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热打击单核细胞外泌体高迁移率族蛋白B1对内皮细胞炎症的作用

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解放军医学杂志 2023年第6期48卷 670-675页

作者：张明杨经文李悦施学智李华楚童华生广州医科大学附属第六医院/清远市人民医院重症医学科一区广东清远511500 南部战区总医院重症医学科/解放军热区损伤与组织修复重点实验室广东广州510010

目的观察热打击单核细胞外泌体高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对内皮细胞炎症的作用。方法制备中暑大鼠模型,将大鼠分为对照组(n=6)与中暑组(n=6),分离单核细胞提取外泌体并进行鉴定;对外泌体蛋白进行质谱分析并采用注释数据库进行功能描述;采... 详细信息

目的观察热打击单核细胞外泌体高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对内皮细胞炎症的作用。方法制备中暑大鼠模型,将大鼠分为对照组(n=6)与中暑组(n=6),分离单核细胞提取外泌体并进行鉴定;对外泌体蛋白进行质谱分析并采用注释数据库进行功能描述;采用Western blotting及酶联免疫吸附法(ELISA)分别验证中暑大鼠及患者单核细胞来源外泌体HMGB1的表达变化;将脐静脉内皮细胞(HUVECs)分为对照组、中暑组以及中暑+丙酮酸乙酯(ethyl pyruvate,EP)组,分别添加来自对照组、中暑组大鼠外周血单核细胞上清中提取的外泌体及EP,采用RT-qPCR及Western blotting检测内皮细胞NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)及白细胞介素-1β(IL-1β)的表达水平;采用ELISA检测健康志愿者及中暑患者外泌体NLRP3及IL-1β的表达水平。结果与对照组比较,中暑组大鼠单核细胞来源外泌体数量(×104/单核细胞)明显增多(11.24±2.66 vs.1.52±0.21,P<0.001)。蛋白质组学分析表明中暑组外泌体HMGB1表达较对照组上调18.63倍(P<0.001),且在NOD样受体等信号通路富集。Westernblotting检测结果显示,中暑组大鼠外泌体内含HMGB1表达量较对照组明显升高(4.13±0.22 vs.1.00±0.15,P<0.001)。ELISA检测结果显示,中暑组患者外泌体内含HMGB1水平(ng/ml)较对照组明显升高(0.29±0.11 vs.0.12±0.04,P=0.006)。RT-qPCR及Western blotting检测结果显示,与对照组比较,中暑组内皮细胞中NLRP3及IL-1β的mRNA和蛋白表达水平均明显升高,与中暑组比较,中暑+EP组NLRP3及IL-1β的mRNA和蛋白表达水平则明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论热打击可提高单核细胞来源外泌体HMGB1水平,并可能通过HMGB1介导内皮细胞的炎症反应。

关键词：中暑外泌体单核细胞高迁移率族蛋白B1

CD200调节重症中暑大鼠肺部炎症反应的信号通路初探

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解放军医学杂志 2020年第3期45卷 265-269页

作者：陈荣琳曹枫符少平彭怀力施学智梁泳欣童华生深圳市龙岗中心医院重症医学科深圳518116 解放军南部战区总医院重症医学科/解放军热区损伤与组织修复重点实验室广州5100010

目的观察CD200预处理对重症中暑大鼠炎性因子和肺组织NF-κB表达的影响,探索NF-κB在CD200抑制重症中暑大鼠肺部炎症反应中的作用。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组(n=8)、重症中暑组(HS组,n=16)、CD200预处理组(CD200组,n=16)... 详细信息

目的观察CD200预处理对重症中暑大鼠炎性因子和肺组织NF-κB表达的影响,探索NF-κB在CD200抑制重症中暑大鼠肺部炎症反应中的作用。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组(n=8)、重症中暑组(HS组,n=16)、CD200预处理组(CD200组,n=16)。HS组、CD200组分别注射等体积生理盐水和CD200融合蛋白,然后经热打击制备大鼠重症中暑模型;对照组饲养于(22.0±1.0)℃环境。造模后60 min检测大鼠肺组织NF-κB/p65 mRNA表达,测定血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)水平,观察肺组织病理形态学改变,记录大鼠存活时间。结果 HS组和CD200组大鼠肺组织NF-κB/p65 mRNA表达水平明显高于对照组(P重症中暑大鼠的炎症反应,这一作用可能涉及NF-κB的活化抑制及炎性因子表达降低。

