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MnSOD过表达对t-BHP诱导间充质干细胞凋亡的保护作用

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生物化学与生物物理进展 2013年第6期40卷 556-564页

作者：杨超戴为民张晓梅陈海旭杨博宫媛王昌正车宇芳吴本俨解放军总医院南楼消化内科北京100853 解放军总医院胸外科北京100853 解放军总医院消化内科北京100853 解放军总医院老年医学研究所北京100853

通过重组慢病毒系统感染人间充质干细胞(mesenchymal stromal cells,MSCs),建立了能够稳定、高效表达锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的细胞株MnSOD-MSCs.从胎儿肝脏组织克隆MnSOD基因,构建重组慢病毒MnSOD的表达载体,感染MSCs.根据荧光表达进... 详细信息

通过重组慢病毒系统感染人间充质干细胞(mesenchymal stromal cells,MSCs),建立了能够稳定、高效表达锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的细胞株MnSOD-MSCs.从胎儿肝脏组织克隆MnSOD基因,构建重组慢病毒MnSOD的表达载体,感染MSCs.根据荧光表达进行流式分选,获得能够继续稳定传代的高表达MnSOD基因的MSCs,RT-PCR和Western blot结果证实细胞株中的MnSOD基因稳定高表达.用不同浓度的第三丁基过氧化氢(t-BHP)处理细胞,通过CCK-8法检测细胞的存活率,SA-β-gal染色观察细胞的衰老情况,流式细胞技术分析细胞的凋亡率,实时荧光定量PCR分析p53和p53正向细胞凋亡调控因子(PUMA)的表达.结果发现,MnSOD过表达可提高细胞的存活率,抑制细胞的凋亡,SA-β-gal染色阳性率降低,且p53和PUMA表达下调.这提示MnSOD过表达对t-BHP诱导的细胞凋亡具有保护作用.

关键词： MnSOD 基因转染间充质干细胞 t-BHP 凋亡

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胶原酶门静脉灌注延缓兔实验性肝硬化的形成

中华消化杂志 2006年第9期26卷 634-635页

作者：金博程留芳张志成孙涛海军总医院消化内科北京100037 解放军总医院消化内科

肝硬化是大多数慢性肝病的终末期。目前肝硬化治疗的惟一方法是肝移植，但肝脏供体不足使大量患者得不到治疗。研究表明肝纤维化是可逆的，而肝硬化的逆转并不完全。胶原酶门静脉灌注是肝细胞分离的一项技术。本研究试图用有限剂量胶原... 详细信息

肝硬化是大多数慢性肝病的终末期。目前肝硬化治疗的惟一方法是肝移植，但肝脏供体不足使大量患者得不到治疗。研究表明肝纤维化是可逆的，而肝硬化的逆转并不完全。胶原酶门静脉灌注是肝细胞分离的一项技术。本研究试图用有限剂量胶原酶门静脉灌注，降解硬化肝内过多沉积的胶原而不分散或破坏细胞，从而逆转肝硬化。

关键词：实验性肝硬化门静脉灌注胶原酶肝细胞分离硬化治疗慢性肝病肝脏供体肝纤维化

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结肠气囊肿症20例临床分析

解放军医学杂志 2016年第2期41卷 130-135页

作者：童瑞秦颖秦蕾梁浩解放军总医院消化内科北京100853

目的总结结肠气囊肿症的临床特点及诊治经验。方法对解放军总医院1995年6月-2015年6月收治的20例经结肠镜确诊的结肠气囊肿症患者的临床资料进行回顾性分析。结果 20例结肠气囊肿瘤患者中,男16例(80.0%),女4例(20.0%)。主要临床表现为... 详细信息

