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原代成骨细胞来源胞外囊泡促进破骨细胞分化

浙江大学学报（医学版） 2024年第4期53卷 434-442页

作者：张岚谭静怡浙江医院口腔科浙江杭州310030 浙江大学医学院附属第二医院口腔内科浙江杭州310009

目的:观察原代成骨细胞来源胞外囊泡(OB-EV)对破骨细胞增殖、分化的作用,探究胞外囊泡参与成骨细胞和破骨细胞之间通信的可能分子机制。方法:采用酶消化法分离原代成骨细胞,并以β-甘油磷酸钠、抗坏血酸、地塞米松成骨诱导液诱导培养,... 详细信息

目的:观察原代成骨细胞来源胞外囊泡(OB-EV)对破骨细胞增殖、分化的作用,探究胞外囊泡参与成骨细胞和破骨细胞之间通信的可能分子机制。方法:采用酶消化法分离原代成骨细胞,并以β-甘油磷酸钠、抗坏血酸、地塞米松成骨诱导液诱导培养,通过碱性磷酸酶染色及茜素红S染色鉴定成骨细胞分化及矿化功能。收集成骨细胞培养上清液,采用超速离心法提取囊泡分泌物,并通过透射电镜观察囊泡形态,蛋白质印迹法鉴定胞外囊泡表面特征性标志物肿瘤易感基因101(TSG101)、ALG-2相互作用蛋白X(Alix)和分化抗原9(CD9)。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验检测OB-EV对RAW264.7的增殖作用。进一步通过蛋白质印迹法检测OB-EV与核因子κB受体活化因子配体(RANKL)联合作用后RAW264.7破骨分化标志物的表达水平。将OB-EV处理的小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM)通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察并比较破骨细胞数,明确OB-EV对破骨细胞分化的影响。结果:透射电镜观察提取的OB-EV呈直径为30~150 nm的双层杯状结构,且TSG101、Alix、CD9呈阳性表达。CCK-8实验结果显示高浓度(20μg/mL以上)OB-EV抑制RAW264.7增殖(P<0.05)。蛋白质印迹法检测发现RAW264.7中c-Fos、活化T细胞核因子(NFATc1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)等破骨细胞分化标志蛋白表达明显增加,且随OB-EV浓度增加而增加(P<0.05)。此外,将OB-EV与RANKL联合作用于BMM,结果显示TRAP阳性细胞较RANKL对照组显著增多(P<0.05)。结论:OB-EV可促进破骨前体细胞向破骨细胞分化,但高浓度OB-EV会抑制细胞增殖。

关键词：成骨细胞胞外囊泡破骨细胞分化小鼠

《增殖性疣状白斑:标准化评估和报告的专家共识指南》解读

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中华口腔医学杂志 2024年第8期59卷 771-776页

作者：张珊珊刘传霞陈谦明浙江大学医学院附属口腔医院口腔内科中心·浙江大学口腔医学院、浙江省口腔疾病临床医学研究中心、浙江省口腔生物医学研究重点实验室、浙江大学癌症研究院杭州310006 浙江大学医学院附属口腔医院·浙江大学口腔医学院、浙江省口腔疾病临床医学研究中心、浙江省口腔生物医学研究重点实验室、浙江大学癌症研究院杭州310006

增殖性疣状白斑(PVL)是一种特殊的口腔白斑病,具有高复发率和高癌变率的特点。2021年由美国口腔和颌面部病理学学会和北美头颈病理学家协会推出“PVL:标准化评估和报告的专家共识指南”,并将PVL分为四类:①非反应性的波纹状过度正角化... 详细信息

增殖性疣状白斑(PVL)是一种特殊的口腔白斑病,具有高复发率和高癌变率的特点。2021年由美国口腔和颌面部病理学学会和北美头颈病理学家协会推出“PVL:标准化评估和报告的专家共识指南”,并将PVL分为四类:①非反应性的波纹状过度正角化或不全角化;②非反应性的大面积过度角化的上皮增生;③鳞状细胞癌或疑为鳞状细胞癌;④不符合上述任何类别。本文对指南中PVL的新分类进行解读,以期为PVL的临床诊治工作提供参考。

