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高活性脐带间充质干细胞干预老年树鼩衰老脾脏的作用与机制

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4000-4010页

作者：叶丽田川赵晓娟陈梦蝶叶倩倩李强廖珠银李晔朱向情阮光萍何志旭舒莉萍潘兴华贵州医科大学基础医学院免疫学教研室组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室昆明市干细胞与再生医学重点实验室基础医学实验室云南省昆明市650032 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州省遵义市563100

背景:脾脏具有储血、造血和免疫功能,随着年龄增长,脾脏结构退变、功能衰退引起免疫系统功能受损,进而加速机体衰老进程,而高活性脐带间充质干细胞治疗树鼩脾脏衰老尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对树鼩脾脏衰老的干预作... 详细信息

背景:脾脏具有储血、造血和免疫功能,随着年龄增长,脾脏结构退变、功能衰退引起免疫系统功能受损,进而加速机体衰老进程,而高活性脐带间充质干细胞治疗树鼩脾脏衰老尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对树鼩脾脏衰老的干预作用及机制。方法:从剖腹产的新生树鼩脐带组织中分离、培养和获得高活性脐带间充质干细胞,三系分化试剂盒检测成脂、成骨、成软骨分化能力,流式细胞术检测细胞周期和表面标志物。以感染复数值分别为100,120,140,160,180,200的吉凯基因绿色荧光蛋白转染第2代高活性脐带间充质干细胞,筛选最佳转染条件;转染后的第4代高活性脐带间充质干细胞尾静脉输注给老年治疗组树鼩,青年对照组和老年模型组不予特殊处理,治疗4个月时取脾脏组织,苏木精-伊红染色观察脾脏组织结构;β-半乳糖苷酶染色检测衰老相关半乳糖苷酶活性;免疫组织化学染色检测p21和p53蛋白表达水平;Ki67和PCNA免疫荧光染色检测细胞增殖活性;免疫荧光染色检测脾脏自噬蛋白分子Beclin1和APG5L/ATG5表达水平;活性氧荧光染色检测脾脏组织的活性氧含量;CD3免疫荧光染色检测总T淋巴细胞比例变化;酶联免疫吸附实验检测脾脏组织白细胞介素1β和转化生长因子β1分泌水平;DAPI复染细胞核观察绿色荧光蛋白标记的高活性脐带间充质干细胞在脾脏组织的分布情况。结果与结论:①高活性脐带间充质干细胞呈核小短梭形、鱼群样生长,G_(0)/G_(1)期占比大,具有向成脂、成骨和成软骨分化潜能。②感染复数为140且转染72 h为吉凯基因绿色荧光蛋白标记树鼩高活性脐带间充质干细胞的最佳条件。③与老年模型组相比,老年治疗组树鼩脾脏组织细胞排列紧密,白髓面积增加(P0.05),脾脏组织衰老相关半乳糖苷酶活性水平降低(P0.05)。与青年对照组相比,以上检测指标在老年治疗组中均有显著差异(P<0.05)。④冰冻组织切片观察可见老年治疗组树鼩脾脏组织中有绿色荧光蛋白标记的绿色荧光细胞。结果表明:静脉输注高活性脐带间充质干细胞可迁移至脾脏组织,抑制活性氧产生,下调衰老相关蛋白分子表达,诱导细胞自噬,促进细胞增殖,降低慢性炎症,进而改善脾脏组织结构和功能。

关键词：高活性脐带间充质干细胞树鼩脾脏衰老免疫自噬炎症

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缺血性脑卒中复发风险预测模型的研究进展

中华神经医学杂志 2020年第4期19卷 408-412页

作者：郑雯丽邓仁丽邱业银杨柳侯莉梅梁恒遵义医科大学第五附属(珠海)医院神经内科珠海519100 遵义医科大学第五附属(珠海)医院护理部珠海519100

缺血性脑卒中(IS)易复发并导致患者死亡或残疾。运用预测模型评估IS患者复发风险,进行危险分层并制定相应干预措施,降低复发率,是IS二级预防的核心内容。IS复发预测内容或因素包括临床因素、影像学因素、生物学标记、中医辨证体质,预测... 详细信息

