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民族医药肿瘤特色外治疗法概述

中华中医药杂志 2021年第4期36卷 2225-2228页

作者：陈果杨柱唐东昕贵州中医药大学贵阳550000 贵州中医药大学第一附属医院贵阳550000

肿瘤发病率持续增高,严重威胁人类健康。少数民族特色外治法在肿瘤治疗上具有独到之处,能够有效减少因口服药物带来的胃肠道反应,且能减少放化疗带来的不良反应。笔者翻阅近30年以来民族医药关于肿瘤外治法的文献,整合梳理壮、藏、蒙、... 详细信息

肿瘤发病率持续增高,严重威胁人类健康。少数民族特色外治法在肿瘤治疗上具有独到之处,能够有效减少因口服药物带来的胃肠道反应,且能减少放化疗带来的不良反应。笔者翻阅近30年以来民族医药关于肿瘤外治法的文献,整合梳理壮、藏、蒙、苗、土家、侗等民族关于肿瘤的外治疗法,并挑选各民族针灸、放血、刮痧、药浴等特色疗法,加以详细论述,以期与中医外治法相呼应,取长补短,为肿瘤治疗提供新的思路,并以期促进民族医药发展整体迈上更高台阶。

关键词：肿瘤民族医药外治疗法药线点灸刮痧放血疗法药浴

基于网络药理学和分子对接分析薤白治疗心肌缺血再灌注损伤的作用机制

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中国医院药学杂志 2020年第8期40卷 885-891页

作者：李尧锋杨欣朱璨刘杨杨长福李军陈向云贵州中医药大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州中医药大学实验中心贵州贵阳550025

目的:基于网络药理学方法探讨薤白治疗心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法:在中药系统药理学分析平台(TCMSP)上检索和筛选薤白的活性成分、作用靶点;利用OMIM数据库和CTD数据库搜集疾病靶点;找出薤白作用靶点和疾病靶点共有交集靶点,... 详细信息

目的:基于网络药理学方法探讨薤白治疗心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法:在中药系统药理学分析平台(TCMSP)上检索和筛选薤白的活性成分、作用靶点;利用OMIM数据库和CTD数据库搜集疾病靶点;找出薤白作用靶点和疾病靶点共有交集靶点,分子对接软件SYBYL验证薤白活性成分与交集靶点结合活性。然后利用String数据库和Cytoscape软件绘制靶点蛋白互作网络,利用DAVID数据库对靶点进行信号通路富集分析,利用Cytoscape软件构建薤白活性成分-靶点-信号通路网络。结果:筛选获得薤白活性成分10个,治疗疾病作用靶点19个。蛋白互作分析结果显示,17个靶点蛋白存在相互作用关系,IL6、TNF、NOS3、CCL2、VEGFA、SOD1、CAT与10个及以上蛋白存在互作关系。信号通路富集结果显示,上述靶点主要与流体剪切应力与动脉粥样硬化、过氧化物酶体、HIF-1信号通路、松弛素信号通路、细胞因子-细胞因子-受体相互作用、IL-17信号通路以及肿瘤坏死因子信号通路等23条信号通路有关。结论:薤白通过多成分、多靶点、多途径治疗心肌缺血再灌注损伤,其作用机制主要通过调控流体剪切应力、氧化应激及炎性反应来发挥作用。

关键词：薤白心肌缺血再灌注损伤网络药理学分子对接信号通路

基于PINK1/Parkin途径探究绿原酸对泡沫细胞线粒体自噬-炎症反应的作用机制

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中国药理学通报 2024年第5期40卷 914-920页

作者：于红红杨韵琪罗培俞琦马玉玲田维毅贵州中医药大学贵州贵阳550025 牛津大学中医药研究中心英国牛津OX12JD 澳门科技大学中国澳门999078

目的探讨绿原酸(chlorogenic acid,CGA)通过同源性磷酸酶张力蛋白诱导激酶1(PINK1)/帕金森蛋白(Parkin)信号通路对ox-LDL诱导的泡沫细胞线粒体自噬及炎症反应的调控作用。方法将RAW264.7巨噬细胞分为正常(Control)组、模型(Model)组、CG... 详细信息

