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表达PD1抗体的重组溶瘤流感病毒株的构建及效果评价

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免疫学杂志 2021年第5期37卷 446-453页

作者：王立朋孙芳程晋霞严锦杨豪王鑫鑫杨鹏辉解放军总医院第一医学中心普通外科北京100853 解放军总医院第五医学中心肝胆外科北京100039

目的拯救表达免疫检查点PD1抗体的重组流感病毒株,并评价其体内外靶向杀伤肝癌的效果。方法利用反向遗传学技术,选择流感病毒株A/PuertoRico/8/34(PR8)为载体,将免疫检查点抑制剂PD1抗体的重链和轻链分别插入到PR8病毒株PB1、PA基因片... 详细信息

目的拯救表达免疫检查点PD1抗体的重组流感病毒株,并评价其体内外靶向杀伤肝癌的效果。方法利用反向遗传学技术,选择流感病毒株A/PuertoRico/8/34(PR8)为载体,将免疫检查点抑制剂PD1抗体的重链和轻链分别插入到PR8病毒株PB1、PA基因片段构建重组质粒p Flu-PD1-PB1、p Flu-PD1-PA。构建的质粒与PR8的其余6个内部基因骨架pHW191-PB2、pHW194-HA、pHW195-NP、pHW196-NA、pHW197-M、pHW198-NS基因,转染COS-I和MDCK共培养细胞,通过八质粒病毒拯救系统成功筛选获得重组靶向溶瘤病毒,命名为rFlu-aPD1。通过血凝试验及TCID50测定重组病毒滴度;电镜观察病毒形态;ELISA方法测定PD1抗体含量;MTS方法测定重组病毒对肝癌细胞杀伤效果;流式细胞术检测重组病毒诱导肝癌细胞凋亡效果。利用PDX肝癌小鼠模型,评价重组病毒在体内对肿瘤的抑制效果。结果重组病毒rFlu-aPD1血凝HA效价为28~29,可在鸡胚中稳定传代;MTS结果显示rFlu-aPD1可选择性杀伤肝癌细胞,而对正常肝细胞无明显影响;重组病毒感染HepG2细胞可检测到较高水平的PD1抗体水平;凋亡实验表明rFlu-aPD1主要通过激活细胞凋亡途径诱导肿瘤细胞死亡。体内实验表明重组病毒可降低PDX肝癌小鼠的肿瘤体积,且动物肿瘤部位的病毒载量显著高于其他组织。结论拯救获得重组溶瘤流感病毒rFlu-aPD1,在体内外均可靶向杀伤肝癌细胞,有望为溶瘤病毒靶向治疗肝癌和肿瘤免疫治疗提供新策略。

关键词：溶瘤病毒程序性细胞死亡蛋白-1 PD1抗体肝癌

复苏性主动脉球囊阻断术在创伤大出血紧急救治中的应用

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解放军医学杂志 2024年第8期49卷 959-964页

作者：袁宏军胡伟刘凤永解放军总医院第五医学中心介入放射科北京100039 解放军总医院第五医学中心急诊科北京100039

不可压迫性躯干及四肢交界部位大出血是现代军事冲突、自然灾害以及突发创伤事故中潜在的可预防性死亡的主要原因。由于不能有效直接压迫止血,因此,主动脉阻断可减少出血量,并为损伤复苏和确切控制出血提供短暂的时间。复苏性主动脉球... 详细信息

不可压迫性躯干及四肢交界部位大出血是现代军事冲突、自然灾害以及突发创伤事故中潜在的可预防性死亡的主要原因。由于不能有效直接压迫止血,因此,主动脉阻断可减少出血量,并为损伤复苏和确切控制出血提供短暂的时间。复苏性主动脉球囊阻断术(REBOA)作为一种有效的辅助止血手段,在军民用医院甚至院前创伤急救中显示出初步潜力。随着导管导丝等介入器材及相关技术的不断发展,REBOA有望实现战伤大出血的紧急止血救治。欧美已经开展相关基础和临床前研究,并将该技术应用于部分大出血伤员的救治,而国内却罕见报道。本文对REBOA在创伤出血救治中的应用历史、适用范围、应用改进以及军事应用等方面进行综述,以加强对REBOA的认识。

