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“十四五”规划指导下生物化学课程改革的思路探究

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卫生职业教育 2022年第9期40卷 39-40页

作者：刘羽茜王艳杰刘慧慧王建光赵丹玉柳春贾连群辽宁中医药大学中西医结合学院辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学辽宁沈阳110847

高等教育应全方位服务国家需要和经济社会发展,“十四五”规划为高等教育领域未来的远期规划提供了基本遵循,为高等教育的高质量发展提出了新的要求。生物化学是医学类院校的必修基础课程,应顺势深化课程教学改革,实现高质量发展。

关键词：生物化学 “十四五”规划高等教育课程改革

藤黄酸对人肺腺癌A549细胞上皮-间质转化的影响及机制研究

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辽宁中医药大学学报 2022年第9期24卷 29-33页

作者：曹悦刘春英辽宁中医药大学中西医结合学院辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学杏林学院辽宁沈阳110167

目的观察藤黄酸(gambogic acid,GA)作用于转化生长因子诱导的人肺腺癌A549细胞后上皮-间质转化过程的变化,研究药物作用对细胞增殖、迁移、侵袭等的影响,探讨藤黄酸抑制非小细胞肺癌转移的可能机制。方法利用细胞增殖、细胞划痕和Transw... 详细信息

目的观察藤黄酸(gambogic acid,GA)作用于转化生长因子诱导的人肺腺癌A549细胞后上皮-间质转化过程的变化,研究药物作用对细胞增殖、迁移、侵袭等的影响,探讨藤黄酸抑制非小细胞肺癌转移的可能机制。方法利用细胞增殖、细胞划痕和Transwell小室实验分别检测藤黄酸对各组人肺腺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力的改变;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组内细胞上皮-间质转化(EMT)关键蛋白和mRNA的表达情况。结果藤黄酸能明显抑制细胞增殖,高浓度组作用显著;细胞划痕0、24、48 h的结果与加药浓度呈正相关;Transwell小室实验表明,藤黄酸干预后高浓度组对细胞侵袭能力有明显抑制作用;Real-time PCR和Western blot显示,与空白组相比,藤黄酸干预后对上皮细胞特性蛋白的基因转录以及蛋白表达有促进作用,而对黏附连接的蛋白基因转录及蛋白表达均有显著的抑制作用(P<0.05)。结论藤黄酸能显著抑制人肺腺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭;对转化生长因子-β(TGF-β)诱导后的EMT信号通路中的相关蛋白表达有明显影响作用。

关键词：藤黄酸人肺腺癌A549细胞上皮-间质转化迁移侵袭 E-cadherin N-cadherin

黄芪甲苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤NLRP3炎性小体表达的影响

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中国当代儿科杂志 2021年第4期23卷 402-409页

作者：李娜穆亚平刘春英王阳李晓锋王雪薇辽宁中医药大学中西医结合学院辽宁沈阳110847 沈阳市儿童医院神经康复实验室辽宁沈阳110032

目的探讨黄芪甲苷(AS-IV)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响。方法将24只7日龄Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、HIBD组、AS-IV治疗组(AS-IV组),每组8只。各组动物造模24 h后取脑组织进行苏木精... 详细信息

目的探讨黄芪甲苷(AS-IV)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响。方法将24只7日龄Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、HIBD组、AS-IV治疗组(AS-IV组),每组8只。各组动物造模24 h后取脑组织进行苏木精-伊红染色、yo-PRO-1和EthD-2免疫荧光染色,以观察AS-IV在体内的脑保护作用。构建HT22细胞氧糖剥夺(OGD)模型,设置AS-IV浓度梯度(50~400μmol/L)进行干预。采用CCK8法检测HT22细胞活力,RT-PCR和Western blot法检测不同浓度AS-IV对NLRP3、Gasdermin D蛋白(GSDMD)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素1β(IL-1β)mRNA及其蛋白表达的影响。结果 Yo-PRO-1和EthD-2染色结果显示,与假手术组比较,HIBD组焦亡细胞增多,同时可见少量坏死细胞,AS-IV组焦亡细胞和坏死细胞均减少。HIBD组脑组织NLRP3、IL-1β、Caspase-1及GSDMD蛋白表达水平显著高于假手术组(P<0.05);与HIBD组比较,AS-IV组NLRP3、Caspase-1及GSDMD蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。HT22细胞实验结果显示,与OGD组比较,AS-IV可以抑制NLRP3、GSDMD、Caspase-1、IL-1βmRNA及其蛋白表达,200μmol/L时治疗效果最佳(P<0.05)。结论 AS-IV可能通过抑制NLRP3、GSDMD、Caspase-1、IL-1β的表达减轻新生大鼠HIBD。