关键词：白斑,口腔增殖性疣状白斑国际共识指南指南解读组织病理学鉴别诊断

精氨酸对变异链球菌生物膜及牙骨质再矿化作用的体外研究

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郑州大学学报（医学版） 2024年第1期59卷 67-71页

作者：王素苹方立新陶地豪张宜爽郭安迪刘飞郑州大学第一附属医院口腔内科郑州450052 郑州大学口腔医学院郑州450052

目的:观察精氨酸对变异链球菌生物膜和牙骨质再矿化的作用,探讨精氨酸对根面龋预防的临床效果及可行性。方法:以不加精氨酸为对照组,采用4种不同质量浓度的精氨酸溶液处理变异链球菌生物膜,研究精氨酸在龋病预防中的效果。24 h后通过pH... 详细信息

目的:观察精氨酸对变异链球菌生物膜和牙骨质再矿化的作用,探讨精氨酸对根面龋预防的临床效果及可行性。方法:以不加精氨酸为对照组,采用4种不同质量浓度的精氨酸溶液处理变异链球菌生物膜,研究精氨酸在龋病预防中的效果。24 h后通过pH值测定、结晶紫染色,观察不同质量浓度精氨酸溶液对变异链球菌生物膜的影响。收集无龋坏的人前磨牙制备牙骨质块,构建人工根面龋模型并随机分为对照组(人工唾液处理)、实验组(7.5、15.0和30.0 g/L精氨酸处理)共4组,经梯度精氨酸溶液处理后,进行20 d再矿化实验,通过扫描电镜、能谱仪观察精氨酸对脱矿牙骨质物理及化学构成的影响,分析精氨酸对根面龋早期的治疗效果。结果:相较于对照组,精氨酸处理对变异链球菌生物膜具有明显的抑制效果(P<0.001);根面牙骨质表面结构更为致密,Ca、P含量升高(P<0.001);与低质量浓度精氨酸相比,高质量浓度精氨酸组对生物膜的抑制和根面龋的再矿化作用更为显著。结论:精氨酸对变异链球菌生物膜形成有良好的抑制作用,且能促进根面龋牙骨质再矿化,在根面龋的预防及早期治疗方面效果显著。

关键词：精氨酸变异链球菌生物膜牙骨质再矿化

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金属离子抗炎作用的分子机制

中国组织工程研究 2024年第10期28卷 1626-1633页

作者：江纯静杨成雪喻正文张剑遵义医科大学口腔医学院贵州省遵义市563099

背景:抵抗炎症反应是促进损伤组织修复的重要环节,改善医用生物植入材料所造成的局部炎症反应是近几年有待解决的关键问题。目的:综述常见金属离子的抗炎作用及相关分子机制,为改善生物植入材料导致的宿主早期炎症反应提供一定理论参考... 详细信息

背景:抵抗炎症反应是促进损伤组织修复的重要环节,改善医用生物植入材料所造成的局部炎症反应是近几年有待解决的关键问题。目的:综述常见金属离子的抗炎作用及相关分子机制,为改善生物植入材料导致的宿主早期炎症反应提供一定理论参考。方法:利用计算机检索PubMed、Web of Science、中国知网及万方数据库中相关文献,以“金属离子,镁离子,锌离子,银离子,铜离子,炎症,抗炎作用,氧化应激,免疫调节,信号通路”为中文检索词,以“metal ions,magnesium ion,zinc ion,silver ion,copper ion,inflammation,anti-inflammatory effects,oxidative stress,immunoregulation,signaling pathway”为英文检索词进行检索,通过阅读文题和摘要进行初步筛选,最终纳入80篇文献进行结果分析与总结。结果与结论:①镁、锌、银、铜等金属离子具有良好的抗炎作用,该抗炎作用的强弱与其剂量及作用时间具有强相关性,未来可考虑通过控制离子的释放速率以及调节适宜治疗浓度以达到最佳抗炎效果。②镁离子和锌离子表现出优异的抗炎活性,镁离子常以硫酸镁等化合物形式在抗炎治疗中发挥益处,锌离子则以锌饲料作为锌的主要补充来源调节机体炎症反应。③银离子和铜离子具有一定抗炎作用,但仍以优异的抗菌活性占首要地位,主要以纳米颗粒及生物涂层等方式发挥作用。④镁、锌等金属离子可与天然提取物结合形成复合物发挥抗炎作用,该方法具有价格低廉、来源广泛的优点,是可持续的绿色途径,值得临床推广。⑤镁、锌、银、铜等金属离子通过减少宿主氧化应激损伤、调节免疫细胞、抑制核转录因子κB、Toll样受体、STAT3和NOD等炎症信号通路共同发挥抗炎作用。⑥金属离子抗炎相关分子机制是一个复杂网络,并非是某个单一通路的作用,而应该是多个信号通路的集合,目前仍有许多潜在机制尚未被发掘,未来需要更加系统地阐明各个信号通路之间的相互联系。

