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细胞外囊泡及长链非编码RNAs在多囊卵巢综合征中的研究进展

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中华生殖与避孕杂志 2024年第9期44卷 974-979页

作者：文婷媛王德婧遵义医科大学附属医院生殖医学科遵义医科大学附属医院妇产科遵义

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)是一种以高雄激素血症、无排卵或稀发排卵和卵巢多囊样改变为主要特征的生殖内分泌紊乱性疾病。PCOS的发生、发展与多种因素有关, 表观遗传因素可能在其中起着重要作用。细胞外囊泡(ext... 详细信息

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)是一种以高雄激素血症、无排卵或稀发排卵和卵巢多囊样改变为主要特征的生殖内分泌紊乱性疾病。PCOS的发生、发展与多种因素有关, 表观遗传因素可能在其中起着重要作用。细胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs)是包载DNA、RNA、脂质和蛋白质的脂质双分子层纳米颗粒, 在细胞之间通信过程中发挥重要作用。研究显示, PCOS的发病机制与细胞外囊泡密切相关。长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)是由超过200个核苷酸组成的RNA分子, 在颗粒细胞的增殖与凋亡、卵泡发育及内分泌代谢等多个环节发挥重要作用。本文对细胞外囊泡及lncRNA在PCOS发病机制的研究进行综述, 为PCOS的诊断和治疗提供新的研究方向。

关键词：多囊卵巢综合征细胞外囊泡长链非编码RNA

姜黄素通过下调HO-1/NQO1保护肝癌模型小鼠

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中国病理生理杂志 2024年第3期40卷 438-443页

作者：牟海军陈幸幸刘安安张丽朱加兴金海遵义医科大学附属医院消化病医院遵义医科大学附属医院消化内科贵州遵义563000

目的:观察姜黄素对N-亚硝基二乙胺(DEN)联合四氯化碳(CCl4)诱导的C57BL/6J小鼠肝癌模型的作用并探索其机制。方法:取14日龄雄性C57BL/6J小鼠腹腔注射DEN(25 mg/kg),随机分成模型组和姜黄素(100、200和400 mg/kg)给药组,另取同龄雄性小... 详细信息

目的:观察姜黄素对N-亚硝基二乙胺(DEN)联合四氯化碳(CCl4)诱导的C57BL/6J小鼠肝癌模型的作用并探索其机制。方法:取14日龄雄性C57BL/6J小鼠腹腔注射DEN(25 mg/kg),随机分成模型组和姜黄素(100、200和400 mg/kg)给药组,另取同龄雄性小鼠10只作为正常对照组。模型组和姜黄素给药组从第8周开始灌胃给予10%CCl4(5 mL/kg),每周2次;同时,给药组开始灌胃姜黄素,正常对照组灌胃等体积的蒸馏水,每天1次,连续14周。给药结束后处死小鼠,检测小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活性,观察肝组织病理学变化,检测血红素加氧酶1(HO-1)和NAD(P)H-醌氧化还原酶1(NQO1)的mRNA表达水平,以及HO-1、NQO1和Ki67蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠体重显著降低(P0.05),HO-1和NQO1蛋白表达水平显著升高(P0.05),癌结节数量显著减少(P<0.05或P<0.01),血清AST活性显著降低(P<0.01),HO-1和NQO1的mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05),Ki67阳性表达率显著降低(P<0.05)。结论:姜黄素对DEN联合CCl4诱导的肝癌模型C57BL/6J小鼠具有显著保护作用,其机制与抑制HO-1和NQO1表达有关。

关键词：姜黄素肝细胞癌血红素加氧酶1 NAD(P)H-醌氧化还原酶1

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消化内镜检查发现下咽部淀粉样变性1例

中南大学学报（医学版） 2024年第4期49卷 643-648页

作者：何玲苏薇李伶俐周巧赵秋灵李红平遵义医科大学附属医院消化病医院遵义医科大学附属医院消化内科贵州遵义563000

淀粉样变性是一种罕见疾病。本文报告1例以肺结核为首发症状的局限性继发性下咽部淀粉样变患者。该患者缺乏特异性临床表现,主要表现为咳嗽、咳痰、反酸、嗳气、腹痛等症状,胸部CT提示支气管扩张伴感染及肺结核,消化内镜检查主要表现为... 详细信息

