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大麻二酚对转化生长因子β1诱导肝星状细胞活化和肝纤维化的作用

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4965-4974页

作者：王联谢娜赵珮伶陈浩李芏酉王豫萍贵州医科大学附属医院临床检验中心贵州省贵阳市550003 贵州医科大学医学检验学院临床微生物学及免疫学教研室贵州省贵阳市550004

背景:大麻二酚具有抗炎、抗氧化等药理学作用,并且不具有精神活性,在肝脏疾病中的研究日渐增加,但其对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号转导通路的作用尚未明确。目的:探讨大麻二酚对肝星状细胞中转化生长因子β1/Smad信号转导通路... 详细信息

背景:大麻二酚具有抗炎、抗氧化等药理学作用,并且不具有精神活性,在肝脏疾病中的研究日渐增加,但其对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号转导通路的作用尚未明确。目的:探讨大麻二酚对肝星状细胞中转化生长因子β1/Smad信号转导通路的影响,研究其抗肝纤维化的可能机制。方法:(1)体外实验:选取大鼠肝星状细胞株(HSC-T6),分6组培养:对照组常规培养24 h,单纯药物组加入大麻二酚培养24 h,造模组加入转化生长因子β1培养24 h,造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组均加入转化生长因子β1培养24 h后分别加入1,5μmol/L大麻二酚或水飞蓟素培养24 h。培养结束后,检测各组细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路蛋白表达。(2)动物体内实验:将C57BL/6J小鼠随机分为5组,每组8只:假手术组不造模,造模组、造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组通过胆管结扎法建立肝纤维化模型,造模3周后分别腹腔注射4,8 mg/kg大麻二酚或水飞蓟素,1次/d,连续给药7 d。给药结束后,检测各组小鼠肝功能、肝脏病理形态及α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路相关蛋白表达。结果与结论:(1)体外实验:与对照组比较,造模组HSC-T6细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平以及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1、p-Smad2/3蛋白表达均升高(P<0.05),Smad7蛋白表达降低(P<0.05);两种剂量大麻二酚处理可改善转化生长因子β1诱导的HSC-T6细胞上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组改善作用更明显;(2)体内实验:与假手术组比较,模型组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性升高(P<0.05),肝组织中炎性细胞浸润及胶原含量增加(P<0.05),转化生长因子β1/Smad信号转导通路被激活,α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达升高(P<0.05);两种剂量大麻二酚干预可减轻造模小鼠上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组效果更明显;(3)结果表明,大麻二酚通过抑制肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号传导通路的激活抑制肝纤维化。

关键词：大麻二酚肝星状细胞肝纤维化信号转导通路转化生长因子β1/Smad HSC-T6细胞

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铜锶二元掺杂硅酸钙涂层改性钛合金的促成骨和抗菌效应

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中国组织工程研究 2025年第22期29卷 4639-4646页

作者：程新奇邵龙辉沈华侨刘宏伟南京医科大学附属常州第二人民医院骨科南京医科大学常州医学中心江苏省常州市213003 大连医科大学研究生院辽宁省大连市116044

背景:钛合金作为骨科植入物时缺乏生物活性,可导致种植体松动和假体周围感染,因此,研究一种兼顾促成骨和抗感染复合功能的钛合金表面改性方法具有重要意义。目的:研究铜、锶二元掺杂硅酸钙复合涂层改性钛合金的理化性质,评估其促成骨和... 详细信息

