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基于衍生化3-氨基-2-恶唑烷酮的夹心酶联免疫分析

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食品科学 2024年第6期45卷 271-276页

作者：张世伟吴会玲周迎春王炳志杨星星杜业刚汤璐冯荣虎郭继平深圳市计量质量检测研究院广东深圳518000 深圳市易瑞生物技术股份有限公司广东深圳518000

建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗... 详细信息

建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗AOZ单克隆抗体并以辣根过氧化物酶标记的亲和素或抗生物素抗体作为第二结合物可实现AOZ的夹心酶联免疫吸附检测(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)。从实际应用的角度,得到双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下两个表位的极限距离,分别为12Å和13Å,理想距离分别为16Å和17Å。在双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下的检出限分别达到1.8 pg/mL和0.8 pg/mL(以AOZ质量浓度计),相对于竞争ELISA,其灵敏度最高提高了25倍。平均回收率为73%~85%,平均相对标准偏差为9.0%。

关键词： 3-氨基-2-恶唑烷酮夹心酶联免疫分析表位间隔距离辣根过氧化物酶标记亲和素

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复合酵素的贮藏稳定性及货架期研究

食品与发酵工业 2024年第1期50卷 59-66页

作者：刘恒范柳萍张涛潘牧江南大学食品学院江苏无锡214122 贵州省农业科学院生物技术研究所贵州贵阳550006

该研究采用克鲁弗毕赤酵母菌(Pichia kluyveri)和植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)共发酵制备复合酵素,旨在研究其产品经巴氏杀菌处理后的贮藏稳定性,并建立一个可靠的货架期预测模型。该实验将杀菌后的复合酵素分别放置在4... 详细信息

该研究采用克鲁弗毕赤酵母菌(Pichia kluyveri)和植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)共发酵制备复合酵素,旨在研究其产品经巴氏杀菌处理后的贮藏稳定性,并建立一个可靠的货架期预测模型。该实验将杀菌后的复合酵素分别放置在4、25、37℃恒温贮藏,测定了复合酵素的感官品质、理化性质和活性成分在贮藏期间的变化。此外,根据Arrhenius方程和零级动力学反应建立了该复合酵素的货架期模型,通过此模型对复合酵素的货架期进行预测并通过实验进行验证。实验结果表明,4℃贮藏的复合酵素pH和总酸变化幅度最小,表现出最高的稳定性,且贮藏56 d后pH值为3.41。抗坏血酸在贮藏过程中分别降低了33.10%、52.11%和77.93%,超氧化物歧化酶活力也呈现不同程度的下降趋势,且抗坏血酸对其具有一定的保护作用。色差ΔE和感官评分在4℃劣变速度最慢。根据建立的货架期模型,预测该复合酵素在常温下的货架期为184 d。在不同温度下(10、20、25℃)对该货架期模型进行验证,相对误差均在5%以下。因此,此货架期模型较为可靠。

关键词：复合酵素贮藏感官品质理化性质活性成分货架期模型

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酸汤中高产酸细菌的分离筛选及其特性研究

食品安全质量检测学报 2024年第18期 271-280页

作者：朱霞杨第芹潘宇叶雨龙艳丽杨熟英贵州省生物技术研究开发基地有限公司

目的对酸汤中分离筛选的高产酸细菌进行鉴定,并研究其生物学特性。方法从白酸汤和红酸汤中分离出的细菌,通过16S r DNA基因序列分析进行分子生物学鉴定,并研究其产酸特性、生理生化特性、耐酸碱和耐盐能力,同时用牛津杯法以抑菌圈为指... 详细信息