关键词：复苏性主动脉球囊阻断术大出血紧急止血

肝脏硬度值及血清生化指标与非酒精性脂肪性肝炎的相关性分析

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临床肝胆病杂志 2020年第11期36卷 2473-2477页

作者：付懿铭纪冬邵清李忠斌王春艳陈松海陈国凤解放军总医院第五医学中心肝病医学部北京100039

目的评估肝脏硬度值(LSM)及血清生化指标与非酒精性脂肪肝性肝炎(NASH)肝脏脂肪变、肝脏炎症、肝纤维化的相关性。方法选择2007年1月-2018年12月入住解放军总医院第五医学中心的NASH患者520例,依据BMI(界值为28 kg/m^2)分为肥胖组(n=151... 详细信息

目的评估肝脏硬度值(LSM)及血清生化指标与非酒精性脂肪肝性肝炎(NASH)肝脏脂肪变、肝脏炎症、肝纤维化的相关性。方法选择2007年1月-2018年12月入住解放军总医院第五医学中心的NASH患者520例,依据BMI(界值为28 kg/m^2)分为肥胖组(n=151)和非肥胖组(n=369)。所有患者均接受肝组织病理学检查,肝活检前3 d内检测LSM,收集患者肝穿前的血清生化学指标及一般临床资料,计算血清学无创模型数据APRI、FIB-4。正态分布计量资料2组间比较采用t检验;非正态分布计量资料2组间比较采用两独立样本非参数Mann-Whitney U检验。计数资料2组间比较采用χ~2检验。相关性分析采用Spearman秩相关分析。结果随着BMI水平升高,ALT、AST、LSM、肝脏脂肪衰减参数、脾长、APRI逐渐升高,差异均有统计学意义(P值均中。

关键词：非酒精性脂肪性肝病弹性成像技术活组织检查针吸

以肝功能异常伴发热为首发表现的药物超敏反应综合征1例

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中国肝脏病杂志（电子版） 2019年第3期11卷 79-84页

作者：王晶晶纪冬陈国凤解放军总医院第五医学中心肝硬化二中心

药物超敏反应综合征属严重药物不良反应,在皮肤科疾病中属重症药疹之一,但在肝病领域诊治经验较少,如未能及时有效诊治,病死率极高.本文现报道1例以肝功能异常及发热为首发表现的典型药物超敏反应综合征,以提高肝病领域中对少见病药物... 详细信息

药物超敏反应综合征属严重药物不良反应,在皮肤科疾病中属重症药疹之一,但在肝病领域诊治经验较少,如未能及时有效诊治,病死率极高.本文现报道1例以肝功能异常及发热为首发表现的典型药物超敏反应综合征,以提高肝病领域中对少见病药物超敏反应综合征的认识,避免漏诊及误诊.

关键词：肝功能异常发热药物超敏

7日龄住院早产儿甲状腺功能影响因素及参考值范围探讨

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中国当代儿科杂志 2024年第6期26卷 625-630页

作者：祁娇何玺玉解放军总医院第五医学中心儿科北京100070

目的探讨7日龄早产儿甲状腺功能的影响因素及其参考值范围,以避免临床上不必要的复查和干预。方法回顾性分析2020年1月—2023年1月住院的685例早产儿资料。依据胎龄和出生体重分为高危组(胎龄<34周或体重<2 000 g;n=228)与低危组(胎龄... 详细信息