背景:钛合金作为骨科植入物时缺乏生物活性,可导致种植体松动和假体周围感染,因此,研究一种兼顾促成骨和抗感染复合功能的钛合金表面改性方法具有重要意义。目的:研究铜、锶二元掺杂硅酸钙复合涂层改性钛合金的理化性质,评估其促成骨和抗菌方面的潜能。方法:采用球磨、造粒方法制备含有氧化铜、氧化锶及硅酸钙的复合粉末,采用大气等离子喷涂技术在钛合金(Ti6Al4V)表面制备铜锶二元掺杂硅酸钙复合涂层,对复合涂层进行表征。将钛合金浸提液、硅酸钙涂层改性钛合金浸提液、铜掺杂硅酸钙复合涂层改性钛合金浸提液、铜锶二元掺杂硅酸钙复合涂层改性钛合金浸提液分别与MC3T3-E1细胞共培养,检测材料的生物安全性与促成骨性能。将金黄色葡萄球菌(或大肠埃希菌)分别与钛合金、硅酸钙涂层改性钛合金、铜掺杂硅酸钙复合涂层改性钛合金、铜锶二元掺杂硅酸钙复合涂层改性钛合金共培养,扫描电镜、平板计数法检测材料的体外抗菌性能。结果与结论:(1)扫描电子显微镜下可见铜锶二元掺杂硅酸钙复合涂层粗糙表面存在大量的纳米结构,该复合涂层成功喷涂在钛合金表面,在体外可缓释Sr^(2+)和Cu^(2+),并且Sr^(2+)的释放浓度大于Cu^(2+);(2)CCK-8和细胞活死染色结果显示,铜掺杂硅酸钙复合涂层改性钛合金具有一定的细胞毒性,硅酸钙涂层与铜锶二元掺杂硅酸钙复合涂层改性钛合金具有良好的生物相容性;碱性磷酸酶与茜素红染色结果显示,相较于钛合金、硅酸钙涂层改性钛合金,铜锶二元掺杂硅酸钙复合涂层改性钛合金表现出更优的促成骨性能;(3)扫描电镜观察、细菌涂布和细菌计数法结果表明,相较于钛合金、硅酸钙涂层改性钛合金,铜掺杂硅酸钙复合涂层与铜锶二元掺杂硅酸钙复合涂层改性钛合金能有效抑制金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的生长,表现出抗菌潜能;(4)结果表明,铜锶二元掺杂硅酸钙复合涂层改性钛片具备良好的生物相容性、促成骨性能与抗菌性能。

关键词：钛合金等离子体喷涂复合涂层氧化铜氧化锶硅酸钙成骨金黄色葡萄球菌大肠埃希菌

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三种内固定方式在青少年胫骨结节撕脱骨折治疗中的疗效分析

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中国修复重建外科杂志 2025年

作者：段克友王照东刘亚军徐陈朱仲廉官建中蚌埠医科大学第一附属医院骨科组织移植安徽省重点实验室

目的分析空心螺钉联合克氏针张力带、空心螺钉联合锚钉、改良1/3管型钢板3种内固定方式在青少年胫骨结节撕脱骨折（avulsion fracture of tibial tubercle,AFTT）治疗中的疗效。方法回顾分析2018年1月—2023年9月收治且符合选择标准... 详细信息

目的分析空心螺钉联合克氏针张力带、空心螺钉联合锚钉、改良1/3管型钢板3种内固定方式在青少年胫骨结节撕脱骨折（avulsion fracture of tibial tubercle,AFTT）治疗中的疗效。方法回顾分析2018年1月—2023年9月收治且符合选择标准的19例青少年AFTT患者临床资料。根据内固定方式不同，将患者分为A组（8例，空心螺钉联合克氏针张力带）、B组（6例，空心螺钉联合锚钉）、C组（5例，改良1/3管型钢板）。3组患者年龄、性别、侧别、致伤原因、Ogden分型及伤后至手术时间等基线资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。记录并比较3组术后1个月膝关节活动度、膝关节负重时间、膝关节正常活动时间、末次随访时美国特种外科医院（HSS）评分；记录骨折有无移位、术后1个月骨折线是否模糊、有无骨骺发育异常，以及有无切口感染等并发症。结果 3组患者住院时间比较差异无统计学意义（P>0.05）。所有患者均获随访，随访时间10～24个月，平均14.3个月；3组间随访时间比较差异无统计学意义（P>0.05）。患者手术切口均愈合良好，无软组织激惹及骨折不愈合发生，随访期间未见患肢短缩畸形，无骨骺发育异常。A组术后1个月膝关节活动度及住院费用均优于B、C组，骨折愈合时间、膝关节负重时间、膝关节正常活动时间优于C组，C组住院费用优于B组，差异均有统计学意义（P学意义（P>0.05）。A组术后1个月骨折线均模糊，骨折端接触紧密，无骨折移位发生；B、C组各有2例术后1个月骨折线清晰，C组1例出现骨折端轻度移位；除B组1例术中出现骨折块劈裂外，其余两组术中骨折块均无劈裂。3组间术后1个月骨折线模糊情况、骨折移位情况及术中骨块劈裂情况比较差异均无统计学意义（P>0.05）。末次随访时3组患者膝关节HSS评分均获优、良，3组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论空心螺钉联合克氏针张力带技术治疗青少年AFTT疗效可靠，具有稳定骨折端、加速骨折愈合康复、早期可行膝关节功能锻炼、降低住院费用等优点。

关键词：胫骨结节撕脱骨折克氏针张力带空心螺钉钢板锚钉内固定

沙眼衣原体、淋球菌、解脲脲原体核酸快速检测方法的建立

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中国病原生物学杂志 2025年第2期 158-163+170页