目的对酸汤中分离筛选的高产酸细菌进行鉴定,并研究其生物学特性。方法从白酸汤和红酸汤中分离出的细菌,通过16S r DNA基因序列分析进行分子生物学鉴定,并研究其产酸特性、生理生化特性、耐酸碱和耐盐能力,同时用牛津杯法以抑菌圈为指标,探究其抑制致病菌性能。结果筛选出4株高产酸乳酸菌和1株产酸醋杆菌,其中RS-5为甘草乳杆菌(Liquorilactobacillus nagelii),ST15-2和RS-8为布氏乳杆菌(Lentilactobacillus buchneri),ST20为发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum),ST19为产液葡糖酸醋杆菌(Gluconacetobacter liquefaciens);RS-8、ST15-2、ST20和RS-5具有较高的产酸能力,产总酸均超过(103.54±6.19) g/L,RS-8产总酸量达到(159.12±12.24) g/L,经高效液相色谱法测定ST20、RS-5和ST15-2产乳酸较高,分别是10.21、9.76和7.11 mg/m L,RS-8和RS-5产柠檬酸较高,分别为4.87 mg/m L和3.93 mg/m L;RS-8、ST15-2和ST20具有较好的耐酸性、耐碱性和耐盐性;RS-5和ST20对大肠杆菌有显著抑制作用,ST15-2对金黄色葡萄球菌有显著抑制作用。结论 RS-8、ST15-2、ST20和RS-5菌株高产酸且具有较好的耐酸碱和耐盐性能,有抑致病菌作用,具有一定工业化应用前景。

关键词：酸汤产酸细菌分离筛选抑菌特性

贵州不同生境半夏内生和根际菌群多样性及其与环境因子的相关性

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福建农业学报 2024年第07期 826-838页

作者：陈晓芳胡天骥张翔宇任锡毅柳敏毕节医学高等专科学校贵州中检联生物科技有限公司毕节市中药研究所贵州省生物技术研究所

【目的】探究贵州不同生境半夏内生和根际土壤微生物群落多样性、物种组成、物种网络关系和功能菌群预测，并分析其与环境因子的相关性，为半夏菌群资源开发利用提供理论依据。【方法】对贵州野生半夏、规模化种植半夏和套种半夏的内生... 详细信息

【目的】探究贵州不同生境半夏内生和根际土壤微生物群落多样性、物种组成、物种网络关系和功能菌群预测，并分析其与环境因子的相关性，为半夏菌群资源开发利用提供理论依据。【方法】对贵州野生半夏、规模化种植半夏和套种半夏的内生菌群、根际土壤菌群进行高通量测序，检测土壤理化因子和酶活性，并进行生物信息学分析。【结果】人工种植和野生半夏土壤环境因子差异性明显，且栽培方式对土壤理化性质与酶活有显著影响，人工种植样地的有机质含量高且土壤酸性强，野生样地酶活性偏高；半夏内生细菌优势菌属包括根瘤菌属（Allorhizobium-Neorhizobium-Pararhizobium-Rhizobium）、假单胞菌属（Pseudomonas）、芽孢杆菌属（Bacillus）、慢生根瘤菌属（Bradyrhizobium）等，半夏内生真菌优势菌属包括弯孢菌属（Campylospora）、新赤壳属（Neocosmospora）、丝核菌属（Rhizoctonia）、镰刀菌属（Fusarium）、 Dactylonectria、炭角菌目（Xylariales）未分类属等，半夏根际优势菌属种类更丰富，各优势菌属在不同样本以不同丰度聚集且具有规律性，受生长环境和种植方式影响；细菌优势菌群中有10属、真菌优势菌群中有13属，与土壤理化性质或酶活性呈显著相关性，内生菌群对环境因子更为敏感，半夏内生菌群既互利又拮抗，根际土壤菌群网络关系相对稳定；半夏内生菌群优势菌属中除了未明确分类、未知菌属外，有益菌属丰度占比高。【结论】可通过人为调节土壤pH、施入菌肥等方式改良土壤微生态环境；半夏内生菌群包括根瘤菌、假单胞菌、芽孢杆菌、农研丝杆菌、木霉菌和绿僵菌等可开发利用，助力半夏栽培，促进半夏产业发展。

关键词：半夏内生菌土壤微生物环境因子

创业企业如何成功开展颠覆性创新?——生态系统合法性视角的案例研究

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科学学研究 2024年第10期 2216-2227页

作者：何郁冰叶凌峰王志玮林齐心福州大学经济与管理学院福州迈新生物技术开发有限公司

在创新生态系统情境下，生态系统合法性的获取及演化是创业企业成功开展颠覆性创新的有效机制。通过对迈新1993-2023年的纵向案例分析发现，创业企业通过生态系统合法性实现颠覆性创新的过程，实际上是创业企业围绕颠覆性的价值主张构... 详细信息

