检索结果-南通市图书馆

作者：曾乾桃遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:对比分析同期三镜（腹腔镜、胆管镜、十二指肠镜）下行逐级导管乳头扩张术（laparoscopic duodenal papilla step by step dilatable catheter dilatation,LPCD）与内镜乳头切开术（laparoscopic endoscopic papillary sphincterotomy,LEST）治疗胆囊结石合并胆总管结石、Vater壶腹部梗阻的术后实验室指标及围手术期常见并发症情况,探讨经腹顺行引导法逐级导管乳头扩张术治疗胆囊结石合并胆总管结石、Vater壶腹部梗阻的临床应用价值。方法:本文主要采用了回顾性分析的方法,研究了成都市第二人民医院在2016年1月到2018年12月之间所收治的共100例胆囊结石合并胆总管结石、Vater壶腹部梗阻的患者,其中50位患者施行胆囊切除术+逐级导管乳头扩张术+鼻胆管引流术（LPCD组）;另外50位患者施行胆囊切除术+乳头切开术+鼻胆管引流术（LEST组）。本文将这两组患者的临床资料进行了对比分析,两组患者由两组医生独立收治,并采用了不同的手术方式。本文所比较的患者术前一般资料主要包括年龄,性别以及手术前丙氨酸转移酶（ALT）、门冬氨酸转移酶（AST）、总胆红素、直接胆红素、胆总管内径、胆总管结石直径等情况;术中资料:手术时间、术中出血量;术后资料:术后丙氨酸转移酶、门冬氨酸转移酶、总胆红素、直接胆红素、术后腹腔引流量、住院天数、术后并发症等信息,并且对这些信息进行了统计学分析。结果:两组患者在术前一般资料,例如性别,年龄等,差异无统计学意义（P＞0.05）,因此具有可对比性。两组患者的手术均成功,未出现中转开腹的过程,无死亡病例。术后两组患者的ALT、AST、总胆红素的比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。LPCD组术中出血量少于LEST组,两组差异有统计学意义（P=0.000）。LPCD组手术时间少于LEST组,两组差异有统计学意义（P=0.000）。LPCD组术后腹腔引流液总量少于LEST组,两组差异有统计学意义（P=0.000）。LPCD组住院时间少于LEST组,因此两组之间的差异具有统计学意义（P=0.000）。LPCD组术后直接胆红素对比LEST组差异有统计学意义（P=0.000）。LPCD组患者术后均未出现胆漏、胰腺炎、胆道出血、电解质紊乱等并发症,LEST组术后出3例胰腺炎,10例电解质紊乱,未出现胆漏及胆道出血。结论:经腹顺行引导法逐级导管乳头扩张术在同期三镜联合下治疗胆囊结石合并胆总管结石、Vater壶腹部梗阻是安全且有效的,该术式有效减少术中出血量及手术时间,显著减少术后腹腔引流液量和住院时间,这种方式还可以有效降低术后并发症的发生率,因此是一种安全有效的手术方式,临床应用前景较为广阔。

关键词：胆总管结石内镜乳头括约肌切开术逐级导管扩张术

p57KIP2、p53、C-erbB-2在子宫内膜样癌中的表达及与临床病理特征的关系

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p57KIP2、p53、C-erbB-2在子宫内膜样癌中的表达及与临床病理特征...

作者：张春英遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:通过检测p57、p53、C-erbB-2三种蛋白在子宫内膜样癌(Endometrioid carcinoma,EC)组织及正常子宫内膜组织中的表达情况,探讨三者与EC发生发展的关系,为临床判断EC患者的生物学行为提供一定的临床参考价值。方法:选取存档的100例EC... 详细信息

