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大麻二酚对小鼠肝纤维化抗氧化作用

中国公共卫生 2022年第2期38卷 181-185页

作者：马润舒远辉谢娜周艳项一宁王豫萍贵州医科大学医学检验学院临床微生物学及免疫学教研室贵州医科大学附属医院临床检验中心微生物免疫检验科贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院病理科

目的探讨大麻二酚(CBD)对四氯化碳(CCL_(4))构建小鼠肝纤维化模型的抗氧化作用。方法C57BL/6J雄性小鼠随机分为5组,每组8只,依次为对照组,模型组,低、高剂量CBD组(4、8 mg/kg),秋水仙素组(0.2 mg/kg)。对照组小鼠腹腔注射花生油,剩余小... 详细信息

目的探讨大麻二酚(CBD)对四氯化碳(CCL_(4))构建小鼠肝纤维化模型的抗氧化作用。方法C57BL/6J雄性小鼠随机分为5组,每组8只,依次为对照组,模型组,低、高剂量CBD组(4、8 mg/kg),秋水仙素组(0.2 mg/kg)。对照组小鼠腹腔注射花生油,剩余小鼠按照5 mL/kg注射30%CCL_(4),每周2次,连续10周。CBD组和秋水仙素组在造模的同时每次注射相应剂量药物,对照组和模型组注射生理盐水。自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT);天狼星红染色检查肝组织胶原沉积情况;试剂盒检测肝组织氧化应激相关成分超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA);蛋白印迹(WB)检测肝组织还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚基gp91phox、核转录相关因子(Nrf2)表达情况。结果与模型组比较,低、高剂量CBD组和秋水仙素组肝指数[分别为(4.71±0.34)%、(4.68±0.20)%、(4.24±0.40)%]、血清ALT含量[分别为(79.38±14.79)、(87.13±9.40)、(77.88±3.76)U/L]明显降低(P<0.05),胶原沉积显著减少(P<0.05),肝组织SOD活力[分别为(259.90±36.05)、(223.13±37.49)、(246.39±53.49)U/mgprot]、GSH含量[分别为(63.07±16.71)、(100.38±22.44)、(96.39±19.40)nmol/mgprot]明显增高(P<0.05),而MDA含量[分别为(2.48±0.43)、(2.74±0.88)、(2.84±0.87)nmol/mgprot]显著降低(P<0.05),gp91蛋白表达降低(P<0.05),Nrf2蛋白表达增加(P<0.05)。结论CBD对CCL_(4)诱导的小鼠肝纤维化有一定的保护作用,其作用机制可能与调节gp91、Nrf2蛋白表达,减少自由基、抑制脂质过氧化相关。

关键词：大麻二酚四氯化碳肝纤维化氧化应激

重症肌无力患者治疗间期外周血记忆T细胞和滤泡T细胞及相关细胞因子水平变化的监测

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第3期38卷 257-262页

作者：马岚吴通前何菁菁沈雪余芳贵州医科大学医学检验学院临床微生物及免疫学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院临床研究中心贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院临床检验中心贵州贵阳550004

目的观察在重症肌无力(MG)治疗间期,T细胞亚群和炎性细胞因子及乙酰胆碱受体(AChR)抗体的变化,探讨其在MG发病机制中的作用。方法选取MG并处于治疗间期的患者30例及健康对照组20例,用流式细胞仪检测其外周血中CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细... 详细信息

目的观察在重症肌无力(MG)治疗间期,T细胞亚群和炎性细胞因子及乙酰胆碱受体(AChR)抗体的变化,探讨其在MG发病机制中的作用。方法选取MG并处于治疗间期的患者30例及健康对照组20例,用流式细胞仪检测其外周血中CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、中枢记忆T(CD4^(+)CD45RO^(+)CCR7^(+))细胞、效应记忆T(CD4^(+)CD45RO^(+)CCR7-)细胞、滤泡辅助T(CD4^(+)CXCR5^(+))细胞、滤泡调节T(CD4^(+)CXCR5^(+)FOXP3^(+))细胞所占百分比情况;利用流式液相蛋白定量技术(CBA)检测外周血白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-12、IL-17及γ干扰素(IFN-γ)的水平;ELISA检测IL-7及AChR抗体的含量。结果与健康对照相比,MG患者外周血中CD4^(+)CXCR5^(+)T细胞、CD4^(+)CD45RO^(+)CCR7-T细胞、CD8^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞及CD4/CD8比值未见明显变化,CD4^(+)CD45RO^(+)CCR7^(+)T细胞明显降低,CD4^(+)CXCR5^(+)FOXP3^(+)T细胞明显增加;MG患者IL-2、IL-4、IL-12、IL-17及IFN-γ水平均高于健康对照,而IL-7低于健康对照,AChR抗体水平无明显变化。各细胞因子水平与各T细胞亚群间未发现有明显相关性。结论治疗间期MG患者存在较为独特的记忆T细胞和滤泡T细胞表型及相关细胞因子水平变化。

