驼源天然噬菌体纳米抗体文库的构建及抗CD22纳米抗体的筛选

作     者：何婉钧 崔愷 张西倩 蒋丹 徐广贤 

作者机构：广东医科大学医学技术学院 广东医科大学附属东莞第一医院精准医学中心 广东医科大学广东省医学免疫与分子诊断重点实验室 

出 版 物：《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：2025年

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：宁夏回族自治区重点研发计划(2022CMG03123,2022CMG02041) 广东省基础与应用基础研究基金(2023A1515140148) 广东医科大学附属东莞第一医院高层次人才科研资助计划项目(GCC2023004) 广东医科大学博士科研启动基金(4SG23190G) 

主　　题：CD22 纳米抗体 噬菌体展示文库 

摘      要：目的 筛选出抗CD22特异性纳米抗体，为其作为免疫治疗制剂提供基础。方法 构建天然噬菌体纳米抗体展示文库，分析其多样性。以生物素化CD22抗原为靶点，进行3轮生物素链霉亲和素液相筛选法，初步通过ELISA和基因测序鉴定抗CD22纳米抗体序列。结果 经测定，构建的噬菌体纳米抗体展示文库容量为3.89×109CFU/mL，插入有效片段高于85%。基于此文库，初步筛选出7条抗CD22纳米抗体，其氨基酸序列比对结果显示，整体相似性为70.34%，均为亲水性蛋白。蛋白-蛋白复合物对接预测结果表明，5条纳米抗体序列的模拟蛋白都可以配对连接到CD22，主要作用力为疏水相互作用和氢键。结论 本研究为靶向CD22的嵌合抗原受体T细胞的研究提供基础，成功构建天然噬菌体纳米抗体展示文库，获得5条抗CD22特异性的纳米抗体。