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食品中甲型肝炎病毒RNA提取方法的比较及应用

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食品科学 2019年第6期40卷 325-330页

作者：冯华炜闫平平艾海新李思嘉麻丽丹刘宏生辽宁大学生命科学院辽宁沈阳110036 大连出入境检验检疫局辽宁大连116400 辽宁省生物大分子模拟计算与信息处理工程研究中心辽宁沈阳110036 东港市农业综合执法大队辽宁丹东118000 丹东出入境检验检疫局辽宁丹东118000

目的:对食品中甲型肝炎病毒的3种RNA提取方法进行综合比较,以优选出最佳的核酸提取方法,为各级实验室开展食源性甲型肝炎病毒核酸检验提供技术参考。方法:分别采用ABI AM1836、QIAGEN 74104和ROCHE11858882001三种商业化核酸提取试剂盒... 详细信息

目的:对食品中甲型肝炎病毒的3种RNA提取方法进行综合比较,以优选出最佳的核酸提取方法,为各级实验室开展食源性甲型肝炎病毒核酸检验提供技术参考。方法:分别采用ABI AM1836、QIAGEN 74104和ROCHE11858882001三种商业化核酸提取试剂盒对人工污染甲型肝炎病毒的食品样品进行核酸提取,根据3种核酸提取方法的提取效率、抑制剂去除效率、检测灵敏度、综合应用指标进行病毒RNA的优化,且采用优化后的提取方法进行实际样品的检测。结果:综合病毒各项评价指标显示,ROCHE 11858882001在食品中提取甲型肝炎病毒RNA效果最优,其次为QIAGEN 74104和ABI AM1836。101份样品的检测结果显示,一份蓝靛果样品为甲型肝炎病毒核酸阳性,其余样品均为阴性。结论:ROCHE 11858882001是一种快捷有效的病毒RNA提取方法,适用于食品中甲型肝炎病毒的日常检测工作。

关键词：甲型肝炎病毒 RNA提取方法实时荧光RT-PCR 食品样品

病毒性神经坏死病病毒核酸检测用标准物质的制备

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中国动物检疫 2018年第2期35卷 102-107页

作者：段燕喻陈茹吴晓薇朱道中林志雄田纯见刘志玲广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室广东广州510623

利用基因克隆和体外转录技术,制备病毒性神经坏死病病毒(Nervous necrosis virus,NNV)核酸检测标准物质。设计NNV RNA2基因的特异性引物,通过RT-PCR获得目的片段并连接至p GEM-T载体;采用体外转录方法,获得大量纯品RNA。初步定量稀释至... 详细信息

利用基因克隆和体外转录技术,制备病毒性神经坏死病病毒(Nervous necrosis virus,NNV)核酸检测标准物质。设计NNV RNA2基因的特异性引物,通过RT-PCR获得目的片段并连接至p GEM-T载体;采用体外转录方法,获得大量纯品RNA。初步定量稀释至约10~8 copies/μL,均匀性检验结果显示样品间差异检验表明,室温(20~25℃)保存7 d、冷藏(2~8℃)保存1个月和冷冻(-20℃)保存6个月的含量均无明显变化。采用核酸浓度测定与拷贝数换算的方法,对转录的RNA片段进行定值,并根据委托单位的定值结果进行不确定度估算。核酸标准物质定值为(8.452±0.068)×10~8 copies/μL,可用作NNV核酸检测的标准质控品。

关键词：病毒性神经坏死病实时定量RT-PCR 标准物质

食品接触材料中全氟化合物检测方法的研究进展

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食品安全质量检测学报 2013年第4期4卷 993-998页

作者：罗世鹏商贵芹陈明常州出入境检验检疫局常州213022 常州进出口工业及消费品安全检测技术中心常州213022

全氟化合物主要包括全氟辛酸(PFOA)、全氟辛烷磺酸(PFOS)及其盐类物质,是目前最难降解的持久性有机污染物之一。全氟化合物具有高效的疏水和疏油特性,因此被广泛地应用于纺织、造纸、皮革等行业。然而其具有生殖毒性、遗传毒性和发育毒... 详细信息

全氟化合物主要包括全氟辛酸(PFOA)、全氟辛烷磺酸(PFOS)及其盐类物质,是目前最难降解的持久性有机污染物之一。全氟化合物具有高效的疏水和疏油特性,因此被广泛地应用于纺织、造纸、皮革等行业。然而其具有生殖毒性、遗传毒性和发育毒性等多种毒性,可以通过食品接触材料进入人们的食品中,威胁着人们的身体健康。本文简述了全氟化合物的概况及其在食品接触材料中分析检测技术的研究进展。

