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CD8+T淋巴细胞在非酒精性脂肪性肝炎中的作用

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临床肝胆病杂志 2024年第10期40卷 2087-2091页

作者：赵一鸣李开楊杨梅赵琦贵州中医药大学第二临床医学院贵阳550002 贵州中医药大学第二附属医院检验科贵阳550001 贵州中医药大学第二附属医院消化内科贵阳550001

非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是一种与代谢综合征密切相关的肝脏疾病,其发病机制包括胰岛素抵抗、脂质代谢紊乱、炎症反应等方面。本文简述了CD8+T淋巴细胞通过Fas-Fas配体(FasL)信号通路、释放穿孔素和颗粒酶以及分泌肿瘤坏死因子(TNF)α... 详细信息

非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是一种与代谢综合征密切相关的肝脏疾病,其发病机制包括胰岛素抵抗、脂质代谢紊乱、炎症反应等方面。本文简述了CD8+T淋巴细胞通过Fas-Fas配体(FasL)信号通路、释放穿孔素和颗粒酶以及分泌肿瘤坏死因子(TNF)α等细胞因子三种途径发挥细胞毒性作用特异性杀伤病毒及肿瘤靶细胞参与免疫调节;同时总结了CD8+T淋巴细胞促进巨噬细胞招募且与自然杀伤T淋巴细胞协同参与脂肪组织炎症发展,并通过自身攻击及表观遗传学机制导致肝损伤,促进NASH发病。由此得知CD8+T淋巴细胞可能成为NASH新的治疗靶点,未来继续深入研究CD8+T淋巴细胞在NASH中影响发病进程的具体机制有利于进一步指导临床治疗。

关键词：非酒精性脂肪性肝病 CD8阳性T淋巴细胞脂肪组织炎症表观基因组学

乳岩内消霜通过调控Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路促进乳腺癌前病变细胞铁死亡的机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：张昊天邱叶贝苏燃颜显欣马民暨南大学中医学院暨南大学附属第一医院

目的：探讨乳岩内消霜（Ruyanneixiao Cream，RUc）诱导乳腺癌前病变（Breast premalignant lesion，BPL）细胞铁死亡的作用机制，丰富乳岩内消霜治疗乳腺癌前病变的理论基础。方法：通过细胞增殖与活性检测法（CCK-8）实验、克隆形成... 详细信息

