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不同厂家实验动物饲料质量调查分析

实验动物科学 2024年第4期41卷 68-74页

作者：董巧燕张文盛尚艳姣邱业峰陈菁青军事医学研究院实验动物中心北京100071

目的了解当前我国实验动物饲料质量现状,为标准化实验动物饲料生产提供依据。方法选择市场占有率高、代表性强的五家不同来源饲料厂家生产的实验动物饲料,采用国标法对成品料常规营养成分进行测定比较分析。结果不同厂家生产的鼠繁殖料... 详细信息

目的了解当前我国实验动物饲料质量现状,为标准化实验动物饲料生产提供依据。方法选择市场占有率高、代表性强的五家不同来源饲料厂家生产的实验动物饲料,采用国标法对成品料常规营养成分进行测定比较分析。结果不同厂家生产的鼠繁殖料、猴维持料、犬料、兔料、豚鼠料常规养分含量存在显著差异,饲料水分、粗蛋白、钙及磷含量均符合国标,个别厂家生产的鼠繁殖料、猴维持料、兔料存在灰分、粗纤维含量超标、粗脂肪含量偏低的情况。此外,五种饲料中微量元素含量不合格检出率高,主要为铁和碘含量的超标。结论不同实验动物饲料生产厂家常规养分质量基本能达到国标要求,但缺乏对微量元素等指标的监测,导致产品不合格率高。因此,还需要加强和提升饲料标准化体系建设和质控监督等关键环节,确保实验动物饲料标准化和规范化。

关键词：实验动物配合饲料常规营养成分微量元素饲料标准化

高原急性缺氧肠道应激损伤小鼠模型的构建与评价

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实验动物与比较医学 2024年第1期44卷 31-41页

作者：郑建华法云智董巧燕邱业峰陈菁青军事医学研究院实验动物中心北京100071

目的通过模拟急性缺氧环境,建立实验性高原小鼠肠道应激损伤模型,为探讨高原急性胃肠病的致病机制以及防治措施奠定基础。方法根据体重按随机数字表法,将36只SPF级成年雄性BALB/c小鼠分为常氧24 h组、常氧72 h组、低氧24 h组和低氧72 h... 详细信息

目的通过模拟急性缺氧环境,建立实验性高原小鼠肠道应激损伤模型,为探讨高原急性胃肠病的致病机制以及防治措施奠定基础。方法根据体重按随机数字表法,将36只SPF级成年雄性BALB/c小鼠分为常氧24 h组、常氧72 h组、低氧24 h组和低氧72 h组,每组9只。常氧对照组小鼠饲养于常规屏障环境中,低氧应激组饲养于屏障环境中的低氧舱内,氧气浓度设定为10%以模拟高原环境,分别应激24 h和72 h,建立急性缺氧所致肠道损伤模型。造模结束后,称量小鼠体重,用1%戊巴比妥钠麻醉后断颈处死各组小鼠,采集十二指肠和结肠组织并进行HE染色后观察肠道组织病理形态,通过蛋白质印迹和免疫组织化学法检测肠道组织中紧密连接相关蛋白表达水平,应用实时荧光定量PCR检测炎性细胞因子和趋化因子的mRNA表达水平,采用TUNEL染色法检测肠上皮细胞凋亡活性等指标,从而对该模型的肠道损伤相关表型进行评价。结果与常氧组相比,低氧24 h组和低氧72 h组的小鼠表现为体重减轻,十二指肠绒毛长度变短、隐窝结构异常、绒毛/隐窝比下降,结肠黏膜炎性细胞浸润、隐窝结构不规则。低氧24 h组和低氧72 h组小鼠的十二指肠和结肠组织中闭锁蛋白(Occludin)及闭锁小带蛋白(zonula occludens-1,ZO-1)表达水平明显下降(P0.05),但缺氧应激72 h后,小鼠结肠组织中促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6、MCP-1以及抗炎因子IL-10 mRNA水平显著增高(P<0.05)。结论利用低氧舱模拟高原急性缺氧环境可导致应激小鼠肠道组织结构异常、肠屏障功能障碍,并诱导肠上皮细胞凋亡,引发肠道炎性反应。这些结果表明急性缺氧应激肠道损伤小鼠模型构建成功。