关键词：重症肌无力记忆T细胞滤泡T细胞细胞因子细胞免疫

防气溶胶污染的UDG-LAMP-LFD核酸检测体系的建立

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中国病原生物学杂志 2023年第2期18卷 147-152页

作者：陈星湘费樱黄月明汪浪王榕吴青青贵州医科大学医学检验学院临床微生物与免疫学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院临床检验中心贵州省人民医院湖南医药学院

目的建立一种基于热敏UDG酶防污染的、环介导等温扩增(LAMP)技术及横向流动试纸条(LFD)联合使用的核酸检测方法,实现对HPV18的快速、可视化检测。方法使用LAMP在线引物设计软件设计HPV18特异性引物,同时引入热敏UDG酶,建立UDG-LAMP检... 详细信息

目的建立一种基于热敏UDG酶防污染的、环介导等温扩增(LAMP)技术及横向流动试纸条(LFD)联合使用的核酸检测方法,实现对HPV18的快速、可视化检测。方法使用LAMP在线引物设计软件设计HPV18特异性引物,同时引入热敏UDG酶,建立UDG-LAMP检测体系,优化T/U碱基比例,设置对照试验验证热敏UDG酶防污染能力;根据LFD要求,设计特异性同化探针及淬灭探针,建立UDG-LAMP-LFD核酸检测体系并对LAMP反应时间进行优化;对该体系进行灵敏度、特异性及临床样品的验证,并与QPCR结果进行比较。结果优化的LAMP反应时间为40 min, T/U比例为1∶1;热敏UDG酶孵育时间为10 min,防污染效果显著;LFD结果判读耗时5 min,整个检测时间为55 min。该UDG-LAMP-LFD核酸检测体系在以HPV18作为检测对象时,灵敏度10^(3)拷贝/μl;29例临床样品的验证结果与QPCR检测结果完全一致。结论建立的UDG-LAMP-LFD检测体系可快速、特异、灵敏、可视化的检测HPV18,同时可避免气溶胶污染导致的假阳性。该方法对实验设备及工作人员要求较低,适合在偏远地区及基层医院使用。

关键词：热敏UDG酶环介导等温扩增技术横向流动试纸条人乳头瘤病毒18型气溶胶污染

单核细胞HLA-DR百分比与单核细胞绝对计数联合应用对脓毒症预后的评估价值

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中国病原生物学杂志 2021年第4期16卷 384-388,395页

作者：张智琪汪浪沈雪张宇黄月明吴青青贵州医科大学医学检验学院临床微生物与免疫教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院临床检验中心

目的探讨外周血单核细胞人类白细胞抗原-DR(mHLA-DR)百分比联合单核细胞绝对计数(AMC)与脓毒症患者预后的相关性及其预测价值。方法选择2019年9月-2020年9月贵州医科大学附属医院收治的脓毒症患者33例,并根据28 d预后情况将其分为幸存... 详细信息

目的探讨外周血单核细胞人类白细胞抗原-DR(mHLA-DR)百分比联合单核细胞绝对计数(AMC)与脓毒症患者预后的相关性及其预测价值。方法选择2019年9月-2020年9月贵州医科大学附属医院收治的脓毒症患者33例,并根据28 d预后情况将其分为幸存组25例和非幸存组8例。记录患者一般资料、急性生理与慢性健康状况评估(APACHEⅡ)评分和序贯器官衰竭评估(SOFA)评分。比较两组患者外周血降钙素原(PCT)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、单核细胞绝对计数(AMC)和mHLA-DR表达水平的差异,采用单因素及多因素Logistic回归分析法分析脓毒症患者预后的危险因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评估不同指标对脓毒症患者的预后价值。结果非幸存组患者外周血PCT值6.04(1.03-20.16)ng/ml和NLR值13.69(7.86-24.21)均显著高于幸存组[2.18(0.54-9.50)ng/ml和和9.32(4.58-16.16)](P临床提供参考。