关键词：重症中暑 CD200 NF-κB 炎症反应细胞因子

中性粒细胞侧向荧光强度对重症中暑合并弥散性血管内凝血的早期诊断价值

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解放军医学杂志 2023年第4期48卷 431-436页

作者：陈文达彭娜刘帅童华生唐柚青刘靖华苏磊南部战区总医院急诊科广东广州510010 广东药科大学研究生院广东广州510080 南方医科大学基础医学院病理生理学教研室/广东省蛋白质组学重点实验室广东广州510515 南部战区总医院重症医学科/全军热区创伤救治与组织修复重点实验室广东广州510010

目的探讨中性粒细胞侧向荧光(NE-SFI)强度对重症中暑(HS)合并弥散性血管内凝血(DIC)的早期诊断价值。方法选取南部战区总医院2017年1月1日-2018年12月31日收治的HS患者34例,依据国际血栓与止血学会(ISTH)发布的显性DIC评分标准,将34... 详细信息

目的探讨中性粒细胞侧向荧光(NE-SFI)强度对重症中暑(HS)合并弥散性血管内凝血(DIC)的早期诊断价值。方法选取南部战区总医院2017年1月1日-2018年12月31日收治的HS患者34例,依据国际血栓与止血学会(ISTH)发布的显性DIC评分标准,将34例患者分为HS未合并DIC组(DIC评分0.05)。HS合并DIC组3 h内核心温度降至38.5℃以下患者比例、GCS评分低于HS未合并DIC组,谷丙转氨酶(ALT)、肌酐、ISTH评分、并发多器官功能障碍综合征(MODS)比例高于HS未合并DIC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。发病第1~3天,HS合并DIC组的NE-SFI值均高于HS未合并DIC组,差异有统计学意义(P<0.001)。HS合并DIC组患者的血清dsDNA、MPO、CitH3水平[分别为(372.93±135.77) ng/ml、(108.32±38.58) pg/ml、(600.18±183.74) ng/μl]明显高于HS未合并DIC组[分别为(30.14±7.01) ng/ml、(56.39±34.64) pg/ml、(320.26±89.60) ng/μl],差异有统计学意义(P<0.001)。Spearman相关分析显示:发病第1~3天的NE-SFI值与发病第1天的dsDNA、MPO、CitH3水平均呈正相关(P<0.05或P<0.01)。ROC曲线分析显示,发病第2天的NE-SFI值对HS合并DIC的诊断效能最高,其AUC为0.921(95%CI0.820~1.000,P<0.001)。结论 NE-SFI可作为早期诊断HS并发DIC的有效指标。

关键词：重症中暑弥散性血管内凝血中性粒细胞侧向荧光多器官功能障碍综合征

中性粒细胞侧向荧光强度对重症中暑相关弥散性血管内凝血的早期诊断价值

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解放军医学杂志 2022年

作者：陈文达彭娜刘帅童华生唐柚青刘靖华苏磊广东药科大学研究生院南部战区总医院急诊科南方医科大学基础医学院病理生理学教研室/广东省蛋白质组学重点实验室南部战区总医院重症医学科/全军热区创伤救治与组织修复重点实验室

目的　探讨中性粒细胞侧向荧光(NE-SFL)对重症中暑(HS)合并弥散性血管内凝血(DIC)的早期诊断价值。方法　选取南部战区总医院2017年1月1日—2018年12月31日收治的HS患者34例，依据国际血栓与止血学会(ISTH)发布的显性DIC评分标准，将本...