缺血性脑卒中(IS)易复发并导致患者死亡或残疾。运用预测模型评估IS患者复发风险,进行危险分层并制定相应干预措施,降低复发率,是IS二级预防的核心内容。IS复发预测内容或因素包括临床因素、影像学因素、生物学标记、中医辨证体质,预测模型构建方法包括传统统计学方法及机器学习方法。本文将围绕近年IS复发风险预测相关的研究进展进行综述,以期为临床工作者提供参考。

关键词：缺血性脑卒中复发预测风险评估

儿科评估三角对PICU护士预见性思维和抢救协作能力的影响

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卫生职业教育 2025年第1期43卷 139-142页

作者：黄晓波王丽芳宋卓华李艳青唐凤佳广西医科大学第一附属医院广西南宁530021

目的探讨在危重症患儿抢救护理中,应用儿科评估三角(pediatric assessment triangle,PAT)抢救评估流程对PICU(儿童重症监护室)护士预见性思维和抢救协作能力的影响。方法将PICU 33名临床重症护士纳为研究对象,采用自身对照研究方法,2023... 详细信息

目的探讨在危重症患儿抢救护理中,应用儿科评估三角(pediatric assessment triangle,PAT)抢救评估流程对PICU(儿童重症监护室)护士预见性思维和抢救协作能力的影响。方法将PICU 33名临床重症护士纳为研究对象,采用自身对照研究方法,2023年1—6月对照期实施常规医护抢救评估,7—12月干预期实施基于儿科评估三角的救护理念,比较两期临床重症护士抢救评估流程执行时间、批判性思维能力和抢救效果。结果干预期护士病情评估平均耗时为(4.93±1.20)min,明显短于对照期的(7.20±0.82)min,且差异有统计学意义(P儿科评估三角为基础,能有效缩短评估过程实施时间,提高评估效率,有利于培养护士预见性思维和提高其抢救协作能力,值得在临床推广使用。

关键词：危重症患儿 PICU护士病情评估预见性思维抢救协作能力

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免疫营养在胃肠道恶性肿瘤围手术期中的应用

中华消化外科杂志 2023年第8期22卷 1040-1046页

作者：黄勇杨丽税兰吴尹王继伟谢铭遵义医科大学附属医院消化病医院遵义医科大学附属医院普外科遵义563000 遵义医科大学附属医院日间化疗病区遵义563000

胃肠道恶性肿瘤发病率较高,且有40%~80%的胃肠道肿瘤患者存在营养不良,肿瘤疾病本身的代谢机制及以手术为主的治疗方式导致围手术期应激反应可进一步加重营养不良。因此,对有营养风险或营养不良的围手术期肿瘤患者应常规进行营养支持。... 详细信息

胃肠道恶性肿瘤发病率较高,且有40%~80%的胃肠道肿瘤患者存在营养不良,肿瘤疾病本身的代谢机制及以手术为主的治疗方式导致围手术期应激反应可进一步加重营养不良。因此,对有营养风险或营养不良的围手术期肿瘤患者应常规进行营养支持。长期以来,以谷氨酰胺、ω-3脂肪酸、精氨酸及核苷酸等为主的免疫营养素在围手术期肿瘤患者中的治疗备受关注。围手术期免疫营养治疗不仅可以改善营养缺乏,纠正营养不良;还能维持机体免疫功能和减轻炎症反应;以及维护肠屏障完整性,减少术后并发症发生率和缩短术后住院时间等。然而,近年来随着免疫营养在临床上的广泛应用与深入研究,其在胃肠道恶性肿瘤围手术期的应用仍存在争议。笔者就胃肠道恶性肿瘤患者围手术期免疫营养素的药理机制与临床应用、免疫营养素围手术期联合应用、免疫营养应用时机等方面进行综述,为其临床应用提供依据。

关键词：胃肿瘤结直肠肿瘤免疫营养围手术期应用

基于Web of Science数据库中减重代谢手术研究的可视化及热点分析

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中华消化外科杂志 2024年第8期23卷 1112-1122页

