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抑制金属蛋白酶组织抑制因子-2在肝组织中的表达对大鼠肝纤维化发展的影响

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中华肝脏病杂志 2006年第2期14卷 138-140页

作者：张亚飞聂青和谢玉梅邵彬苟艳子周永兴第四军医大学唐都医院传染病科全军感染病诊疗中心西安710038

我们前期应用反义寡核苷酸技术，以金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）-1基因为靶基因，研究发现抑制TIMP-1的表达可阻止大鼠肝纤维化的发展。肝纤维化时，肝内增生的胶原蛋白主要为Ⅰ、Ⅲ型胶原，Ⅳ型胶原的增生沉积并不占主要地位，但Ⅳ... 详细信息

我们前期应用反义寡核苷酸技术，以金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）-1基因为靶基因，研究发现抑制TIMP-1的表达可阻止大鼠肝纤维化的发展。肝纤维化时，肝内增生的胶原蛋白主要为Ⅰ、Ⅲ型胶原，Ⅳ型胶原的增生沉积并不占主要地位，但Ⅳ型胶原过度沉积可使肝血窦毛细血管化，肝血流和结构改变，从而加剧肝脏病变。TIMP-2是肝组织内Ⅳ型胶原酶，即基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的主要抑制因子，

关键词：寡核苷酸类反义金属蛋白酶2组织抑制剂肝纤维化

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糖皮质激素在肝衰竭治疗中的地位

中华肝脏病杂志 2012年第6期20卷 414-415页

作者：聂青和第四军医大学唐都医院传染病科全军感染病诊疗中心西安710038

目前，重型肝炎肝衰竭临床救治仍然相当困难，内科多采用综合支持治疗[1]。糖皮质激素是治疗重型肝炎肝衰竭的方法之一，但激素疗法目前在临床上尚存较大争议。《肝衰竭诊疗指南》回中指出：目前对于肾上腺皮质激素在肝衰竭治疗中的应... 详细信息

目前，重型肝炎肝衰竭临床救治仍然相当困难，内科多采用综合支持治疗[1]。糖皮质激素是治疗重型肝炎肝衰竭的方法之一，但激素疗法目前在临床上尚存较大争议。《肝衰竭诊疗指南》回中指出：目前对于肾上腺皮质激素在肝衰竭治疗中的应用尚存在不同意见，非病毒感染性肝衰竭。

关键词：肝功能衰竭糖皮质激素治疗

乙型肝炎疫苗联合B7-H1蛋白疫苗对HBV转基因小鼠抗HBsAg免疫应答的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第2期28卷 113-116页

作者：苏雯静张野刘博连建奇黄长形白雪帆第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心

目的:研究B7-H1蛋白疫苗对HBV转基因小鼠免疫应答的影响,探索治疗慢性乙型肝炎的新方法。方法:用不同剂量的乙型肝炎疫苗和B7-H1蛋白疫苗联合免疫HBV转基因小鼠,应用ELISA法检测转基因小鼠在不同时间点血清抗B7-H1抗体滴度,同时在免疫后... 详细信息

目的:研究B7-H1蛋白疫苗对HBV转基因小鼠免疫应答的影响,探索治疗慢性乙型肝炎的新方法。方法:用不同剂量的乙型肝炎疫苗和B7-H1蛋白疫苗联合免疫HBV转基因小鼠,应用ELISA法检测转基因小鼠在不同时间点血清抗B7-H1抗体滴度,同时在免疫后第14周末处死小鼠取脾细胞,检测不同的免疫方法对小鼠脾细胞产生HBsAg特异性Th1类细胞因子(IFN-γ及IL-2)、对HBsAg特异性分泌IFN-γT细胞数量及对小鼠淋巴细胞增殖的影响。结果:成功完成小鼠的免疫计划,5周起血清中即能测到B7-H1抗体,同一时间点各组之间的抗体滴度值并无明显差异。加B7-H1蛋白免疫各组与相同剂量单用HBsAg蛋白免疫各组相比:IL-2均明显减低(P<0.05),分泌IFN-γT的T细胞数量下降,但脾淋巴细胞分泌IFN-γ的水平各组间无明显差异;MTT法测定的淋巴细胞增殖能力各组间也无明显变化。结论:B7-H1蛋白疫苗可诱导HBV转基因小鼠产生明显的抗B7-H1抗体应答,但不能增强抗HBsAg的免疫应答。较小剂量的HBsAg即可引起HBV转基因小鼠Th1类细胞因子(IFN-γ及IL-2)的分泌以及淋巴细胞增殖。

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠细胞因子程序性死亡因子1受体1 淋巴细胞增殖

慢性HBV感染者外周血CD4^＋CD25^high调节性T细胞初步分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2008年第10期28卷 885-890页

作者：刘清泉洪沙徐哲王进王平忠黄长形第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心西安710038