淀粉样变性是一种罕见疾病。本文报告1例以肺结核为首发症状的局限性继发性下咽部淀粉样变患者。该患者缺乏特异性临床表现,主要表现为咳嗽、咳痰、反酸、嗳气、腹痛等症状,胸部CT提示支气管扩张伴感染及肺结核,消化内镜检查主要表现为下咽部右侧披裂处一白色黏膜隆起,病理诊断为下咽部黏膜组织内淀粉样物沉积。抗淀粉样蛋白A抗体阳性,刚果红染色(+)、过碘酸希夫染色(+)。淀粉样变性最常累及消化系统,发生于消化系统的淀粉样变性病因多,且常与其他消化系统疾病的临床表现混淆,易漏诊和误诊,从而错过最佳的治疗时机。下咽部是消化道与呼吸道的共同通道,为高度皱襞化的狭窄腔隙性器官,消化内镜有助于发现中下咽部的淀粉样变性。

关键词：下咽部淀粉样变性消化内镜

辅酶Q10抑制IL-17/NF-κB蛋白表达对敌草快中毒大鼠肾损伤保护作用

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中华急诊医学杂志 2024年第9期33卷 1249-1256页

作者：杨登会吴瑾胡杰詹江珊陆安静赖福平贾映茂陆元兰遵义医科大学附属医院急诊科遵义563003 遵义医科大学附属医院门诊部遵义563003

目的探究抗氧化剂辅酶Q10(coenzyme Q10,CoQ10)是否通过抗氧化应激作用抑制白介素(interleukin,IL)-17及核转录因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路参与调控敌草快中毒(diquat,DQ)所致大鼠的肾损伤,该机制是否与减轻线粒... 详细信息

目的探究抗氧化剂辅酶Q10(coenzyme Q10,CoQ10)是否通过抗氧化应激作用抑制白介素(interleukin,IL)-17及核转录因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路参与调控敌草快中毒(diquat,DQ)所致大鼠的肾损伤,该机制是否与减轻线粒体功能障碍相关。方法体内及体外模型中检测核因子κB抑制蛋白α、磷酸化核转录因子κB(nuclear factor kappa B,P-NF-κB)、JNK相关亮氨酸拉链蛋白(JNK-related leucine zipper protein,JLP)、神经保护蛋白PTEN诱导的假定激酶1(neuroprotective protein PTEN-induced putative kinase 1,PINK1)通路蛋白的表达;生化检测肾损伤标志物及炎症细胞因子:血清尿素氮(serum urea nitrogen,BUN)、血肌酐(Creatinine,Cr)、血清胱抑素-C(Cystatin C,CysC)、肾损伤分子1、丙二醛、超氧化物歧化酶(supemxide dismutase,SOD)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophilgelatinase-Associated lipocalin,NGAL)等;肾脏病理HE染色观察光镜下肾损伤程度及病理评分;免疫荧光检测活性氧表达情况;CCK-8实验观察给药后细胞增殖水平。结果体内实验DQ组染毒72 h后血浆及肾脏标本中肾功能损伤指标(Cr、BUN、CysC、NGAL、KIM-1)明显增高,存在明显的病理组织学改变、病理评分升高;离体实验HK-2细胞DQ染毒48 h后,细胞活力下降一半。DQ染毒后氧化应激指标血清SOD下降、丙二醛上升,肾组织活性氧免疫荧光值上升,予以CoQ10干预后能减轻DQ诱导的大鼠病理损害及增强HK-2细胞活力,减轻肾损伤,减轻氧化应激水平。此外,体内实验DQ组染毒后促炎细胞因子(IL-6、TNF-α和IL-17)水平表达增加,体内DQ组和体外HK-2细胞DQ组检测P-NF-κBp65蛋白表达量明显升高,线粒体功能障碍指标PINK1蛋白表达量明显升高,JLP蛋白、IκB-α蛋白表达量明显下降;予以CoQ10干预后,能减低P-NF-κBp65蛋白、PINK1的表达,增加IκB-α蛋白的表达及减轻JLP降解,证明CoQ10可改善DQ中毒后线粒体功能障碍。结论CoQ10可减轻DQ中毒诱导的大鼠肾脏损伤,其机制可能与CoQ10通过抗氧化应激作用,调节IL-17及NF-κB信号通路表达,进一步改善线粒体功能障碍有关。