关键词：缺氧缺血性脑损伤黄芪甲苷细胞焦亡 HT22细胞新生大鼠

基于肝主卫气理论浅谈昼夜节律紊乱共病肥胖的发病机制

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中西医结合肝病杂志 2023年第9期33卷 839-843页

作者：苗嘉芮于悦孙晓萌樊旭辽宁中医药大学研究生学院辽宁沈阳110032 辽宁中医药大学杏林学院辽宁中医药大学针灸推拿学院辽宁中医药大学中西医结合学院

现代社会中,熬夜、轮班等成为人体昼夜节律紊乱的主要诱因。昼夜节律对生理和行为影响过程调节可以表现在很多方面,长时间睡眠障碍引起的昼夜节律紊乱可导致许多疾病的发生。基于大量前期研究发现肝与昼夜节律紊乱联系紧密[1-4],因此本... 详细信息

现代社会中,熬夜、轮班等成为人体昼夜节律紊乱的主要诱因。昼夜节律对生理和行为影响过程调节可以表现在很多方面,长时间睡眠障碍引起的昼夜节律紊乱可导致许多疾病的发生。基于大量前期研究发现肝与昼夜节律紊乱联系紧密[1-4],因此本文通过发现昼夜节律紊乱的中医病机与其西医分子生物学机制的相似关系,提出“肝-卫气-自主神经系统”特性相似理论.

关键词：昼夜节律紊乱肥胖肝卫气发病机制

基于生物信息学分析青光眼差异表达基因及潜在干预中药实验研究

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沈阳药科大学学报 2023年

作者：滕丹李乐曹晶郭溪女李如岩王庆峰辽宁中医药大学中西医结合学院辽宁何氏医学院药学院辽宁何氏医学院人工智能与大数据学院

目的通过生物信息学方法分析青光眼发病相关核心差异基因，筛选出对青光眼治疗有干预作用的中药，并进行体外细胞实验验证，为青光眼中药治疗提供新的研究思路和实验依据。方法从GEO数据库中获取包含青光眼全基因组表达的数据集GSE2727... 详细信息

目的通过生物信息学方法分析青光眼发病相关核心差异基因，筛选出对青光眼治疗有干预作用的中药，并进行体外细胞实验验证，为青光眼中药治疗提供新的研究思路和实验依据。方法从GEO数据库中获取包含青光眼全基因组表达的数据集GSE27276，用R语言对其进行差异基因分析，String数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）分析，Cytoscape软件筛选核心差异基因。利用Python语言，在TCMSP数据库内抓取核心差异表达基因对应的化合物及相关中药，进行体外细胞实验研究。用MTT及MTS检测细胞存活率，采用WesternBlot检测Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达，化学荧光法检测细胞内ROS，双抗体夹心法测定TNF-α及IL-1β水平。结果从GSE27276中共获得194个差异表达基因，其中表达下调基因为130个，表达上调基因为64个，通过Cytoscape获得15个上调和15个下调核心差异表达基因。利用Python语言，在TCMSP数据库内共抓取了6048个/频次的化合物，最终共获得了498个中药，其中出现频次最多的中药为冬瓜皮（2852频次），对其进行的体外实验结果表明，采用MTT及MTS两种检测细胞活力方法，高中低三种浓度冬瓜皮水提物均可提高过氧化氢损伤后的细胞存活率。WesternBlot检测结果表明冬瓜皮水提物可上调Bcl-2/Bax，下调Bax、Caspase-3蛋白表达；ROS检测结果显示，与过氧化氢模型组相比，冬瓜皮水提物三个浓度组ROS水平均明显降低；ELISA检测结果显示冬瓜皮水提物可降低损伤细胞TNF-α和IL-1β水平。结论通过生物信息学方法可挖掘潜在的抗青光眼中药，实验验证可知其中冬瓜皮水提物对视网膜神经节细胞具有保护作用，其作用机制可能与抗炎和抗氧化损伤相关。

关键词：青光眼生物信息学视网膜神经节细胞细胞实验

参苓白术散对肥胖2型糖尿病ZDF大鼠胰岛β细胞去分化的作用

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中华中医药杂志 2023年第12期38卷 6034-6039页

作者：罗金童张栎婧战丽彬杭天怡南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210000 辽宁中医药大学中医药创新工程技术中心沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室沈阳110847