目的分析不同临床乙型肝炎病毒（HBV）慢性感染者外周血中CD4^＋CD25^high调节性T细胞（Treg）的水平及其与各种临床指标的关系。方法采集35例不同临床表现成年慢性HBV感染者（HBsAb^＋组5例、非活动肝炎组8例、活动肝炎组12例、免疫耐... 详细信息

目的分析不同临床乙型肝炎病毒（HBV）慢性感染者外周血中CD4^＋CD25^high调节性T细胞（Treg）的水平及其与各种临床指标的关系。方法采集35例不同临床表现成年慢性HBV感染者（HBsAb^＋组5例、非活动肝炎组8例、活动肝炎组12例、免疫耐受期组10例）及12例健康成人外周血标本，流式细胞仪分析外周血中CD4^＋CD25^highTreg含量，ELISA法检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb，RT—PCR法检测HBVDNA载量，同时进行肝脏生化功能检测，并进行统计学分析。结果HBV慢性感染者[（12．35±6．48）个／ul；（1．82±0．87）％）]及健康成人外周血标本[（8．91±3．11）个／ul，（1．35±0．39）％]中CD4^＋CD25^highTreg绝对计数和其占CD4^＋T细胞百分含量差异均无统计学意义（P〉0．05）；分组分析发现，免疫耐受期组CD4^＋CD25^highTreg占CD4^＋T细胞百分含量高于HBsAb^＋组、活动肝炎组及健康对照组（P〈0．05）；免疫耐受期组CD4^＋CD25^highTrge绝对计数高于健康对照组（P〈0．05）；余各组间差异无统计学意义（P〉0．05）。分析CD4^＋CD25^highTreg含量与临床指标间相关性发现，CD4^＋CD25^highTreg占CD4^＋T细胞百分含量与丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平呈负相关（r=-0．418，P=0．038），与CD4／CD8比值呈正相关（r=0．344，P=0．021），与HBVDNA水平无相关性（r=0．118，P〉0．05）；CD4^＋CD25^highTreg绝对计数与CD4／CD8比值呈正相关（r=0．360，P=0．015），与ALT水平及HBVDNA水平无相关性（r=-0．211，r=0．060，P〉0．05）。结论CD4^＋CD25^highTreg在HBV慢性感染的免疫发病机制中可能发挥一定作用。

关键词：慢性HBV感染 CD4^+CD25^high调节性T细胞免疫耐受

HFRS患者汉滩病毒核蛋白特异性T细胞克隆及其靶细胞的建立

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第8期24卷 600-605页

作者：王平忠白雪帆张颖黄长形第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心西安710038

目的　建立肾综合征出血热 (HFRS)患者汉滩病毒 (HTNV)核衣壳蛋白 (NP)特异性CTL克隆 ,为HTNVNPT细胞表位鉴定及HFRS患者T细胞免疫功能研究奠定基础。方法　采用Fi coll密度梯度离心法分离HFRS患者外周血单个核细胞 (PBMC) ,用灭活HTNV... 详细信息

目的　建立肾综合征出血热 (HFRS)患者汉滩病毒 (HTNV)核衣壳蛋白 (NP)特异性CTL克隆 ,为HTNVNPT细胞表位鉴定及HFRS患者T细胞免疫功能研究奠定基础。方法　采用Fi coll密度梯度离心法分离HFRS患者外周血单个核细胞 (PBMC) ,用灭活HTNV和IL 2体外刺激 ,有限稀释法建立T细胞克隆 ,流式细胞术鉴定克隆表型。并用EB病毒 (EBV)转化B淋巴细胞 ,建立B淋巴母细胞样细胞系 (B LCL) ,以含HTNVS基因的重组痘苗病毒感染B LCL作靶细胞 ,以CTL克隆作效应细胞进行细胞毒杀伤试验 ,测定T细胞克隆的抗原特异性。结果　T细胞克隆能特异性识别表达NP的B LCL。在 5名患者中 ,3名有较高的杀伤率 ,并自 2名患者建立了 5株HTNV特异性CTL克隆 ,其表型为CD8+ 均大于 6 0 %。结论　成功建立了HFRS患者HTNVNP特异性CTL克隆及其靶细胞。NP是HFRS患者HTNV特异性CTL应答的主要靶抗原之一。

关键词： HFRS 汉滩病毒核蛋白特异性T细胞克隆靶细胞 EBV 肾综合征出血热

体外培养的嵌合体丙型肝炎病毒感染Huh7．5细胞的透射电镜观察

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第6期29卷 568-573页

作者：马南魏欣张野王平忠连建奇贾战生第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心西安710038

目的通过透射电子显微镜技术观察体外培养的嵌合体丙型肝炎病毒（HCV）感染Huh7．5细胞后胞内病毒颗粒的形态学特征及细胞内部超微结构的变化。方法将含有全长HCV嵌合基因组的质粒pFL-J6／JFH体外转录为HCVRNA，电穿孔转染至Huh7．5细... 详细信息