关键词：金属离子镁离子锌离子银离子铜离子炎症抗炎作用氧化应激免疫调节信号通路

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巨噬细胞极化在牙周炎发病及治疗中的作用

中国组织工程研究 2024年第20期28卷 3246-3251页

作者：葛叡扬倪璨杨琨闫福华遵义医科大学口腔医学院/附属口腔医院贵州省遵义市563000 南京大学医学院附属口腔医院牙周病科江苏省南京市210008

背景:菌斑生物膜引发的宿主免疫反应是牙周炎进展和破坏的始作俑者,巨噬细胞是参与其中的主要免疫细胞,在炎症发生发展过程中发挥着重要作用。目的:主要对巨噬细胞极化与牙周炎的关系及通过调控巨噬细胞极化治疗牙周炎的相关进展进行综... 详细信息

背景:菌斑生物膜引发的宿主免疫反应是牙周炎进展和破坏的始作俑者,巨噬细胞是参与其中的主要免疫细胞,在炎症发生发展过程中发挥着重要作用。目的:主要对巨噬细胞极化与牙周炎的关系及通过调控巨噬细胞极化治疗牙周炎的相关进展进行综述。方法:应用计算机检索PubMed和中国知网数据库1990-2023年发表的相关文献,英文检索词为“macrophage polarization,M1/M2 macrophage,periodontitis,periodontitis treatment,macrophage polarization and periodontitis,osteoimmunology,ferroptosis,macrophage polarization and ferroptosis,periodontitis and ferroptosis”,中文检索词为“巨噬细胞极化,M1/M2巨噬细胞,牙周炎,牙周炎治疗,骨免疫,铁死亡”。经初筛后,选定96篇文献进行综述。结果与结论:巨噬细胞不同表型之间的转换与牙周炎组织破坏密切相关,其分泌的多种细胞因子和炎症递质参与调控了牙周组织的破坏与修复过程,调节巨噬细胞表型及细胞因子分泌有助于降低牙周炎炎症水平、改善牙周微环境,从而减少组织破坏或促进牙周组织再生。目前已有许多研究着力于开发药物或生物材料来调节巨噬细胞功能,从而达到免疫调控治疗牙周炎的目的,但由于巨噬细胞的作用贯穿牙周炎发生发展过程,在抗感染、骨破坏和骨修复过程中均扮演重要角色,且极化本身是一个复杂的动态过程,受诸多因素的影响,所以仍需探索更多可能的机制来明确材料或药物与巨噬细胞间的交互作用。

关键词：巨噬细胞极化牙周炎慢性炎症牙周组织再生治疗

经济发展加速地区老年口腔健康共富模式的建设和应用初探

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中华口腔医学杂志 2024年第9期59卷 935-941页

作者：陈卓雷昇美沈晓艇叶飘程晓菁陈谦明浙江大学医学院附属口腔医院牙体牙髓科·浙江大学口腔医学院浙江省口腔疾病临床医学研究中心浙江省口腔生物医学研究重点实验室浙江大学癌症研究院杭州浙江大学医学院附属口腔医院武义分院口腔预防科武义浙江大学医学院附属口腔医院口腔内科中心·浙江大学口腔医学院浙江省口腔疾病临床医学研究中心浙江省口腔生物医学研究重点实验室浙江大学癌症研究院杭州

目的探索创建基层老年口腔健康共富的省县乡村四级网络架构, 初步评估此模式在经济发展加速地区高龄老人口腔疾病防治中的应用效果。方法以2022年6月人口调查获取的浙江省经济发展加速地区中革命老区武义县的高龄(≥85岁)抗美援朝老同... 详细信息