在创新生态系统情境下，生态系统合法性的获取及演化是创业企业成功开展颠覆性创新的有效机制。通过对迈新1993-2023年的纵向案例分析发现，创业企业通过生态系统合法性实现颠覆性创新的过程，实际上是创业企业围绕颠覆性的价值主张构建创新生态系统，并不断克服各种生态系统合法性障碍，逐步得到创新生态系统内外部行动者的理解和认可，最终实现对现有生态系统价值主张的颠覆或部分替代的过程。在此期间，生态系统合法性经历了“规范”“认知”和“价值”维度的演化，并依次通过“行为”“话语”和“意义”合法化策略获取相应的合法性。研究结论对于创业企业成功开展颠覆性创新具有重要见解。

关键词：创新生态系统颠覆性创新生态系统合法性创业企业

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自然发酵紫薯泥中融合魏斯氏菌的分离鉴定及安全性研究

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食品安全导刊 2024年第11期 140-146页

作者：林科运曾金兴杨熟英贵州省生物技术研究开发基地有限公司贵州贵阳550000

本研究以自然发酵的紫薯为菌株来源,使用特定培养基从中分离纯化出菌株ZS-1,结合菌落特征、个体形态特征以及分子生物学鉴定确定其为融合魏斯氏菌(Weissella confusa)。通过生长特性分析发现,ZS-1菌株具有稳定的生长状态与良好的产酸能... 详细信息

本研究以自然发酵的紫薯为菌株来源,使用特定培养基从中分离纯化出菌株ZS-1,结合菌落特征、个体形态特征以及分子生物学鉴定确定其为融合魏斯氏菌(Weissella confusa)。通过生长特性分析发现,ZS-1菌株具有稳定的生长状态与良好的产酸能力,该菌株对碳源的要求较低,能有效利用甘露醇、乳糖、麦芽糖和葡萄糖,生存空间大。通过吲哚实验、明胶液化实验、溶血性实验及药敏实验进行安全性分析,结果表明该菌株不具有产生溶胶酶以及分解色氨酸的能力,但存在溶血性,能引起β-溶血现象,不宜在食品领域中进一步应用。ZS-1菌株对多种抗生素表现出敏感性,包括红霉素、四环素、氯霉素、克林霉素、利福平、青霉素、氨苄西林和头孢曲松等,这些抗生素能够有效抑制该菌的生长和繁殖。关于融合魏斯氏菌在食品领域的安全性,目前的研究尚需进一步深化,本研究为未来对融合魏斯氏菌的深入研究与应用提供了宝贵的参考依据。

关键词：紫薯筛选乳酸菌融合魏斯氏菌安全性实验

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不同环境条件对黑水虻虫卵保种的影响

饲料工业 2024年

作者：黎金彩殷咏韬戴子奕朱剑锋王盼祁姣姣胡文锋李雪玲华南农业大学食品学院生物源生物技术(深圳)股份有限公司

文章旨在探究黑水虻（Black soldier fly）虫卵最佳保种条件，这将有利于实现黑水虻全年养殖，提高养殖效率和经济效应。通过测定和比较虫卵孵化率，分别探究不同卵龄、冷藏温度、垫料前处理、单一垫料、复合垫料和稻草秸秆成分等因素... 详细信息

文章旨在探究黑水虻（Black soldier fly）虫卵最佳保种条件，这将有利于实现黑水虻全年养殖，提高养殖效率和经济效应。通过测定和比较虫卵孵化率，分别探究不同卵龄、冷藏温度、垫料前处理、单一垫料、复合垫料和稻草秸秆成分等因素对黑水虻虫卵保种的影响。卵裂期、胚盘胚带形成期、原肠形成期和胚体分节期的虫卵不能直接冷藏，在整个冷藏阶段破壳期的虫卵孵化率显著高于其他卵龄的虫卵孵化率(P0.05)，在冷藏第8～10 d时，16 ℃的虫卵孵化率显著高于与4、8、12 ℃(P生长。由此可见，在16 ℃下，使用破壳期黑水虻虫卵与未经前处理的稻草秸秆混合，可有效改良黑水虻虫卵保存期短这一特性，达到保种目的。