关键词：高原急性缺氧肠道应激损伤细胞凋亡炎性反应小鼠

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肠道寄生虫与肠道微生物相互作用研究进展

中国畜牧兽医 2024年第1期51卷 330-337页

作者：李思瑶侯斌玛丽雅其其格哈斯苏荣内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室国家级动物医学实验教学中心呼和浩特010018 乌审旗动物疫病预防控制中心鄂尔多斯017300

在脊椎动物的肠道内,存在着数量庞大、结构多样、动态变化的微生物群,它们对肠道的生理、代谢、免疫等具有重要的作用。在自然条件下,这些微生物和真核生物(如蠕虫、原生动物、真菌等)共同存在于脊椎动物肠道内。寄生虫与微生物群均可... 详细信息

在脊椎动物的肠道内,存在着数量庞大、结构多样、动态变化的微生物群,它们对肠道的生理、代谢、免疫等具有重要的作用。在自然条件下,这些微生物和真核生物(如蠕虫、原生动物、真菌等)共同存在于脊椎动物肠道内。寄生虫与微生物群均可显著改变机体肠道生理与免疫环境,为它们之间的相互作用创造了机会。肠道微生物与寄生虫之间的相互作用会极大地影响感染的结果,进而对宿主的健康产生重要影响。如寄生虫感染会影响宿主与微生物的相互作用关系,从而促使或保护宿主免受细菌的侵害。另一方面,菌群又会影响寄生虫的定植、繁殖和毒性,使其沿着与宿主寄生性-互惠共生性的生存模式发展。这些相互作用的机理与结果是微生物学与寄生虫学之间交叉研究的前沿课题。笔者对近年来有关肠道寄生虫与肠道微生物间相互作用的最新研究成果进行了总结,并对其可能未考虑到的因素提出了自己的观点,旨在为肠道寄生虫病防控及肠道菌群研究提供参考。

关键词：肠道寄生虫肠道微生物相互作用

犬支气管败血波氏杆菌的分离鉴定和灭活疫苗初步应用

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中国兽医杂志 2024年第7期60卷 41-48页

作者：王潘龙赵悦孙强周昊尹月曲雪婷原昆鹏栾庆东陈淑贞卢艳敬臧立玉韩海峰尹燕博青岛农业大学动物医学院山东青岛266109 青岛市即墨区畜牧业发展服务中心山东青岛266299 青岛博隆实验动物有限公司山东青岛266225 山西农业大学动物医学院山西晋中030801 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030

某实验比格犬养殖场部分犬出现咳喘和口鼻流血等症状,严重者死亡。为了调查发病原因并采取针对性措施,本试验采集临床发病犬的鼻腔拭子、死亡犬的肺脏和气管分泌物等,进行细菌分离培养;通过形态观察、革兰染色、16S rRNA和ptxA基因测序... 详细信息

某实验比格犬养殖场部分犬出现咳喘和口鼻流血等症状,严重者死亡。为了调查发病原因并采取针对性措施,本试验采集临床发病犬的鼻腔拭子、死亡犬的肺脏和气管分泌物等,进行细菌分离培养;通过形态观察、革兰染色、16S rRNA和ptxA基因测序,对分离细菌进行鉴定,并对部分菌株进行药敏试验。选取1株致病性强的分离菌株制备支气管败血波氏杆菌蜂胶佐剂灭活疫苗,进行免疫保护试验,分别采用1.0和0.5 mL剂量免疫小鼠,免疫后21 d攻毒;对养殖场临床发病犬和同群健康犬进行紧急免疫接种,剂量为4月龄以上犬每只1.0 mL、2~4月龄犬每只0.5 mL。对临床病死犬和攻毒死亡小鼠进行组织病理学观察。结果显示,从临床发病犬的鼻腔拭子、肺脏、气管和鼻腔黏液状分泌物共分离鉴定获得30株支气管败血波氏杆菌。药敏试验结果显示,临床分离菌株对环丙沙星和米诺环素高度敏感,但临床治疗效果不明显。免疫保护试验中,1.0 mL和0.5 mL蜂胶佐剂灭活疫苗对小鼠的保护率均可达100%;紧急免疫接种后,临床发病犬逐渐恢复,同群健康犬无新发病个体,疫苗免疫效果良好。组织病理学观察发现,临床病死犬和攻毒死亡小鼠均表现典型的支气管肺炎和肺气肿病变,肝细胞呈水泡样变。结果表明,支气管败血波氏杆菌是导致该场部分犬出现呼吸道疾病的病原体,蜂胶灭活疫苗可有效防控实验用比格犬支气管败血波氏杆菌感染。

