检索结果-南通市图书馆

化能自养硫氧化细菌Halothiobacillus diazotrophicus低氧硫氧化特性及其机制

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微生物学报 2024年第11期 4358-4370页

作者：严洪珊林炜铁罗剑飞华南理工大学生物科学与工程学院

【目的】探究Halothiobacillus diazotrophicus LS2在不同氧浓度下的硫氧化特性，并揭示其低氧适应机制。【方法】通过离子色谱测定S2O32-和SO42-浓度，平板稀释涂布法跟踪测定菌体生长情况，转录组测序及生物信息学分析其差异表达基因... 详细信息

【目的】探究Halothiobacillus diazotrophicus LS2在不同氧浓度下的硫氧化特性，并揭示其低氧适应机制。【方法】通过离子色谱测定S2O32-和SO42-浓度，平板稀释涂布法跟踪测定菌体生长情况，转录组测序及生物信息学分析其差异表达基因及相关代谢通路。【结果】菌株LS2在氧含量0.2%-21%的条件下能够进行硫氧化代谢和生长，并且在氧含量高于1.6%的条件下维持较高的硫氧化活性。比较转录组学分析筛选出851个可能与低氧适应相关的差异表达基因，包括表达上调基因464个，表达下调基因387个，其中硫代硫酸盐硫转移酶（thiosulfate sulfurtransferase,TST）、硫氧化酶/还原酶（sulfuroxidase/reductase,SOR）、硫化物:醌氧化还原酶（sulfide:quinone oxidoreductase, SQR）上调表达，Sox酶系下调表达，菌株LS2低氧硫氧化代谢途径可能发生改变。低氧组菌株LS2上调表达cbb3型细胞色素c氧化酶，以增加O2与酶的结合效率，同时上调表达固氮酶基因nifDKH和Fix复合体基因fixA、fixB、fixC、fixX，利用N2、CO2为最终电子受体维持胞内氧化还原平衡。【结论】菌株LS2是一株在低氧环境中仍能维持较高硫氧化活性的硫氧化细菌，SQR、高氧亲和末端氧化酶及固氮酶对其适应低氧环境有重要作用，本研究对丰富低氧硫氧化代谢机制认识有积极意义，为优化含硫废水处理工艺提供一定理论基础。

关键词：低氧适应硫氧化细菌固氮酶末端氧化酶转录组分析

嗜热毁丝菌裂解性多糖单加氧酶TtLPMO9I的酶学性质及其功能研究

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生物技术通报 2024年第2期40卷 289-299页

作者：郑菲杨俊钊牛羽丰李蕊麟赵国柱北京林业大学生物科学与技术学院北京100083

【目的】为挖掘新型裂解性多糖单加氧酶(LPMO)酶资源,探究LPMO在辅助降解纤维素过程中起到的重要作用。【方法】从Thermothelomyces thermophilus基因组中克隆表达了一个新型LPMO酶TtLPMO9I,系统地分析了其序列及结构的进化特征;采用DN... 详细信息

【目的】为挖掘新型裂解性多糖单加氧酶(LPMO)酶资源,探究LPMO在辅助降解纤维素过程中起到的重要作用。【方法】从Thermothelomyces thermophilus基因组中克隆表达了一个新型LPMO酶TtLPMO9I,系统地分析了其序列及结构的进化特征;采用DNS法表征了TtLPMO9I的酶学性质;在反应体系中添加不同浓度的抗坏血酸探究外部电子供体对TtLPMO9I活性的影响;以玉米秸秆和微晶纤维素为底物,通过检测还原糖的生成量计算获得TtLPMO9I与纤维素酶的协同作用效果。【结果】TtLPMO9I在60℃,pH 5.0时表现出最佳酶活力。在60℃孵育12 h后,仍能剩余54%的活性。经pH 6.0-8.0处理12 h后,酶活无损失。添加外部电子供体抗坏血酸使TtLPMO9I的活性提高至184%。在玉米秸秆和微晶纤维素降解过程中,TtLPMO9I与纤维素酶表现出良好的协同作用效果。将50-200μg的TtLPMO9I添加至降解体系中,还原糖产量分别提高了34%-142%和6%-46%。【结论】TtLPMO9I不仅具有良好的温度稳定性和pH稳定性,在木质纤维素的降解过程中也具有突出的作用效果,为工业生产应用提供了潜在的优质酶资源。