目的探讨7日龄早产儿甲状腺功能的影响因素及其参考值范围,以避免临床上不必要的复查和干预。方法回顾性分析2020年1月—2023年1月住院的685例早产儿资料。依据胎龄和出生体重分为高危组(胎龄<34周或体重<2 000 g;n=228)与低危组(胎龄≥34周且出生体重≥2 000 g;n=457)。分析甲状腺功能的影响因素,并计算其95%参考值范围。结果多元线性回归分析显示,胎龄、出生体重、出生季节、性别、辅助生殖等为甲状腺功能的影响因素(P<0.05)。高危组早产儿的游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT4)、总三碘甲状腺原氨酸(total triiodothyronine,TT3)、总甲状腺素(total thyroxine,TT4)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)参考值范围分别为2.79~5.40 pmol/L、8.80~25.64 pmol/L、0.80~2.15 nmol/L、50.06~165.09 nmol/L、0.80~18.57μIU/mL,低危组的分别为3.08~5.93 pmol/L、11.17~26.24pmol/L、1.02~2.27 nmol/L、62.90~168.95 nmol/L、0.69~13.70μIU/mL。FT3、FT4、TT3、TT4与胎龄呈正相关(P<0.05);FT3、FT4、TT3、TT4与出生体重呈正相关(P<0.05),TSH与出生体重呈负相关(P<0.05)。结论 7日龄早产儿甲状腺功能受胎龄、出生体重等因素影响;7日龄早产儿甲状腺功能参考值范围应基于胎龄及出生体重建立。

关键词：甲状腺功能影响因素参考值范围胎龄早产儿

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自身抗体检测在自身免疫病中的临床价值

中华检验医学杂志 2020年第4期43卷 391-394页

作者：李波刘爱霞李伯安张江林解放军总医院第五医学中心临床检验医学中心北京100039 解放军总医院第一医学中心风湿科北京100853

自身免疫病是一类由基因和环境因素导致的免疫功能紊乱性疾病,目前,早期诊断、预后评价及疗效评估都存在一定的困难。随着相关研究的深入,越来越多的自身抗体被发现并证实其与自身免疫病的发生发展密切相关,准确的自身抗体检测有助于提... 详细信息

自身免疫病是一类由基因和环境因素导致的免疫功能紊乱性疾病,目前,早期诊断、预后评价及疗效评估都存在一定的困难。随着相关研究的深入,越来越多的自身抗体被发现并证实其与自身免疫病的发生发展密切相关,准确的自身抗体检测有助于提高自身免疫病患者的诊断效率、治疗效果和生活质量。

关键词：自身免疫疾病自身抗体早期诊断临床实验室技术

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肝移植术后卟啉病复发1例报告

临床肝胆病杂志 2020年第11期36卷 2545-2547页

作者：王洪波李丽昕于雁宾孟令展白瑛李晓东孙艳玲刘振文解放军总医院第五医学中心肝脏移植科北京100039 解放军总医院第五医学中心病理科北京100039

卟啉病是一种由于血红素生物合成途径中所需酶的缺陷导致的遗传性和代谢性疾病,其代谢途径中8种酶的缺乏可导致8种亚型卟啉病,多数卟啉病为常染色体显性遗传病,最常见的3种亚型包括:急性间歇性卟啉病、迟发性皮肤卟啉病和红细胞生成性... 详细信息

卟啉病是一种由于血红素生物合成途径中所需酶的缺陷导致的遗传性和代谢性疾病,其代谢途径中8种酶的缺乏可导致8种亚型卟啉病,多数卟啉病为常染色体显性遗传病,最常见的3种亚型包括:急性间歇性卟啉病、迟发性皮肤卟啉病和红细胞生成性原卟啉病(erythropoieticprotoporphyria,EPP)。

关键词：卟啉病红细胞生成性肝移植复发

基于NOD样受体3炎性小体通路对利拉鲁肽在氧化低密度脂蛋白诱导内皮细胞损伤的作用机制研究

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中国全科医学 2025年第5期28卷 601-606页

作者：陈玲徐锐程新春张占英徐红新疆维吾尔自治区人民医院老年医学中心新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830001

背景动脉粥样硬化是世界范围内引起心脑血管疾病最主要的原因,炎症是目前研究热点,其中NOD样受体3(NLRP3)是研究最为深入的炎症小体。胰高糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂有抗动脉粥样硬化作用,具体机制尚不明确。目的研究利拉鲁肽通过拮抗... 详细信息