目的:通过检测p57、p53、C-erbB-2三种蛋白在子宫内膜样癌(Endometrioid carcinoma,EC)组织及正常子宫内膜组织中的表达情况,探讨三者与EC发生发展的关系,为临床判断EC患者的生物学行为提供一定的临床参考价值。方法:选取存档的100例EC组织作为实验组,60例正常子宫内膜(增生期、分泌期各30例)为对照组,运用Envision法,分别检测p57、p53、C-erbB-2三种蛋白在EC组织及正常子宫内膜组织中表达情况,以及三者在EC组织不同临床病理特征(组织学分级、临床分期、肌层浸润深度、年龄大小、有无淋巴结转移)中的相关性分析。结果:1、p57、p53、C-erbB-2蛋白在EC组织和增生期、分泌期组织中的表达情况:p57蛋白在EC组织的阳性表达率(30%)低于分泌期组织中的阳性表达率(93.3%),高于在增生期组织中的阳性表达率(3.3%),在增生期、分泌期与EC组织中的阳性表达率三组总体比较有统计学意义(P病理特征的关系:在EC组织中,p57KIP2蛋白随着组织学分级的增加,阳性表达率呈递减趋势(在组织学Ⅰ级中表达最高,组织学Ⅲ级中表达最低),总体比较差异有统计学意义,两两比较仅在Ⅰ级和Ⅲ级、Ⅱ级和Ⅲ级之间的表达比较有统计学意义(P≤0.017)。p53、C-erbB-2蛋白均随着组织学分级的增加,其阳性表达率呈递增趋势(在组织学Ⅰ级中表达最低,在组织学Ⅲ级中表达最高),总体比较差异有统计学意义(P病理分期由早期向晚期进展,p57KIP2蛋白阳性表达率逐渐减少,C-erbB-2蛋白阳性表达率逐渐增加,两者的阳性表达率均有统计学意义(P病理分期无关。三者阳性表达率均与盆腔淋巴结转移、患者年龄大小无关(P>0.05)。3、p57、p53与C-erbB-2蛋白表达之间的关系:在EC组织中,p53蛋白、C-erbB-2蛋白表达呈正相关(P0.05)。结论:1、在EC组织中,p57、p53与C-erbB-2蛋白可能与EC的发生发展有关,而p57蛋白参与的细胞周期调控失衡可能与女性激素周期性调控有关。2、在EC组织中,随着组织学分级、手术病理分期、肌层浸润深度的增加,p57蛋白的表达逐渐减少,C-erbB-2蛋白的表达则逐渐增加;p53蛋白随着组织学分级、肌层浸润深度的增加,其表达逐渐增加。p57蛋白的低表达,p53、C-erbB-2蛋白的高表达,可能预示着EC患者有更差的预后。3、在EC组织中,p53蛋白与C-erbB-2蛋白表达之间呈正相关。4、联合检测EC患者肿瘤组织中p57、p53与C-erbB-2蛋白的表达情况,对指导临床评估患者的生物学行为有较为积极的指导意义。

关键词： p57KIP2 p53 C-erbB-2 子宫内膜样癌

弥漫性大B细胞淋巴瘤中Pim-3蛋白与Bcl-2蛋白的表达及相关性研究

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弥漫性大B细胞淋巴瘤中Pim-3蛋白与Bcl-2蛋白的表达及相关性研究

作者：李昕睿遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究以弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)患者和健康体检者的血清为研究对象,通过检测Pim-3蛋白与Bcl-2蛋白在血清中的表达情况,探索Pim-3蛋白和Bcl-2蛋白与患者的临床特征、发病及治疗前后的关系以及... 详细信息

目的:本研究以弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)患者和健康体检者的血清为研究对象,通过检测Pim-3蛋白与Bcl-2蛋白在血清中的表达情况,探索Pim-3蛋白和Bcl-2蛋白与患者的临床特征、发病及治疗前后的关系以及两者之间的相关性,为DLBCL的临床诊疗提供理论依据和新的思路。方法:收集遵义医科大学附属医院2019年9月至2020年12月血液内科收治的18例DLBCL初诊患者血清样本为实验组(所有患者均通过病理活检确诊),其中9例患者经4个疗程化疗后达到缓解,治疗方案均为R-CHOP方案,同时收集我院20例健康体检者血清样本为对照组。使用酶联免疫吸附试验的方法测定Pim-3蛋白与Bcl-2蛋白在DLBCL患者中与健康体检者之中的具体表达状况,从而对比DLBCL初诊患者化疗前后血清中Pim-3蛋白水平与Bcl-2蛋白水平的变化以及两者表达在性别、年龄、分期、分组、乳酸脱氢酶高低、有无结外浸润、IPI评分及免疫表型等临床因素方面的差别;对比DLBCL初诊患者及健康对照组血清中Pim-3蛋白水平与Bcl-2蛋白水平。两个组别之间的对比使用独立样本t检验的方案,治疗前后的数据对比使用配对t检验的方案,来探讨两组指标有无统计学差异,初诊组中Pim-3蛋白与Bcl-2蛋白的相关性采用Pearson相关分析,治疗前后的数据对比使用配对t检验的方案来分析两者间有无相关性。结果:(1)在DLBCL初诊患者血清中Pim-3蛋白与Bcl-2蛋白的表达水平在性别、年龄、分期、分组、乳酸脱氢酶高低、有无结外浸润、IPI评分及免疫表型等临床因素上无明显差异(P>0.05)。(2)Pim-3蛋白与Bcl-2蛋白在DLBCL初诊患者中的表达明显高于健康体检者,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)治疗后缓解的DLBCL患者血清Pim-3蛋白与Bcl-2蛋白表达低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)在DLBCL中,Pim-3蛋白与Bcl-2蛋白的表达具有正相关性。结论:(1)Pim-3蛋白与Bcl-2蛋白在DLBCL患者血清中的表达水平高于其在正常人血清中的表达水平;在DLBCL中,治疗后达到缓解的患者血清中Pim-3蛋白与Bcl-2蛋白表达水平低于其在治疗前的表达水平,表明Pim-3蛋白与Bcl-2蛋白有可能参与了DLBCL的发生与发展。(2)在DLBCL中,Pim-3蛋白与Bcl-2蛋白具有正相关性,表明两者可能共同参与了凋亡环节,影响了疾病的进程。