关键词：裂解性多糖单加氧酶(LPMO) 异源表达酶学性质协同降解

微波辅助低共熔溶剂提取新疆野生樱桃李多糖工艺及抗氧化、抑菌活性分析

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食品工业科技 2024年

作者：张玲赫谢浩努尔买买提伊犁师范大学生物科学与技术学院

为探究新疆野生樱桃李多糖的最佳提取工艺、抗氧化及抑菌活性。以新疆霍城县大西沟的樱桃李为原材料，采用微波辅助低共熔溶剂法提取多糖，通过单因素试验和响应面法优化确定最佳提取工艺，再对其进行脱脂、脱色、除蛋白等得到粗多糖（... 详细信息

为探究新疆野生樱桃李多糖的最佳提取工艺、抗氧化及抑菌活性。以新疆霍城县大西沟的樱桃李为原材料，采用微波辅助低共熔溶剂法提取多糖，通过单因素试验和响应面法优化确定最佳提取工艺，再对其进行脱脂、脱色、除蛋白等得到粗多糖（PCE），最后通过体外抗氧化和抑菌实验进行功效评价。结果表明：当苹果酸与氯化胆碱的摩尔比例为4:1、微波功率400 W、微波温度60℃、微波时间70 min、液料比30:1 mL/g、DES浓度50%时，PCE得率最高值为（26.38±0.73）%；PCE对清除DPPH自由基、ABTS+自由基和羟基自由基的IC50分别为1.163 mg/mL、0.506 mg/mL、2.958 mg/mL，PCE在质量浓度为4 mg/mL时总还原能力值为0.667。质量浓度为200 mg/mL的PCE对白色念珠菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌均有较好的抑制作用，平均抑菌圈直径分别为（23.45±1.88）mm、（16.12±0.47）mm、（17.68±1.32）mm、（17.20±1.18）mm、（12.00±0.72）mm，具有较好的体外抗氧化和抑菌能力。研究结果可为以樱桃李多糖为功能性产品的开发利用提供理论参考。

关键词：新疆野生樱桃李多糖,提取工艺,抗氧化,抑菌

枯草芽孢杆菌RN8的抗菌活性成分分离及其作用机制

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中国生物工程杂志 2024年第7期44卷 12-28页

作者：沈晓熳杨炽光翁晨虹朱向东江西农业大学生物科学与工程学院南昌330045

目的:从采自云南省丽江郊野的土壤中筛选出具有抑菌活性的菌株,分离其活性成分进行抗菌作用机制初步研究以寻找抗菌活性物质。方法:使用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌等6种细菌以及白色念珠菌等11种真菌作为指示菌,采用管碟法和菌丝生长速... 详细信息

目的:从采自云南省丽江郊野的土壤中筛选出具有抑菌活性的菌株,分离其活性成分进行抗菌作用机制初步研究以寻找抗菌活性物质。方法:使用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌等6种细菌以及白色念珠菌等11种真菌作为指示菌,采用管碟法和菌丝生长速率法对拮抗菌进行筛选,通过生理生化测试和16S rDNA序列分析鉴定菌种;对发酵液中分离出的活性化合物使用液相色谱-质谱/质谱技术进行结构分析;采用氯化三苯四氮唑法检测RN8菌株发酵液不同稀释倍数处理大肠杆菌和白色念珠菌后的细胞脱氢酶活力,利用分光光度法测定蛋白质、DNA和钾离子泄漏率;将环四肽RN作用于白色念珠菌进行代谢组研究。结果:RN8菌株发酵液对17种测试指示菌具有拮抗效果,鉴定为枯草芽孢杆菌;RN鉴定为环肽类化合物,当其质量浓度为12.5μg/mL时,抑制率达73.41%,EC50为4.69μg/mL;KEGG数据库和路径拓扑分析显示,五个主要代谢途径有显著影响,包括嘧啶代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,苯丙氨酸代谢,烟酸和烟酰胺代谢,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成,这些过程涉及2′-脱氧胞苷等37种代谢物。结论:枯草芽孢杆菌RN8是广谱拮抗性菌株,其抑菌活性成分造成白色念珠菌细胞外膜的损伤,破坏细胞膜整体结构,导致细胞内物质泄漏,显著影响主要代谢途径,从而起到抗菌作用。

关键词：枯草芽孢杆菌抑菌活性代谢产物作用机制

转抗草甘膦基因甘蓝型油菜根际土壤理化性质及真菌群落多样性

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生态学杂志 2024年第4期43卷 1082-1091页