目的总结结肠气囊肿症的临床特点及诊治经验。方法对解放军总医院1995年6月-2015年6月收治的20例经结肠镜确诊的结肠气囊肿症患者的临床资料进行回顾性分析。结果 20例结肠气囊肿瘤患者中,男16例(80.0%),女4例(20.0%)。主要临床表现为腹胀、腹泻、腹痛、黏液血便。确诊主要依靠结肠镜检及病理检查,1例行腹腔镜辅助下直肠癌切除术,1例行剖腹探查、乙状结肠穿孔修补术;5例行内镜下治疗;2例行药物+高压氧治疗;7例单纯药物治疗;4例未做治疗。结论结肠气囊肿瘤诊断首选结肠镜,无症状者无需治疗。治疗主要包括氧疗、内镜下治疗和外科手术及治疗原发病,预后良好。

关键词：结肠气囊肿症内镜诊断治疗

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胶原酶门静脉灌注逆转兔CCl_4性肝硬化

世界华人消化杂志 2006年第8期14卷 772-777页

作者：金博张志成孙涛程留芳海军总医院消化内科北京市100037 解放军总医院消化内科北京市100853

目的:观察门静脉灌注胶原酶对逆转实验性肝硬化的作用．方法:4只兔作为正常对照(A组)给予四氯化碳(CCl4)sc 12 wk,再行门静脉生理盐水灌注 12 wk．另外4只兔先给予CCl4 sc 12 wk,再行胶原酶门静脉灌注12 wk(B组),再有3只兔先行CCl4 sc 1... 详细信息

目的:观察门静脉灌注胶原酶对逆转实验性肝硬化的作用．方法:4只兔作为正常对照(A组)给予四氯化碳(CCl4)sc 12 wk,再行门静脉生理盐水灌注 12 wk．另外4只兔先给予CCl4 sc 12 wk,再行胶原酶门静脉灌注12 wk(B组),再有3只兔先行CCl4 sc 12 wk,再行生理盐水门静脉灌注 12 wk(C组)．结果:经过12 wk的CCl4注射和12 wk的门静脉灌注后,应用胶原酶灌注的B组动物肝羟脯氨酸含量显著低于用生理盐水灌注的对照组 (C组)(177．5±35．6μg/g vs 446．3±150．1μg／g; F=13．78,P<0．01)．肝组织学检查也显示胶原酶治疗后肝硬化完全消退．肝、肾、肺、脑、心组织学检查未发现胶原酶的毒性反应．实验中有2只兔发生过敏反应,其中1只死亡．结论:门静脉灌注胶原酶可以促进已形成的肝硬化向正常肝组织结构逆转．

关键词：肝硬化胶原酶门静脉兔

胃黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤中p16蛋白和Ki-67抗原的表达及意义

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中华内科杂志 2008年第9期47卷 743-745页

作者：杨跃魏振军翟云刘斌梁浩解放军总医院消化内科北京100853

目的探讨p16蛋白和Ki-67抗原在胃黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤（MALTL）发生、发展中的作用。方法选择我院病理科1993年3月至2005年6月期间经病理诊断的胃MALTL手术标本，均经2位以上病理科医师会诊筛选，从中确定胃MALTL患者47例。应用免... 详细信息

目的探讨p16蛋白和Ki-67抗原在胃黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤（MALTL）发生、发展中的作用。方法选择我院病理科1993年3月至2005年6月期间经病理诊断的胃MALTL手术标本，均经2位以上病理科医师会诊筛选，从中确定胃MALTL患者47例。应用免疫组织化学法检测p16蛋白和Ki-67抗原在20例正常胃黏膜组织和47例胃MALTL组织中的表达。结果胃MALTL组织中p16蛋白表达阳性率21．3％（10／47）明显低于胃正常组织（90．0％）。伴淋巴结转移的胃MALTL组织中p16蛋白阳性率低于无淋巴结转移组（P〈0．05），Ki-67抗原表达的阳性率为87．2％（41／47），明显高于胃止常组织（P〈0．05）。p16蛋白表达与Ki-67分级呈明显负相关（P〈0．05）。结论联合检测p16蛋白和Ki-67抗原有助于评估胃MALTL患者的预后及指导临床治疗。

