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免疫酶染色试验及双面胶纸条法环卵沉淀试验诊断血吸虫病的比较

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1989年第4期7卷 263-266页

作者：李允鹤胡永德许文美杨光堡殷水龙龚唯朱家勇吴宗泉骆伟苏州医学院寄生虫学教研室苏州医学院寄生虫学专业

应用免疫酶染色试验(IEST)及双面胶纸条法COPT(DGS-COPT),并以常规法DOPT(CV-COPT)为对照,采用单盲法比较检测120例血吸虫病人。120例经吡喹酮治疗后3～4年及≥5年的血吸虫病人和120名健康人的血清。三种方法的敏感性和特异性:IEST分别... 详细信息

应用免疫酶染色试验(IEST)及双面胶纸条法COPT(DGS-COPT),并以常规法DOPT(CV-COPT)为对照,采用单盲法比较检测120例血吸虫病人。120例经吡喹酮治疗后3～4年及≥5年的血吸虫病人和120名健康人的血清。三种方法的敏感性和特异性:IEST分别为91.7和95.8％;两种COPT分别为81.7～82.5和96.7～97.5％,无显著性差异。治疗后3～8年血吸虫病人的阴转率分别为70.8％(IEST)、80.8%(DGS-COPT)和81.7%(CV-COPT)。表明IEST的诊断效果显著地高于两种COPT,并可弥补COPT漏检病人的缺陷。

关键词：免疫酶染法血吸虫病环卵沉淀

间日疟原虫对磺胺多辛-乙胺嘧啶抗药性相关基因的研究进展

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中国血吸虫病防治杂志 2019年第3期31卷 346-352页

作者：邹其成陆凤扬州大学医学院寄生虫学教研室

疟疾是一种严重威胁人类生命健康的寄生虫病。磺胺多辛-乙胺嘧啶可用于儿童和孕妇疟疾间歇性预防性治疗,同时其也作为以青蒿素及其衍生物为基础的联合疗法的一种复方成分而被用于疟疾治疗。恶性疟原虫对磺胺多辛-乙胺嘧啶产生抗药性与... 详细信息

疟疾是一种严重威胁人类生命健康的寄生虫病。磺胺多辛-乙胺嘧啶可用于儿童和孕妇疟疾间歇性预防性治疗,同时其也作为以青蒿素及其衍生物为基础的联合疗法的一种复方成分而被用于疟疾治疗。恶性疟原虫对磺胺多辛-乙胺嘧啶产生抗药性与编码二氢叶酸还原酶(DHPS)和二氢蝶酸合酶(DHFR)的基因发生点突变相关,而药物选择压力亦可导致间日疟原虫上述两个基因发生突变。本文就抗疟药磺胺多辛-乙胺嘧啶的发现、应用、作用和间日疟原虫对其抗性机制及抗性相关基因研究进展作一综述,旨在为抗疟策略的制定提供参考依据。

关键词：间日疟原虫磺胺多辛-乙胺嘧啶二氢叶酸还原酶二氢蝶酸合酶抗药性

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保护性免疫大鼠结支睾吸虫后吡喹酮化疗效果

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2000年第2期18卷 98-102页

作者： Quan,FS Lee,JS 高丽大学医学院寄生虫学教研室

目的研究吡喹酮与宿主保护性对华支睾吸虫感染的协同作用。方法用粗成虫抗原９ＡＷＡｇ）和排泄分泌抗的（ＥＳＡｇ）免疫大鼠或感染２０条华支睾吸虫囊蚴获得保护性免疫，用５０俱结支睾吸虫囊蚴感染大鼠，用亚致死量吡喹酮（５０... 详细信息