目的：探讨乳岩内消霜（Ruyanneixiao Cream，RUc）诱导乳腺癌前病变（Breast premalignant lesion，BPL）细胞铁死亡的作用机制，丰富乳岩内消霜治疗乳腺癌前病变的理论基础。方法：通过细胞增殖与活性检测法（CCK-8）实验、克隆形成实验检测1%、2%和4%浓度乳岩内消霜透皮液（Ruyanneixiao Cream transdermal solution，RUt）对细胞增殖的抑制情况；使用DCFH-DA探针对活性氧（Reactive oxygen species，ROS）进行检测，使用相应试剂盒检测细胞内亚铁离子(Fe2+)、谷胱甘肽（Glutathione，GSH）和丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量；采用脂质过氧化荧光探针C11-BODIPY581/591检测脂质过氧化；通过蛋白免疫印迹法（Western blot）检测核因子E2相关因子2（Nuclear factor E2-related factor 2，Nrf2）、溶质载体家族7成员11（Solute carrier family 7 member 11，SLC7A11）和谷胱甘肽过氧化物酶4（Glutathione peroxidase 4，GPX4）蛋白的表达情况。使用二甲基苯并蒽(2，2'-bis（hydroxymethyl）butyric acid，DMBA)联合雌孕激素构建BPL大鼠模型，同时使用RUc外用治疗，第十二个周期后安乐死大鼠，通过苏木素-伊红（Hematoxylin-eosin staining，HE）染色观察乳腺组织病理学改变，使用相应试剂盒检测乳腺组织Fe2+和MDA含量；通过免疫组化法（Immunohistochemistry，IHC）和蛋白免疫印迹法检测BPL大鼠乳腺组织Nrf2、SLC7A11和GPX4蛋白的表达情况。结果：与基质组比较，1%、2%和4% RUt组MCF-10AT细胞活性显著降低（P＜0.05），具有浓度依赖性，24小时半数抑制浓度(IC50)为2.23%；与4% RUt组比较，RUt+Fer-1组细胞活性显著提高（P＜0.05）。与基质组比较，1%、2%和4% RUt组MCF-10AT细胞克隆形成率显著降低（P＜0.05）；与4% RUt组比较，RUt+Fer-1组细胞克隆形成率显著增高（P＜0.05）。与基质组比较，1%、2%和4% RUt组细胞内ROS和Fe2+水平显著增高（P＜0.05），GSH水平显著降低（P＜0.05），MDA和脂质过氧化水平显著增高（P＜0.05）；与4% RUt组比较，RUt+Fer-1组细胞内ROS和Fe2+水平显著降低（P＜0.05），GSH水平显著增高（P＜0.05），MDA和脂质过氧化水平显著降低（P＜0.05）。与基质组比较，1%、2%和4% RUt组MCF-10AT细胞内Nrf2、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）；与4% RUt组比较，RUt+Fer-1组细胞内Nrf2、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平显著增高（P＜0.05）。在体内实验中，与基质组比较，RUc组BPL大鼠乳腺组织病理状态有效改善，乳腺导管扩张程度低且导管排列有序，未见浸润性癌的病理形态。与基质组比较，RUc组大鼠乳腺组织中Fe2+和MDA水平显著增高（P＜0.05）。与基质组比较，RUc组大鼠乳腺组织中Nrf2、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）。结论：乳岩内消霜可能通过抑制Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路，提高Fe2+积累并通过脂质过氧化反应诱导乳腺癌前病变细胞发生铁死亡。

关键词：乳腺癌前病变乳岩内消霜铁死亡脂质过氧化核因子E2相关因子2(Nrf2)

基于脑肠轴探讨益气活血化浊解毒方对脑缺血再灌注损伤大鼠的影响

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中国免疫学杂志 2024年第8期40卷 1709-1717页

作者：孙亚萍石瑞孙玲玲谢占维崔怡娴田军彪河北中医学院研究生学院石家庄050200 河北中医学院第一附属医院河北省中医院石家庄050011

目的:基于脑肠轴探讨益气活血化浊解毒方(YHHJP)对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑组织炎症因子、脑和结肠组织紧密连接、肠道菌群及其代谢产物的影响。方法:50只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(MCAO)、YHHJP低、中、高... 详细信息

目的:基于脑肠轴探讨益气活血化浊解毒方(YHHJP)对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑组织炎症因子、脑和结肠组织紧密连接、肠道菌群及其代谢产物的影响。方法:50只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(MCAO)、YHHJP低、中、高剂量组(TCM-L/TCM-M/TCM-H)。采用Zea Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型,治疗3 d后观察神经功能缺损评分,TTC染色计算脑梗死面积,尼氏染色观察脑组织病理形态改变,HE染色观察脑和结肠组织病理形态改变,ELISA检测脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α和血清LPS含量,生物化学法检测血清D-乳酸(D-LA)含量,实时荧光定量PCR检测脑组织ZO-1、Claudin-5和结肠组织ZO-1、Claudin-1基因表达,16S rDNA高通量测序检测肠道菌群。结果:与假手术组相比,模型组大鼠脑和结肠组织病理损伤严重,肠道菌群微生态结构存在明显差异,神经功能损伤加重,脑梗死面积增加,脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α和血清LPS、D-LA含量升高,脑组织ZO-1、Claudin-5及结肠组织ZO-1、Claudin-1基因表达降低(P<0.05)。与模型组相比,YHHJP低、中、高剂量组大鼠脑组织和结肠组织病理损伤减轻,肠道菌群微生态紊乱得到改善,神经功能损伤减轻,脑梗死面积明显缩小,脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著降低,结肠组织ZO-1、Claudin-1基因表达显著升高(P<0.05);YHHJP中、高剂量组大鼠血清LPS、D-LA含量明显降低,脑组织ZO-1、Claudin-5基因表达显著升高(P<0.05)。结论:YHHJP可改善CIRI,其机制可能与调节肠道菌群多样性,抑制肠道细菌代谢产物LPS、D-LA释放,增加紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5、Claudin-1基因表达,下调炎症因子分泌有关。