关键词：敌草快中毒肾损害氧化应激辅酶Q10 NF-κB

鼻腔免疫淋病奈瑟球菌疫苗候选蛋白MetQ的免疫保护效果初步评估

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中华皮肤科杂志 2024年第3期57卷 233-239页

作者：卢琴黄美容杨慧张宁晴闵迅黄健遵义医科大学附属医院医学检验科遵义563000 遵义医科大学检验医学院遵义563000 遵义医科大学附属医院输血科遵义563000

目的原核表达淋病奈瑟球菌MetQ蛋白,采用鼻腔免疫途径初步评估MetQ蛋白的免疫保护效果。方法利用基因重组技术构建pCold *** BL21表达菌株,并进行MetQ蛋白的表达纯化。将6~8周龄BALB/c雌性小鼠随机分两组,每组6只,MetQ组:MetQ蛋白+霍乱... 详细信息

目的原核表达淋病奈瑟球菌MetQ蛋白,采用鼻腔免疫途径初步评估MetQ蛋白的免疫保护效果。方法利用基因重组技术构建pCold *** BL21表达菌株,并进行MetQ蛋白的表达纯化。将6~8周龄BALB/c雌性小鼠随机分两组,每组6只,MetQ组:MetQ蛋白+霍乱毒素B亚单位(CTB)佐剂等比例混匀后对小鼠进行鼻腔滴注,10μg/只;磷酸盐缓冲液(PBS)组:鼻腔滴注等比例、等剂量的PBS+CTB佐剂。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MetQ组末次免疫后3只小鼠的血清及阴道分泌物中的抗体效价。免疫印迹分析MetQ在不同淋病奈瑟球菌中的表达情况。间接ELISA分析MetQ抗血清与全菌抗原的结合能力。评估MetQ抗血清对淋病奈瑟球菌的杀菌活性以及对ME-180细胞的黏附抑制作用。计量资料以x[±]s表示,不同处理组间比较采用t检验。结果成功表达去除信号肽的MetQ蛋白。MetQ组小鼠经鼻腔免疫后血清能检测到特异性IgG、IgG1、IgG2a、IgA抗体,抗体滴度分别达1×10^(7)、1×10^(5)、2×10^(4)、1×10^(2),阴道分泌物能检测到特异性IgG、IgA抗体,抗体滴度分别达1×10^(3)和1×10^(2)。免疫印迹结果显示,MetQ蛋白在8株淋病奈瑟球菌中均有表达。间接ELISA结果显示,MetQ抗血清与淋病奈瑟球菌全菌抗原结合能力为20。血清杀菌力实验结果显示,与无血清对照组(100%)相比,MetQ抗血清的有效杀菌滴度可达1∶320(淋病奈瑟球菌存活率:46.33%±6.67%,t=8.05,P=0.001),MetQ抗血清稀释1∶160、1∶640时,淋病奈瑟球菌存活率分别为22.01%±6.80%(t=11.47,P0.05)。黏附抑制实验结果显示,与无血清对照组(100%)相比,MetQ抗血清稀释1∶20、1∶40、1∶80能抑制淋病奈瑟球菌对ME-180细胞的黏附作用(淋病奈瑟球菌黏附率=17.25%、28.23%、54.51%,t=48.44、31.88、7.29,均P<0.05)。结论MetQ蛋白在不同淋病奈瑟球菌中均有表达,经鼻腔免疫小鼠后能在血清及阴道分泌物中检测到高效价的特异性抗体。MetQ抗血清与淋病奈瑟球菌有较好的亲和性,并具有较好的血清杀菌活性及抗体黏附抑制作用,是一种有潜力的淋病奈瑟球菌疫苗候选蛋白。