目的:探讨参苓白术散对肥胖2型糖尿病(T2DM) ZDF大鼠胰岛β细胞去分化的作用。方法:10只LZ大鼠为对照组,20只ZDF大鼠随机分为模型组以及参苓白术散治疗组。从5周龄开始对应灌胃超纯水及24 g/kg的参苓白术散水煎液,前期研究证实该剂量疗... 详细信息

目的:探讨参苓白术散对肥胖2型糖尿病(T2DM) ZDF大鼠胰岛β细胞去分化的作用。方法:10只LZ大鼠为对照组,20只ZDF大鼠随机分为模型组以及参苓白术散治疗组。从5周龄开始对应灌胃超纯水及24 g/kg的参苓白术散水煎液,前期研究证实该剂量疗效及安全性最佳。连续干预至9周龄,检测血清游离脂肪酸(FFA)。通过对照组、模型组、参苓白术散治疗组3组的胰腺组织苏木素-伊红染色,观察胰岛的形态损伤情况。通过免疫荧光实验、蛋白免疫印迹实验、实时荧光定量PCR实验,观察参苓白术散对胰岛中胰岛素和胰高血糖素、叉头转录因子O1(FoxO1)、胰腺十二指肠同源盒-1(Pdx1)、同源盒基因NKx6.1(Nkx6.1)、肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A(MafA)、八聚体结合蛋白-4(Oct4)、蛋白Nanog、神经元素3(Ngn3)表达的影响,以评价参苓白术散对自发性糖尿病ZDF大鼠胰岛β细胞去分化的影响。结果:9周龄时,与LZ组比较,ZDF组大鼠血清FFA水平升高(P<0.01);在胰腺中,同一视野下,ZDF组胰岛较LZ组形态不规则,边缘不整齐,界限不清晰,胰岛体积略增大。胰岛中胰岛素表达减少(P<0.01),胰高血糖素表达增多(P<0.01)。在胰腺组织中,FoxO1、MafA、Pdx1、Nkx6.1的蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.05),Oct4、Nanog蛋白及mRNA、Ngn3蛋白的表达显著升高(P<0.05)。参苓白术散干预后,ZDF大鼠血清FFA水平下降(P<0.01),胰岛形态改善,界限清晰,体积恢复正常。胰岛中胰岛素表达增多(P<0.05),胰高血糖素表达减少(P<0.01)。胰腺中FoxO1、Pdx1、Nkx6.1蛋白及mRNA的表达上调(P<0.05),Oct4、Nanog蛋白及mRNA、Ngn3蛋白的表达下调(P<0.05)。结论:参苓白术散可以降低ZDF大鼠脂毒性风险,改善胰岛β细胞去分化,起到治疗肥胖T2DM的效果。

关键词：肥胖2型糖尿病胰岛β细胞去分化参苓白术散脂毒性

基于“胞脉络于心”探讨绞股蓝通过METTL3介导RNA m6A修饰调控糖酵解途径共治AS与卵巢癌的理论研究

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中华中医药学刊 2023年

作者：孙小扉王莹闵冬雨赵佼王华文李政杨莹赵卓周立江宋囡辽宁中医药大学中西医结合学院辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室中国医科大学肿瘤医院辽宁省肿瘤医院辽宁中医药大学附属医院辽宁中医药大学医学检验学院

心血管病和癌症，是导致人类患病和死亡的主要原因。研究发现，二者存在潜在联系。从中医角度而言，动脉粥样硬化病位在血管，与奇恒之府“脉”对应，卵巢癌以脏腑功能紊乱、冲任失调为本，邪毒内生为标，阻于胞宫所致，又《素问·评热... 详细信息

心血管病和癌症，是导致人类患病和死亡的主要原因。研究发现，二者存在潜在联系。从中医角度而言，动脉粥样硬化病位在血管，与奇恒之府“脉”对应，卵巢癌以脏腑功能紊乱、冲任失调为本，邪毒内生为标，阻于胞宫所致，又《素问·评热病论》曰：“胞脉者，属心而络于胞中。可见，两种疾病可以“脉”为桥梁构建联系。绞股蓝化痰止咳，健脾理气，益气活血，解毒利湿，具有调血脂、抗衰老、调节机体免疫以及抗肿瘤等多种药理作用，在心血管系统与肿瘤领域疾病中疗效显著。N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine，m6A）甲基化修饰是真核细胞mRNA最常见的一种表观遗传修饰方式。m6A甲基化修饰通过调控修饰mRNA，广泛参与细胞内RNA的许多生物学行为，从而影响疾病进展与肿瘤的发生。本文基于“胞脉络于心”理论，以中医异病同治观点为依据，构建“药物-成分-靶点”网络，以METTL3介导RNA m6A修饰调控糖酵解途径为切入点，对绞股蓝共治AS与卵巢癌的中医内涵及现代药理作用予以探讨。