关键词：脑肠轴益气活血化浊解毒方脑缺血再灌注损伤炎症因子肠道菌群代谢产物紧密连接

生物信息学和机器学习策略识别骨关节炎炎性衰老生物标志物与临床验证

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四川大学学报（医学版） 2024年第2期55卷 279-289页

作者：周巧刘健朱艳汪元王桂珍齐亚军胡月迪安徽中医药大学第二附属医院老年病一科合肥230061 安徽中医药大学第一临床医学院合肥230012 安徽中医药大学第一附属医院风湿病科合肥230031

目的本研究旨在识别骨关节炎(osteoarthritis, OA)中炎性衰老生物标志物。方法 GEO(Gene Expression Omnibus)数据库获得年轻OA和老年OA微阵列基因谱,人类衰老基因组资源数据库(Human Aging Genome Resource,HAGR)获得衰老相关基因(agi... 详细信息

目的本研究旨在识别骨关节炎(osteoarthritis, OA)中炎性衰老生物标志物。方法 GEO(Gene Expression Omnibus)数据库获得年轻OA和老年OA微阵列基因谱,人类衰老基因组资源数据库(Human Aging Genome Resource,HAGR)获得衰老相关基因(aging-related genes, ARGs)。筛选获得年轻OA与老年OA的差异基因,再与ARGs取交集得到OA衰老相关基因。富集分析揭示OA衰老相关标志物的潜在机制。3种机器学习方法识别OA核心衰老标志物,受试者工作特征(receiver operating characteristic curve, ROC)曲线评估其诊断OA炎性衰老的能力。收集临床OA患者外周血单核细胞验证衰老相关分泌表型(senescence-associated secretory phenotype, SASP)因子和衰老标志物的表达。结果总共获得45个衰老相关标志物,主要参与对细胞衰老、细胞周期、炎症反应等的调控。3种机器方法筛选得出5个核心衰老标志物(FOXO3、MCL1、SIRT3、STAG1和S100A13)。纳入20例正常组,40例OA患者,包括年轻组和老年组各20例。与年轻组相比,老年组OA中C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、白细胞介素(interleukin, IL)-6、IL-1β上升,IL-4水平下降(P<0.01);FOXO3、MCL1、SIRT3 mRNA表达下降,STAG1和S100A13 mRNA表达上升(P<0.01)。Pearson相关性分析表明选定的标志物与红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate, ESR)、IL-1β、IL-4、CRP、IL-6指标相关。5个核心衰老基因ROC曲线下面积均大于0.8,列线图预测模型中校正曲线的C-index为0.755,模型校准能力较好。结论 FOXO3、MCL1、SIRT3、STAG1和S100A13可作为OA炎性衰老的新型诊断分子标志物和潜在治疗靶点。

关键词：骨关节炎炎性衰老衰老相关分泌表型机器学习生物标志物

缩泉益肾方对高糖诱导的小鼠肾脏足细胞损伤的影响

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中国老年学杂志 2024年第17期 4155-4159页

作者：黄明月朱叶谢毅强钟军华邱龙尹德辉海南医学院中医学院海南医学院第一附属医院

目的观察缩泉益肾方对高糖诱导的小鼠肾脏足细胞损伤的影响。方法体外培养小鼠足细胞，分为正常(N)组、高糖(HG)组、含5%、10%、20%缩泉益肾方含药血清低/中/高剂量高糖(SQYSF-L、M、H)组、含4.45μg/ml卡格列净高糖(Cana)组，CCK8法... 详细信息