作者：李雨欣周华誉张瑜高静蔡亦梅逯素梅任鲁风马鲁豫山东第一医科大学北京中科生仪科技有限公司山东第一医科大学第一附属医院(山东省千佛山医院)检验医学科

目的建立一种基于微流控芯片平台的可同时鉴别沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)、淋球菌(Neisseria gonorrhoeae,NG)、解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)的现场化全自动检测方法。方法选取CT的隐蔽性质粒、NG的porA基因和UU... 详细信息

目的建立一种基于微流控芯片平台的可同时鉴别沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)、淋球菌(Neisseria gonorrhoeae,NG)、解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)的现场化全自动检测方法。方法选取CT的隐蔽性质粒、NG的porA基因和UU的16S rRNA中的保守序列作为检测靶标，设计特异性引物和TaqMan探针；分别制备CT、NG、UU三种病原体的阳性克隆菌株进行灵敏度初步测试。开发基于全自动检测设备的一体化微流控芯片，实现“样本进-结果出”的核酸提取纯化及实时荧光PCR全过程。使用经过数字PCR定量的CT、NG、UU三种病原体的液体室内质控品对全自动检测方法的灵敏度、特异性和重复性进行评价。用建立的全自动检测方法与已上市的多重实时荧光PCR法检测试剂盒同时检测160例临床样本，评价其一致性。结果阳性克隆菌株经琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定，构建正确。建立的全自动检测方法检测CT、NG和UU的检出限均可达到1×10～2 copies/test,检测范围1×10～2～1×10～7 copies/test;该方法特异性好，不受单纯疱疹病毒Ⅰ型/Ⅱ型、腺病毒、肠道病毒71型、肺炎衣原体、肺炎支原体以及人免疫缺陷病毒Ⅰ型的干扰；该方法重复性好，变异系数均0.05);全自动检测方法与对比试剂盒检测CT、NG和UU结果的阳性符合率分别为96.2%、94.4%和93.4%,阴性符合率均为100%,总符合率分别为99.4%、99.4%和97.5%。结论建立的现场化全自动检测方法具有良好的灵敏度、特异性和重复性，该方法自动化程度高，检测时间短，操作简便、快速，不受实验室场地限制，适合于CT、NG、UU的临床快速诊断。

关键词：沙眼衣原体淋球菌解脲脲原体微流控芯片现场化核酸检测

金刚烷胺抗人呼吸道合胞病毒感染的体内外研究

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中国抗生素杂志 2025年

作者：陈芳张勇沈胡艳张平平林思宇侯长周张淋牟荣罗语思张科贵州医科大学基础医学院贵州省微生物组与传染性疾病防控重点实验室/病毒研究所/现代病原生物学特色重点实验室/人体寄生虫学教研室贵州中医药大学药学院贵州医科大学附属医院急诊ICU 贵州医科大学附属医院六盘水医院急诊科

目的研究离子通道阻断剂金刚烷胺在体内外抗人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus, HRSV)感染的活性。方法以MTT方法测定金刚烷胺对HEp-2细胞的半数毒性浓度，分别将30、60、90和120μmol/L金刚烷胺加入已感染RSV的HE... 详细信息

目的研究离子通道阻断剂金刚烷胺在体内外抗人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus, HRSV)感染的活性。方法以MTT方法测定金刚烷胺对HEp-2细胞的半数毒性浓度，分别将30、60、90和120μmol/L金刚烷胺加入已感染RSV的HEp-2细胞上清，通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验和免疫荧光实验评估金刚烷胺的体外抗病毒活性。将Balb/c小鼠分为Mock组、GZ08-18攻毒组、GZ08-18攻毒加10 mg/kg金刚烷胺治疗组、GZ08-18攻毒加20 mg/kg金刚烷胺治疗组和GZ08-18攻毒加50 mg/kg利巴韦林治疗组。通过小鼠体重变化、存活情况、肺指数、肺泡灌洗液病毒滴度、肺切片免疫荧光、肺组织病理损伤和炎症因子变化等评估金刚烷胺的体内抗病毒活性。结果体外实验qRT-PCR和免疫荧光结果显示不同浓度金刚烷胺处理后，病毒滴度与病毒融合蛋白表达均显著下降，且具量效依赖性。体内实验结果示，与GZ08-18攻毒组相比，金刚烷胺治疗后小鼠体重下降减缓，存活率显著提高，肺指数和病毒滴度在20 mg/kg金刚烷胺治疗组显著降低，肺组织切片病毒融合蛋白免疫荧光强度明显降低，相关炎症因子表达水平显著下调。肺组织病理切片的H&E染色结果示金刚烷胺明显抑制小鼠肺组织损伤。结论金刚烷胺在体内外均可显著抑制RSV感染。