关键词：胃淋巴瘤,黏膜相关淋巴样组织蛋白质p16 Ki-67抗原

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地震灾区居民消化道症状与睡眠障碍的关系

中华内科杂志 2010年第12期49卷 1032-1034页

作者：李明阳朱敏王志强杨云生孙刚解放军总医院南楼消化内镜中心北京100853 解放军总医院南楼消化内科北京100853 解放军总医院消化内科北京100853

目的分析汶川大地震后灾区居民消化道症状与睡眠障碍的关系.方法采用整群随机抽样方法,以地震后2周为时间界限,以同时期北京地区居民作对照,对受灾居民进行问卷调查,按照罗马Ⅲ标准判断是否存在消化道症状,并根据睡眠问卷分析睡眠障... 详细信息

目的分析汶川大地震后灾区居民消化道症状与睡眠障碍的关系.方法采用整群随机抽样方法,以地震后2周为时间界限,以同时期北京地区居民作对照,对受灾居民进行问卷调查,按照罗马Ⅲ标准判断是否存在消化道症状,并根据睡眠问卷分析睡眠障碍与消化道症状的关系.结果 956例受灾居民中,459例（48.0%）存在消化道症状,对照组1021例北京地区受访居民中,78例（7.6%）存在消化道症状,后者明显低于地震灾区居民的消化道症状发生率（P＜0.05）.各年龄段受灾居民组及对照组的消化道症状发生率的差异无统计学意义（P＞0.05）.受灾居民在地震发生2周内出现的消化道症状主要以腹痛（14.0%）、腹胀（12.1%）、便秘（10.3%）、烧心（8.6%）、排便障碍（8.3%）为主.在459例有消化道症状的受灾居民中,存在睡眠障碍的有384例（83.7%）,明显高于对照组的19例（24.4%）,P＜0.05.受灾居民组中,有消化道症状的患者早醒伴乏力现象发生率（57.1%）明显高于无消化道症状的患者（23.5%）,P＜0.05.结论地震灾区受灾居民消化道症状的发生率较同时期北京地区受访居民的发生率显著升高,消化道症状的发生与睡眠障碍有关,其中早醒伴乏力是出现消化道症状的影响因素.

关键词：睡眠障碍自然灾害发病率消化道症状

2058例结直肠息肉病理类型和解剖位置分析

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解放军医学杂志 2013年第5期38卷 391-394页

作者：杨竞范南南蔡顺天杨云生解放军总医院消化内科北京100853

目的分析不同年龄患者结直肠息肉检出率、病理类型及在不同解剖部位的分布情况。方法回顾性分析2010年1月1日-12月31日解放军总医院消化内镜中心接受肠镜检查的患者,搜集一般临床资料并计算息肉检出率。将患者根据年龄分层,分析〈50、50... 详细信息

目的分析不同年龄患者结直肠息肉检出率、病理类型及在不同解剖部位的分布情况。方法回顾性分析2010年1月1日-12月31日解放军总医院消化内镜中心接受肠镜检查的患者,搜集一般临床资料并计算息肉检出率。将患者根据年龄分层,分析〈50、50～60,60～70,≥70岁患者的息肉检出情况;计算各种病理类型息肉的比例及在各解剖部位的分布;分析不同病理类型息肉伴发癌变的情况。结果 2010年共行结肠镜检查7117例,内镜下诊断息肉2614例,内镜下息肉检出率36.74%,患者男女比例2.1：1（1760：854）,年龄2～92岁,平均59.3岁。患者根据年龄分层分析结果显示,内镜下息肉检出率随年龄增加而升高,70岁以上人群检出率最高达55.24%。对息肉病理类型进行的分析显示,组织学诊断为息肉患者1372例,2058枚息肉。腺瘤性息肉在结直肠息肉中占84.16%（1732/2058）,其中管状腺瘤占75.35%（1305/1732）。对息肉解剖部位进行的分析显示,1287枚（62.54%）息肉位于左半结肠和直肠,771枚（37.46%）位于右半结肠;腺瘤中1039枚（59.99%）和非肿瘤性息肉中249枚（76.39%）均分布于左半结肠和直肠。在息肉的恶变情况病理变化方向,7.0%（96例）的患者在发现息肉时已伴发癌变,腺瘤占癌变息肉总数的96.9%,其中绒毛状腺瘤癌变率最高,达43.33%。结论结直肠息肉是结直肠镜检查最常见的阳性发现,男性发病率高于女性,其检出率随年龄的增加而增加,50岁以上人群是结直肠息肉的筛查重点。在结肠镜检时应对结肠进行完整检查,重点是直肠和乙状结肠。结直肠息肉的主要类型是腺瘤,以绒毛状腺瘤的癌变率最高。对内镜下诊断为息肉的病变均应进行组织学检查,明确性质,警惕癌变。