目的观察缩泉益肾方对高糖诱导的小鼠肾脏足细胞损伤的影响。方法体外培养小鼠足细胞，分为正常(N)组、高糖(HG)组、含5%、10%、20%缩泉益肾方含药血清低/中/高剂量高糖(SQYSF-L、M、H)组、含4.45μg/ml卡格列净高糖(Cana)组，CCK8法检测细胞活力，细胞划痕实验检测细胞迁移能力，流式细胞术分析细胞凋亡，实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western印迹检测各组细胞骨架相关蛋白分子结蛋白(Desmin)、α-辅动肌蛋白(actinin)-4表达。结果体外实验结果显示，与SQYSF-L、SQYSF-H组比较，SQYSF-M组细胞存活率明显升高(P骨架相关蛋白分子Desmin、α-actinin-4的异常表达，稳定细胞骨架，减轻足细胞损伤。

关键词：糖尿病肾脏疾病缩泉益肾方骨架相关蛋白分子结蛋白(Desmin) α-辅动肌蛋白(actinin)-4

中药生发酊联合梅花针治疗雄激素性秃发的疗效观察

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时珍国医国药 2024年第2期35卷 388-391页

作者：李玉珠郭文申桦桂建朝刘雨杭靳秋月云璐李伟业刘湘河北中医学院第一附属医院河北石家庄050011

目的探讨中药生发酊联合梅花针治疗雄激素性秃发(AGA)的临床疗效及安全性。方法将80例AGA患者按照随机数字表法分为观察组(40例,脱落3例)与对照组(40例,脱落5例)。观察组给予中药生发酊外用,对照组给予米诺地尔搽剂外用,两组患者均联合... 详细信息

目的探讨中药生发酊联合梅花针治疗雄激素性秃发(AGA)的临床疗效及安全性。方法将80例AGA患者按照随机数字表法分为观察组(40例,脱落3例)与对照组(40例,脱落5例)。观察组给予中药生发酊外用,对照组给予米诺地尔搽剂外用,两组患者均联合梅花针叩刺,连续治疗24周。比较治疗前后患者固定脱发观察区在毛发镜下的客观指标(毛发密度、毛发直径)以及临床症状评分(头皮油腻度、瘙痒、脱屑)、汉密尔顿抑郁量表(Hamilton DePression Scale,HAMD)评分、汉密尔顿焦虑量表(Hamilton Anxiety Scale,HAMA)评分,探讨中药生发酊对AGA的治疗效果;并通过比较两组不良反应发生率,评价中药生发酊治疗AGA的安全性。结果治疗24周后,观察组和对照组总有效率分别为86.49%和71.43%,观察组疗效优于对照组(P<0.05);经治疗后观察组毛发密度改善程度高于对照组(P<0.05),临床症状评分、HAMA评分、HAMD评分、不良反应率均低于对照组(P<0.05)。结论中药生发酊联合梅花针治疗AGA临床疗效显著且使用便捷,未发生明显不良反应。

关键词：雄激素性秃发中药生发酊梅花针

滑膜液中PI3K/AKT/mTOR信号轴介导巨噬细胞极化对膝骨关节炎促炎反应的作用

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安徽医科大学学报 2024年第3期59卷 377-383页

作者：蒋总郭腾逊姚晓玲兰维娅唐芳马武开刘佳贵州中医药大学第二临床医学院贵阳550002 贵州中医药大学第二附属医院风湿免疫科贵阳550003

目的已知PI3K/AKT/mTOR信号通路与膝骨关节炎(KOA)的进展有关,本研究旨在探讨PI3K/AKT/mTOR信号轴介导的巨噬细胞极化诱导是否是KOA进展的原因。方法收集KOA KL-Ⅱ与KL-Ⅲ级患者与正常人的滑膜液,检测滑膜液中M1巨噬细胞(CD80、CD86)与M... 详细信息