作者：杜坤李金萍王婷张晶晶王明王幼平扬州大学生命科学基础实验教学中心江苏扬州225009 扬州大学生物科学与技术学院江苏扬州225009

在转基因作物环境安全评价研究中,对外源基因的导入是否会影响土壤微生物群体的生态平衡以及非靶标生物方面一直存在较大的争议。本研究以转抗草甘膦mEPSPS基因甘蓝型油菜JHX6(转基因油菜,GMO)和受体材料J9707(非转基因油菜,GMO-free)... 详细信息

在转基因作物环境安全评价研究中,对外源基因的导入是否会影响土壤微生物群体的生态平衡以及非靶标生物方面一直存在较大的争议。本研究以转抗草甘膦mEPSPS基因甘蓝型油菜JHX6(转基因油菜,GMO)和受体材料J9707(非转基因油菜,GMO-free)为对象,比较了两材料不同发育时期根际土壤理化性质,并利用IonS5TMXL的ITS高通量测序技术,对大田和盆栽试验中的根际土壤进行真菌群落特征分析。结果显示,两材料同一发育时期根际土壤理化性质均不存在显著性差异。甘蓝型油菜根际富集的主要真菌门为油壶菌门和子囊菌门,两材料在相同发育时期根际土壤中真菌的Alpha多样性指数、群落结构均没有显著差异。但是,无论盆栽还是大田试验,两材料根际土壤中油壶菌门的相对丰度均存在显著差异。因此,我们推测,在甘蓝型油菜中导入mEPSPS基因并不会显著改变根际土壤的功能、真菌群落结构和多样性,但会影响个别真菌物种的相对丰度。

关键词： mEPSPS基因甘蓝型油菜根际真菌多样性群落结构

没食子酸-果胶共聚物的酶法制备:溶剂效应及功能特性研究

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食品与发酵工业 2024年第17期50卷 156-161页

作者：张泽宏郭苏童李奕雅费鹏闽南师范大学生物科学与技术学院福建漳州363000

该研究旨在探讨有机溶剂对脂肪酶催化没食子酸-果胶共聚物接枝反应的影响,并评估接枝反应对果胶抗氧化和抑菌活性的影响。以二甲基亚砜/水、N,N-二甲基甲酰胺/水、四氢呋喃/水和甲基叔丁基醚(methyl tert-butyl ether,MTBE)/水为反应介... 详细信息

该研究旨在探讨有机溶剂对脂肪酶催化没食子酸-果胶共聚物接枝反应的影响,并评估接枝反应对果胶抗氧化和抑菌活性的影响。以二甲基亚砜/水、N,N-二甲基甲酰胺/水、四氢呋喃/水和甲基叔丁基醚(methyl tert-butyl ether,MTBE)/水为反应介质,利用脂肪酶催化没食子酸接枝到果胶分子上,制备了一系列没食子酸-果胶共聚物。采用紫外-可见光谱、X射线光电子能谱和傅里叶变换红外光谱等方法表征了共聚物的化学结构,并评价了共聚物的抗氧化和抑菌活性。结果表明,没食子酸在4种溶剂体系中均成功接枝到果胶分子上,但接枝率因溶剂极性不同而存在显著差异,其中MTBE/水体系制得的没食子酸-果胶共聚物接枝率最高(20.36%)。没食子酸的引入显著提高了果胶的抗氧化活性和对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的抑菌活性,且改性果胶的抗氧化和抑菌活性均与接枝率呈正相关。该研究为高抗氧化和抑菌活性的果胶衍生物制备提供了新思路,其有望作为天然防腐剂应用于食品和化妆品领域。

关键词：没食子酸果胶脂肪酶抗氧化抑菌

体外催化花生四烯酸生产前列腺素F_(2α)

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中国油脂 2024年第1期49卷 114-119页

作者：范潇何国威黄薇童建华卢向阳田云刘虎虎湖南农业大学生物科学技术学院长沙410128

前列腺素F_(2α)(PGF_(2α))具有广泛的生理活性,是一种重要的脂质介质。为了实现PGF_(2α)的绿色生物合成,构建了pET30a-TbPGFS、pET30a-MmPGHS、pET30a-GvPGHS载体并在大肠杆菌BL21(DE3)中分别表达,同时对异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IP... 详细信息