目的研究吡喹酮与宿主保护性对华支睾吸虫感染的协同作用。方法用粗成虫抗原９ＡＷＡｇ）和排泄分泌抗的（ＥＳＡｇ）免疫大鼠或感染２０条华支睾吸虫囊蚴获得保护性免疫，用５０俱结支睾吸虫囊蚴感染大鼠，用亚致死量吡喹酮（５０ｍｇ／ｋｇ）治疗，以回收虫体数观察疗效。统计学上显著性差异用ＰＣ－ＳＡＳ系统的ＡＮＯＶＡ和ＮｐａｒｌｗａｙＫｒｕｓｋａｌ－Ｗａｌｌｉｓ检验法。结果（１）在对照组，ＥＳＡｇ免疫接

关键词：华支睾吸虫吡喹酮化疗效果保护性免疫

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日本血吸虫感染小鼠组织内的抗原、抗体定位

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1991年第2期9卷 118-121页

作者：曹岷李允鹤苏州医学院寄生虫学教研室

应用间接荧光抗体试验(IFAT)检测小鼠感染血吸虫后肝、肠内抗原,结果感染后4wk未检出抗原,6wk抗原水平显著升高,10—12wk达到高峰、其几何均数倒数分别高达512和483。组织内虫卵肉芽肿的病变,亦最为显著,而肝内虫卵肉芽肿的直径显著大... 详细信息

应用间接荧光抗体试验(IFAT)检测小鼠感染血吸虫后肝、肠内抗原,结果感染后4wk未检出抗原,6wk抗原水平显著升高,10—12wk达到高峰、其几何均数倒数分别高达512和483。组织内虫卵肉芽肿的病变,亦最为显著,而肝内虫卵肉芽肿的直径显著大于肠内的。用直接荧光抗体试验(DFAT)及IFAT测定小鼠感染血吸虫后肝、肠组织内抗体,结果在感染6wk后,三种抗体(IgG、IgM和IgA)均达低水平,10—12wk均显著上升,而肝、肠组织内IgG抗体则非常显著地高于IgM和IgA的。提示血吸虫虫卵肉芽肿的免疫应答,主要是IgG抗体。

关键词：日本血吸虫虫卵肉芽肿抗体

马来丝虫感染沙鼠治疗前后血清抗体水平的动态研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1991年第1期9卷 61-64页

作者：吴邗李允鹤苏州医学院寄生虫学教研室

应用马来丝虫和牛丝虫(Setaria cervi)成虫冰冻切片抗原作间接荧光抗体试验(IFAT)及免疫酶染色试验(IEST),均能显示马来丝虫感染沙鼠治疗前后血清IgG及IgM水平的消长情况。两者高峰分别在感染后12～14wk及2～6wk。IgG水平与感染时间长... 详细信息

应用马来丝虫和牛丝虫(Setaria cervi)成虫冰冻切片抗原作间接荧光抗体试验(IFAT)及免疫酶染色试验(IEST),均能显示马来丝虫感染沙鼠治疗前后血清IgG及IgM水平的消长情况。两者高峰分别在感染后12～14wk及2～6wk。IgG水平与感染时间长短有密切关系,但与感染度无显著相关。感染沙鼠治后6个月抗体下降。认为用同种和异种抗原作IFAT及IEST,对感染沙鼠均具有诊断和考核疗效的价值。

关键词：免疫诊断丝虫感染沙鼠

同种和异种丝虫成虫抗原免疫动物后血清特异性抗体动态的研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1990年第3期8卷 210-213页

作者：吴邗李允鹤苏州医学院寄生虫学教研室

应用马来丝虫和牛丝虫成虫冰冻切片抗原作间接免疫荧光抗体试验(IFAT)和免疫酶染色试验(IEST)检测家兔经3种抗原免疫后不同时期血清抗体IgG水平,均能显示免疫动物特异性抗体水平的动态变化。IgG水平高峰(GMRT为76.11～861.08)均在动物... 详细信息