目的探讨绿原酸(chlorogenic acid,CGA)通过同源性磷酸酶张力蛋白诱导激酶1(PINK1)/帕金森蛋白(Parkin)信号通路对ox-LDL诱导的泡沫细胞线粒体自噬及炎症反应的调控作用。方法将RAW264.7巨噬细胞分为正常(Control)组、模型(Model)组、CGA低剂量(CGA-L)组、中剂量(CGA-M)组、高剂量(CGA-H)组、CGA-H+Mdivi-1(CGA-H+Mdi)组。油红O法鉴定细胞泡沫化;CCK-8法确定CGA干预浓度;透射电镜观察细胞线粒体结构改变;ELISA检测IL-1β、IL-18、IFN-γ表达;qRT-PCR及免疫荧光标记法检测PINK1/Parkin线粒体自噬通路相关基因及蛋白表达。结果油红O染色显示泡沫细胞模型制备成功。与Model组相比,不同浓度CGA干预后细胞线粒体损伤明显减轻,诱导了PINK1、Parkin、p-Parkin、PHB2、LC3Ⅱ表达,抑制了TOMM20表达,以及降低了IL-1β、IL-18、IFN-γ的表达(P<0.05或P<0.01);与CGA-H组相比,CGA-H+Mdi组细胞线粒体损伤明显加重,抑制了PINK1、Parkin、p-Parkin、PHB2、LC3Ⅱ表达,诱导了TOMM20表达,以及增强了IL-1β、IL-18、IFN-γ表达(P<0.01)。结论CGA可通过调控PINK1/Parkin通路诱导泡沫细胞线粒体自噬以及抑制了促炎因子IL-1β、IL-18、IFN-γ过表达,这可能是CGA抗动脉粥样硬化机制之一。

关键词：绿原酸泡沫细胞 PINK1/Parkin 线粒体自噬炎症反应动脉粥样硬化

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基于16S rRNA测序与网络药理学探讨葛根芩连汤干预抗生素相关性腹泻的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2023年第23期29卷 81-88页

作者：苏钢杨光勇张庚鑫沈俊希韩慧子田维毅王文佳王平涂小华何光志贵州中医药大学基础医学院贵阳550025

目的:通过16S rRNA测序与网络药理学探究葛根芩连汤(GQT)对抗生素相关性腹泻(AAD)肠道菌群的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机平均分为空白组、模型组、丽珠肠乐组(0.15 g·kg^(-1))、葛根芩连汤高、中、低剂量组(10.08、5.04、2.52 g·... 详细信息

目的:通过16S rRNA测序与网络药理学探究葛根芩连汤(GQT)对抗生素相关性腹泻(AAD)肠道菌群的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机平均分为空白组、模型组、丽珠肠乐组(0.15 g·kg^(-1))、葛根芩连汤高、中、低剂量组(10.08、5.04、2.52 g·kg^(-1)),除空白组外,各组每日均给予克林霉素(250 mg·kg^(-1))灌胃造模,连续7 d。造模成功后,各给药组按剂量灌胃对应药物,1次/d,持续14 d,空白组与模型组给予等体积生理盐水灌胃。通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选GQT活性成分及作用靶点,利用人类基因数据库GeneCards、在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库、药物遗传学与药物基因组学知识库(PharmGKB)、药品生物信息学和化学信息学数据库DrugBank、疾病相关的基因与突变位点数据库DisGeNET检索AAD疾病靶点,通过R软件分析获得“药物-疾病”共有靶点。利用STRING数据库分析靶点蛋白质-蛋白质相互作用关系,并进行京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。通过苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠结肠病理学改变,并结合16S rRNA测序AAD结肠内容物菌群结构验证网络药理学结果。结果:通过网络药理学从GQT中筛选出238个活性成分作用于276个成分靶点,其中槲皮素、葛根素、汉黄芩素、芹黄素为GQT主要核心成分,AAD疾病靶点1097个,药物-疾病交集靶点127个。蛋白质-蛋白质相互作用网络主要包括蛋白激酶B1(Akt1)、白细胞介素-6(IL-6)及IL-1β等核心靶点,主要富集于IL-17信号通路。通过动物实验验证发现,与空白组比较,模型组结肠结构严重异常,肠道上皮柱状细胞损伤、杯状细胞减少、大量炎症细胞浸润;与模型组比较,GQT高剂量组结肠结构有所改善,但仍存在异常;GQT中、低剂量组和丽珠肠乐组结肠结构明显改善,达到正常水平。GQT可改善AAD肠道菌群结构多样性,在门水平增加厚壁菌门Firmicutes丰度,降低拟杆菌门Bacteroidetes丰度,在属水平增加乳酸杆菌属Lactobacillus丰度,降低普雷沃氏菌属Prevotella与拟杆菌属Bacteroides丰度,其中乳酸球菌属Lactococcus可作为GQT治疗AAD的生物标记物,通过菌群功能代谢预测发现GQT可促进肠道中醋酸与乳酸代谢途径。结论:GQT可能通过槲皮素、汉黄芩素等关键成分作用于Akt1及IL-6等靶点,激活IL-17信号通路,同时改善肠道乳酸球菌属丰度及醋酸、乳酸代谢途径,从而发挥修复肠道屏障的作用来治疗AAD。