作者：冯清波周昕王麦建郑兴斌李正彪胡旭谢铭遵义医科大学附属医院消化病医院、遵义医科大学附属医院普外科遵义563000

系统检索2000年至2023年Web of Science数据库中与减重代谢手术相关的学术论文.运用文献计量学方法和可视化技术,深入剖析该领域的研究趋势、主要研究者、研究机构以及研究热点.通过分析,揭示减重代谢外科领域的研究动态和前沿进展.此外... 详细信息

系统检索2000年至2023年Web of Science数据库中与减重代谢手术相关的学术论文.运用文献计量学方法和可视化技术,深入剖析该领域的研究趋势、主要研究者、研究机构以及研究热点.通过分析,揭示减重代谢外科领域的研究动态和前沿进展.此外,笔者还探讨了当前研究的热点和挑战,以及未来可能的研究方向.该研究不仅为减重代谢手术领域的研究者提供了有价值的参考信息,也为临床实践和政策制定提供科学依据.

关键词：肥胖症减重代谢手术文献计量学 CiteSpace VOSviewer

线粒体动力学紊乱在脓毒症相关性急性肾损伤发病机制中的作用研究进展

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中华危重病急救医学 2024年第10期36卷 1117-1120页

作者：李竹唐立丽张杰何东蕊谭江陆李小悦遵义医科大学第五附属(珠海)医院急诊科广东珠海遵义医科大学第五附属(珠海)医院重症医学科广东珠海

脓毒症是宿主对感染反应失控所致的危及生命的器官功能障碍, 是急危重症患者死亡的主要原因之一。脓毒症相关性急性肾损伤(SA-AKI)与脓毒症患者预后不良相关, 其发病机制复杂, 至今仍不明确。线粒体动力学是维持线粒体形态、数量正常及... 详细信息

脓毒症是宿主对感染反应失控所致的危及生命的器官功能障碍, 是急危重症患者死亡的主要原因之一。脓毒症相关性急性肾损伤(SA-AKI)与脓毒症患者预后不良相关, 其发病机制复杂, 至今仍不明确。线粒体动力学是维持线粒体形态、数量正常及线粒体功能正常运行的关键, 是近年来新的研究热点。线粒体动力学紊乱通过调节肾小管功能参与SA-AKI的发生发展, 有望成为新的治疗靶点。深入探讨线粒体动力学紊乱在SA-AKI发病机制中的作用有助于寻找更有效的治疗方式, 从而提高SA-AKI患者的抢救成功率。

关键词：脓毒症脓毒症相关性急性肾损伤线粒体动力学紊乱

结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的影响因素分析及处理策略

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中华消化外科杂志 2022年第8期21卷 1087-1092页

作者：宁伟伟冯清波张桃徐福建李正彪谢铭遵义医科大学附属医院消化病医院遵义医科大学附属医院普外科遵义563000

目的探讨结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的影响因素及处理策略。方法采用回顾性病例对照研究方法。收集2011年1月至2021年3月遵义医科大学附属医院收治的358例行结肠镜检查治疗患者的临床资料;男216例,女142例;年龄为(59±14)岁。患者均... 详细信息

