体外培养的嵌合体丙型肝炎病毒感染Huh7．5细胞的透射电镜观察

作     者：马南 魏欣 张野 王平忠 连建奇 贾战生 MA Li;WEI Xin;ZHANG Ye;WANG Ping-zhong;LIAN Jian-qi;JIA Zhan-sheng

作者机构：第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心西安710038 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2009年第29卷第6期

页      面：568-573页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：国家863计划项目(2007AA02Z441) 

主　　题：丙型肝炎病毒 体外转录 透射电子显微镜 

摘      要：目的通过透射电子显微镜技术观察体外培养的嵌合体丙型肝炎病毒（HCV）感染Huh7．5细胞后胞内病毒颗粒的形态学特征及细胞内部超微结构的变化。方法将含有全长HCV嵌合基因组的质粒pFL-J6／JFH体外转录为HCVRNA，电穿孔转染至Huh7．5细胞，实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）测定培养上清中病毒数量；间接免疫荧光检测病毒蛋白的表达；收取转染后细胞培养上清感染原始Huh7．5细胞，制作超薄细胞切片，透射电子显微镜技术观察被感染细胞中病毒颗粒的形态学特征及细胞超微结构的变化。结果qRT-PCR显示不同时间点收取的转染后细胞培养上清中含有高水平的病毒量；间接免疫荧光显示病毒NSSA非结构蛋白高表达；透射电子显微镜观察到被感染的Huh7．5细胞内含有大量有包膜或无包膜的病毒样颗粒，细胞质内部分膜性细胞器增生，出现黄病毒科病毒感染后特征性结构及某种未知结构等。结论体外培养的嵌合体HCV具有HCV颗粒的形态学特征，并能够有效感染人源性肝细胞Huh7．5。