关键词：脓毒症人白细胞抗原-DR 单核细胞中性粒细胞/淋巴细胞值预后

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老年脓毒症患者临床特征及预后影响因素

中国感染控制杂志 2022年第4期21卷 377-383页

作者：汪浪张智琪沈雪陈星湘谭玉洁吴青青贵州医科大学检验学院临床微生物与免疫学教研室贵州贵阳550004 泰安市中心医院临床检验中心山东泰安271000 贵州医科大学附属医院临床检验中心贵州贵阳550004

目的探讨老年脓毒症患者临床特征及影响预后的危险因素。方法选取2020年7月—2021年9月某三级甲等医院收治的老年脓毒症患者为研究对象,记录患者的临床及实验室资料,根据患者28天预后情况分为存活组和死亡组,比较各临床指标在两组间的差... 详细信息

目的探讨老年脓毒症患者临床特征及影响预后的危险因素。方法选取2020年7月—2021年9月某三级甲等医院收治的老年脓毒症患者为研究对象,记录患者的临床及实验室资料,根据患者28天预后情况分为存活组和死亡组,比较各临床指标在两组间的差异,应用二元logistic回归分析法分析影响老年脓毒症患者预后的独立危险因素,进一步绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评估不同指标预测患者预后的价值。结果共纳入121例患者,其中74例为脓毒症,47例为脓毒性休克。存活组92例,死亡组29例。与存活组相比,死亡组患者发生脓毒性休克、合并症个数≥2的比例均较高(P临床治疗和预后评估提供参考依据。

关键词：脓毒症脓毒性休克临床特征预后老年人

防御素在抗结核分枝杆菌感染中的作用机制研究进展

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中国病原生物学杂志 2023年第1期18卷 121-125页

作者：高雪涵朱杰华刘利萍蒙祖迪亓凯卫麟娜秦欢罗军敏遵义医科大学基础医学院免疫学教研室贵州遵义563000 遵义医科大学附属医院医学检验科遵义医科大学基础医学院微生物学教研室

防御素是广泛分布于生物界的一类富含半胱氨酸的内源性阳离子抗菌肽,在抵抗病原微生物入侵及调节机体免疫功能等方面发挥重要作用。研究发现,防御素对细菌、真菌或病毒等均具有杀灭作用,其在抗结核分枝杆菌感染中也展现出突出优势。防... 详细信息

防御素是广泛分布于生物界的一类富含半胱氨酸的内源性阳离子抗菌肽,在抵抗病原微生物入侵及调节机体免疫功能等方面发挥重要作用。研究发现,防御素对细菌、真菌或病毒等均具有杀灭作用,其在抗结核分枝杆菌感染中也展现出突出优势。防御素独特的抗菌机理可以破坏结核分枝杆菌的细胞壁、细胞膜等生物学结构,从而抑制结核分枝杆菌。本文对防御素的分子结构、生物学作用、抗结核作用及机制予以综述。

关键词：防御素抗菌肽结核分枝杆菌机制免疫应答综述

联合检测四项生化指标对狼疮肾炎早期诊断的临床意义

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第11期 0050-0052页

作者：周艳贵州医科大学医学检验学院临床微生物免疫教研室贵州贵阳550004

探讨血清胱抑素C、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及肾小球滤过率估算值四项生化指标联合检测及血清抗核抗体谱对狼疮肾炎(LN)的早期诊断价值。方法收集2018年1月至2021年4月贵州医科大学附属医院收治的295例LN且伴有肾损伤的患者,另选取同时期... 详细信息

探讨血清胱抑素C、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及肾小球滤过率估算值四项生化指标联合检测及血清抗核抗体谱对狼疮肾炎(LN)的早期诊断价值。方法收集2018年1月至2021年4月贵州医科大学附属医院收治的295例LN且伴有肾损伤的患者,另选取同时期314例SLE非肾损伤患者为对照组。分别记录两组血清胱抑素C、血清肌酐、血清尿素水平、肾小球滤过率及抗核抗体结果(抗核抗体核型、滴度),比较上述各指标在两组中的差异。结果 LN组与SLE非肾损伤组比较,四项生化检测指标均具有显著差异(P免疫抗核抗体均质型及其滴度均高于SLE非肾损伤患者(P免疫荧光抗核抗体不同荧光模型及滴度与对狼疮性肾炎早期诊断也具有一定临床价值。

关键词：狼疮性肾炎胱抑素C 肌酐尿素氮肾小球滤过率抗核抗体

人β防御素3和γ干扰素在MAPK信号通路中的相互诱导及联合抗甲型流感病毒的机制

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贵州医科大学学报 2023年第4期48卷 373-382页