关键词：全氟辛酸全氟辛烷磺酸食品接触材料检测

基于HDA的超级细菌耐药基因NDM-1检测方法的建立

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食品安全质量检测学报 2011年第3期2卷 152-158页

作者：梁炜张京宣张云霞魏晓棠杨伟克林黎明曹际娟山东出入境检验检疫局青岛266002 辽宁出入境检验检疫局技术中心大连116000

本研究以建立解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法为目的,选择三种超级细菌NDM-1基因(metallo-beta-lactamase 1 gene)为目的基因,设计并合成特异性引物,建立和优化了可快速检测该种基因的HDA检测方法。特异性和灵敏度检测结果表明:该方法对... 详细信息

本研究以建立解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法为目的,选择三种超级细菌NDM-1基因(metallo-beta-lactamase 1 gene)为目的基因,设计并合成特异性引物,建立和优化了可快速检测该种基因的HDA检测方法。特异性和灵敏度检测结果表明:该方法对NDM-1基因检测具有特异性,最低检测限可达10fg/μL,灵敏度高于普通PCR。提示HDA是一种针对NDM-1的快速、灵敏、便捷的非PCR核酸扩增技术。

关键词：超级细菌 NDM-1基因检测解旋酶DNA恒温基因扩增

转基因大豆MON89788双重数字PCR通用定量检测方法的建立

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食品科学 2018年第4期39卷 312-319页

作者：刘津李婷冼钰茵吴希阳凌莉高东微广东检验检疫技术中心广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室广东广州510623 暨南大学理工学院广东广州510632

建立一种特异、稳定、灵敏、通用的转基因大豆MON89788品系双重数字聚合酶链式反应(digital polymerase chain reaction,d PCR)定量检测方法,在一个体系内同时进行内外源基因的定量检测,适用于微滴式数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR... 详细信息

建立一种特异、稳定、灵敏、通用的转基因大豆MON89788品系双重数字聚合酶链式反应(digital polymerase chain reaction,d PCR)定量检测方法,在一个体系内同时进行内外源基因的定量检测,适用于微滴式数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)和芯片式数字PCR(chip digital PCR,cd PCR)平台,并通过了食品分析能力评价体系国际能力验证项目的盲样检测评价。dd PCR平台对大豆MON89788品系和内源Lectin的绝对定量限分别为8.0 copies/μL和8.2 copies/μL;cd PCR平台对大豆MON89788品系和内源Lectin的绝对定量限分别为7.443 copies/μL和7.646 copies/μL;dd PCR和cd PCR对转基因大豆MON89788品系成分相对含量的相对定量限均为0.1%。

关键词：微滴式数字PCR 芯片式数字PCR 转基因大豆MON89788品系定量检测

碰撞池-电感耦合等离子体质谱法快速检测化妆品中重金属

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食品安全质量检测学报 2016年第8期7卷 3333-3337页

作者：庞艳华董振霖那晗王楠曹际娟辽宁出入境检验检疫局检验检疫技术中心大连116001

目的建立碰撞池—电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定复杂基质化妆品中铬、镍、砷、镉、汞、铅等重金属含量的快速检测方法。方法样品经过微波消解处理,用ICP-MS进行分析,八级杆碰撞反应池结合屏蔽炬技术消除质谱干扰,在线加入内标元... 详细信息

目的建立碰撞池—电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定复杂基质化妆品中铬、镍、砷、镉、汞、铅等重金属含量的快速检测方法。方法样品经过微波消解处理,用ICP-MS进行分析,八级杆碰撞反应池结合屏蔽炬技术消除质谱干扰,在线加入内标元素72Ge、115In和209Bi校正基体干扰。结果各元素校正曲线的相关系数均大于0.9992,方法检出限为0.4-2.2 ng/g,相对标准偏差小于5.69%,加标回收率为85.8%-104.2%,有证标准参考物质的测定结果与标准值相符。结论该方法前处理步骤简便快速,适用于复杂基质化妆品中多种有害元素的快速准确测定。

关键词：电感耦合等离子体质谱法碰撞池微波消解化妆品重金属

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残留测试和控制战略

检验检疫科学 2002年第4期12卷 58-61页

作者： James D.Macnell 王建华张艺兵加拿大食品检验署动物卫生研究院兽药残留中心青岛检验检疫局

对残留控制和检测的需要基本上来自两个方面 :食品供应的安全和贸易上的需要。不同食品农药、兽药、功能性食品添加剂和潜在的污染物如真菌毒素的最大残留限量 (MRLs)是以毒理学评价为基础建立的。对国内生产的商品的常规检测显示出在... 详细信息