关键词：葛根芩连汤抗生素相关性腹泻(AAD) 肠道菌群网络药理学肠道屏障炎症因子白细胞介素(IL)

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基于16S rRNA测序研究葛根芩连汤对菌群失调性腹泻大鼠肠道菌群结构的影响

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中国实验方剂学杂志 2021年第11期27卷 19-26页

作者：张庚鑫杜海洋王平杨光勇涂小华田维毅王文佳何光志贵州中医药大学基础医学院贵阳550025

目的:采用16S rRNA技术研究葛根芩连汤对菌群失调性腹泻大鼠肠道菌群结构的影响。方法:将60只健康SD大鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、葛根芩连汤高、中、低剂量组,丽珠肠乐组,每组10只。除正常组外,每日按头孢拉定178.6 mg·kg^(... 详细信息

目的:采用16S rRNA技术研究葛根芩连汤对菌群失调性腹泻大鼠肠道菌群结构的影响。方法:将60只健康SD大鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、葛根芩连汤高、中、低剂量组,丽珠肠乐组,每组10只。除正常组外,每日按头孢拉定178.6 mg·kg^(-1),硫酸庆大霉素31.25 mg·kg^(-1)混合抗生素进行灌胃造模,造模成功后,葛根芩连汤高、中、低剂量组灌胃葛根芩连汤(7.02,3.51,1.755 g·kg^(-1)),丽珠肠乐组按0.125 g·kg^(-1)灌胃,正常组与模型组给予无菌蒸馏水灌胃,体积分数均为10 mL·kg^(-1),连续给药7 d,将大鼠麻醉后取大鼠结肠内容物,提取粪便DNA后进行16S rRNA高通量测序并分析其结果。结果:葛根芩连汤明显调节菌群失调性腹泻模型大鼠的物种数量及Alpha与Beta多样性,提高菌群生物丰富度指数与多样性指数,正向调节菌群失调性腹泻模型大鼠的3种差异菌门(厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门)与14种差异菌属(拟杆菌属、狄氏副拟杆菌属、布劳特氏菌属等)。结论:葛根芩连汤对菌群失调性腹泻模型大鼠肠道菌群有调节作用,揭示了肠道菌群与菌群失调性腹泻之间的生理病理机制。

关键词： 16S rRNA 葛根芩连汤肠道菌群菌群结构菌群失调性腹泻

穴位埋线对哮喘大鼠肺组织中p38MAPK信号通路及细胞间黏附分子-1、白细胞介素-4和嗜酸性粒细胞的影响

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针刺研究 2022年第2期47卷 129-134页

作者：唐徐韵陈盼碧杜狄佳秦中银龙润锦贵州中医药大学针灸推拿学院贵阳550025

目的:观察穴位埋线对哮喘大鼠肺组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素-4(IL-4)和嗜酸性粒细胞(EOS)的影响,探讨其通过调控EOS减轻哮喘的作用机制。方法:40只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为对照组... 详细信息