背景动脉粥样硬化是世界范围内引起心脑血管疾病最主要的原因,炎症是目前研究热点,其中NOD样受体3(NLRP3)是研究最为深入的炎症小体。胰高糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂有抗动脉粥样硬化作用,具体机制尚不明确。目的研究利拉鲁肽通过拮抗氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的内皮细胞损伤的作用机制。方法2022-03-25—05-19培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),取HUVEC加空白血清作为对照组,100μg/mL的ox-LDL干预HUVEC 48 h作为模型组,100μg/mL的ox-LDL干预HUVEC 24 h后分别加入100、200、400 nmol/L利拉鲁肽处理24 h作为利拉鲁肽低浓度组、利拉鲁肽中浓度组、利拉鲁肽高浓度组。CCK-8法计算细胞增殖率。通过扫描电镜观察焦亡细胞形态。检测乳酸脱氢酶(LDH)活力。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白介素(IL)-1β、IL-18表达水平。蛋白质免疫印迹试验(Western blot)检测NLRP3、接头蛋白凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)、焦亡执行蛋白(GSDMD)、N端结构域的焦亡执行蛋白(N-GSDMD)表达水平。结果模型组、利拉鲁肽低浓度组和利拉鲁肽中浓度组细胞增殖率低于对照组,利拉鲁肽低浓度组、利拉鲁肽中浓度组、利拉鲁肽高浓度组细胞增殖率高于模型组(P中浓度组、利拉鲁肽高浓度组细胞焦亡情况明显改善。模型组、利拉鲁肽低浓度组LDH活力高于对照组,利拉鲁肽低浓度组、利拉鲁肽中浓度组、利拉鲁肽高浓度组低于模型组(P中浓度组、利拉鲁肽高浓度组IL-1β表达水平低于模型组(P中浓度组、利拉鲁肽高浓度组IL-18表达水平低于模型组(P中浓度组NLRP3、ASC表达水平低于模型组,利拉鲁肽高浓度组NLRP3、ASC、Caspase-1表达水平低于模型组(P硬化作用。

关键词：动脉粥样硬化利拉鲁肽内皮细胞氧化低密度脂蛋白 NOD样受体3

慢性HBV感染重叠非酒精性脂肪性肝病临床与基础研究的现状及展望

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临床肝胆病杂志 2021年第7期37卷 1489-1494页

作者：蒋丽娜李玮赵景民解放军总医院第五医学中心北京100039

慢性乙型肝炎病毒感染(CBI)与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是世界范围内慢性肝病常见的两大病因,CBI重叠或合并NAFLD(Co-CBI&NAFLD)的情况较普遍。Co-CBI&NAFLD两者的相互影响作用,尤其是NAFLD对慢性乙型肝炎(CHB)疾病进展、抗病毒疗效及... 详细信息

慢性乙型肝炎病毒感染(CBI)与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是世界范围内慢性肝病常见的两大病因,CBI重叠或合并NAFLD(Co-CBI&NAFLD)的情况较普遍。Co-CBI&NAFLD两者的相互影响作用,尤其是NAFLD对慢性乙型肝炎(CHB)疾病进展、抗病毒疗效及结局的影响作用尚存在争议。现有的Co-CBI&NAFLD临床与基础研究结果显示,NAFLD能够一定程度上抑制HBV DNA复制,表现为血清HBV DNA载量相对较低,并可能增加慢性CHB患者血清HBsAg转阴率;基于临床前瞻性或回顾性队列研究显示,Co-CBI&NAFLD较单纯CHB肝纤维化进展呈加快趋势,乃至肝硬化及HCC发生率亦呈增加态势;Co-CBI/NAFLD组织学上两者病变并存,各自特征性病变鉴别困难。目前Co-CBI&NAFLD的自然史、发病机制尚不清楚,其病理学特征尚待确认,NAFLD对CHB疾病进程的影响作用,尤其是对抗病毒疗效的影响及疾病结局尚缺乏高等级的循证医学证据,国内外尚无Co-CBI&NAFLD诊疗或管理指南。对上述问题的解决,无疑将有助于加深对Co-CBI&NAFLD的理解与认识,规范并提高临床诊疗或管理效果,降低相关终末期肝病的发生率和病死率。

关键词：乙型肝炎病毒乙型肝炎,慢性非酒精性脂肪性肝病