目的探讨结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的影响因素及处理策略。方法采用回顾性病例对照研究方法。收集2011年1月至2021年3月遵义医科大学附属医院收治的358例行结肠镜检查治疗患者的临床资料;男216例,女142例;年龄为(59±14)岁。患者均行结肠镜检查或治疗。观察指标:(1)结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔情况。(2)结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的影响因素分析。(3)结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔预测模型的构建。(4)结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的处理。正态分布的计量资料以x±s表示。偏态分布的计量资料以M(Q1,Q3)表示,组间比较采用Wilcoxon秩和检验。计数资料以绝对数表示,组间比较采用χ^(2)检验。多因素分析采用二元Logistic回归模型。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价预测模型的灵敏度和特异度。结果(1)结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔情况。358例患者中,18例发生结直肠穿孔,其中男6例,女12例;年龄为61(49,69)岁。18例结直肠穿孔患者中,结肠穿孔12例,其中乙状结肠及直肠乙状结肠交界处穿孔10例、横结肠穿孔1例、降结肠穿孔1例;直肠穿孔6例。诊断性穿孔11例,治疗性穿孔7例。(2)结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的影响因素分析。单因素分析结果显示:性别、年龄、结直肠溃疡、结直肠憩室、结直肠肿瘤、腹腔手术史、结肠镜类别、操作医师职称为影响结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的相关因素(χ^(2)=5.77,Z=-3.24,χ^(2)=37.99、97.34、37.99、10.31、8.07、6.73,P<0.05)。多因素分析结果显示:结直肠憩室、腹腔手术史是影响结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的独立危险因素(优势比=287.79,6.74,95%可信区间为23.14~3579.11,1.19~38.27,P<0.05)。治疗性结肠镜是影响结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的独立保护因素(优势比=0.11,95%可信区间为0.23~0.52,P<0.05)。(3)结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔预测模型的构建。以结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔为因变量,结直肠憩室、腹腔手术史、治疗性结肠镜为自变量构建结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的Logistic回归预测模型。ROC结果显示:该预测模型的灵敏度为0.56,特异度为1.00,曲线下面积为0.78(95%可信区间为0.63~0.92,P<0.05)。(4)结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的处理。18例结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔患者中,15例立即行腹腔镜穿孔修补术,2例行内镜下缝合术,1例行保守治疗;均治愈出院,无因结直肠穿孔死亡患者。结论结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔部位易发于乙状结肠及直肠乙状结肠交界处。结直肠憩室、腹腔手术史是影响结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的独立危险因素。治疗性结肠镜是影响结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的独立保护因素。结直肠穿孔患者行腹腔镜结直肠穿孔修补术疗效较好。

关键词：结肠疾病直肠疾病结肠镜肠穿孔危险因素治疗

壬基酚对人结肠癌SW480细胞活性及跨膜G蛋白偶联雌激素膜受体30表达的影响

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中华消化外科杂志 2022年第6期21卷 802-808页

作者：杨清旭刘秀张桃宁伟伟张杰谢铭遵义医科大学附属医院消化病医院遵义医科大学附属医院普外科遵义563000

目的分析壬基酚对人结肠癌SW480细胞活性及跨膜G蛋白偶联雌激素膜受体30(GPR30)表达的影响。方法采用实验研究方法。通过体外培养人结肠癌SW480细胞,采用细胞增殖、周期及凋亡检测以及基因和蛋白检测实验,分析壬基酚影响人结肠癌SW480... 详细信息

目的分析壬基酚对人结肠癌SW480细胞活性及跨膜G蛋白偶联雌激素膜受体30(GPR30)表达的影响。方法采用实验研究方法。通过体外培养人结肠癌SW480细胞,采用细胞增殖、周期及凋亡检测以及基因和蛋白检测实验,分析壬基酚影响人结肠癌SW480细胞增殖、细胞周期、凋亡以及GPR30表达的情况。细胞分组:SW480细胞加入培养基设为对照组,加入培养基+1×10^(‒8) mol/L雌二醇设为雌二醇组,加入培养基+1×10^(-8) mol/L壬基酚设为壬基酚组,加入培养基+1×10^(-8) mol/L壬基酚+1×10^(-7) mol/L GPR30特异性拮抗剂G15设为壬基酚+G15组。观察指标:(1)4组人结肠癌SW480细胞增殖指数。(2)4组人结肠癌SW480细胞的周期占比。(3)4组人结肠癌SW480细胞的凋亡指数。(4)4组人结肠癌SW480细胞GPR30信使RNA(mRNA)表达情况。(5)4组人结肠癌SW480细胞GPR30蛋白表达情况。正态分布的计量资料以x±s表示,组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用最小显著差异法检验。结果(1)4组人结肠癌SW480细胞增殖指数。细胞增殖实验结果显示:对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞的增殖指数分别为100.00±0.00、89.19±4.86、148.96±6.04、120.40±3.39,4组比较,差异有统计学意义(F=21.45,P0.05)。(2)4组人结肠癌SW480细胞的周期占比。细胞周期实验结果显示:对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞的S期细胞占比分别为39.96%±2.02%、36.67%±0.62%、43.85%±1.02%、38.29%±1.42%,4组比较,差异有统计学意义(F=10.08,P0.05)。(3)4组人结肠癌SW480细胞的凋亡指数。细胞凋亡实验结果显示:对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞的凋亡指数分别为1.67±0.18、4.80±0.31、0.75±0.11、2.20±0.19,4组比较,差异有统计学意义(F=136.79,P0.05)。(4)4组人结肠癌SW480细胞GPR30 mRNA表达情况。实时荧光定量聚合酶链式反应检测结果显示:对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞GPR30 mRNA相对表达率分别为1.00±0.00、0.86±0.05、1.89±0.27、0.64±0.12,4组比较,差异有统计学意义(F=26.61,P0.05)。(5)4组人结肠癌SW480细胞GPR30蛋白表达情况。Western blot检测结果显示:对照组、雌二醇组、壬基酚组、壬基酚+G15组人结肠癌SW480细胞GPR30蛋白相对表达率分别为1.83±0.16、1.68±0.15、3.10±0.30、1.26±0.11,4组比较,差异有统计学意义(F=34.05,P0.05)。结论低剂量壬基酚可增加人结肠癌SW480细胞增殖指数与S期细胞占比,降低细胞凋亡指数,并促进GPR30 mRNA和蛋白表达。