关键词：黑水虻虫卵保种环境条件

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酸汤中产酸酵母的筛选及性能测定

食品安全导刊 2024年第21期 64-70页

作者：潘宇杨第芹朱霞叶雨杨熟英贵州省生物技术研究开发基地有限公司贵州贵阳550025

产酸酵母作为酸汤发酵过程中的优势菌株,是影响酸汤产品品质的关键因素。本文通过形态学、生理生化和分子生物学,对从酸汤样品中分离出的产酸菌株进行鉴定,并测定分析其产酸、耐酸和耐胆盐能力。结果表明,RS^(-1)4为盔状毕赤酵母(Pichia... 详细信息

产酸酵母作为酸汤发酵过程中的优势菌株,是影响酸汤产品品质的关键因素。本文通过形态学、生理生化和分子生物学,对从酸汤样品中分离出的产酸菌株进行鉴定,并测定分析其产酸、耐酸和耐胆盐能力。结果表明,RS^(-1)4为盔状毕赤酵母(Pichia galeiformis),CS^(-1)6和CS^(-1)9为膜醭毕赤酵母(Pichia membranaefaciens),45、RS^(-1)3、RS^(-1)5、CS-21和CS-22为满洲毕赤酵母(Pichia manshurica)。其中,菌株45的产酸能力最强,总酸含量达到41.47 g·L^(-1),且8株酵母菌均能在pH值为1.5和牛胆盐浓度为0.70%的条件下生长,具有较高的耐酸性能和耐牛胆盐性能。本研究通过对酸汤中产酸酵母的筛选及其性能测定,为开发酸汤纯种发酵菌株和提升酸汤发酵产品品质提供理论支撑。

关键词：酵母菌酸汤有机酸耐胆盐

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UPLC-HRMS法同时直接测定白酒中多种痕量呈香呈味物质及衍生物含量

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食品科学 2024年第6期45卷 164-174页

作者：杨军林尹艳艳尹延顺杨少娟田栋伟谢丹尤小龙吴成胡建锋张德芹贵州习酒股份有限公司贵州遵义564622

为建立一种快速、准确测定白酒中多种痕量呈香呈味物质及衍生物含量的定性定量方法,对白酒样品进行高速离心、过滤等简单前处理后,直接通过Hypersil Gold C_(18)(150 mm×2.1 mm,1.9μm)色谱柱进行待测物分离,再结合高分辨质谱仪实现白... 详细信息

为建立一种快速、准确测定白酒中多种痕量呈香呈味物质及衍生物含量的定性定量方法,对白酒样品进行高速离心、过滤等简单前处理后,直接通过Hypersil Gold C_(18)(150 mm×2.1 mm,1.9μm)色谱柱进行待测物分离,再结合高分辨质谱仪实现白酒中多种痕量呈香呈味物质及衍生物的定性定量分析。结果表明,该方法前处理过程无需除乙醇以及有机溶剂提取,且仅需16 min便可完成白酒中多组分含量分析;配制17种氨基酸、4种生物胺及11种难挥发性有机酸的混合标准品系列溶液,经线性拟合发现各待测组分的标准工作曲线线性关系良好(R~2>0.990),且各待测组分的检出限、定量限值相对较低,可满足实际白酒样品相关化合物的分析需求;同时,各待测组分的平均回收率为71.92%~117.45%,且相对标准偏差为0.46%~5.48%,该方法对白酒中多种痕量呈香呈味物质及衍生物具有良好的回收率、精密度及稳定性。因此,该方法具有操作简单、灵敏度高及重复性好等优点,对于解析白酒中其他非挥发性呈香呈味物质的种类及其含量具有借鉴意义。

关键词：呈香呈味物质同时直接测定白酒超高效液相色谱-高分辨质谱法