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贵州老鹰茶中一个新的Biphenylpropanoid衍生物

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有机化学 2016年第12期36卷 2986-2988页

作者：肖世基余润东徐德林张茂生遵义医学院药学院遵义563003 遵义医学院细胞生物学教研室遵义563003

从毛豹皮樟来源的贵州老鹰茶中分离得到1个新的biphenylpropanoid衍生物和5个已知化合物,新化合物命名为1-(3′,4′-亚甲二氧基苯基)-3-(2′′-羟基-4′′,6′′-二甲氧基苯基)丙-2-酮(1),其结构通过HR-ESIMS,1D和2D NMR等光谱技术确定.

关键词：樟科毛豹皮樟老鹰茶 biphenylpropanoid

九香虫防御性物质水溶液成分分析及其对LO2细胞活性的影响

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现代食品科技 2013年第10期29卷 2363-2367页

作者：侯晓晖孙廷李晓飞钟婷婷刘川燕遵义医学院贵州遵义563099

研究了九香虫的防御性物质水溶液中挥发性成分及其相对百分含量,以及该水溶液对人肝LO2细胞活性的研究。采用温水浸泡法获得九香虫的防御性物质水溶液;GC-MS获得该水溶液的挥发性成分组成,并用面积归一法计算各成分的相对百分含量;利用... 详细信息

研究了九香虫的防御性物质水溶液中挥发性成分及其相对百分含量,以及该水溶液对人肝LO2细胞活性的研究。采用温水浸泡法获得九香虫的防御性物质水溶液;GC-MS获得该水溶液的挥发性成分组成,并用面积归一法计算各成分的相对百分含量;利用MTT法、流式细胞术研究该水溶液对LO2细胞的影响。研究表明,九香虫防御性物质水溶液中挥发性成分包含19种化合物,其中相对百分含量最高的为反-2-己烯醛(88.54%),其次为2-甲基-4-戊烯醛(5.16%)、十三烷(3.43%)等;该水溶液作用LO2细胞后,IC50为3.64μL,呈剂量依赖性;细胞周期结果显示,G2/M期细胞比例明显降低,而G0/G1期细胞比例明显升高,且差异具有统计学意义。九香虫防御性物质水溶液成分主要是烯醛和烷烃类化合物;该物质能够抑制人肝LO2细胞的体外增殖,可能与其细胞周期阻滞有关。

关键词： Aspongopus chinensis 防御性物质水溶液挥发性成分 GC-MS LO2细胞细胞增殖细胞周期

一种简便可控的高氧急性肺损伤模型的建立方法

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中华危重病急救医学 2016年第1期28卷 27-32页

作者：刘国跃牟胜旭陈淼惠越梅鸿覃松陈涛遵义医学院附属医院重症医学科贵州遵义563003 遵义医学院附属医院胸心外科贵州遵义563003 遵义医学院研究生学院贵州遵义563003

目的建立高氧急性肺损伤（HALI）大鼠模型，寻找一种更简便、价格更低、性能更稳定的高氧模型建立方法。方法自行设计一种可控性的高氧动物饲养箱。将100只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组和HALI组，每组再按高氧暴露时间随机分为0... 详细信息

目的建立高氧急性肺损伤（HALI）大鼠模型，寻找一种更简便、价格更低、性能更稳定的高氧模型建立方法。方法自行设计一种可控性的高氧动物饲养箱。将100只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组和HALI组，每组再按高氧暴露时间随机分为0、24、48、72和96h5个亚组，每个亚组10只。正常对照组直接在空气中饲养；HALI组置于高氧箱中饲养，箱内氧浓度≥体积分数90％，温度维持在25～27℃，湿度保持在50％～70％，CO2浓度〈0．5％，每日持续给氧23．5h。分别在各时间点取大鼠动脉血进行血气分析，并计算氧合指数（OI）及呼吸指数（RI）。处死大鼠取右肺组织行苏木素一伊红（HE）染色，光镜下观察肺组织病理改变并进行病理学评分；取左肺测量湿／干质量（W／D）比值。结果随着高氧暴露时间的延长，大鼠肺组织病理学损伤程度逐渐加重，肺泡结构逐渐紊乱，肺泡壁断裂破坏，肺泡间隔逐渐增宽、水肿、炎性细胞浸润，部分大鼠可见少量红细胞渗出，在48～72h达高峰。HALI组随着高氧暴露时间（0、24、48、72、96h）的延长，OI（mmHg，1mmHg=0．133kPa）逐渐降低（446．67±29．93、306．19±37．23、269．70±29．00、253．81±43．40、245．58±35．25），RI（0．25±0．04、0．31±0．06、0．38±0．06、0．46±0．07、0．44±0．03）、肺组织病理学评分（分：0．00±0．00、0．90±0．74、2．90±1．20、4．70±1．57、4．80±1．23）和肺W／D比值（3．84±0．61、4．14±0．46、4．56±0．34、5．32±0．27、5．18±0．25）呈进行性升高，72h内各指标与前一时间点比较差异均有统计学意义（均P〈0．05），而96h与72h比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）；24h开始，上述各指标与正常对照组比较差异有统计学意义，并持续至96h[OI（mmHg）：24h为306．19±37．23比435．65±25．34，96h为245．58±35．25比465．42±24．75；RI：24h为0．31±0．06比0．24±0．04，96h为0．44±0．03比0．24±0．06；肺组织病理学评分（分）：24h为0．90±0．74比0．00±0．00，96h为4．80±1．23比0．00±0．00；肺W／D比值：24h为4．14±0．46比3．79±0．44，96h为5．18±0．25比4．12±0．91；均P〈0．05]。结论自行设计的高氧箱操作简便、性能稳定，在持续给予高浓度氧（≥90％）24h后即可成功复制HALI模型，并于48～72h损伤达高峰。