关键词： Pim-3 Bcl-2 弥漫性大B细胞淋巴瘤

悬吊式胰管空肠端侧连续缝合吻合术在PD中的临床应用价值

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悬吊式胰管空肠端侧连续缝合吻合术在PD中的临床应用价值

作者：金琦智遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:胰十二指肠切除术(Pancreaticoduodenectomy,PD)中随机采用胰管-空肠黏膜对黏膜端侧吻合术和悬吊式胰管空肠端侧连续缝合吻合术进行胰肠吻合,比较分析两组患者术后早期并发症等情况,探讨悬吊式胰管空肠端侧连续缝合吻合术在PD中的... 详细信息

目的:胰十二指肠切除术(Pancreaticoduodenectomy,PD)中随机采用胰管-空肠黏膜对黏膜端侧吻合术和悬吊式胰管空肠端侧连续缝合吻合术进行胰肠吻合,比较分析两组患者术后早期并发症等情况,探讨悬吊式胰管空肠端侧连续缝合吻合术在PD中的临床应用价值。根据术前总胆红素(Total bilirubin,TBIL)水平和血清白蛋白(Albumin,ALB)水平分为两个亚组进行亚组内比较分析,评价该术式安全性和有效性。方法:采用回顾性研究的方法,收集2015.08-2018.08于XX医院肝胆胰中心行PD手术治疗的患者。共纳入206例患者,根据术式的不同分为悬吊组和经典组,悬吊组共119人,均采用悬吊式胰管空肠端侧连续缝合吻合术行胰肠吻合。经典组共87人,均采用胰管-空肠黏膜对黏膜端侧吻合术行胰肠吻合。针对意见尚不统一的两个因素,分别设立两个亚组:(1)胆红素亚组:根据黄疸程度的不同,分为高胆红素亚组,TBIL≥171(?)mol/L;低胆红素亚组,TBIL病理资料其他特殊情况),术后并发症资料(总并发症、围手术期死亡、胰瘘(Postoperative Pancreatic Fistula,POPF)、生化漏(Biochemical Leakage,BL)、术后出血(Post Pancreaticoduodenectomy Hemorrhage,PPH)、胃排空障碍(Delayed Gastric Empting,DGE)、胆瘘、乳糜漏、腹腔感染和切口感染),术后恢复情况(术后腹腔引流管留置时间、总住院费用、住院时间和再次手术例数)进行统计学分析比较。结果:1、悬吊组和经典组患者术前资料比较,差异无显著性(P＜0.05)。(1)悬吊组:低胆红素亚组和高胆红素亚组术前资料中,仅TBIL差异有统计学意义(P＞0.05),TBIL分别为47.89±45.48(?)mol/L和260.99±60.59(?)mol/L。余术前资料比较,差异无显著性(P＜0.05)。两亚组可进行差异性比较。高蛋白亚组和低高蛋白亚组患者术前资料中,仅ALB差异有统计学意义(P＞0.05),ALB分别为39.25±2.45g/L和31.57±2.44g/L。余术前资料比较,差异无显著性(P＜0.05)。两亚组可进行差异性比较。(2)经典组:低胆红素亚组和高胆红素亚组术前资料中,仅TBIL差异有统计学意义(P＞0.05),TBIL分别为28.5(21.30～54.10)μmol/L和260.3(182.3～318.6)μmol/L。余术前资料比较,差异无显著性(P＜0.05)。两亚组可进行差异性比较。高蛋白亚组和低高蛋白亚组患者术前资料中,仅ALB差异有统计学意义(P＞0.05),ALB分别为39.25±2.45g/L和31.57±2.44g/L。余术前资料比较,差异无显著性(P＜0.05)。两亚组可进行差异性比较。2、悬吊组和经典组患者手术时间分别为356.76±71.80 min和377.99±68.52 min,悬吊组明显低于经典组,差异具有统计学意义(P＞0.05)。余术中资料比较,差异无显著性(P＜0.05)。病理资料,良性病变30例(14.6%),恶性病变176例(85.4%),组间比较无统计学差异(P＜0.05)。(1)悬吊组:高胆红素亚组术中输血12例明显多于低胆红素亚组6例(27.9%VS7.9%),差异具有统计学意义(P＞0.05)。高胆红素亚组术中出血量较低胆红素亚组多[350(300～400)ml VS 350(280～397.5)ml],差异具有统计学意义(P＞0.05)。余术中资料两亚组间比较,差异均无显著性(P＜0.05)。高蛋白亚组和低高蛋白亚组术中资料比较,差异均无显著性(P＜0.05)。(2)经典组:高胆红素亚组术中出血量较低胆红素亚组多[345(280～380)ml VS380(380～430)ml],差异具有统计学意义(P＞0.05)。余术中资料两亚组间比较,差异均无显著性(P＜0.05)。高蛋白亚组和低高蛋白亚组术中资料比较,差异均无显著性(P>0