目的通过透射电子显微镜技术观察体外培养的嵌合体丙型肝炎病毒（HCV）感染Huh7．5细胞后胞内病毒颗粒的形态学特征及细胞内部超微结构的变化。方法将含有全长HCV嵌合基因组的质粒pFL-J6／JFH体外转录为HCVRNA，电穿孔转染至Huh7．5细胞，实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）测定培养上清中病毒数量；间接免疫荧光检测病毒蛋白的表达；收取转染后细胞培养上清感染原始Huh7．5细胞，制作超薄细胞切片，透射电子显微镜技术观察被感染细胞中病毒颗粒的形态学特征及细胞超微结构的变化。结果qRT-PCR显示不同时间点收取的转染后细胞培养上清中含有高水平的病毒量；间接免疫荧光显示病毒NSSA非结构蛋白高表达；透射电子显微镜观察到被感染的Huh7．5细胞内含有大量有包膜或无包膜的病毒样颗粒，细胞质内部分膜性细胞器增生，出现黄病毒科病毒感染后特征性结构及某种未知结构等。结论体外培养的嵌合体HCV具有HCV颗粒的形态学特征，并能够有效感染人源性肝细胞Huh7．5。

关键词：丙型肝炎病毒体外转录透射电子显微镜

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胞外体——免疫治疗中的“特洛伊木马”

生理科学进展 2005年第2期36卷 113-118页

作者：牟丹蕾贾战生白雪帆第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心西安710038

胞外体是源于多种真核细胞的多泡体,通过后者与质膜融合释放到细胞外的一种膜性小囊泡,在多种生理过程中发挥作用。近年研究发现,由抗原提呈细胞分泌的胞外体富集MHCI/II类分子、协同刺激分子、热休克蛋白70和热休克蛋白90等多种生物活... 详细信息

胞外体是源于多种真核细胞的多泡体,通过后者与质膜融合释放到细胞外的一种膜性小囊泡,在多种生理过程中发挥作用。近年研究发现,由抗原提呈细胞分泌的胞外体富集MHCI/II类分子、协同刺激分子、热休克蛋白70和热休克蛋白90等多种生物活性分子于一身,像“特洛伊木马”一样,在体内外免疫调节中起关键作用。本文就胞外体的基本特征、生产纯化方法及其作为一种新型的亚细胞疫苗在抗肿瘤和抗病毒免疫中的应用前景予以综述。

关键词：胞外体免疫治疗抗原呈递细胞疫苗树突状细胞

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人类朊毒体病的研究进展

中国实用内科杂志 2005年第9期25卷 854-856页

作者：聂青和张久聪第四军医大学唐都医院传染病科全军感染病诊疗中心西安710038

朊毒体病即传染性海绵状脑病(transmissible stxmgiform encephalopathies,TSEs)是由朊毒体(Prion)引起的人和动物共患的一类致死性中枢神经系统病变性脑病。人类朊毒体病导致了进行性认知功能的损害和运动的共济失调,并且以脑组织海绵... 详细信息

朊毒体病即传染性海绵状脑病(transmissible stxmgiform encephalopathies,TSEs)是由朊毒体(Prion)引起的人和动物共患的一类致死性中枢神经系统病变性脑病。人类朊毒体病导致了进行性认知功能的损害和运动的共济失调,并且以脑组织海绵样的退变伴有星形胶质细胞和小胶质细胞的增生。这些改变伴有一种宿主起源的具有蛋白水解酶抗性的蛋白质即异常朊毒体蛋白(PrPSc)的聚集。[第一段]

关键词：朊毒体病传染性海绵状脑病人类中枢神经系统病星形胶质细胞小胶质细胞朊毒体蛋白蛋白水解酶共济失调

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类汉坦病毒肺综合征1例报告

中国实用内科杂志 2013年第S1期33卷 175-176页

作者：高禄化梁志军白雪帆郝春秋聂青和王素娜于海涛杜虹第四军医大学唐都医院传染病科全军感染病诊疗中心西安710038

1病历资料患者男,17岁,以"发热伴头痛、腰痛4d"于2012年10月17日入院。患者2012年10月15日无明显诱因出现畏寒、发热,体温高达39.3℃,伴头痛、周身不适、腰痛,在当地医院按上呼吸道感染治疗,体温逐渐降至正常,第4d患者食欲减退、恶心、... 详细信息

1病历资料患者男,17岁,以"发热伴头痛、腰痛4d"于2012年10月17日入院。患者2012年10月15日无明显诱因出现畏寒、发热,体温高达39.3℃,伴头痛、周身不适、腰痛,在当地医院按上呼吸道感染治疗,体温逐渐降至正常,第4d患者食欲减退、恶心、呕吐,上述症状明显加重。

关键词：类汉坦病毒肺综合征