目的已知PI3K/AKT/mTOR信号通路与膝骨关节炎(KOA)的进展有关,本研究旨在探讨PI3K/AKT/mTOR信号轴介导的巨噬细胞极化诱导是否是KOA进展的原因。方法收集KOA KL-Ⅱ与KL-Ⅲ级患者与正常人的滑膜液,检测滑膜液中M1巨噬细胞(CD80、CD86)与M2巨噬细胞(CD163、CD206)百分比(M1/M2比值),评估巨噬细胞极化细胞因子白细胞介素(IL)-1、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、转化生长因子(TGF)-β在KOA滑膜液中的表达,并对KOA滑膜液中PI3K/AKT/mTOR信号轴关键分子PI3K、AKT3、mTORC1和诱导性一氧化氮合酶(iONS)进行检测分析。结果与正常人的滑膜液相比,KOA患者中M1型巨噬细胞(CD80、CD86)百分比增加(P<0.01),M1/M2比值升高(P<0.001);KOA组滑膜液中IL-1、IL-6、TNF-α表达也高于对照组(P<0.01),KOA组IL-10、TGF-β表达明显减少(P<0.01);KOA组滑膜液中PI3K/AKT/mTOR信号通路中关键蛋白PI3K、AKT3、mTORC1及下游炎症因子(iONS)高于对照组(P<0.01)。结论在KOA滑膜液中,M1型巨噬细胞极化占据主要地位,M1巨噬细胞极化介导的炎症反应可能是滑膜炎产生的原因,同时PI3K/AKT/mTOR信号通路可能介导M1型巨噬细胞极化参与KOA炎症反应。

关键词：膝骨关节炎巨噬细胞极化 M1/M2 PI3K/AKT/mTOR信号通路滑膜液炎症

葛花解酒涤脂汤对酒精性肝病小鼠肝脏组织能量代谢的影响

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北京中医药大学学报 2024年第5期47卷 662-671页

作者：刘蕊易旭吴雪莉王硕石何典城游绍伟贵州中医药大学第二附属医院临床医学实验室贵阳550002 贵州中医药大学第二附属医院消化内科

目的检测酒精性肝病(ALD)小鼠肝脏组织能量代谢相关指标水平,并探讨葛花解酒涤脂汤的干预作用。方法 40只雄性C57BL/6J小鼠任意分为正常对照组、模型组、葛花解酒涤脂汤高剂量组(4.94 g/kg)、葛花解酒涤脂汤低剂量组(2.47 g/kg)和白藜... 详细信息