关键词：胰十二指肠切除术胰瘘胰肠吻合

大黄附子汤对重症急性胰腺炎大鼠肠道菌群及肠黏膜机械屏障的影响及其意义

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大黄附子汤对重症急性胰腺炎大鼠肠道菌群及肠黏膜机械屏障的影响...

作者：杨轶仑遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:通过应用大黄附子汤对重症急性胰腺炎大鼠进行干预,观察其肠道菌群的变化,测定肠黏膜机械屏障紧密连接蛋白Claudin-1、occludin、ZO-1的表达情况,探讨大黄附子汤对重症急性胰腺炎大鼠肠道菌群及肠黏膜机械屏障的作用及意义。方法:... 详细信息

目的:通过应用大黄附子汤对重症急性胰腺炎大鼠进行干预,观察其肠道菌群的变化,测定肠黏膜机械屏障紧密连接蛋白Claudin-1、occludin、ZO-1的表达情况,探讨大黄附子汤对重症急性胰腺炎大鼠肠道菌群及肠黏膜机械屏障的作用及意义。方法:SPF级雄性大鼠24只,体重230-270g,随机分为4组:假手术组(SH,n=6),大黄附子汤-假手术组(SH-DHFZT,n=6),重症急性胰腺炎组(SAP,n=6),大黄附子汤治疗组(DHFZT,n=6),采用异氟烷气体麻醉方式麻醉;假手术组、大黄附子汤-假手术组大鼠开腹后,翻动胰腺数次后关腹;SAP组、治疗组经胰胆管缓慢逆行注入4%牛磺胆酸钠(1ml/kg)诱导SAP模型,造模成功后假手术组、SAP组用2ml生理盐水(约38℃)于术后12、24、36小时保留灌肠;大黄附子汤-假手术组与治疗组用2ml大黄附子汤(约38℃)于术后12、24、36小时保留灌肠干预治疗。各组大鼠在48h处死后开腹,经腹主动脉抽血,使用生化分析仪检测血浆内毒素、血淀粉酶、血钙,ELISA法炎症因子IL-1β、肠黏膜二胺氧化酶(DAO)水平。光学显微镜下观察肺、胰腺、回肠组织HE染色形态学变化。应用Smith评分法对实验各组肺组织进行病理评分,评价肺损伤程度,以明确SAP模型是否建立成功。应用改良Schmidt评分标准对胰腺组织进行病理评分,Chiu肠黏膜损伤评分标准对回肠组织进行评分。应用免疫组化及免疫荧光法检测肠黏膜ZO-1、occludin、claudin-1表达与分布,Westernblot对ZO-1、occludin以及claudin-1进行半定量分析,采用16S rRNA基因测序法分析回肠段肠黏膜菌群。结果:1.大黄附子汤-假手术组血清内毒素、淀粉酶、DAO及IL-1β水平较假手术组无明显差异;SAP组血清内毒素、淀粉酶、DAO及IL-1β水平均较假手术组明显升高,血钙含量较假手术组降低;治疗组血清内毒素、淀粉酶、DAO及IL-1β水平则较SAP组减少,血钙含量较SAP组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。2.假手术组、大黄附子汤-假手术组胰腺、肺及回肠组织结构均无明显损伤,大黄附子汤-假手术组肠黏膜ZO-1、occludin、claudin-1表达与假手术组相比无明显变化;SAP组大鼠48h后胰腺、肺及回肠组织结构均发生不同程度破坏,ZO-1、occludin、claudin-1表达减弱。经大黄附子汤治疗后,胰腺、肺及回肠组织结构破坏有修复,肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1表达水平较SAP组明显增加。3.大黄附子汤-假手术组菌群样本因受到污染未能测出可用结果,其余各组回肠组织菌群分析结果显示,与假手术组相比,SAP组菌群丰富度和多样性在整体水平上无显著变化。而大黄附子汤治疗组显著增加了菌群丰度(P<0.05,除门水平外)和菌群多样性(P<0.05);假手术组、SAP组和大黄附子汤组治疗三组菌群结构存在显著差异。根据菌群组成分析结果,厚壁菌门(Firmicutes),拟杆菌门(Bacteroidetes)和变形菌门(Proteobacteria)是相关菌群中的三个相对优势菌门,其中以厚壁菌门(Firmicutes)为最优势。在门水平上,SAP组优势菌门无显著变化,大黄附子汤组治疗组变形菌门(Proteobacteria)显著增加。在属水平,假手术组中乳杆菌属(Lactobacillus)为优势菌属,在发生SAP后其相对丰度发生明显下降,优势地位为相对丰富度明显增加消化链球菌(unclassified_eptostreptococcaceae)所取代。治疗组乳杆菌属(Lactobacillus)较SAP组明显增加而重新成为优势菌属。结论:重症急性胰腺炎发生后,肠道菌群发生了改变,与此同时肠道结构被破坏,肠黏膜机械屏障的紧密连接表达水平降低,肠上皮通透性增加,内毒素等物质入血,血中炎症因子水平升高出现“类瀑布”式效应,加重病情。应用大黄附子汤治疗后,血清内毒素水平及IL-1β被降低,有效的抑制胰酶分泌及炎症因子的瀑布式激活。同时,大黄附子汤促进乳杆菌属等“益生菌”的增多,可能与促进肠上皮紧密连接蛋白表达有关,进而改善肠黏膜机械屏障,达到缓解病情的效果。