对残留控制和检测的需要基本上来自两个方面 :食品供应的安全和贸易上的需要。不同食品农药、兽药、功能性食品添加剂和潜在的污染物如真菌毒素的最大残留限量 (MRLs)是以毒理学评价为基础建立的。对国内生产的商品的常规检测显示出在特定商品中的某种特殊残留具有普遍性且也可作为评估产品注册制度有效性的一种方法 ,而对进口产品实施的检测则主要是来证实出口国法规程序的有效性。对产业部门来说 ,需要用检测来说明具有合适的自律并保证产品满足出口市场或特定合同的要求。检测程序应适当 ,以满足特定的用途。确定不合格概率的调查需要检测高于ＭＲＬ的残留 ,而饮食暴露研究则要求测出尽可能小的残留。满足产品出口要求或完成合同要求的检测应保证产品符合市场和合同要求。如果要求是“不得检出”需要非常灵敏的检测方法。在许多国家 ,有一个正在达成一致的意见 ,即尽管政府执行有关公共利益的工作 (如在统计学水平上保证产品供应是安全的 ) ,最终是产品生产者负责产品的安全 ,负责保证产品满足市场或合同要求。应考虑一直在变化的法规、贸易和消费环境的各个方面 ,作为例子如目前政府和产业界在确保食品安全和质量方面所承担的角色。

关键词：食品检测食品安全食品贸易残留测试控制战略残留控制毒理学评价

气相色谱内标法测定食品添加剂乙酸正丁酯中14种杂质

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检验检疫学刊 2014年第3期24卷 44-47页

作者：陈烨王红松刘君峰陈智栋吴珂李婷常州大学石油化工学院江苏常州213164 常州出入境检验检疫局常州进出口工业及消费品安全检测中心

建立了气相色谱内标法测定食品添加剂乙酸正丁酯中14种杂质含量的分析方法。样品直接进气相色谱仪分析,内标法定量。结果表明:14种目标物在50-1000 mg/L范围内线性关系良好(r为0.9986-0.9998),仪器检测限为1.0-15.0 mg/L(S/N=3);在50 m... 详细信息

建立了气相色谱内标法测定食品添加剂乙酸正丁酯中14种杂质含量的分析方法。样品直接进气相色谱仪分析,内标法定量。结果表明:14种目标物在50-1000 mg/L范围内线性关系良好(r为0.9986-0.9998),仪器检测限为1.0-15.0 mg/L(S/N=3);在50 mg/L、400 mg/L和1000 mg/L的3个加标水平下,对样品进行加标回收实验,平均回收率为91.4-115.2%,相对标准偏差(n=6)为0.4-3.9%。本方法具有方便、快速、灵敏度高等特点,可用于食品添加剂乙酸正丁酯中14种杂质含量的测定。

关键词：气相色谱食品添加剂乙酸正丁酯内标法

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国境转基因产品精准快速检测关键技术及应用

中国科技成果 2016年第9期17卷 61-62页

作者：陈洪俊黄新曹际娟俞晓平林祥梅高宏伟中国检验检疫科学研究院辽宁出入境检验检疫局检验检疫技术中心中国计量学院山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心

我国是世界上最大农产品进口国之一，2014年粮食进口量达1亿吨。全球转基因品种多达715种，根据我国法规，进出境农产品均需进行转基因符合性检测与未经批准的转基因品系检测。但原有检测技术难以满足贸易量大和快速通关的需求，主要存... 详细信息

我国是世界上最大农产品进口国之一，2014年粮食进口量达1亿吨。全球转基因品种多达715种，根据我国法规，进出境农产品均需进行转基因符合性检测与未经批准的转基因品系检测。但原有检测技术难以满足贸易量大和快速通关的需求，主要存在复杂基质中转基因成分精准检测难、痕量现场快速检测技术缺乏和检测量值难以溯源三大问题，“国境转基因产品精准快速检测关键技术及应用”项目针对性地发明了一管式核酸富集检测技术，新型DNA传感检测和防污染等温扩增技术，转基因标准样品制备工艺和PCR仪校准技术，研发了转基因检测试剂盒，现场快速检测装置，标准样品和校准装置三类重要产品。为推动检验检疫技术升级，提升国际话语权，保障我国食品和生态安全提供了技术支撑。为此，项目获2015年国家技术发明二等奖。

关键词：快速检测技术转基因产品应用快速检测装置标准样品技术发明转基因品种转基因品系