目的:观察穴位埋线对哮喘大鼠肺组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素-4(IL-4)和嗜酸性粒细胞(EOS)的影响,探讨其通过调控EOS减轻哮喘的作用机制。方法:40只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、穴位埋线组和地塞米松组,每组10只。采用腹腔注射卵蛋白(OVA)和氢氧化铝混悬液法制备哮喘大鼠模型。穴位埋线组于"肺俞""定喘""膻中"处行埋线治疗1次;地塞米松组予腹腔注射地塞米松,每日1次,连续2周。HE染色法观察大鼠肺组织形态结构的改变,瑞氏-姬姆萨染色法计数肺泡灌洗液(BALF)中EOS的相对含量,TUNEL法检测大鼠肺组织EOS的凋亡水平,透射电镜观察大鼠肺组织EOS超微结构的变化,荧光定量PCR法检测大鼠肺组织中p38MAPK、ICAM-1和IL-4 mRNA的相对表达量。结果:(1)与对照组比较,模型组可见明显的支气管变形和炎性细胞浸润;与模型组比较,穴位埋线组和地塞米松组支气管变形和周围炎性细胞浸润程度缓解。(2)与对照组比较,模型组BALF中EOS含量显著增加(P中心键偏移;与模型组比较,穴位埋线组和地塞米松组肺组织EOS包膜完整,细胞质皱缩,且细胞内可见自噬小体或自噬泡结构。(5)与对照组比较,模型组肺组织中p38MAPK、ICAM-1和IL-4 mRNA相对表达量显著增加(P<0.01);与模型组比较,穴位埋线组和地塞米松组肺组织中p38MAPK、ICAM-1和IL-4 mRNA相对表达量显著下降(P<0.01,P<0.05);与穴位埋线组比较,地塞米松组肺组织中ICAM-1 mRNA相对表达量下降(P<0.05)。结论:穴位埋线可能是通过抑制p38MAPK、ICAM-1和IL-4 mRNA的表达,减少肺组织EOS的聚集,促进EOS的凋亡,从而缓解哮喘气道炎性反应。

关键词：穴位埋线哮喘 p38丝裂原活化蛋白激酶细胞间黏附分子-1 白细胞介素-4 嗜酸性粒细胞

国医大师刘尚义“膜病理论”在盆腔炎性疾病后遗症中的运用

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中华中医药杂志 2024年第5期39卷 2604-2607页

作者：欧燕周意园张泰魏华诏召刘晓文晓敏李燕贵州中医药大学贵阳550025 贵州中医药大学第一附属医院产科优生研究中心贵阳550001 贵州中医药大学第二附属医院贵阳550001 贵州中医药大学第一附属医院妇科贵阳550001

“膜病理论”是国医大师刘尚义结合多年“疡科”经验,守成创新,引西润中,在辨证论治的基础上形成的横向认识疾病的方式,并将该理论引入妇科临床诊疗,认为盆腔炎性疾病后遗症属于“膜病”范畴,“痰瘀”为其核心病机。在治疗中刘老遵循“... 详细信息

“膜病理论”是国医大师刘尚义结合多年“疡科”经验,守成创新,引西润中,在辨证论治的基础上形成的横向认识疾病的方式,并将该理论引入妇科临床诊疗,认为盆腔炎性疾病后遗症属于“膜病”范畴,“痰瘀”为其核心病机。在治疗中刘老遵循“肤膜同治”之思路,首重循经辨证,善于经方活用,治从“肝肾两经”入手,痰瘀同治,疏通膜络,并配合风药与虫药搜剔伏邪,同时注重顾护正气,调理肝、脾、肾三脏,能有效改善炎症及粘连、缓解慢性盆腔痛、防止疾病复发。

关键词：盆腔炎性疾病后遗症慢性盆腔痛盆腔炎膜病理论肤膜同治国医大师刘尚义

异叶天南星凝集素基因的克隆及蛋白的结构性质分析

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生物学杂志 2019年第6期36卷 36-41页

作者：李晟赵德蕊张声祥施圆圆杨青山王晨凯单春苗吴家文安徽中医药大学药学院合肥230012 安徽中医药大学研究生院合肥230012 安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室合肥230038 安徽道地中药材品质提升协同创新中心合肥230012 安徽省中医药科学院合肥230012