关键词：重症急性胰腺炎肠黏膜机械屏障肠道菌群大黄附子汤

CBS参与CCI大鼠背根神经节NF-κB痛觉调制作用的研究

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CBS参与CCI大鼠背根神经节NF-κB痛觉调制作用的研究

作者：代韵柯遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:观察胱硫醚-β-合成酶(CBS)对坐骨神经慢性缩窄性损伤(CCI)大鼠的疼痛阈值及核因子-κB(NF-κB)、蛋白激酶C(PKC)表达的影响,探讨CBS在背根神经节NF-κB痛觉调制中的作用及可能机制。方法:健康雄性SPF级SD大鼠36只(18000g),鞘内置... 详细信息

目的:观察胱硫醚-β-合成酶(CBS)对坐骨神经慢性缩窄性损伤(CCI)大鼠的疼痛阈值及核因子-κB(NF-κB)、蛋白激酶C(PKC)表达的影响,探讨CBS在背根神经节NF-κB痛觉调制中的作用及可能机制。方法:健康雄性SPF级SD大鼠36只(18000g),鞘内置管成功后,采用随机数字表法分为3组(n=12):假手术组(Sham组),CCI模型组(CCI组)和CBS抑制剂AOAA组(CCI+AOAA组)。鞘内置管第3d,CCI组和CCI+AOAA组建立神经病理性疼痛模型(CCI模型);Sham组只游离坐骨神经主干而不结扎。术后第1d起连续14d对大鼠进行鞘内注射给药(每天一次,同一时间点):Sham组和CCI组鞘内注射生理盐水20μl;CCI+AOAA组鞘内注射CBS抑制剂AOAA(10μg/kg)10μl,并用生理盐水10μl进行鞘内冲洗。分别于术前1d,术后1、3、7、10、14d鞘内注射后30min时测定各组大鼠的机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。术后7d和14d时处死大鼠,取出脊髓L4-6的背根神经节,运用免疫荧光染色技术观察背根神经节CBS和NF-κB p65的表达情况,Western Blot技术检测各组大鼠背根神经节CBS、p-NF-κB p65、p-PKC的表达情况。结果:与Sham组相比,CCI组大鼠术后1、3、7、10和14d时机械缩足阈值和热缩足潜伏期下降(P病理性疼痛的发生发展。内源性HS合成酶CBS在大鼠CCI所致的神经病理性疼痛中具有重要作用,可能通过调节背根神经节PKC/NF-κB信号通路参与痛觉过敏的形成和维持。

关键词：胱硫醚-β-合成酶硫化氢 NF-κB PKC CCI 神经病理性疼痛

MiR-19a调控血小板反应蛋白1在结直肠癌淋巴转移中的研究

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MiR-19a调控血小板反应蛋白1在结直肠癌淋巴转移中的研究

作者：王佩佩遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:以52例II-III期结直肠癌患者为对象,通过免疫组织化学方法研究THBS1在结直肠癌患者淋巴结中的差异性表达以及与预后的关系;在细胞水平初步探索mir-19a对THBS1的调节作用,以期为THBS1在结直肠癌淋巴转移中的作用打下前期理论基础。... 详细信息