应用马来丝虫和牛丝虫成虫冰冻切片抗原作间接免疫荧光抗体试验(IFAT)和免疫酶染色试验(IEST)检测家兔经3种抗原免疫后不同时期血清抗体IgG水平,均能显示免疫动物特异性抗体水平的动态变化。IgG水平高峰(GMRT为76.11～861.08)均在动物免疫后第4wk,在第8wk时,均下降至低水平(GMRT为4.00～32.00);加强免疫后1wk时,又上升至高水平(GMRT为20.11～181.02)。

关键词：丝虫抗原抗体免疫

单性和双性日本血吸虫感染兔特异性抗体的动态研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1990年第4期8卷 277-279页

作者：朱家勇李允鹤苏州医学院寄生虫学教研室

血吸虫病鼠肝组织内虫卵及血吸虫成虫冰冻切片抗原免疫酶染色试验(TEFS-IEST及AWFS-IEST)均能显示单性和双性日本血吸虫感染家兔特异性抗体的动态,滴度高峰均在感染后10wk。特异性抗体水平与感染度及感染期密切相关,抗虫卵抗体水平高于... 详细信息

血吸虫病鼠肝组织内虫卵及血吸虫成虫冰冻切片抗原免疫酶染色试验(TEFS-IEST及AWFS-IEST)均能显示单性和双性日本血吸虫感染家兔特异性抗体的动态,滴度高峰均在感染后10wk。特异性抗体水平与感染度及感染期密切相关,抗虫卵抗体水平高于抗成虫者,双性感染抗体水平高于单性感染者,TEFS-IEST的检测敏感性显著高于AWFS-IEST及双面胶纸条法环卵沉淀试验。

关键词：免疫酶技术血清学诊断血吸虫病

弓形虫新基因wx2表位疫苗免疫小鼠的保护研究

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生物化学与生物物理进展 2008年第9期35卷 1051-1058页

作者：谭逵张琼范久波谢荣华蒋立平吴翔舒衡平中南大学湘雅医学院寄生虫学教研室长沙410078

采用生物信息学方法对弓形虫新基因wx2进行表位分析预测,PCR扩增基因中编码2个表位的片段W2b和W2a,成功构建新基因的单表位疫苗质粒pcDNA3-W2b、pcDNA3-W2a和双表位疫苗pcDNA3-W2b2a,接种小鼠,观察表位疫苗的免疫保护作用.将表位疫苗分... 详细信息

采用生物信息学方法对弓形虫新基因wx2进行表位分析预测,PCR扩增基因中编码2个表位的片段W2b和W2a,成功构建新基因的单表位疫苗质粒pcDNA3-W2b、pcDNA3-W2a和双表位疫苗pcDNA3-W2b2a,接种小鼠,观察表位疫苗的免疫保护作用.将表位疫苗分别通过肌肉注射免疫小鼠,对照组注射pcDNA3空质粒.ELISA法检测血清IgG抗体水平,取脾细胞用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群.各组小鼠末次免疫后第4周每只小鼠经腹腔注射弓形虫速殖子500个,观察小鼠的生存时间.结果显示,pcDNA3-W2a2b双表位疫苗组小鼠血清IgG抗体水平显著高于对照组(P<0.05),且pcDNA3-W2a2b双表位疫苗组小鼠脾细胞CD4+T与CD8+T淋巴细胞比值明显低于两单表位疫苗组,pcDNA3-W2a2b双表位疫苗组小鼠存活时间明显长于两单表位疫苗组(P<0.05).实验结果表明,弓形虫新基因wx2表位疫苗能够诱导小鼠产生抗弓形虫感染保护性免疫,并且弓形虫pcDNA3-W2b2a双表位疫苗的免疫保护性优于pcDNA3-W2b、pcDNA3-W2a两单表位疫苗.

