白及苯丙氨酸解氨酶基因的克隆、序列特征及激素响应表达分析

作     者：罗才林 李林 陈立 邓琴 张俊 马璇 徐德林 钱刚 LUO Cai-lin;LI Lin;CHEN Li;DENG Qin;ZHANG Jun;MA Xuan;XU De-lin;QIAN Gang

作者机构：遵义医学院细胞生物学教研室贵州遵义563003 遵义医学院第一临床学院贵州遵义563003 

出 版 物：《中草药》 (Chinese Traditional and Herbal Drugs)

年 卷 期：2019年第50卷第3期

页      面：694-701页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31560079) 国家自然科学基金资助项目(31560102) 贵州省科学技术基金项目(QKH-ZY 3002) 贵州省科学技术基金项目(QKH-LH 7549) 遵义市15851人才项目(201424) 贵州省科技厅人才成长项目(KY 194 遵义医学院博士启动基金资助项目(F-809) 

主　　题：白及 苯丙氨酸解氨酶 基因克隆 序列特征 表达分析 激素响应 

摘      要：目的苯丙氨酸解氨酶(PAL)是植物次生代谢与抗逆反应的关键酶类之一,研究PAL基因的序列信息与逆境胁迫响应模式,揭示其蛋白结构与功能及抗逆信号网络。方法采用RT-PCR、RACE技术获得白及PAL基因c DNA全长;Protparam、SOPMA、SWISS-MODEL等生物信息学软件分析其编码蛋白的理化特性、结构域等特征;DNAMAN、MEGA软件分别进行氨基酸多序列比对与系统进化分析;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术进行PAL基因时空表达特异性与外源激素胁迫下响应检测。结果克隆得到的Bs PAL基因c DNA全长为2 708 bp,编码1条797个氨基酸组成的多肽,预测蛋白质相对分子质量为86 216.94,等电点6.24,具有植物PAL酶的典型结构域和活性中心,不具有跨膜结构域,与铁皮石斛、蝴蝶兰的PAL基因亲缘关系最近。q RT-PCR结果表明白及根中PAL表达量显著高于叶与茎。在Me JA处理下,PAL表达量呈逐渐上升再下降的趋势;SA处理下,则是先下降再上升的趋势。结论白及PAL基因的克隆与序列特征分析、表达检测及响应Me JA和SA胁迫后的表达变化为阐明白及苯丙烷代谢途径与激素信号通路研究提供实验基础。