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Gpr124对高糖环境下视网膜微血管内皮细胞增殖、迁移和血管形成的调控作用

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陆军军医大学学报 2024年第18期46卷 2101-2109页

作者：王玉雯李芙蓉袁容娣陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院眼科

目的研究高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞(human retinal microvascular endothelial cell, HRMEC)中G蛋白偶联受体124(Gpr124)表达的变化，以及干扰Gpr124对HRMEC的调控作用。方法免疫荧光观察Gpr124在HRMEC中的表达；高糖刺激HRM... 详细信息

目的研究高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞(human retinal microvascular endothelial cell, HRMEC)中G蛋白偶联受体124(Gpr124)表达的变化，以及干扰Gpr124对HRMEC的调控作用。方法免疫荧光观察Gpr124在HRMEC中的表达；高糖刺激HRMEC,将细胞分为空白组和高糖组，CCK-8、EdU检测细胞活力与增殖情况；病毒抑制Gpr124表达后，将细胞分为空白对照组、高糖对照组、高糖+shRNA组以及高糖+Gpr124 shRNA组，划痕实验评估细胞迁移，基质凝胶评估细胞小管形成能力。Western blot检测Gpr124、VEGFA、MMP9和β-catenin相对蛋白表达水平。结果相较于空白组，HRMEC在高糖组中显示出显著提升的细胞活力和增殖细胞数(P<0.01)。高糖环境下，Gpr124、VEGFA以及MMP9的表达水平也显著增加(P<0.01)。同时，在各个时间点，高糖对照组的迁移面积以及体外血管形成面积和管径长度均显著高于空白对照组(P<0.01)。然而，在敲低Gpr124的表达后，高糖+Gpr124 shRNA组的HRMEC在迁移和体外血管形成能力上相较于高糖+shRNA组有显著的降低(P<0.01),并且高糖+Gpr124 shRNA组相比于高糖+shRNA组VEGFA、MMP9以及β-catenin蛋白表达减少(P<0.01)。结论 Gpr124能够调控高糖环境下HRMEC的增殖、迁移以及管形成能力，并且还可以抑制VEGFA和MMP9的过度表达，这一影响可能是通过调节Wnt/β-catenin经典通路来实现的。

关键词：糖尿病视网膜病变 G蛋白偶联受体124 血管内皮细胞细胞迁移实验血管形成

谷胱甘肽改善卒中后抑郁和慢性社会挫败应激小鼠行为及其机制研究

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陆军军医大学学报 2024年第8期46卷 775-785页

作者：赵源林森杨清武陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院神经内科重庆400037

目的探究抑郁症的潜在致病机制及谷胱甘肽的改善作用。方法6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠分为3组(n=20):无处理对照(SHAM)组、卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)模型组和慢性社会挫败应激(chronic social defeat depression,CSDS)模型组。通过旷场实验、高架十字实验、悬尾实验、糖水偏好实验等验证模型小鼠是否有抑郁样行为表现,取2种模型小鼠以及对照小鼠内侧前额叶皮层(medial prefrontal cortex,mPFC)进行神经递质靶向代谢组学测序。通过主成分分析(principle component analysis,PCA)、相关性分析等方法探索各组小鼠代谢物表达情况、筛选差异代谢物,利用京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)预测与抑郁模型相关的代谢通路,并对关键差异代谢物谷胱甘肽(glutathione,GSH)的表达以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)等铁死亡指标进行检测,外源性补充GSH观察模型小鼠抑郁样行为是否改善。结果神经递质靶向代谢组学分析结果显示3组小鼠代谢水平存在明显差异,在mPFC检测到的38种代谢物中,有6种在PSD组中特异性降低,有4种在CSDS组中特异性降低,而GSH、L-天冬酰胺和L-赖氨酸在PSD和CSDS组均表现出明显下降(P<0.05)。KEGG分析结果显示差异代谢物涉及到的主要通路有谷胱甘肽代谢,β-氨基酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢等通路。还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(glutathione/oxidized glutathione,GSH/GSSG)试剂盒检测发现两种抑郁模型小鼠mPFC还原型GSH明显减少(P<0.05),铁死亡指标检测发现与对照组比较,两种抑郁模型小鼠存在MDA升高并且GPX4阳性细胞比例显著减少的表型(P<0.05),而对抑郁模型小鼠外源补充GSH可增加小鼠高架十字实验开臂时间和旷场实验中央区时间(P<0.05),并且降低悬尾实验静止不动时间(P<0.05),显著改善抑郁样行为表现。结论PSD以及CSDS小鼠脑组织存在13种代谢物失调,其中谷胱甘肽代谢异常引发的铁死亡可能在抑郁症发生中具有重要作用,外源性补充谷胱甘肽可以改善小鼠抑郁样行为。