关键词：比格犬支气管败血波氏杆菌 16S rRNA 组织病理学观察蜂胶佐剂灭活疫苗

磷酸二酯酶4抑制剂在中枢神经系统疾病中的作用研究进展

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浙江大学学报（医学版） 2024年第3期53卷 390-398页

作者：阿迪力·阿不都肉苏力迪丽呼玛尔·阿尔肯朱虎虎汤慧芳新疆医科大学动物实验中心新疆乌鲁木齐830017 浙江大学医学院基础医学院浙江杭州310058 乌鲁木齐市友谊医院眼科新疆乌鲁木齐830049

磷酸二酯酶(PDE)通过催化细胞内的环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)的水解参与调节神经元可塑性、突触发生、突触传递、记忆形成和认知功能等细胞生理过程及功能发挥。大量基础和临床研究证明PDE4抑制剂主要通过抑制cAMP水解、提高c... 详细信息

磷酸二酯酶(PDE)通过催化细胞内的环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)的水解参与调节神经元可塑性、突触发生、突触传递、记忆形成和认知功能等细胞生理过程及功能发挥。大量基础和临床研究证明PDE4抑制剂主要通过抑制cAMP水解、提高cAMP含量,增强其下游效应,从而改善中枢神经系统疾病的发生和发展。PDE4抑制剂可提高长时程增强效应、海马神经元cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的磷酸化和记忆相关Arc基因的表达,从而改善认知和记忆障碍以及阿尔茨海默病样症状;通过减轻α-突触核蛋白诱导的细胞毒性,增加miR-124-3p对细胞活性的作用而抵抗帕金森病的发生发展;可激活cAMP/PKA/CREB通路,从而减弱神经炎症和氧化应激,增强神经可塑性,改善精神分裂症;通过抑制海马的晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、Toll样受体4和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3通路降低小胶质细胞激活和IL-1β产生,下调HMGB1/RAGE信号通路和抑制炎症因子,在抑郁症中发挥作用;通过减少小脑神经胶质细胞损伤,增加伤害性感受阈值,改善相互学习和记忆缺陷,从而在孤独症谱系障碍的治疗中发挥作用;通过调节cAMP含量影响脆性X智力低下蛋白表达,有望应用于脆性X染色体综合征治疗;促进少突胶质祖细胞分化并增强髓鞘形成而影响多发性硬化症治疗。PDE4与双向情感障碍也有关,可能作为治疗靶点之一。目前还有不少PDE4抑制剂处于中枢神经系统疾病的临床试验阶段。本文综述了PDE4抑制剂治疗中枢神经系统疾病的基础研究和临床试验进展,以期为中枢神经系统疾病的预防和治疗提供新的思路,为中枢神经系统药物的研发提供新策略。

关键词：磷酸二酯酶4抑制剂中枢神经系统疾病基础研究临床试验综述

miR-15a-5p调控Wnt通路在百草枯致肺纤维化中的机制

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中华急诊医学杂志 2024年第8期33卷 1128-1133页

作者：王静姬晓航王蒙蒙张炜丁伟超陈娟冯靖孟健康孙兆瑞聂时南南京大学医学院附属金陵医院(中国人民解放军东部战区总医院)急诊医学科南京210002 江苏大学医学院实验中心镇江212013

目的探讨miR-15a-5p调控Wnt信号通路对PQ致肺纤维化的影响及分子机制。方法构建PQ诱导的16HBE细胞模型,采用高通量miRNA芯片技术和RT-qPCR筛选表达差异明显的miR-15a-5p进行实验。实验分组为:NC组(对照组):无特殊处理;PQ组:50μmol/L P... 详细信息