关键词：人呼吸道合胞病毒金刚烷胺抗病毒离子通道

驼源天然噬菌体纳米抗体文库的构建及抗CD22纳米抗体的筛选

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细胞与分子免疫学杂志 2025年

作者：何婉钧崔愷张西倩蒋丹徐广贤广东医科大学医学技术学院广东医科大学附属东莞第一医院精准医学中心广东医科大学广东省医学免疫与分子诊断重点实验室

目的筛选出抗CD22特异性纳米抗体，为其作为免疫治疗制剂提供基础。方法构建天然噬菌体纳米抗体展示文库，分析其多样性。以生物素化CD22抗原为靶点，进行3轮生物素链霉亲和素液相筛选法，初步通过ELISA和基因测序鉴定抗CD22纳米抗体... 详细信息

目的筛选出抗CD22特异性纳米抗体，为其作为免疫治疗制剂提供基础。方法构建天然噬菌体纳米抗体展示文库，分析其多样性。以生物素化CD22抗原为靶点，进行3轮生物素链霉亲和素液相筛选法，初步通过ELISA和基因测序鉴定抗CD22纳米抗体序列。结果经测定，构建的噬菌体纳米抗体展示文库容量为3.89×109CFU/mL，插入有效片段高于85%。基于此文库，初步筛选出7条抗CD22纳米抗体，其氨基酸序列比对结果显示，整体相似性为70.34%，均为亲水性蛋白。蛋白-蛋白复合物对接预测结果表明，5条纳米抗体序列的模拟蛋白都可以配对连接到CD22，主要作用力为疏水相互作用和氢键。结论本研究为靶向CD22的嵌合抗原受体T细胞的研究提供基础，成功构建天然噬菌体纳米抗体展示文库，获得5条抗CD22特异性的纳米抗体。

关键词： CD22 纳米抗体噬菌体展示文库

钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ质粒的构建和表达及其与CaV1.2通道结合的鉴定

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中国医科大学学报 2025年

作者：王红梅王祥卉张文竹何蕊廖天佐高青华郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室赤峰市医院药剂科中国医科大学继续教育学院综合办公室中国医科大学生命科学学院发育细胞生物学教研室

目的构建钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）长片段的融合蛋白质粒，表达、提取、纯化，并鉴定其与CaV1.2通道蛋白的结合。方法将提取的pGEX-6p-1/CaMKⅡ长片段质粒转化到原核大肠杆菌BL21感受态细胞，摇床培养箱中培养12h，添加... 详细信息

目的构建钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）长片段的融合蛋白质粒，表达、提取、纯化，并鉴定其与CaV1.2通道蛋白的结合。方法将提取的pGEX-6p-1/CaMKⅡ长片段质粒转化到原核大肠杆菌BL21感受态细胞，摇床培养箱中培养12h，添加异丙基-β-D-硫代半乳糖苷，促进GST融合蛋白的表达。采用DTT联合超声破碎法，谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B （GS-4B）分离、纯化GST-CaMKⅡ长片段后，经过PreScission蛋白酶处理，切除GST标签，得到CaMKⅡ长片段蛋白。采用15%SDS-PAGE鉴定CaMKⅡ长片段蛋白的分子量和相对纯度；采用Bradford方法测定纯化后蛋白的浓度；采用pull-down结合Western blotting鉴定其与CaV1.2通道蛋白的结合能力。结果测序结果表明，CaMKⅡ长片段构建成功。通过DTT联合超声破碎法，得到了较高纯度和浓度的长片段CaMKⅡ蛋白，并能够与心肌CaV1.2钙通道末端CT1蛋白结合。结论本研究成功构建了CaMKⅡ长片段钙调蛋白激酶融合蛋白质粒，提取、纯化了能够与CaV1.2通道蛋白结合并具有生物活性的CaMKⅡ长片段蛋白，为深入研究CaMKⅡ蛋白的功能奠定了基础。

关键词：钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 质粒构建分离纯化 pull-down

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线粒体自噬在心血管疾病中的作用

中国病理生理杂志 2025年

作者：卢少华庄海霞朱晨冯杜广州医科大学基础医学院广州市呼吸疾病全国重点实验室广东省蛋白质修饰与降解重点实验室广州医科大学附属第四医院广州医科大学附属第二医院麻醉科广州医科大学附属中医医院