关键词：高氧急性肺损伤动物模型大鼠

转化生长因子β_1/Smads表达在高盐饮食致Wistar大鼠心肌纤维化中的作用及替米沙坦干预

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中华高血压杂志 2013年第7期21卷 648-653页

作者：李同商黔惠刘婵石耿辉遵义医学院临床医学研究所遵义医学院附属医院心内科贵州遵义563003

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads表达在高盐(8%NaCl)诱导Wistar大鼠左心室心肌纤维化中的作用及替米沙坦的干预效应。方法雄性Wistar大鼠49只随机分为对照组(n=13,饲0.5%NaCl),模型组(n=24,饲8%NaCl),干预组(n=12,饲8%NaCl+替... 详细信息

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads表达在高盐(8%NaCl)诱导Wistar大鼠左心室心肌纤维化中的作用及替米沙坦的干预效应。方法雄性Wistar大鼠49只随机分为对照组(n=13,饲0.5%NaCl),模型组(n=24,饲8%NaCl),干预组(n=12,饲8%NaCl+替米沙坦2mg/kg灌胃),喂养24周。每两周测一次尾动脉压。Masson染色观察左心室心肌纤维化程度。运用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测左心室TGF-β1、Smad2、Smad3及Smad7的mRNA表达,同时采用免疫印迹法检测左心室α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1、磷酸化Smad2/3(P-smad2/3)、Smad7蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组血压升高(P<0.05),左心室心肌间质、心肌内血管周围及血管壁胶原容积分数增大,α-SMA蛋白的表达水平升高(P<0.05);TGF-β1、Smad2、Smad3的mRNA与蛋白表达水平升高(均P<0.05),而Smad7的mRNA与蛋白的表达水平降低(均P<0.05)。与模型组比较,干预组血压降低(P<0.05),左心室心肌间质、心肌内血管周围及血管壁胶原容积分数减少[(7.94±0.93)%比(17.38±1.37)%;(17.88±5.97)%比(52.32±9.93)%,(21.26±6.83)%比(61.31±9.25)%;均P<0.05],α-SMA蛋白表达水平下调[(0.146±0.012)比(0.206±0.018),P<0.05];TGF-β1的蛋白表达水平下调[(0.035±0.005)比(0.084±0.010),P<0.05],Smad2、Smad3的mRNA表达量降低[Smad2(146.8±21.7)比(304.2±34.0);Smad3(139.2±15.1)比(354.1±52.4),均P<0.05],而Smad7的mRNA与蛋白表达水平均上调[分别(171.6±13.9)比(43.7±1.7);(0.607±0.115)比(0.298±0.045),均P<0.05]。结论长期高盐饮食可诱导Wistar大鼠血压升高及心肌纤维化,其机制与TGF-β1/Smads表达异常相关;替米沙坦抗高血压及左心室纤维化的作用可能部分是通过阻断血管紧张素Ⅱ1型受体影响TGF-β1/Smads表达实现的。

关键词：转化生长因子β1 Smads信号通路高盐饮食高血压心肌纤维化替米沙坦 Wistar大鼠

固相微萃取-气质联用分析贵州沙姜挥发性成分

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现代食品科技 2014年第12期30卷 271-276页