目的　探讨中性粒细胞侧向荧光(NE-SFL)对重症中暑(HS)合并弥散性血管内凝血(DIC)的早期诊断价值。方法　选取南部战区总医院2017年1月1日—2018年12月31日收治的HS患者34例，依据国际血栓与止血学会(ISTH)发布的显性DIC评分标准，将本组34例患者分为HS未合并DIC组(DIC评分0.05)。HS合并DIC组的3 h内核心温度降至38.5℃以下患者比例、GCS评分低于HS未合并DIC组，谷丙转氨酶(ALT)、肌酐、ISTH评分、并发多脏器功能衰竭综合征(MODS)比例高于HS未合并DIC组，差异均有统计学意义(P<0.05)。发病第1～3天，HS合并DIC组的NE-SFL值均高于HS未合并DIC组，差异有统计学意义(P＜0.001)。与HS未合并DIC组患者的血清dsDNA、MPO、CitH3水平[分别为(30.14±7.01)ng/mL、(56.39±34.64)pg/mL、(320.26±89.60)ng/μL]相比，HS合并DIC组患者的血清dsDNA、MPO、CitH3水平[分别为(372.93±135.77)ng/mL、(108.32±38.58)pg/mL、(600.18±183.74)ng/μL]明显升高，差异有统计学意义(P<0.001)。Spearman相关分析显示：第1～3天的NE-SEL水平与第1天的dsDNA、MPO、CitH3水平均呈正相关。ROC曲线分析显示，第2天的NE-SFL值对HS相关DIC的诊断效能最高，其AUC为0.921(95%CI 0.820～1.000，P<0.001)。结论　NE-SFL可作为早期诊断HS并发DIC发生的有效指标。

关键词：

体重指数对脓毒症患者预后的影响:基于大型临床数据库MIMIC-Ⅲ的回顾性分析

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解放军医学杂志 2021年第2期46卷 129-135页

作者：王丹妮华黎电潘志国文强苏磊广东药科大学附属第一医院重症医学科广州510080 解放军南部战区总医院重症医学科/全军热区创伤救治与组织修复重点实验室广州510010

目的探讨体重指数(BMI)与脓毒症患者短期和长期临床结局的关系。方法回顾性分析2001-2012年在医学信息市场重症监护(MIMIC-Ⅲ)数据库中注册的贝斯以色列迪康医疗中心(美国马萨诸塞州波士顿)的5571例脓毒症患者的临床资料。采用Cox比例... 详细信息

目的探讨体重指数(BMI)与脓毒症患者短期和长期临床结局的关系。方法回顾性分析2001-2012年在医学信息市场重症监护(MIMIC-Ⅲ)数据库中注册的贝斯以色列迪康医疗中心(美国马萨诸塞州波士顿)的5571例脓毒症患者的临床资料。采用Cox比例风险回归模型评估脓毒症患者BMI与30 d病死率、1年病死率的关系。结果根据BMI将患者进行分类[体重不足:336例(6.0%);正常体重:1752例(31.4%);超重:1563例(28.1%);肥胖:1920例(34.5%)],各类患者30 d病死率分别为42.3%、36.6%、32.2%、29.6%(P<0.001),1年病死率分别为64.6%、56.8%、52.5%、46.7%(P<0.001),院内病死率分别为35.4%、34.3%、31.6%、29.9%(P=0.018)。Cox比例风险回归模型分析显示,与正常体重患者相比,在30 d和1年内的死亡风险体重不足患者分别增高了13%和24%,超重患者分别降低了17%和14%,肥胖患者分别降低了22%和21%。结论超重或肥胖脓毒症患者入院后30 d和1年生存率高于体重不足及体重正常的脓毒症患者。

关键词：医学信息市场重症监护大数据分析脓毒症肥胖

HMGB1与重症中暑大鼠凝血紊乱的相关性分析

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解放军医学杂志 2020年第3期45卷 292-297页

作者：余保军王黎彭娜施学智陆勇梁泳欣童华生苏磊南方医科大学附属深圳宝安医院重症医学科广东深圳518101 解放军南部战区总医院重症医学科/全军热区创伤救治与组织修复重点实验室广州510010

目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)与重症中暑大鼠凝血紊乱的相关性。方法将48只SD雄性大鼠按照随机数字表法分为假加热对照组(Sham组)和重症中暑复温0 h组(HS-0 h组)、3 h组(HS-3 h组)、6 h组(HS-6 h组)、9 h组(HS-9 h组)、12 h组(HS-1... 详细信息