关键词：淋病奈瑟球菌细菌菌苗 MetQ蛋白鼻腔免疫免疫保护

血清黑色素浓缩激素与2型糖尿病和超重/肥胖的相关性研究

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中华糖尿病杂志 2024年第1期16卷 63-68页

作者：钱会玲黄琦李玲唐子轩李明泽贵小婷张琳王茜张晗章莹廖鑫遵义医科大学附属医院内分泌与代谢病科遵义563000 遵义医科大学附属医院核医学科遵义563000

目的:探讨血清黑色素浓缩激素(MCH)与2型糖尿病(T2DM)和超重/肥胖的相关性。方法:为横断面研究。选取2021年6月至2022年4月遵义医科大学附属医院内分泌与代谢病科门诊及住院的T2DM患者及同期于该院体检中心进行健康体检者作为研究对象... 详细信息

目的:探讨血清黑色素浓缩激素(MCH)与2型糖尿病(T2DM)和超重/肥胖的相关性。方法:为横断面研究。选取2021年6月至2022年4月遵义医科大学附属医院内分泌与代谢病科门诊及住院的T2DM患者及同期于该院体检中心进行健康体检者作为研究对象。测量研究对象身高、体重并计算体重指数(BMI),检测其MCH、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA 1c)、甘油三酯(TG)、瘦素,并计算稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。根据研究对象BMI及糖代谢状态将其分为正常对照组(BMI0.05)。Spearman相关性分析结果显示,血清MCH与HOMA-IR( r=0.285)、FPG( r=0.551)、HbA 1c( r=0.569)、TG( r=0.317)、瘦素( r=0.511)均呈正相关(均 P<0.001)。多分类logistic回归分析结果显示,校正多个混杂因素后,与正常对照组相比,MCH高者患超重/肥胖、T2DM体重正常、T2DM合并超重/肥胖风险仍然更高,OR值(95%CI)分别为1.336(1.031~1.733)、2.095(1.594~2.752)、1.858(1.402~2.463)。结论:血清MCH与T2DM和超重/肥胖密切相关。

关键词：糖尿病 2型超重/肥胖糖脂代谢黑色素浓缩激素

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多囊卵巢综合征与代谢异常

中华糖尿病杂志 2024年第3期16卷 371-376页

作者：廖鑫黄琦张琳王茜遵义医科大学附属医院内分泌与代谢病科遵义563000 遵义医科大学附属医院核医学科遵义563000

多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄妇女最常见内分泌疾病之一,PCOS患者大多存在糖脂代谢异常,同时高血压、脂肪肝以及心血管疾病的发生风险显著增加。因此,PCOS患者除了关注生殖异常,更需要关注代谢异常。所有PCOS患者就诊时均应评估是否存在... 详细信息

多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄妇女最常见内分泌疾病之一,PCOS患者大多存在糖脂代谢异常,同时高血压、脂肪肝以及心血管疾病的发生风险显著增加。因此,PCOS患者除了关注生殖异常,更需要关注代谢异常。所有PCOS患者就诊时均应评估是否存在代谢异常,尤其是糖代谢。生活方式的干预和管理是改善PCOS患者代谢异常最基础、最重要的非药物措施。药物治疗中,二甲双胍、噻唑烷二酮类以及α-葡萄糖苷酶抑制剂等药物治疗在多个指南中有相应的推荐,近年来的文献报道,新型降糖药物胰高糖素样肽-1受体激动剂及钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂也有改善PCOS女性代谢异常的作用。

关键词：多囊卵巢综合征雄激素增多症代谢异常胰岛素抵抗

miR-515-5p靶向Toll样受体4调控髓样分化因子88/NF-κB通路抑制骨关节炎软骨细胞凋亡及炎症反应的分子机制研究

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中国修复重建外科杂志 2024年第3期38卷 315-323页

作者：蔡东峰杨子肖钟超张靖洪嵩遵义医科大学附属医院骨科贵州遵义563000

目的探究miR-515-5p抑制骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞凋亡、缓解炎症反应的分子机制。方法体外培养人软骨细胞系C28/I2,使用10 ng/mL IL-1β处理细胞24 h构建体外OA模型;另外,分别采用miR mimics、mimics阴性对照(negative cont... 详细信息