目的:以52例II-III期结直肠癌患者为对象,通过免疫组织化学方法研究THBS1在结直肠癌患者淋巴结中的差异性表达以及与预后的关系;在细胞水平初步探索mir-19a对THBS1的调节作用,以期为THBS1在结直肠癌淋巴转移中的作用打下前期理论基础。方法:1、通过收集2015年1月至2017年2月在我院胃肠外科行结直肠癌根治术、病理分期为II期或者III期的患者淋巴结石蜡标本,所有患者的淋巴结经常规苏木精-伊红染色,显微镜下观察有无淋巴结转移。其中纳入研究的II期患者29人,选取区域淋巴结阴性石蜡标本29枚,纳入研究的III期患者23人,因III期个别患者术后存在1-3个淋巴结转移,故选取III期23例患者所有淋巴结阳性石蜡标本33枚,存在多个淋巴结转移的III期患者THBS1的表达水平取平均值进行分析。将选出的淋巴结石蜡标本切片行免疫组织化学实验,通过平均光密度值分析法检测有、无淋巴结转移的结直肠癌患者淋巴结中THBS1的表达情况;2、收集52例结直肠癌患者的一般临床资料,通过卡方检验分析THBS1的表达水平与结直肠癌患者临床病理特征的关系;以无进展生存时间(PFS)为观察指标,采用Kaplan-Meier法对结直肠癌患者绘制生存曲线,采用Log-rank检验比较两组患者生存时间,研究THBS1的表达水平与结直肠癌患者预后的关系;3、采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测四株不同结直肠癌细胞株(LOVO、HT116、SW480、HT29)中mi R-19a表达情况,筛选出mi R-19a表达最高和最低细胞株;4、对方法3中选出的两株结直肠癌细胞进行mi R-19a转染沉默或过表达,然后采用蛋白免疫印迹技术(Western Blot,WB)检测THBS1表达变化情况;5、用方法3中筛选出的两株结直肠癌细胞和转染沉默、过表达质粒后的两株结直肠癌细胞分别培养做细胞划痕实验,检测转染前后两株细胞的迁移能力;6、采用双荧光素酶实验对mi R-19a与THBS1 3’UTR区验证其结合情况。结果:1、免疫组织化学结果显示:THBS1在有、无淋巴结转移的结直肠癌术后淋巴结中的相对表达水平分别为0.261±0.053和0.451±0.014,有淋巴结转移的患者THBS1表达水平明显低于无淋巴结转移者,两者之间的差异具有统计学意义(P病理类型均无关(P>0.05),结直肠癌患者淋巴结中的THBS1表达水平与淋巴结是否转移有关(P<0.05);以PFS为观察指标,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,结果显示,THBS1低表达患者表现出比THBS1高表达患者更差的生存时间,经Log-rank检验,差异具有统计学意义(P=0.007);3、mi R-19a在结直肠癌细胞株LOVO、HT116、SW480、HT29中的表达量分别为:1.00±0.09、0.64±0.02、0.56±0.02、0.38±0.06,mi R-19a在结直肠癌LOVO细胞株中的表达量最高,HT29的mi R-19a的表达量最低;4、转染质粒前:HT29细胞的THBS1的蛋白表达量高于LOVO细胞;转染质粒后:HT29在转染了mi R-19a的过表达质粒后,THBS1的蛋白表达量显著下降;LOVO在转染了mi R-19a sh RNA后,THBS1的蛋白表达量显著上升;5、转染mi R-19a sh RNA后,LOVO细胞的迁移能力显著下降;HT29细胞转染mi R-19a过表达质粒后,迁移能力显著上升;6、LOVO和HT29在转染THBS1-3’UTR Mut后,和转染THBS1 3’UTR WT相比,荧光素酶活性显著上升。结论:1、结直肠癌转移阳性的淋巴结组织中THBS1的表达量明显低于转移阴性的淋巴结组织,THBS1的表达水平可能与结直肠癌患者的预后有关,THBS1的表达水平越低,结直肠癌患者可能预后较差;2、结直肠癌细胞中mi R-19a可能通过与THBS1 3’UTR区直接结合,从而抑制THBSl的表达,最终影响结直肠癌的发生与发展。

关键词： miR-19a 血小板反应蛋白1 结直肠癌淋巴结转移预后

BMAL1、Per2、Notch1、GSK-3β在结直肠腺癌组织中的表达及临床意义

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BMAL1、Per2、Notch1、GSK-3β在结直肠腺癌组织中的表达及临床意...

