善预后。

关键词：注射用紫杉醇(白蛋白结合型) 放疗分子亚型乳腺浸润性小叶癌生存期预后

重症肺炎患儿血清miR-221和miR-127的表达水平及临床意义

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中国医师杂志 2022年第2期24卷 250-255页

作者：王泽慧张伟永李守霞邯郸市中心医院检验科邯郸056001 邯郸市中心医院CT室邯郸056001

目的分析重症肺炎患儿血清微小RNA-221(miR-221)和微小RNA-127(miR-127)的表达及其临床意义。方法前瞻性选取2017年1月至2019年12月期间于河北省邯郸市中心医院就诊的重症肺炎患儿151例作为重症肺炎组,根据在院期间患儿预后分为死亡组(1... 详细信息

目的分析重症肺炎患儿血清微小RNA-221(miR-221)和微小RNA-127(miR-127)的表达及其临床意义。方法前瞻性选取2017年1月至2019年12月期间于河北省邯郸市中心医院就诊的重症肺炎患儿151例作为重症肺炎组,根据在院期间患儿预后分为死亡组(16例)和存活组(135例),另选取同期在本院进行健康查体的健康儿童80例作为正常对照组。使用微阵列分析重症肺炎组和正常对照组中的miRNAs表达,选择上调或下调(选择依据为差异表达变化≥2倍阈值和P肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平,分析重症肺炎组血清miR-221和miR-127与上述炎症指标的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-221和miR-127对重症肺炎的诊断及预后预测的价值。结果重症肺炎组患儿血清miR-221和miR-127水平低于正常对照组,而CRP、PCT、IL-6、IL-8、TNF-α水平高于正常对照组(均P<0.05)。血清miR-221与CRP、PCT、TNF-α呈负相关(均P<0.05),血清miR-127与CRP、PCT、IL-6、IL-8呈负相关(均P<0.05)。死亡组患儿血清miR-221、miR-127水平均低于存活组(均P<0.05)。miR-221、miR-127联合诊断重症肺炎的曲线下面积(AUC)为0.871,联合预测重症肺炎患儿预后的AUC为0.851。结论重症肺炎患儿血清miR-221和miR-127水平降低,与部分炎症因子水平呈负相关,二者联合检测对重症肺炎的诊断及预后预测具有较高的临床价值。

关键词：肺炎 miR-221 miR-127 炎症因子儿童