作者：罗静吴迪钟永科遵义医学院药学院贵州遵义563000

本文采用固相微萃取-气质联用技术分析了贵州沙姜的挥发性成分,同时,采用相应技术及傅立叶变换红外将所得主要成分与广西沙姜的成分进行了比较。结果发现:贵州沙姜的挥发性成分不同于广西沙姜,主要为爱草脑,其次是2,4,6,7,8,8a-六氢-3,8... 详细信息

本文采用固相微萃取-气质联用技术分析了贵州沙姜的挥发性成分,同时,采用相应技术及傅立叶变换红外将所得主要成分与广西沙姜的成分进行了比较。结果发现:贵州沙姜的挥发性成分不同于广西沙姜,主要为爱草脑,其次是2,4,6,7,8,8a-六氢-3,8-二甲基-4(1-甲基亚乙基)-5(1H)-薁酮和塞舌尔烯。采用峰面积归一化法,对匹配度大于90%的可检索组分进行了统计和分析,结果表明:从贵州沙姜中鉴别出的挥发性成分共47个,三主要成分含量占总体的绝大多数,爱草脑、2,4,6,7,8,8a-六氢-3,8-二甲基-4(1-甲基亚乙基)-5(1H)-薁酮和塞舌尔烯的含量分别为61.53%、15.54%和7.19%;鉴别出的47个挥发性成分的分布是醚类4个、酮类3个、萜类28个、酚类3个、醇类2个、酯类2个、醛类2个、烃类3个,其中醚类、酮类、萜类化合物的含量较高,分别为62.22%、15.83%、13.68%。

关键词：贵州沙姜挥发性成分爱草脑固相微萃取

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大黄素对布鲁菌侵染巨噬细胞的免疫调节作用

中华微生物学和免疫学杂志 2018年第3期38卷 199-204页

作者：朱珠陈泽慧陈安林董泽令彭丹周小仙杨智芳遵义医学院附属医院检验科 563003 遵义医学院检验医学院 563000

目的研究大黄素对布鲁菌侵染巨噬细胞免疫功能的调节，为探寻新的药物治疗布鲁菌病提供理论和实验依据。方法取BALB/c小鼠分离骨髓细胞，加入MG-CSF诱导分化培养，用小鼠F4/80抗体、CD11b抗体标记细胞，流式检测骨髓细胞分化为巨噬细胞... 详细信息

目的研究大黄素对布鲁菌侵染巨噬细胞免疫功能的调节，为探寻新的药物治疗布鲁菌病提供理论和实验依据。方法取BALB/c小鼠分离骨髓细胞，加入MG-CSF诱导分化培养，用小鼠F4/80抗体、CD11b抗体标记细胞，流式检测骨髓细胞分化为巨噬细胞（MΦ）的比例；通过MTT法检测不同浓度大黄素对小鼠MΦ存活率的影响，同时以多西环素为对照，比较两种药物的半抑制浓度（IC50）；用布鲁菌侵染巨噬细胞（MΦ和细菌比例为100∶1）培养4 h，然后加入大黄素作用后，培养1、6、12、24、48 h，通过菌落计数法检测大黄素对MΦ内布鲁菌存活的影响，然后用ELISA法检测MΦ培养上清中细胞因子TNF-α、IL-6、IFN-γ的含量。结果培养第8天，骨髓细胞诱导分化为巨噬细胞的比例为91.28%；大黄素的IC50（608.4 μg/ml）明显高于多西环素的IC50（225.5 μg/ml）；菌落计数结果：6、12、24、48 h大黄素组logCFU值均显著低于空白组，大黄素组间比较，24 h大黄素组的logCFU值最低，且低于多西环素组；ELISA结果显示，与对照组比较，6、12、24 h大黄素组TNF-α、IL-6、IFN -γ含量明显增加，24 h大黄素组TNF-α、IL-6、IFN-γ含量最高；而12 h大黄素组IFN-γ含量[（74.233±4.416） pg/ml]与24 h大黄素组[（78.328±8.932） pg/ml]比较，差异无统计学意义。结论大黄素能够通过刺激TNF-α、IL-6、IFN-γ表达量增加，增强巨噬细胞杀伤布鲁菌的能力。

关键词：大黄素布鲁菌巨噬细胞细胞因子

积雪草总苷对糖尿病皮肤溃疡大鼠的促愈合作用研究

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中国药学杂志 2017年第8期52卷 643-648页

作者：张丹丹张涵赵久凤石秀君杨建文聂绪强遵义医学院药学院贵州遵义563000 遵义医学院附属医院贵州遵义563003

目的本实验探讨积雪草总苷对大鼠糖尿病皮肤溃疡创面修复的影响。方法 38只雄性清洁级SD大鼠,随机分为正常组和模型组,代谢笼单笼饲养;模型组采用腹腔注射链脲佐菌素——全程皮肤缺损方法建立糖尿病皮肤溃疡(DCU)模型;模型建立后分别用... 详细信息