作者：杜胜奇遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:检测在结直肠癌旁、结直肠腺瘤及结直肠腺癌组织中BMAL1、Per2、Notch1、GSK-3β的表达情况及相关性。分析4个指标与结直肠癌临床病例特征之间的关系。方法:采用实时荧光定量PCR技术检测BMAL1、Per2、Notch1、GSK-3β在11例结直肠... 详细信息

目的:检测在结直肠癌旁、结直肠腺瘤及结直肠腺癌组织中BMAL1、Per2、Notch1、GSK-3β的表达情况及相关性。分析4个指标与结直肠癌临床病例特征之间的关系。方法:采用实时荧光定量PCR技术检测BMAL1、Per2、Notch1、GSK-3β在11例结直肠癌及其配对癌旁组织中的表达水平。收集50例结直肠腺癌的患者的癌组织标本及癌旁组织,以及30例结直肠腺瘤标本,采用免疫组化法分别检测BMAL1、Per2、Notch1、GSK-3β在各组织中的表达水平。进一步分析四者相关关系及与临床病例特征的关系。结果:PCR结果显示BMAL1、Per2在结直肠癌表达水平明显低于配对癌旁组织,差异具有统计学意义(P0.05)。免疫组化结果显示在结直肠癌旁、腺瘤及腺癌组织中BMAL1、Per2、Notch1、GSK-3β均有表达,BMAL1阳性率分别为74.0%(37/50)、46.7%(14/30)、12.0%(6/50),Per2阳性率分别为70.0%(35/50)、43.3%(13/30)、16.0%(8/50),Notch1阳性率分别为48.0%(24/50)、70%(21/30)、90.0%(45/50),GSK-3β阳性率分别为52.0%(26/50)、83.3%(25/30)、86.0%(43/50)。在结直肠腺癌组织中BMAL1、Per2阳性率均低于腺瘤及癌旁组织,而Notch1、GSK-3β阳性率均高于腺瘤及癌旁组织。在结直肠癌旁、腺瘤、腺癌三组间阳性表达程度两两比较,四个指标在癌旁与腺癌组、癌旁与腺瘤组间比较差异均有统计学意义(P0.05)。BMAL1在结直肠腺癌中表达与性别、年龄、表达部位、浸润深度、肿瘤大小、病理类型均无关(P>0.05),与淋巴结转移、TNM分期相关(P病理类型间存在差异(P病理类型相关(P病理类型有关。联合监测BMAL1、Notch1可能有助于评估结直肠腺癌患者的转移和预后。3.结直肠腺癌组织中GSK-3β与Per2表达呈负相关,GSK-3β与Notch1表达呈正相关,BMAL1与Per2表达水平呈正相关。

关键词：结直肠腺癌 BMAL1 Per2 Notch1 GSK-3β

莫诺苷对EphB4基因敲除的9月龄小鼠脑缺血损伤后神经发生的影响

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莫诺苷对EphB4基因敲除的9月龄小鼠脑缺血损伤后神经发生的影响

作者：李子洁遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:现我国缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)死亡率位居全球第二位。由于环境及生活习惯等原因,中年人群是卒中发病的主要群体,本研究利用九月龄小鼠缺血再灌注损伤模型模拟中年卒中患者。近年来随着对成年哺乳动物神经发生的研究,人... 详细信息