目的检测酒精性肝病(ALD)小鼠肝脏组织能量代谢相关指标水平,并探讨葛花解酒涤脂汤的干预作用。方法 40只雄性C57BL/6J小鼠任意分为正常对照组、模型组、葛花解酒涤脂汤高剂量组(4.94 g/kg)、葛花解酒涤脂汤低剂量组(2.47 g/kg)和白藜芦醇组(0.40 g/kg),每组8只。除正常对照组外,其他各组小鼠先予Lieber-DeCarli对照液体饲料喂养5 d,随后予Lieber-DeCarli酒精液体饲料喂养10 d,第16天灌胃31.5%乙醇溶液1次,以制备ALD小鼠模型。造模结束后第2天起,各干预组灌胃相应药物,每日1次,连续9 d。苏木素-伊红染色和油红O染色观察肝脏组织脂肪变性情况;分光光度法检测肝脏组织Na+K+-腺苷三磷酸(ATP)酶、Ca^(2+)Mg^(2+)-ATP酶活性,琥珀酸脱氢酶(SDH)、肝糖原含量;反相高效液相色谱法检测肝脏组织ATP、腺苷二磷酸(ADP)和腺苷一磷酸(AMP)含量,以及AMP/ATP值、总腺苷酸池(TAN)含量、能荷值(EC);实时荧光PCR法检测肝脏组织沉默信息调节因子1(SIRT1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)α2 mRNA表达;蛋白质印迹法检测肝脏组织SIRT1、AMPKα2、AMPKβ1蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组小鼠肝脏组织脂肪变性病变明显,肝脏组织Ca^(2+)Mg^(2+)-ATP酶活性、SDH含量降低,肝糖原含量升高,EC、AMP/ATP值降低,ATP、ADP、AMP和TAN含量升高,SIRT1、AMPKα2 mRNA表达降低,AMPKβ1蛋白表达升高(均P<0.05)。与模型组比较,葛花解酒涤脂汤高、低剂量组肝脏组织脂肪变性明显减轻,肝脏组织Na+K+-ATP酶活性降低,EC及SIRT1、AMPKα2 mRNA表达升高(均P<0.05);葛花解酒涤脂汤低剂量组Ca^(2+)Mg^(2+)-ATP酶活性、SDH及ATP含量升高(均P<0.05);葛花解酒涤脂汤高剂量组AMP/ATP值升高(P<0.05);葛花解酒涤脂汤高、低剂量组和白藜芦醇组肝脏组织SIRT1蛋白表达升高(均P<0.05);葛花解酒涤脂汤低剂量组和白藜芦醇组AMPKα2蛋白表达升高(均P<0.05)。与葛花解酒涤脂汤高剂量组比较,葛花解酒涤脂汤低剂量组、白藜芦醇组肝脏组织ATP、TAN含量和EC升高,AMP/ATP值降低(均P<0.05);葛花解酒涤脂汤低剂量组AMPKα2 mRNA表达降低(P<0.05);白藜芦醇组SIRT1、AMPKα2蛋白表达升高(均P<0.05)。与葛花解酒涤脂汤低剂量组比较,白藜芦醇组AMPKβ1蛋白表达降低(P<0.05)。结论慢性酒精摄入引起的能量代谢改变可能与小鼠ALD发生有关,葛花解酒涤脂汤干预可以改善ALD小鼠肝脏能量代谢异常。

关键词：酒精性肝病葛花解酒涤脂汤能量代谢沉默信息调节因子1 腺苷酸活化蛋白激酶小鼠

乌头酊热敷联合中频电疗法对慢性非特异性腰痛患者的效果研究

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实用临床医药杂志 2024年第11期28卷 90-93,98页

作者：梁渤许奎军刘红敏朱小静河北中医学院第二附属医院骨伤一科河北保定073000 河北中医学院第二附属医院治未病科河北保定073000 河北中医学院第二附属医院药剂科河北保定073000

目的探讨乌头酊热敷联合中频电疗法对慢性非特异性腰痛患者腰椎功能、腰肌耐力及炎症因子的影响。方法将120例慢性非特异性腰痛患者随机分为2组,每组60例。对照组采用中频电疗法进行治疗,研究组在对照组基础上联合使用乌头酊热敷治疗。... 详细信息

目的探讨乌头酊热敷联合中频电疗法对慢性非特异性腰痛患者腰椎功能、腰肌耐力及炎症因子的影响。方法将120例慢性非特异性腰痛患者随机分为2组,每组60例。对照组采用中频电疗法进行治疗,研究组在对照组基础上联合使用乌头酊热敷治疗。比较2组患者症状改善情况以及治疗后腰椎功能、腰肌耐力和血清炎性因子水平。结果研究组治疗总有效率为96.67%,高于对照组的83.33%,差异有统计学意义(P骨科学会(JOA)评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2组患者治疗后腰肌耐力测试时间均延长,且研究组患者腰肌耐力测试时间长于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组治疗后血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组不良反应总发生率为30.00%(18/60),研究组为23.33%(14/60),差异无统计学意义(χ^(2)=0.682,P=0.409)。结论乌头酊热敷联合中频电疗法对慢性非特异性腰痛患者疗效显著,能够显著减轻患者腰部疼痛症状,改善腰椎功能,降低炎性因子水平。

关键词：乌头酊热敷中频电疗法慢性非特异性腰痛腰椎功能腰肌耐力