前列腺素F_(2α)(PGF_(2α))具有广泛的生理活性,是一种重要的脂质介质。为了实现PGF_(2α)的绿色生物合成,构建了pET30a-TbPGFS、pET30a-MmPGHS、pET30a-GvPGHS载体并在大肠杆菌BL21(DE3)中分别表达,同时对异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达条件进行了优化以提高重组蛋白在大肠杆菌中的表达量。另外,以最佳诱导表达条件下得到的重组蛋白为催化剂,催化花生四烯酸合成PGF_(2α)。结果表明:MmPGHS蛋白在大肠杆菌中没有表达;GvPGHS蛋白的最佳诱导表达条件为诱导剂IPTG浓度0.2 mmol/L、诱导温度30℃、诱导时间2 h,TbPGFS蛋白的最佳诱导表达条件为诱导剂IPTG浓度0.2 mmol/L、诱导温度30℃、诱导时间6 h;在最佳诱导表达条件下,由GvPGHS和TbPGFS的粗酶液构成的双酶催化未能检测到产物PGF_(2α),而在酶偶联化学催化时,GvPGHS能将花生四烯酸转化为PGH_(2),PGH_(2)被SnCl_(2)进一步还原为PGF_(2α)。综上,通过体外酶促反应结合化学法可高效转化花生四烯酸生产PGF_(2α)。

关键词：花生四烯酸前列腺素F_(2α) 体外催化前列腺素H合成酶

网络药理学与分子对接研究黄芪治疗阿尔兹海默病的作用机制

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济南大学学报（自然科学版） 2024年第2期38卷 194-202页

作者：武文倩张文涛袁萧萧吴之军王亚涛李玉梅济南大学生物科学与技术学院山东济南250022

为了研究黄芪中活性成分治疗阿尔兹海默病的作用机制,采用网络药理学与分子对接模拟方法,利用相关数据库确定疾病靶点,构建靶点相互作用和药物-成分-靶蛋白-疾病网络,在DAVID数据库进行基因本体富集分析和京都基因与基因组百科全书数据... 详细信息

为了研究黄芪中活性成分治疗阿尔兹海默病的作用机制,采用网络药理学与分子对接模拟方法,利用相关数据库确定疾病靶点,构建靶点相互作用和药物-成分-靶蛋白-疾病网络,在DAVID数据库进行基因本体富集分析和京都基因与基因组百科全书数据库通路富集分析,并对靶点进行分子对接模拟验证。结果表明:筛选到20种黄芪抗阿尔兹海默病的活性成分,其中槲皮素、山奈酚、异鼠李素、刺芒柄花素、 7-O-甲基-异微凸剑叶莎醇为关键成分;筛选出118个交集靶点,含6个关键靶点,各靶点富集于炎症反应细胞凋亡等生物过程;分析得到180条信号通路,作用机制主要与TNF、 PI3K-Akt、 IL-17等通路相关。

关键词：网络药理学分子对接黄芪阿尔兹海默病作用机制

超声波结合酶解对玉米淀粉多层级结构及其吸附性能的影响

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食品科学 2024年第5期45卷 174-183页

作者：郁映涛肖刘洋杨晓凡韩富娟韩立宏北方民族大学生物科学与工程学院食品生产与安全协同创新中心宁夏银川750021

为了探索一种有效改善玉米淀粉颗粒吸附性能的处理方法,采用低于淀粉糊化温度的不同温度(0、25、45、65℃)超声波预处理结合α-淀粉酶改性玉米淀粉。结果表明,超声预处理可使淀粉颗粒表面粗糙且出现凹槽;超声预处理后淀粉样品的摩尔质... 详细信息

为了探索一种有效改善玉米淀粉颗粒吸附性能的处理方法,采用低于淀粉糊化温度的不同温度(0、25、45、65℃)超声波预处理结合α-淀粉酶改性玉米淀粉。结果表明,超声预处理可使淀粉颗粒表面粗糙且出现凹槽;超声预处理后淀粉样品的摩尔质量、相对结晶度以及短程分子有序度显著降低(P<0.05);与单一酶处理相比,超声结合酶处理后淀粉样品的比表面积和总孔容积更大,进而使其吸附性能增强;且随着超声预处理温度从0℃升至65℃,超声结合酶处理后淀粉颗粒的吸水率和吸油率分别从114.71%和142.16%提高至144.77%和189.70%。因此,低于淀粉糊化温度的高温超声波结合α-淀粉酶法可作为制备绿色、高效淀粉基吸附剂的有效方法。本研究结果将有助于更好地理解超声波促进淀粉酶解的机理,并为开发高效淀粉基吸附剂提供理论依据。

关键词：玉米淀粉超声处理酶解多层级结构吸附性能