作者：唐源祝洁杨小余张乙进罗红江滟贵州医科大学医学检验学院临床微生物与免疫学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学实验动物中心贵州贵阳550025 贵州医科大学附属医院临床检验中心微生物免疫科贵州贵阳550004

目的探讨人β防御素3(HBD3)和γ干扰素(IFN-γ)在丝裂源活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中相互诱导作用及体外联合抗甲型流感病毒(IAV)H1N1的作用。方法不同剂量IFN-γ(12.5、25.0、50.0、100.0μg/L)或HBD3(0.25、0.50、1.00、2.00 mg/L... 详细信息

目的探讨人β防御素3(HBD3)和γ干扰素(IFN-γ)在丝裂源活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中相互诱导作用及体外联合抗甲型流感病毒(IAV)H1N1的作用。方法不同剂量IFN-γ(12.5、25.0、50.0、100.0μg/L)或HBD3(0.25、0.50、1.00、2.00 mg/L)分别作用人支气管上皮细胞BEAS-2B 4、12、24、48 h,另设立p38 MAPK、ERK和JNK通路抑制剂预处理后、用IFN-γ(25.0μg/L)或HBD3(1.00 mg/L)处理BEAS-2B细胞4 h, qRT-PCR和ELISA检测HBD3及IFN-γ基因和蛋白表达,Western blot检测p-p38 MAPK、p-ERK、p-JNK蛋白表达;25.0μg/L IFN-γ、1.00 mg/L HBD3、HBD3 siRNA转染及IFN-γ中和抗体(0.50 mg/L)单独或联合作用BEAS-2B细胞、用5×TCID50H1N1感染,qRT-PCR和Western blot检测IAV核蛋白(NP)基因和蛋白的表达情况。结果在BEAS-2B细胞中,不同剂量的IFN-γ与HBD3可互相诱导表达(P0.05)。结论在BEAS-2B细胞中,HBD3和IFN-γ可通过MAPK通路相互诱导表达,且2者联合使用可增强抗IAV H1N1的作用。

关键词：甲型流感病毒人β防御素3 γ干扰素丝裂原活化蛋白激酶

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抗人B7-H4嵌合抗体的制备及鉴定

中国免疫学杂志 2022年第22期38卷 2763-2769页

作者：范振军张文婷张丽张俊爱赵祖国徐军发(指导) 广东医科大学医学技术学院检验医学研究所东莞523808 广东医科大学基础医学院微生物学和免疫学教研室东莞523808

目的:制备抗人B7-H4嵌合单克隆抗体(mAb),并对其生物学功能进行初步鉴定。方法:从杂交瘤细胞株扩增抗人B7-H4可变区基因序列;构建表达人鼠嵌合抗体的表达载体,并转染CHO-K1细胞构建稳定表达抗B7-H4嵌合抗体的CHO-K1细胞株;SDS-PAGE检测... 详细信息

目的:制备抗人B7-H4嵌合单克隆抗体(mAb),并对其生物学功能进行初步鉴定。方法:从杂交瘤细胞株扩增抗人B7-H4可变区基因序列;构建表达人鼠嵌合抗体的表达载体,并转染CHO-K1细胞构建稳定表达抗B7-H4嵌合抗体的CHO-K1细胞株;SDS-PAGE检测mAb纯度;ELISA测定mAb效价;SPR测定mAb的亲和力;BCA法检测mAb浓度;CCK-8法检测T细胞增殖情况;ELISA和Western blot确定mAb结合表位范围;使用Discovery Studio软件对单抗表位进行分析。结果:从杂交瘤细胞成功扩增出抗体可变区基因,筛选出稳定表达嵌合抗体的CHO-K1细胞株;细胞培养上清中mAB浓度为1.82 mg/ml,ELISA有效效价为1.97×10^(5)左右,亲和力为3.72×10^(-9)kD;CCK-8结果表明嵌合单抗可以阻断B7-H4-Fc分子对T细胞增殖的抑制作用;表位分析结果表明嵌合mAb主要以氢键和疏水作用与B7-H4 IgC域结合。结论:本研究成功制备了抗B7-H4的人鼠嵌合单抗,可在体外有效地阻断B7-H4-Fc对T细胞增殖抑制作用并为B7-H4抗体药物研发提供了前期基础。

关键词： B7-H4 嵌合抗体抗体表位 T细胞增殖