目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)与重症中暑大鼠凝血紊乱的相关性。方法将48只SD雄性大鼠按照随机数字表法分为假加热对照组(Sham组)和重症中暑复温0 h组(HS-0 h组)、3 h组(HS-3 h组)、6 h组(HS-6 h组)、9 h组(HS-9 h组)、12 h组(HS-12 h组)、18 h组(HS-18 h组)、24 h组(HS-24 h组),每组6只。Sham组大鼠置于温度(25.0±0.5)℃、湿度50%±5%的环境中,其余各组大鼠置于高温气候人工培养箱[温度(39.5±0.2)℃,湿度60%±5%]内,制备重症中暑大鼠模型,以直肠温度达43℃作为重症中暑标准。大鼠中暑后置于室温环境自然降温,分别于复温0、3、6、9、12、18、24 h采集血液标本。采用凝固法检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fib)水平;ELISA法测定血浆HMGB1及凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)水平;采用广义相加模型分析HMGB1与各凝血指标的相关性。结果HMGB1与PT、TAT均呈线性关系且明显相关(P0.05)。结论HMGB1与重症中暑大鼠凝血紊乱明显相关,其在中暑凝血紊乱中的作用机制值得深入研究。

关键词：高迁移率族蛋白B1 重症中暑凝血紊乱

枢椎棘突椎板螺钉固定技术的建立与初步临床应用

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中华骨与关节外科杂志 2023年第5期16卷 408-413页

作者：马向阳邹小宝付索超马仁财陈钧麟杨浩志邓琛府涂强王建华章凯夏虹中国人民解放军南部战区总医院脊柱外科广州510010 全军创伤骨科研究所广州510010 全军热区创伤救治与组织修复重点实验室广州510010

目的:介绍枢椎棘突椎板螺钉固定技术,并评价其初步临床应用效果。方法:建立枢椎棘突椎板螺钉固定技术,并应用于2022年1—12月收治的5例寰枢椎脱位和颅底凹陷症患者。采用日本骨科协会(JOA)评分评估患者神经功能状态,测量寰齿前间隙(ADI... 详细信息

目的:介绍枢椎棘突椎板螺钉固定技术,并评价其初步临床应用效果。方法:建立枢椎棘突椎板螺钉固定技术,并应用于2022年1—12月收治的5例寰枢椎脱位和颅底凹陷症患者。采用日本骨科协会(JOA)评分评估患者神经功能状态,测量寰齿前间隙(ADI)评估寰枢椎复位情况,测量脊髓有效空间(SAC)评估脊髓压迫情况。术后及随访期间行X线、CT检查评价寰枢椎序列、枢椎棘突椎板螺钉位置、整体内固定及植骨融合情况。结果:所有患者手术均顺利完成,1例行后路寰枢椎钉棒固定融合术,4例行后路枕颈钉棒固定融合术,平均手术时间(134.6±25.2)min,平均中出血量(150.0±50.0)mL。每例患者均在枢椎椎弓根狭小的一侧成功置入1枚枢椎棘突椎板螺钉,对侧置入枢椎椎弓根螺钉、椎板螺钉或峡部螺钉。枢椎棘突椎板螺钉与寰椎螺钉和枕骨固定板的连接方便,钉棒无需特殊弯棒,螺钉术中复位过程中无松动,未出现脊髓神经及血管损伤等并发症。术后患者临床症状明显缓解,JOA评分由(11.8±4.4)分提高至(14.2±2.8)分(t=-2.954,P=0.042)。X线及CT示寰枢椎序列恢复良好,ADI由(4.7±2.4)mm减小至(1.5±0.6)mm(t=3.122,P=0.035),5枚枢椎棘突椎板螺钉位置满意,整体内固定、植骨融合良好。MRI示脊髓减压充分,SAC由(8.5±3.4)mm增大至(12.5±3.7)mm(t=-2.808,P=0.048)。1例患者出现取髂骨处切口渗液,对症处理后甲级愈合。结论:枢椎棘突椎板螺钉固定技术上可行,应用于寰枢椎脱位和颅底凹陷治疗的初步临床效果满意,可作为枢椎椎弓根螺钉固定的替代技术。

关键词：枢椎棘突椎板螺钉寰枢椎脱位后路钉棒内固定系统后路复位固定术

血管内降温在重症中暑临床救治中的作用研究进展

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解放军医学杂志 2021年第5期46卷 525-530页