关键词：肠息肉病腺瘤性息肉结肠镜检查

OTSC在经食管纵隔探查犬瘘口闭合中的作用

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中华医学杂志 2014年第22期94卷 1744-1746页

作者：郭贺张修礼唐平孙刚张汝刚杨云生解放军总医院消化内科北京100853

目的：通过动物实验应用over-the-scope clip（OTSC）系统闭合经食管行纵隔探查的瘘口，评价其可行性和安全性。方法以狗为实验动物，开展经食管纵隔探查术。共进行10例实验，记录手术时间、术中并发症、术中出血量、手术完成情况、术... 详细信息

目的：通过动物实验应用over-the-scope clip（OTSC）系统闭合经食管行纵隔探查的瘘口，评价其可行性和安全性。方法以狗为实验动物，开展经食管纵隔探查术。共进行10例实验，记录手术时间、术中并发症、术中出血量、手术完成情况、术后实验动物的存活率、体重下降情况以及术后3周食管切口闭合情况。结果10例经食管 NOTES 纵隔探查，平均手术时间24（18～33） min，术中无动物死亡，无胸腔脏器损伤等严重并发症发生。3周后10只实验动物均存活良好，复查胃镜发现OTSC金属夹在位，镜下食管黏膜愈合良好，无脓肿、渗出。结论 OTSC闭合经食管纵隔探查瘘口安全可靠。

关键词：自然腔道内镜手术食管穿孔伤口闭合技术动物实验

泛素羧基末端酯酶L1启动子区甲基化在食管癌变过程中的作用

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中华内科杂志 2012年第5期51卷 390-393页

作者：闫文姬郭明洲杨云生解放军总医院消化内科北京100853

目的探讨泛素羧基末端酯酶L1（UCHL1）启动子区甲基化与食管癌发生的关系。方法采用甲基化特异性PCR、半定量RT-PCR和Western blot技术在食管癌细胞系中分析UCHL1启动子区甲基化与其基因表达的关系，并应用甲基化抑制剂5-杂氮-2′-... 详细信息

目的探讨泛素羧基末端酯酶L1（UCHL1）启动子区甲基化与食管癌发生的关系。方法采用甲基化特异性PCR、半定量RT-PCR和Western blot技术在食管癌细胞系中分析UCHL1启动子区甲基化与其基因表达的关系，并应用甲基化抑制剂5-杂氮-2′-脱氧胞苷（5-Aza）处理食管癌细胞系，探讨UCHL1表达是否受甲基化的调控。同时检测了51例原发食管癌的UCHL1启动子区甲基化情况。结果 8株食管癌细胞系（KYSE30、KYSE150、KYSE140、KYSE450、KYSE510、TE3、TE7、TE10）的UCHL1启动子区完全甲基化。其中7株细胞系（KYSE30、KYSE150、KYSE140、KYSE450、KYSE510、TE3、TE7）UCHL1表达缺失，TE10细胞系表达降低。5-Aza 处理后KYSE150、TE3细胞系UCHL1恢复表达。51例原发食管癌组织标本中,UCHL1启动子区甲基化率为74.51%（38/51），而在10例正常食管黏膜组织中UCHL1启动子区均未甲基化。UCHL1启动子区甲基化与食管癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、临床病理分期、淋巴结转移等均无明显相关性。结论 UCHL1基因启动子区甲基化在食管癌患者中普遍存在，UCHL1基因表达受启动子区甲基化调控。UCHL1基因甲基化在食管癌发生发展中可能起着重要作用。

关键词：食管肿瘤 DNA甲基化 UCHL1基因甲基化特异性PCR