目的探讨miR-15a-5p调控Wnt信号通路对PQ致肺纤维化的影响及分子机制。方法构建PQ诱导的16HBE细胞模型,采用高通量miRNA芯片技术和RT-qPCR筛选表达差异明显的miR-15a-5p进行实验。实验分组为:NC组(对照组):无特殊处理;PQ组:50μmol/L PQ处理细胞72 h;miR-15a-5p组:转染miR-15a-5p过表达慢病毒的16HBE稳转株;miR-15a-5p+PQ组:50μmol/L PQ处理稳转株细胞72 h。RT-qPCR和Western blot检测Wnt通路相关基因Wnt3α和β-catenin、成纤维细胞标记基因Collagen I、Vimentin和αSMA,上皮细胞标记基因Occludin和CK18表达情况。构建PQ诱导的肺纤维化小鼠模型,采用Western blot、HE染色和免疫组织化学检测蛋白表达及肺组织损伤情况。数据以均数±标准差(x±s)表示,采用独立样本t检验分析两组间数据。结果细胞损伤模型中,Wnt3α、β-catenin、成纤维细胞标记基因Collagen I、Vimentin和αSMA表达显著上调(P动物模型中,Wnt3α、β-catenin、成纤维细胞标记基因Collagen I、Vimentin和αSMA蛋白水平显著升高(P<0.01),肺组织结构紊乱并发生纤维化,过表达miR-15a-5p可抑制Wnt3α蛋白表达水平(P<0.05)且改善肺组织损伤。结论miR-15a-5p可通过调控Wnt3α/β-catenin信号通路改善PQ导致的肺损伤,从而抑制肺纤维化的发生发展。

关键词： miRNA miR-15a-5p 百草枯肺纤维化 16HBE细胞 Wnt信号通路 Wnt3α β-catenin EMT

鸡载脂蛋白A-Ⅰ的多克隆抗体制备及亚细胞定位分析

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2024年第1期50卷 137-146页

作者：王圣文张丹邬雨倩周继勇郑肖娟浙江大学动物医学中心农业农村部动物病毒学重点实验室浙江杭州310058

载脂蛋白A-Ⅰ(apolipoprotein A-Ⅰ,Apo A-Ⅰ)在动脉粥样硬化、病毒感染、脂质代谢等方面发挥重要的调控作用。目前关于鸡载脂蛋白A-Ⅰ(chicken Apo A-Ⅰ,chApo A-Ⅰ)的研究较少,对其生物学功能尚不清楚。本研究在对chApo A-Ⅰ进行生物... 详细信息

载脂蛋白A-Ⅰ(apolipoprotein A-Ⅰ,Apo A-Ⅰ)在动脉粥样硬化、病毒感染、脂质代谢等方面发挥重要的调控作用。目前关于鸡载脂蛋白A-Ⅰ(chicken Apo A-Ⅰ,chApo A-Ⅰ)的研究较少,对其生物学功能尚不清楚。本研究在对chApo A-Ⅰ进行生物信息学分析的基础上,通过p ET-28a原核表达系统对chApo A-Ⅰ的重组蛋白进行表达和纯化。利用纯化后的重组蛋白免疫小鼠,制备鼠多克隆抗血清(多抗血清),通过酶联免疫吸附测定(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)检测其效价,并通过蛋白质印迹法(Western blot,WB)、间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)鉴定其反应性,随后利用多抗血清对chApo A-Ⅰ进行亚细胞定位分析。生物信息学分析显示,chApo A-Ⅰ蛋白在第1—18位氨基酸处含有信号肽,由N端的连续α螺旋构成。氨基酸序列同源性分析显示,chApo A-Ⅰ蛋白与火鸡的同源性最高,与鱼类的同源性最低。利用成功表达和纯化的重组蛋白His-chApo A-Ⅰ制备多抗血清,其ELISA效价达1×10^(5)以上,与真核表达的chApo A-Ⅰ蛋白有WB和IFA反应性,能识别鸡血清中的Apo A-Ⅰ蛋白,而与鼠、兔、牛、猪血清中的Apo A-Ⅰ蛋白无交叉反应性。利用该多克隆抗体对全长片段chApo A-Ⅰ-FL和不含信号肽的片段chApo A-Ⅰ-NS进行亚细胞定位分析,经共聚焦显微镜观察发现,chApo A-Ⅰ-FL蛋白大多分布在细胞膜附近,而chApo A-Ⅰ-NS蛋白则定位于细胞胞浆中,且多数呈弥散分布。chApo A-Ⅰ蛋白的特异性多克隆抗体和亚细胞定位结果为进一步开展Apo A-Ⅰ的生物学功能研究奠定了基础。