作者：夏诗语林国东苏磊广东药科大学临床医学院广州510080 解放军南部战区总医院重症医学科/全军热区创伤救治与组织修复重点实验室广州510010

重症中暑(HS)指在高温、高湿且空气流通缓慢的环境下或剧烈运动后导致患者核心体温高于40.5℃,同时合并脏器功能损伤的一种疾病,其发病率及致死率均较高。早期诊断、早期降温可明显改善患者预后,提高生存率,减少并发症。重症中暑的降温... 详细信息

重症中暑(HS)指在高温、高湿且空气流通缓慢的环境下或剧烈运动后导致患者核心体温高于40.5℃,同时合并脏器功能损伤的一种疾病,其发病率及致死率均较高。早期诊断、早期降温可明显改善患者预后,提高生存率,减少并发症。重症中暑的降温措施可分为血管外降温及血管内降温,血管外降温主要为体表物理降温,血管内降温主要用于不适宜物理降温或因资源短缺导致诊治不及时的患者,尤其对重症中暑降温效果较好,能明显改善患者预后。目前临床上常用的血管内降温措施主要包括血管内输注降温、血管内温度管理装置降温及持续血液净化等。该文主要从血管内降温的类别、机制、临床应用及优缺点等方面进行综述。

关键词：重症中暑物理降温致伤机制血管内降温

热打击诱导肝细胞释放的外泌体生物学功能及其致肝损伤作用分析

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解放军医学杂志 2020年第3期45卷 277-284页

作者：李悦祝鑫桃张明梁泳欣施学智童华生解放军南部战区总医院重症医学科/解放军热区损伤与组织修复重点实验室广州510010 广州医科大学第六附属医院/清远市人民医院重症医学科广东清远511500

目的探讨中暑诱导肝细胞释放外泌体的生物学功能及其对重症中暑肝损伤的作用。方法将人肝癌细胞系HepG2细胞分为对照组与热打击组,提取上清经超高速离心法分离外泌体。透射电子显微镜(TEM)观察外泌体形态,纳米颗粒追踪分析法(NTA)检测... 详细信息

目的探讨中暑诱导肝细胞释放外泌体的生物学功能及其对重症中暑肝损伤的作用。方法将人肝癌细胞系HepG2细胞分为对照组与热打击组,提取上清经超高速离心法分离外泌体。透射电子显微镜(TEM)观察外泌体形态,纳米颗粒追踪分析法(NTA)检测外泌体直径分布,Western blotting检测外泌体特征性标记物表达。通过等重同位素多标签相对定量蛋白质组学(iTRAQ)方法分析对照组与热打击组肝细胞外泌体中蛋白质的组成差异,采用KEGG通路对差异蛋白质集合进行生物信息学分析。外泌体刺激受体肝细胞实验将受体肝细胞分为对照组、正常刺激组、热打击刺激组(10μg/5 ml,24 h)、热打击组及热打击预处理组,检测各组谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)水平。外泌体体内回输刺激实验将小鼠分为对照组、正常输注组、热打击输注组(40μg/只)、热打击组及热打击预处理组,9 h后处死,检测其血清ALT、AST、LDH水平,以评价肝组织损伤情况。结果肝细胞分泌的微粒在TEM下呈双层膜状包裹的圆形或椭圆形结构,NTA检测显示其直径为90~150 nm,Western blotting检测显示其高表达CD9、CD63和CD81,具有外泌体的特征。热打击组肝细胞释放的外泌体数量明显高于对照组[(8.46±1.38)×10~9/mlvs.(0.66±0.16)×10~9/ml,t=5.605,P=0.005]。iTRAQ分析显示,热打击明显改变了肝细胞外泌体的蛋白质表达谱,KEGG通路分析显示,参与坏死性凋亡途径、PI3K-Akt信号传导途径、抗原加工和呈递途径、凋亡途径及NOD样受体等信号通路的蛋白质富集。外泌体刺激受体肝细胞实验中,热打击刺激组受体肝细胞上清ALT、AST、LDH水平明显升高,热打击预处理组肝细胞上清ALT、AST、LDH水平明显低于热打击组(P实验中,热打击输注组小鼠血清ALT、AST、LDH水平明显升高,热打击预处理组肝细胞血清ALT、AST、LDH水平明显低于热打击组(P损伤具有诱导作用。

关键词：重症中暑热打击肝细胞外泌体肝损伤