关键词：绞股蓝 m6A甲基化卵巢癌动脉粥样硬化糖酵解

二陈汤通过增强自噬改善痰湿型PCOS大鼠子宫葡萄糖转运功能的研究

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中国中医基础医学杂志 2021年第8期27卷 1270-1274页

作者：丛培玮张丽娜赵丹玉尚冰吴兆利辽宁中医药大学教学实验中心沈阳110847 辽宁中医药大学中西医结合学院沈阳110847 辽宁中医药大学医史文献研究院沈阳110847 辽宁中医药大学针灸推拿学院沈阳110847

目的:观察二陈汤通过增强自噬改善痰湿型多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠子宫自噬相关基因7(autophagy related gene,Atg7)、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter protein 4,Glut4)信号通路的作用,探讨二陈汤改善痰湿型PCOS胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的可能机制。方法:选取动情周期规律SD大鼠42只,运用高脂+来曲唑灌胃法复制痰湿型PCOS大鼠,随机分为对照组10只和模型组32只。造模结束后,周期延长的模型组大鼠随机分为模型组、中药组和二甲双胍组各10只。Elisa法测定大鼠血清激素水平,胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment-Insulin resistance,HOMA-IR),HE染色观察子宫病理组织形态,Western Blot法检测子宫Atg7、PI3K、Akt及Glut4蛋白表达水平。结果:与对照组比较模型组血清性激素水平普遍升高(P<0.05),与模型组比较2组药物治疗组性激素水平降低(P<0.05),与对照组比较模型组HOMA-IR升高(P<0.05),与模型组比较药物治疗组HOMA-IR降低(P<0.05),与对照组比较模型组子宫Atg7、PI3K、Akt及Glut4蛋白水平降低(P<0.05),与模型组比较药物治疗组子宫Atg7、PI3K、Akt及Glut4蛋白水平有一定改善(P<0.05)。结论:二陈汤能够显著抑制PCOS IR水平,其机制可能是通过提高子宫内膜的自噬能力、增强PI3K/Akt/Glut4信号通路实现的。

关键词：二陈汤痰湿型多囊卵巢综合征子宫 Atg7 PI3K/Akt/Glut4信号通路

二陈汤对痰湿型多囊卵巢综合征大鼠内分泌及糖脂代谢的影响

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中华中医药学刊 2021年第8期39卷 58-61,I0018页

作者：丛培玮张丽娜王丹张越时陈文娜苗兰英赵丹玉辽宁中医药大学教学实验中心辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学医学检验学院辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学中西医结合学院辽宁沈阳110847

目的观察二陈汤对痰湿型多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠内分泌及糖脂代谢的作用,探讨"痰湿"的科学内涵。方法选取动情周期规律SD大鼠42只,随机分为对照组(n=10),模型组(n=32),模型组给予高脂饲料+来曲唑溶液灌胃。造模结束后,选周期延长的模... 详细信息

目的观察二陈汤对痰湿型多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠内分泌及糖脂代谢的作用,探讨"痰湿"的科学内涵。方法选取动情周期规律SD大鼠42只,随机分为对照组(n=10),模型组(n=32),模型组给予高脂饲料+来曲唑溶液灌胃。造模结束后,选周期延长的模型组大鼠随机分为中药组(n=10)和二甲双胍组(n=10),1 mL/100 g剂量灌胃给药,连续4周。Elisa法测定大鼠血清性激素水平,HOMA-IR指数;HE染色观察卵巢病理组织形态;生化分析仪检测血脂水平;实时荧光定量PCR法检测卵巢胰岛素抵抗相关基因的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血清LH、FSH、T、TC、TG、LDL、HDL、FPG、FINS、HOMA-IR水平升高,E2水平降低;卵巢IGF1、PTEN mRNA升高,IGFBP1 mRNA降低;卵巢呈多囊样改变。与模型组比较,中药组和二甲双胍组大鼠血清LH、FSH、T、TC、TG、LDL、HDL、FPG、FINS、HOMA-IR水平降低,E2水平升高;卵巢IGF1、PTEN mRNA降低,IGFBP1 mRNA升高;颗粒细胞增厚,各级卵泡增多。结论二陈汤能够显著改善痰湿型PCOS内分泌及糖脂代谢功能,可能是其"化痰"的科学本质。

关键词：痰湿型多囊卵巢综合征颗粒细胞二陈汤内分泌糖脂代谢