心血管疾病（cardiovascular diseases, CVD）是全球主要致死原因之一，其发病机制复杂多样。线粒体作为细胞能量代谢中心，在CVD病理进程中的功能障碍已成为关键标志。这种功能失调可引发氧化应激、钙离子失衡和ATP减少，导致心肌细胞... 详细信息

心血管疾病（cardiovascular diseases, CVD）是全球主要致死原因之一，其发病机制复杂多样。线粒体作为细胞能量代谢中心，在CVD病理进程中的功能障碍已成为关键标志。这种功能失调可引发氧化应激、钙离子失衡和ATP减少，导致心肌细胞损伤。线粒体自噬是一种选择性降解受损线粒体的保护机制，在维持心肌细胞健康中发挥重要作用。近年研究揭示，线粒体自噬在心力衰竭、心肌梗死、缺血/再灌注损伤等多种CVD中具有显著调控作用。并且已有多种药物在靶向调节线粒体自噬活性中显示出很好的潜力，这为CVD治疗提供新思路。本综述系统阐述了线粒体自噬在CVD发病中的分子机制、生理病理功能及潜在治疗应用的最新进展，为深化对CVD认知和开发创新治疗策略提供理论基础。

关键词：心血管疾病线粒体线粒体自噬

载富血小板血浆水凝胶对L929细胞氧化损伤的保护作用

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中国组织工程研究 2025年第4期29卷 771-779页

作者：王自林牟秋菊刘宏杰申玉雪祝丽丽贵州医科大学医学检验学院临床检验基础与血液学检验教研室贵州省贵阳市550000 贵州医科大学附属医院输血科贵州省贵阳市550000

背景:在慢性创面愈合过程中,活性氧的过量生成可能会损害L929成纤维细胞的功能,从而延缓创面修复,因此保护成纤维细胞免受氧化应激的影响对于促进创面愈合非常重要。目的:评估羧甲基壳聚糖-氧化硫酸软骨素/富血小板血浆(CMC-OCS/PRP)水... 详细信息

背景:在慢性创面愈合过程中,活性氧的过量生成可能会损害L929成纤维细胞的功能,从而延缓创面修复,因此保护成纤维细胞免受氧化应激的影响对于促进创面愈合非常重要。目的:评估羧甲基壳聚糖-氧化硫酸软骨素/富血小板血浆(CMC-OCS/PRP)水凝胶对H2O2刺激下L929细胞的保护作用。方法:制备CMC-OCS/PRP水凝胶,表征水凝胶的微观形貌、降解性能、清除H2O2与羟基自由基的能力及生物相容性。取生长状态良好的L929细胞,分5组培养:对照组常规培养,H2O2组加入H2O2,CMC-OCS组加入羧甲基壳聚糖-氧化硫酸软骨素水凝胶浸提液+H2O2,PRP组加入富血小板血浆凝胶浸提液+H2O2,CMC-OCS/PRP组加入羧甲基壳聚糖-氧化硫酸软骨素/富血小板血浆水凝胶浸提液处理+H2O2,每组先加入水凝胶浸提液处理6 h,然后再加入H2O2处理24 h。培养结束后,检测细胞活性氧及丙二醛水平,细胞凋亡、胶原纤维Ⅰ蛋白表达。在加入H2O2的情况下,将上述水凝胶浸提液分别与L929成纤维细胞直接或间接共培养36 h,通过划痕实验、Transwell小室实验检测细胞的迁移能力。结果与结论:①CMC-OCS/PRP水凝胶具有均匀相互关联的多孔结构及良好的降解能力,体外可有效清除H2O2与羟基自由基,并且具有良好的生物相容性;②与对照组比较,H2O2组细胞凋亡率、细胞活性氧与丙二醛水平升高(P0.05);与H2O2组比较,CMC-OCS组、CMC-OCS/PRP组细胞活性氧水平降低(P0.05);与H2O2组比较,PRP组、CMC-OCS组、CMC-OCS/PRP组细胞迁移数量、迁移面积均增加(P<0.05),并且以CMC-OCS/PRP组增加最显著;④在氧化应激条件下,CMC-OCS/PRP水凝胶可改善成纤维细胞的迁移能力,抗细胞凋亡并保护细胞伸展功能。

关键词：富血小板血浆羧甲基壳聚糖氧化硫酸软骨素水凝胶 L929细胞抗氧化

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