目的:现我国缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)死亡率位居全球第二位。由于环境及生活习惯等原因,中年人群是卒中发病的主要群体,本研究利用九月龄小鼠缺血再灌注损伤模型模拟中年卒中患者。近年来随着对成年哺乳动物神经发生的研究,人们发现卒中后会诱发微弱的神经发生,我们前期研究发现从本课题组提取的单体化合物莫诺苷可以有效促进大鼠IS后神经功能的恢复,减少脑梗死体积,并且增强室管膜下区(SVZ)神经干细胞增殖和分化,增加梗死周边新生的神经元。同时,我们首次发现EphB4受体是调节神经干细胞的增殖分化的关键因素之一。此外EphB4与莫诺苷良好结合性,在大鼠IS后EphB4受体的表达也受到莫诺苷的调节。因此我们推测莫诺苷可能作用于EphB4受体来调控IS后神经发生。本课题通过对条件性敲除神经干细胞中EphB4的9月龄转基因小鼠进行缺血再灌注损伤造模,观察莫诺苷对其神经功能以及神经发生的影响,深入探究EphB4是否是莫诺苷治疗卒中的关键靶点,以期为卒中后神经再生与修复治疗提供理论依据。方法:(1)通过注射他莫昔芬诱导神经干细胞特异性EphB4敲除(Nestin-Cre ERT2;EphB4)转基因小鼠模型。(2)选取体重25-30g之间的转基因敲除小鼠和野生型9月龄小鼠建立局灶性缺血再灌注(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)模型,随机分成8个组:野生假手术组、野生假手术加药组、野生模型组、野生模型加药组、敲除假手术组、敲除假手术加药组、敲除模型组、敲除模型加药组。给药组进行莫诺苷(270mg/kg,qd)灌胃给药,假手术组和模型组则给予等量生理盐水。术后1天、7天、28天进行转棒,m NSS和步态行为学测试。(3)术后7天后灌注取材,免疫荧光(Immunofluorescence,IF)染色法检测小鼠脑梗死后SVZ中Brd U/EphB4/Nestin、Brd U/EphB4/SOX2、Brd U/EphB4/DCX的神经发生情况。结果:(1)行为学测试结果显示,(1)转棒试验:野生鼠MCAO造模后连续给予莫诺苷28天,可显著延长小鼠的平均在棒时间,敲除鼠模型组和对照鼠模型组相比无统计学差异,敲除给药组与模型组相比无明显变化;(2)m NSS评分:与模型组相比,术后连续给予莫诺苷7天和28天的野生小鼠,m NSS分数显著降低,敲除鼠模型组和对照鼠模型组相比无统计学差异,敲除给药组与模型组相比无明显变化;(3)步态测试:MCAO造模后28天与野生模型组相比,给药组小鼠Catwalk步态参数发生改变,表现为小鼠通过跑道的持续时间、前后肢爪间宽度、左侧肢摆动时间和摆动速度显著降低,平均速度和左前、左后、右后肢步长显著增加,敲除给药组与模型组相比虽有改善趋势但无统计学差异,且敲除后对小鼠行为学无明显变化。(2)免疫荧光染色结果显示:造模后,敲除组与野生组相比,Brd U/Nestin和Brd U/DCX阳性细胞数明显降低。与野生鼠模型组相比,给予莫诺苷后Brd U/Nestin/EphB4细胞数与Nestin/EphB4的百分比、Brd U/SOX2/EphB4细胞数与SOX2/EphB4的百分比、Brd U/DCX/EphB4细胞数与DCX/EphB4的百分比显著增加。但敲除模型组与模型给药组相比无统计学差异。结论:莫诺苷可以促进9月龄小鼠神经功能的恢复以及神经干细胞的增殖和分化,条件性敲除EphB4后,神经功能的恢复作用不明显,并且促进神经发生能力减弱,说明莫诺苷调控神经发生的机制可能与EphB4受体有关,为卒中治疗提供新靶点。

关键词： EphB4 小鼠莫诺苷脑卒中神经发生

弥漫大B细胞淋巴瘤中ENO1蛋白的表达及临床意义

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弥漫大B细胞淋巴瘤中ENO1蛋白的表达及临床意义

作者：文春菊遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究旨在探讨ɑ-烯醇化酶(ENO1)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织及反应增生性淋巴结组织中的表达情况,并分析DLBCL组织中ENO1表达水平与临床资料及其预后的关系,为DLBCL的临床进展及预后评估提供可能预测的指标。方法:收集2013年... 详细信息

目的:本研究旨在探讨ɑ-烯醇化酶(ENO1)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织及反应增生性淋巴结组织中的表达情况,并分析DLBCL组织中ENO1表达水平与临床资料及其预后的关系,为DLBCL的临床进展及预后评估提供可能预测的指标。方法:收集2013年7月019年3月在遵义医科大学附属医院收治入院的50例经临床及病理确诊的DLBCL作为实验组,并选取本院同期20例反应增生性淋巴结作为对照组。运用免疫组织化学的方法检测ENO1在DLBCL组织及反应增生性淋巴结组织中的表达。同时收集DLBCL患者的性别、年龄、IPI评分、Ann Arbor分期、乳酸脱氢酶(LDH)等临床资料以及随访资料,分析ENO1在DLBCL中的表达水平与临床资料及其预后的关系。P0.05)。ENO1表达水平与DLBCL患者化疗效果之间比较无统计学差异(P>0.05)。单因素分析ENO1表达水平与DLBCL患者总生存(OS)时间之间比较,差异有统计学意义(P0.05)。多因素COX分析ENO1蛋白的表达水平不是DLBCL独立危险因素;(3)在生发中心型(GCB)DLBCL中,ENO1表达水平与性别、IPI评分、LDH水平、Bcl-6表达等临床资料及化疗效果之间均无统计学差异(P>0.05),单因素分析ENO1表达水平与患者OS之间比较具有统计学差异(P0.05)。结论:ENO1在DLBCL中高表达,ENO1高表达与Ki-67、IPI、ECOG、LDH存在相关性,ENO1高表达的患者OS下降。

关键词：弥漫大B细胞淋巴瘤 ɑ-烯醇化酶(ENO1) 糖酵解免疫组织化学