关键词：结肠肿瘤雌激素壬基酚受体跨膜G蛋白偶联雌激素膜受体30 增殖细胞周期凋亡

淋病奈瑟菌NGO2105蛋白660~1468肽段的表达纯化及多克隆抗体的制备与鉴定

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中华皮肤科杂志 2023年第3期56卷 216-221页

作者：夏灵尹卢琴王小素黄美容闵迅黄健遵义医科大学附属医院检验科遵义563000 遵义医科大学附属医院输血科遵义563000

目的原核表达淋病奈瑟菌NGO2105蛋白的660~1468肽段,制备并鉴定其多克隆抗体。方法将pCold TF-NGO2105_(660-1468 aa)重组质粒转化至*** BL21(DE3)菌中进行蛋白表达。包涵体蛋白经变性复性处理后纯化目的蛋白。目的蛋白免疫BALB/c小鼠... 详细信息

目的原核表达淋病奈瑟菌NGO2105蛋白的660~1468肽段,制备并鉴定其多克隆抗体。方法将pCold TF-NGO2105_(660-1468 aa)重组质粒转化至*** BL21(DE3)菌中进行蛋白表达。包涵体蛋白经变性复性处理后纯化目的蛋白。目的蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗血清;采用ELISA法检测抗体效价,Western印迹分析抗体对淋病奈瑟菌中NGO2105蛋白的特异性,流式细胞仪分析抗血清与淋病奈瑟菌的亲和力,黏附抑制实验评估抗NGO2105_(660-1468 aa)抗体对淋病奈瑟菌对人宫颈上皮细胞ME-180细胞黏附作用的抑制能力。不同处理组间比较采用t检验。结果NGO2105_(660-1468 aa)蛋白以包涵体的形式呈现,通过变复性和纯化后得到了可溶性NGO2105_(660-1468 aa)蛋白,以该蛋白免疫小鼠后抗血清的效价为5.12×10^(6),流式细胞仪分析结果显示,该抗体能较好与淋病奈瑟菌的NGO2105_(660-1468 aa)片段结合。黏附抑制实验结果提示,相比未处理组的黏附率(100%),抗NGO2105_(660-1468 aa)抗体在20和40倍稀释时均能显著抑制淋病奈瑟菌的黏附作用(黏附率=52.9%、79.2%;t=8.40、5.29;P<0.001、=0.006),呈现一定的浓度梯度依赖。结论成功表达及纯化出NGO2105_(660-1468 aa)肽段蛋白,制备出高效价的多克隆抗体,该抗体与淋病奈瑟菌有较好的亲和力且有黏附抑制能力。

关键词：淋病奈瑟球菌 NGO2105蛋白多克隆抗体抗体亲和力细菌黏附免疫接种疫苗