关键词：鸡载脂蛋白A-Ⅰ 原核表达多克隆抗体亚细胞定位

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伪狂犬病病毒编码的内膜蛋白生物学功能研究进展

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畜牧兽医学报 2024年第3期55卷 957-970页

作者：李艺璇牛静轶李港万超方仁东叶超西南大学动物医学院动物健康与动物性食品安全国际合作联合实验室重庆400715

伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)属于甲型疱疹病毒亚科,能够感染宿主神经系统并在神经元中建立潜伏感染,是威胁全球养猪业的重要病原体。与其他甲型疱疹病毒类似,PRV的病毒粒子存在一层富含蛋白质的内膜层,它通过将含有DNA的核... 详细信息

伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)属于甲型疱疹病毒亚科,能够感染宿主神经系统并在神经元中建立潜伏感染,是威胁全球养猪业的重要病原体。与其他甲型疱疹病毒类似,PRV的病毒粒子存在一层富含蛋白质的内膜层,它通过将含有DNA的核衣壳与布满糖蛋白的囊膜层衔接起来构成病毒粒子的完整结构。研究表明,在PRV的感染周期中,内膜蛋白可以通过单独作用或与其他蛋白相互作用的方式,在维持病毒形态结构的稳定、促进病毒的复制和出核、参与病毒在细胞质中的二次包膜、以及对抗宿主免疫系统等方面发挥重要生物学功能。因此本文重点讨论了近年来PRV内膜蛋白生物学功能的相关研究进展,以期为伪狂犬病病毒的病原学研究以及抗病毒研究提供重要参考。

关键词：伪狂犬病病毒内膜蛋白生物学功能

副猪革拉瑟菌影递送猪圆环病毒2型DNA二联疫苗的制备及小鼠免疫效果评价

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畜牧兽医学报 2024年第3期55卷 1179-1191页

作者：王康刘格言王宇杨振唐欣巍曹三杰黄小波颜其贵伍锐赵勤杜森焱文心田文翼平四川农业大学动物医学院猪病研究中心成都611130

本研究旨在研制猪圆环病毒2型(PCV2)-副猪革拉瑟菌(GPS)二联菌影疫苗,并评价其在小鼠上的免疫保护效果。选择GPS 5型菌株SH0165作为疫苗株,利用氢氧化钠最低抑菌浓度法将其制备成菌影,再将PCV2的ORF2基因克隆至pEGFP-N1真核表达质粒,将... 详细信息

本研究旨在研制猪圆环病毒2型(PCV2)-副猪革拉瑟菌(GPS)二联菌影疫苗,并评价其在小鼠上的免疫保护效果。选择GPS 5型菌株SH0165作为疫苗株,利用氢氧化钠最低抑菌浓度法将其制备成菌影,再将PCV2的ORF2基因克隆至pEGFP-N1真核表达质粒,将GPS菌影作为PCV2 DNA疫苗的载体,构建PCV2-GPS二联菌影疫苗,设计了商品化疫苗组、PCV2-GPS二联菌影疫苗组、菌影组、质粒组、PBS组、空白组,对4周龄BALB/c小鼠进行免疫,测定免疫后PCV2和GPS的IgG抗体效价、PCV2中和抗体、脏器中PCV2病毒载量、血清杀菌率、GPS攻毒保护率以及血清中细胞因子(IFN-γ、IL-12)水平。结果显示:二联菌影疫苗组小鼠血清中PCV2和GPS的IgG抗体水平显著增高,PCV2中和抗体滴度提高,PCV2攻毒后的小鼠淋巴结和肺脏中病毒载量下降,血清杀菌率显著提高,GPS攻毒后免疫保护率达70%(7/10),小鼠血清中IFN-γ含量显著上调。综上表明,PCV2-GPS二联菌影疫苗显著激活了小鼠对PCV2和GPS的体液免疫反应和细胞免疫反应,且能够抑制PCV2在小鼠体内的增殖,对感染GPS的小鼠达到较好的保护效果,为新型安全高效的PCV2、GPS联合疫苗的研制提供了生物材料和实验数据。

关键词：猪圆环病毒2型 ORF2基因副猪革拉瑟菌菌影小鼠免疫保护