目的探究miR-515-5p抑制骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞凋亡、缓解炎症反应的分子机制。方法体外培养人软骨细胞系C28/I2,使用10 ng/mL IL-1β处理细胞24 h构建体外OA模型;另外,分别采用miR mimics、mimics阴性对照(negative control,NC)、过表达(over expression,oe)-NC和oe-Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)转染C28/I2细胞后,使用10 ng/mL IL-1β处理各组细胞24 h构建OA模型。采用细胞计数试剂盒8和EdU检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Western blot检测B淋巴细胞瘤2蛋白(B-cell lymphoma 2 protion,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、裂解的半胱天冬酶3(cleaved-Caspase-3)、TLR4、髓样分化因子88(myeloid differentiation primary response gene 88,MyD88)、p65及磷酸化p65(phosphorylated p65,p-p65)蛋白的表达水平,实时荧光定量PCR检测miR-515-5p、TLR4mRNA表达水平,ELISA检测细胞上清液中促炎因子前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)、TNF-α、IL-6的水平。通过BiBiServ2数据库预测miR-515-5p和TLR4之间的潜在结合位点,并采用双荧光素酶报告实验验证miR-515-5p和TLR4的靶向关系。结果采用IL-1β处理C28/I2细胞后,miR-515-5p、Bcl-2蛋白的表达及细胞增殖能力均显著降低,Bax和cleaved-Caspase-3蛋白表达水平、细胞上清液中促炎因子(PGE2、TNF-α、IL-6)水平及细胞凋亡率均显著增加;此外,S期和G2期细胞比例显著降低,G1期细胞比例显著增加,提示IL-1β处理后细胞周期受到阻滞。而转染miR mimics后,细胞中miR-515-5p表达水平显著上调,部分逆转了IL-1β诱导的OA软骨细胞凋亡,缓解了OA软骨细胞的周期阻滞和炎症反应。采用IL-1β处理C28/I2细胞后,TLR4的mRNA和蛋白水平均显著升高;过表达miR-515-5p后,靶向抑制了TLR4的表达并且阻断了MyD88/NF-κB通路的激活。而过表达TLR4可部分逆转miR mimics对IL-1β诱导的OA软骨细胞凋亡及炎症的改善作用。结论miR-515-5p靶向负调控TLR4的表达,抑制了MyD88/NF-κB通路激活以及OA软骨细胞凋亡,并有效缓解了细胞炎症反应。

关键词：骨关节炎软骨细胞炎症反应 miR-515-5p Toll样受体4 细胞凋亡细胞周期

CLDN9过表达与结肠腺癌患者预后不良和免疫浸润相关

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中国免疫学杂志 2024年

作者：范腾阳柯迪邹曲邹林林余飞肖雪遵义医科大学附属医院全科医学科遵义医科大学附属医院介入科

目的：探究CLDN9在结肠腺癌（Colon adenocarcinoma，COAD）中的表水平和在临床和免疫中的潜在价值。方法：利用癌症基因图谱和GTEx数据库中转录组数据鉴定CLDN9基因在COAD中的表达水平，且探究CLDN9过表达水平与COAD患者临床病理学特... 详细信息

目的：探究CLDN9在结肠腺癌（Colon adenocarcinoma，COAD）中的表水平和在临床和免疫中的潜在价值。方法：利用癌症基因图谱和GTEx数据库中转录组数据鉴定CLDN9基因在COAD中的表达水平，且探究CLDN9过表达水平与COAD患者临床病理学特征和预后的关系。通过相关性研究和基因富集分析调查CLDN9表达水平与COAD免疫细胞浸润的关系及涉及的信号机制。结果：CLDN9在COAD组织中的表达水平显著升高。CLDN9表达水平升高与COAD患者年龄、临床分期、淋巴浸润、远处转移和生存时间相关，且与癌症患者的预后呈负相关关系。CLDN9表达水平与Th2细胞、T辅助细胞、Tcm、T细胞、aDC、细胞毒性细胞、Th1细胞、巨噬细胞和中性粒细胞水平呈负相关关系，与自然杀伤细胞、NK CD56bright细胞、嗜酸性粒细胞、iDC和TReg水平呈正相关关系。CLDN9可能通过趋化因子信号通路、PD-L1表达和PD-1检查点通路、IL-17信号通路和细胞因子受体相互作用影响COAD进展。结论：CLDN9过表达是COAD患者的预后不良因素，且与COAD免疫微环境有关。

关键词： CLDN9 结肠腺癌免疫细胞浸润基因富集分析总生存期