目的探索创建基层老年口腔健康共富的省县乡村四级网络架构, 初步评估此模式在经济发展加速地区高龄老人口腔疾病防治中的应用效果。方法以2022年6月人口调查获取的浙江省经济发展加速地区中革命老区武义县的高龄(≥85岁)抗美援朝老同志为主要研究对象, 构建省县乡村四级网络医疗服务模式矩阵, 建立数字化口腔健康档案, 为满足纳入排除标准的老人提供入户口腔治疗, 并于治疗前及治疗后3个月回访时, 记录口腔健康影响程度量表(OHIP-14)以及义齿满意度调查问卷结果。结果共54名抗美援朝老人被纳入基层老年口腔服务试点范围, 接受入户口腔治疗的患者治疗后3个月复查的OHIP-14总分为(3.27±3.00)分, 显著低于治疗前[(32.82±7.15)分](Z=-2.94, P=0.003);生理性疼痛、功能限制、心理不适、心理障碍和生理障碍等各个维度得分均显著低于治疗前(P口腔疾病防治水平中取得了较好的初步应用效果。

关键词：老年牙科医疗老年人保健服务牙缺失老年口腔共富口腔修复服务模型矩阵

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舌头麻木、疼痛可能是患了灼口综合征

保健与生活 2024年第1期 36-37页

作者：毛清华刘传霞(指导) 浙江大学医学院附属口腔医院口腔内科中心

医生:“我最近舌头痛、嘴唇痛,吃了消炎药也没见好转,是不是得了舌癌?”这种看不到、摸不着的疾病可能是灼口综合征!什么是灼口综合征?灼口综合征是一种常见的口腔黏膜疾病,但是很多人并不知晓它的存在。

关键词：灼口综合征消炎药舌癌口腔黏膜疾病舌头知晓

miR-135a-5p靶向抑制Kif3B调控小鼠腭胚突间充质细胞的自噬

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中国组织工程研究 2024年第19期28卷 3003-3011页

作者：冯文宣廉舒博王哲陈靖何苇遵义医科大学口腔医学院贵州省遵义市563000 遵义医科大学附属口腔医院贵州省遵义市563000

背景:研究表明,在地塞米松诱导腭裂的小鼠胚胎腭突间充质细胞中miR-135a-5p呈高表达,初级纤毛及其介导的Shh信号通路参与小鼠胚胎腭突间充质细胞的自噬。由此猜测miR-135a-5p可能通过初级纤毛及其介导的Shh信号途径调控小鼠胚胎腭突间... 详细信息

背景:研究表明,在地塞米松诱导腭裂的小鼠胚胎腭突间充质细胞中miR-135a-5p呈高表达,初级纤毛及其介导的Shh信号通路参与小鼠胚胎腭突间充质细胞的自噬。由此猜测miR-135a-5p可能通过初级纤毛及其介导的Shh信号途径调控小鼠胚胎腭突间充质细胞的自噬。目的:探讨miR-135a-5p对小鼠胚胎腭突间充质细胞自噬的调控作用。方法:体外提取并培养C57BL/6J小鼠胚胎腭突间充质细胞。细胞转染分别设置为:①对照组、miR-135a-5p阴性对照组、miR-135a-5p模拟物组。②NC+miR-NC组、KIF3B过表达组、miR-135a-5p+KIF3B组。qRT-PCR验证miR-135a-5p、KIF3B的转染效率;透射电镜观察各组细胞中自噬小体/自噬溶酶体的数目;免疫荧光技术测定自噬标记物LC3B的荧光表达程度;Western blot检测KIF3B、LC3和P62的蛋白表达。③miR-135a-5p阴性对照组、SAG处理组、SAG+miR-135a-5p组。qRT-PCR检测Shh信号下游关键转录因子Gli3的mRNA表达水平;Western blot检测自噬相关蛋白LC3和P62的蛋白表达。结果与结论:①过表达miR-135a-5p后,细胞内自噬小体/自噬溶酶体数量显著增多(P<0.01);LC3B的荧光密度显著升高(P<0.01),KIF3B、P62的蛋白表达降低(P<0.01),LC3的蛋白表达升高;②过表达KIF3B后,细胞内自噬小体/自噬溶酶体数目明显减少(P<0.01),LC3B的荧光密度降低(P<0.01),P62的蛋白表达升高(P<0.01),LC3的蛋白表达下降(P<0.01);miR-135a-5p靶向抑制KIF3B的表达(P<0.01),并使自噬小体/自噬溶酶体数目、LC3B的荧光强度以及LC3的蛋白表达得到回升(P<0.01),P62的蛋白表达下降(P<0.01);③SAG使Gli3的mRNA表达明显升高(P<0.01),P62的蛋白表达升高(P<0.01),LC3的蛋白表达下降(P<0.01);加入miR-135a-5p后,Gli3的mRNA表达显著下降(P<0.01),P62的蛋白表达下降(P<0.01),LC3的蛋白表达回升(P<0.01);④结果表明:miR-135a-5p靶向抑制KIF3B并且可能通过负向调控Shh信号通路促进小鼠胚胎间充质细胞自噬。