目的本实验探讨积雪草总苷对大鼠糖尿病皮肤溃疡创面修复的影响。方法 38只雄性清洁级SD大鼠,随机分为正常组和模型组,代谢笼单笼饲养;模型组采用腹腔注射链脲佐菌素——全程皮肤缺损方法建立糖尿病皮肤溃疡(DCU)模型;模型建立后分别用低(22.29 mg·cm^(-2))、中(111.45 mg·cm^(-2))、高(222.93 mg·cm^(-2))剂量积雪苷霜软膏对DCU大鼠进行药物干预。治疗后3、7、10、14 d监测大鼠体重、血糖、饮水量及尿量;采用Adobe Photoshop CS5图像处理软件评价创面愈合率;利用HE染色观察DCU大鼠创面肉芽组织形态变化、上皮化、成纤维细胞增殖和血管新生。结果模型组大鼠体重、血糖与正常组比较有统计学差异(P生成增多,中剂量组上皮化较早及较高的成纤维细胞增殖,14 d表皮结构趋于完整。结论初步判断积雪草总苷对糖尿病皮肤溃疡大鼠创面具有促愈合作用。

关键词：糖尿病皮肤溃疡愈合率积雪草总苷积雪苷霜软膏病理学

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鲍曼不动杆菌生物膜形成机制研究进展

中国感染与化疗杂志 2018年第1期18卷 124-128页

作者：马晓春代军徐磊张仕斌高丽丽遵义医学院实验动物中心贵州遵义563000 遵义医学院基础医学院贵州遵义563000

鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）是一种革兰阴性杆菌,广泛存在于自然界,是目前医院感染最重要的条件致病菌之一。该菌常见于重症患者及免疫力低下人群,可引起医院获得性肺炎以及血流、腹腔、中枢神经系统、泌尿系统和皮肤软组... 详细信息

鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）是一种革兰阴性杆菌,广泛存在于自然界,是目前医院感染最重要的条件致病菌之一。该菌常见于重症患者及免疫力低下人群,可引起医院获得性肺炎以及血流、腹腔、中枢神经系统、泌尿系统和皮肤软组织等感染,病死率高。

关键词：鲍曼不动杆菌生物膜调控机制

白及苯丙氨酸解氨酶基因的克隆、序列特征及激素响应表达分析

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中草药 2019年第3期50卷 694-701页

作者：罗才林李林陈立邓琴张俊马璇徐德林钱刚遵义医学院细胞生物学教研室贵州遵义563003 遵义医学院第一临床学院贵州遵义563003

目的苯丙氨酸解氨酶(PAL)是植物次生代谢与抗逆反应的关键酶类之一,研究PAL基因的序列信息与逆境胁迫响应模式,揭示其蛋白结构与功能及抗逆信号网络。方法采用RT-PCR、RACE技术获得白及PAL基因c DNA全长;Protparam、SOPMA、SWISS-MODEL... 详细信息

目的苯丙氨酸解氨酶(PAL)是植物次生代谢与抗逆反应的关键酶类之一,研究PAL基因的序列信息与逆境胁迫响应模式,揭示其蛋白结构与功能及抗逆信号网络。方法采用RT-PCR、RACE技术获得白及PAL基因c DNA全长;Protparam、SOPMA、SWISS-MODEL等生物信息学软件分析其编码蛋白的理化特性、结构域等特征;DNAMAN、MEGA软件分别进行氨基酸多序列比对与系统进化分析;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术进行PAL基因时空表达特异性与外源激素胁迫下响应检测。结果克隆得到的Bs PAL基因c DNA全长为2 708 bp,编码1条797个氨基酸组成的多肽,预测蛋白质相对分子质量为86 216.94,等电点6.24,具有植物PAL酶的典型结构域和活性中心,不具有跨膜结构域,与铁皮石斛、蝴蝶兰的PAL基因亲缘关系最近。q RT-PCR结果表明白及根中PAL表达量显著高于叶与茎。在Me JA处理下,PAL表达量呈逐渐上升再下降的趋势;SA处理下,则是先下降再上升的趋势。结论白及PAL基因的克隆与序列特征分析、表达检测及响应Me JA和SA胁迫后的表达变化为阐明白及苯丙烷代谢途径与激素信号通路研究提供实验基础。

关键词：白及苯丙氨酸解氨酶基因克隆序列特征表达分析激素响应