克隆了中药材异叶天南星(Arisaema heterophyllum Blume)叶中凝集素(lectin)基因(Ahltn)的开放阅读框(ORF),并对其编码蛋白AhLTN的性质和结构进行了分析。首先从植物异叶天南星的新鲜叶片中提取总RNA,通过逆转录获取cDNA,经PCR扩增Ahlt... 详细信息

克隆了中药材异叶天南星(Arisaema heterophyllum Blume)叶中凝集素(lectin)基因(Ahltn)的开放阅读框(ORF),并对其编码蛋白AhLTN的性质和结构进行了分析。首先从植物异叶天南星的新鲜叶片中提取总RNA,通过逆转录获取cDNA,经PCR扩增Ahltn后与pMD19-T载体连接构成重组质粒,然后转化到大肠杆菌感受态细胞中培养,经菌液PCR鉴定后再进行测序验证,确定目的基因被成功克隆,进一步运用各种生物信息学软件对AhLTN的理化性质、进化关系和空间结构进行分析。结果显示,克隆获得了Ahltn的ORF,此基因片段长度为561 bp,编码186个氨基酸的蛋白质,经生物信息学分析AhLTN属于稳定蛋白,AhLTN与铁皮石斛的凝集素亲缘关系最近,四级结构显示其为二聚体,且两个单体的C末端发生了交换,每个单体中含有11个β折叠,呈“三棱镜”型,3个面均有保守的甘露糖结合区域。为天南星植物凝集素基因和蛋白功能的进一步研究和开发利用奠定了基础。

关键词：异叶天南星凝集素基因克隆生物信息学分析

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中华中医药学刊 2021年第4期39卷 145-150,I0054页

作者：李嘉高玲陈晓兰罗乐田源红张雄贵州中医药大学贵州贵阳550025

目的研究马兰草乙醇提取物在体外对转化生长因子-β1(TGF-β1)活化的大鼠肝星形细胞(HSC-T6)增殖、凋亡及基于AQP8蛋白靶点调控活化的HSC-T6细胞线粒体凋亡途径的影响,探究该药抗肝硬化腹水的作用机制。方法体外培养HSC-T6,用TGF-β1刺... 详细信息

目的研究马兰草乙醇提取物在体外对转化生长因子-β1(TGF-β1)活化的大鼠肝星形细胞(HSC-T6)增殖、凋亡及基于AQP8蛋白靶点调控活化的HSC-T6细胞线粒体凋亡途径的影响,探究该药抗肝硬化腹水的作用机制。方法体外培养HSC-T6,用TGF-β1刺激24 h后,用不同浓度的马兰草乙醇提取物体外干预12、24、36、48 h,用MTT法检测马兰草乙醇提取物对活化HSC-T6存活率的影响,流式细胞术检测HSC-T6细胞凋亡和细胞线粒体膜电位的影响,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测AQP8mRNA的表达水平,Western Blot检测AQP8、Cty-C的蛋白表达。结果阴性对照组相比,各组OD值和细胞存活率均有下降,基质对照组的凋亡率下降(P<0.05),其余各组的凋亡率均有所上升(P<0.05),基质对照组和马兰提取物组(20、40μg/mL)的AQP8mRNA的表达水平明显上升(P<0.05);与基质组相比,大黄素各剂量组和马兰乙醇提取物各剂量组的细胞存活率均呈时间/剂量依赖性下降,大黄素组的早期凋亡有所上升(P<0.05),马兰提取物各剂量组各时期的凋亡增加的同时呈剂量依赖性升高(P<0.05),且线粒体细胞膜电位呈剂量依赖性显著下降(P<0.05)。Western Blot检测结果显示,Cty-C和AQP8的表达趋势一致,大黄素组的表达较较阴性对照组和基质对照组均有明显增多(P<0.05),马兰提取物组(40μg/mL)的表达量最多(P<0.05)。结论马兰草乙醇提取物在体外可抑制活化的HSC-T6增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与激活线粒体细胞凋亡途径和上调AQP8表达有关。

关键词：马兰草乙醇提取物 HSC-T6大鼠肝星形细胞细胞凋亡 AQP8 线粒体途径