关键词：自噬胚胎腭突间充质细胞 miRNA KIF3B Shh信号通路腭裂

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高氟干预成釉细胞钙稳态差异表达基因的筛选及分析

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中国组织工程研究 2024年第16期28卷 2481-2487页

作者：黄婷刘霞王烛陈霆陈彬白国辉吴家媛田源遵义医科大学附属口腔医院贵州省遵义市563000 遵义医科大学口腔医学院贵州省遵义市563000

背景:氟牙症是长期摄入大量氟所导致的牙釉质发育障碍,病因复杂,其发病机制有待深入研究。目的:通过转录组测序技术筛选高氟干预成釉细胞与钙稳态相关的差异表达基因,并进一步探索氟斑牙形成的分子机制。方法:分别用浓度为0,0.4,0.8,1.6... 详细信息

背景:氟牙症是长期摄入大量氟所导致的牙釉质发育障碍,病因复杂,其发病机制有待深入研究。目的:通过转录组测序技术筛选高氟干预成釉细胞与钙稳态相关的差异表达基因,并进一步探索氟斑牙形成的分子机制。方法:分别用浓度为0,0.4,0.8,1.6,3.2,6.4 mmol/L的NaF处理成釉细胞LS824,48,72 h,检测细胞形态、细胞活性与细胞内钙离子浓度。分别用浓度为0,1.6,3.2 mmol/L的NaF处理成釉细胞LS824 h,通过转录组测序筛选差异表达基因,并对差异表达基因进行验证。结果与结论:①处理24 h后,NaF浓度0,0.4,0.8 mmol/L组细胞生长状态良好,细胞的数量增多,细胞轮廓清晰;当NaF浓度≥1.6 mmol/L,随着NaF浓度的增加,细胞体积逐渐皱缩变小、细胞数量减少。处理48,72 h后,NaF浓度0,0.4 mmol/L组细胞数量增加,0.8,1.6,3.2 mmol/L组细胞数量逐渐减少,细胞形态变圆、变小,6.4 mmol/L组细胞皱缩变圆悬浮于培养基中,几乎无细胞贴壁。当NaF浓度相同时,处理24 h后LS8细胞的生长状态最佳。CCK-8检测结果显示,当NaF浓度相同时,随着处理时间的延长,细胞活性减弱;当处理时间相同时,随着NaF浓度的增加,细胞活性减弱。处理24 h后,随着NaF浓度的增加,细胞内钙离子浓度增加。②转录组测序分析发现参与调控细胞钙稳态的基因:Hsp90b1、Canx、Calr、Hspa5的表达显著上调(P<0.05),Cacna1a的表达显著下调(P<0.05),该结果得到了RT-qPCR检测的验证。③结果显示,NaF对LS8细胞增殖的抑制作用可能与细胞内Ca2+浓度异常增加有关,其机制可能由蛋白质加工合成通路Hsp90b1、Canx、Calr、Hspa5表达上调和钙信号通路Cacna1a表达下调所导致。

关键词：氟中毒氟斑牙成釉细胞氟化钠转录组测序内质网应激钙离子通道钙离子探针