关键词：弓形虫表位疫苗重组质粒 B细胞表位保护力

周期型马来丝虫复合基因重组质粒和相应表达蛋白的免疫学研究

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中华地方病学杂志 2014年第3期33卷 280-285页

作者：王慧方政徐倩陆施娟钱一言徐怿琳方浩徐邦生南通大学医学院寄生虫学教研室 226001

目的构建周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂／3-磷酸甘油醛脱氢酶（BmcPI／，BmGAPDH）复合基因重组质粒，并转染人宫颈癌细胞（Hela）进行重组蛋白表达。将重组质粒和相应表达蛋白进行免疫学研究比较。为研制新型的抗丝虫基因工程疫... 详细信息

目的构建周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂／3-磷酸甘油醛脱氢酶（BmcPI／，BmGAPDH）复合基因重组质粒，并转染人宫颈癌细胞（Hela）进行重组蛋白表达。将重组质粒和相应表达蛋白进行免疫学研究比较。为研制新型的抗丝虫基因工程疫苗提供理论及实验依据。方法扩增周期型马来丝虫目的编码基因。将目的基因片段和载体分别双酶切后进行连接，构建复合基因重组质粒pcDNA3．1（＋）-BmCPI/BmGAPDH，鉴定后转染Hela细胞，以G418筛选转染细胞，进而通过RT-PCR和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）鉴定G418筛选后的单克隆抗性细胞株。亲和层析纯化所表达的重组蛋白并通过免疫蛋白印迹法（Westernblot）对纯化的重组蛋白进行生物学鉴定。60只BALB／c小鼠分5组，每组12只，第2、4、6周分别免疫1次。磷酸盐缓冲液（PBS）对照组为注射PBS100μl；空质粒／CpG对照组为注射pcDNA3．1100μg和CpG30μg；复合重组质粒／CpG组为注射pcDNA3．1-BmCPI／BmGAPDH100μg和CpG30μ；复合重组蛋白／CpG组为注射pcDNA3．1-BmCPI／BmGAPDH复合重组蛋白50P-g和CpG30μg；复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组前2次注射pcDNA3．1-BmCPI／BmGAPDH100μg和CpG30μg；后1次注射pcDNA3．1-BmCPI／BmGAPDH复合重组蛋白50μ和CpG30μg。用RT—PCR方法检测肌肉组织内目的基因；用酶联免疫吸附试验（ELISA）、特异性增殖试验（MTT法）分别检测免疫小鼠血清抗体效价、T淋巴细胞刺激增殖指数和血清中细胞因子干扰素（INF）-γ、白细胞介素（IL）-4水平。结果复合重组质粒pcDNA3．1（＋）-BmCPI／BmGAPDH免疫小鼠后，从小鼠肌肉组织扩增出目的基因。复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组小鼠免疫4、6周后血清抗体效价（1695．12±1．43、3199．63±1．34）均高于复合重组质粒／CpG组（712．69±1．08、1510．08±1．43，P均〈0．05）和复合重组蛋白／CpG组（800．02±1．34、1510．08±1．43，P均〈0．05）；第6周的复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组小鼠淋巴细胞刺激增殖指数（1．629±0．235）高于复合重组蛋白组（1．248±0．110，P〈0．05）；免疫4、6周后，复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组和复合重组质粒／CpG组小鼠血清IFN-γ水平[（101．660±5．101）、（178．265±7．139）mg／L，（102．067±3．722）、（115．148±6．031）mg／L]均高于复合重组蛋白组[（75．438±2．102）、（82．004±3．777）mg／L，P均〈0．05]；免疫后6周，复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组和复合重组蛋白／CpG组的小鼠血清IL-4水平[（75．385±3．318）、（46．363±3．672）mg／L]均明显高于复合重组质粒／CpG组[（36．691±3．443）mg／L，P均〈0．05）。结论pcDNA3．1-BmCPL／BmGAPDH核酸疫苗和相应蛋白疫苗均可诱导BALB／c小鼠产生特异性体液和细胞免疫应答反应。核酸疫苗-蛋白疫苗联合免疫效果有明显的优势。

关键词：马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂 3-磷酸甘油醛脱氢酶复合基因表达蛋白免疫