关键词：卒中后抑郁慢性社会挫败应激代谢组学谷胱甘肽铁死亡

探头式共聚焦激光显微内镜对胃底腺息肉的诊断价值

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陆军军医大学学报 2024年第10期46卷 1150-1157页

作者：王梓义陈静周学谦杨佳孟祥勇吴静陈文生陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院消化内科重庆400038

目的探讨探头式共聚焦激光显微内镜(probe-based confocal laser endomicroscopy,pCLE)在胃底腺息肉诊断中的价值。方法纳入2023年6-12月于陆军军医大学第一附属医院消化内科内镜中心行普通白光内镜(white light image,WLI)提示胃息肉患... 详细信息

目的探讨探头式共聚焦激光显微内镜(probe-based confocal laser endomicroscopy,pCLE)在胃底腺息肉诊断中的价值。方法纳入2023年6-12月于陆军军医大学第一附属医院消化内科内镜中心行普通白光内镜(white light image,WLI)提示胃息肉患者63例,收集患者临床资料、白光内镜图像、窄带成像内镜(narrow band imaging,NBI)图像、pCLE内镜图像以及术后组织病理,统计验证胃底腺息肉在pCLE内镜下特点,分别计算不同内镜诊断的灵敏度、特异性、准确度、一致性。结果胃底腺息肉在pCLE内镜下主要表现为胃小凹开口拉长,“手牵手样”胃小凹开口,小凹开口周围血管规则,无荧光素渗出。WLI的灵敏度、特异度、准确度、一致性分别为:72.73%、75.00%、73.13%、0.343(胃底腺息肉),81.82%、71.43%、71.64%、0.354(增生性息肉);NBI的灵敏度、特异度、准确度、一致性分别为87.27%、83.33%、86.57%、0.673(胃底腺息肉);81.82%、85.71%、85.07%、0.554(增生性息肉);pCLE的灵敏度、特异度、准确度、一致性分别为92.73%、91.67%、92.53%、0.769(胃底腺息肉),90.91%、94.64%、94.03%、0.797(增生性息肉)。pCLE的灵敏度、特异度等均优于WLI和NBI,与病理诊断的一致性较好。结论pCLE可用于胃底腺息肉的诊断。

关键词：胃息肉胃底腺息肉共聚焦激光显微内镜

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陆军军医大学学报 2024年第9期46卷 1041-1046页

作者：孟祥勇陈志国王梓义杨佳陈文生陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院消化内科重庆400038

目的探究早期胃癌淋巴结转移的相关因素,分析腹腔镜D2根治术与内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection, ESD)的临床疗效差异。方法采用回顾性队列研究方法,选择2018年6月至2022年6月于我院进行手术治疗的404例早期胃癌患... 详细信息

目的探究早期胃癌淋巴结转移的相关因素,分析腹腔镜D2根治术与内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection, ESD)的临床疗效差异。方法采用回顾性队列研究方法,选择2018年6月至2022年6月于我院进行手术治疗的404例早期胃癌患者作为研究对象,根据手术方法的不同将患者分为腹腔镜组(271例)和ESD组(133例)。比较不同临床特征患者的淋巴结转移情况,多因素Logistic回归分析影响早期胃癌患者淋巴结转移的因素;统计符合ESD绝对适应证和扩大适应证患者的淋巴结转移率;Kaplan-Meier法比较早期胃癌患者ESD与腹腔镜D2根治术的远期疗效;采用分层回归分析探索早期胃癌患者手术方式与远期疗效间的关系。结果 404例早期胃癌患者中,淋巴结转移率为12.38%(50/404)。单因素分析结果显示,合并溃疡、肿瘤病理类型、病理分化程度等7个临床特征与淋巴结转移有关;多因素Logistic回归分析结果显示,肿瘤分化程度为低分化、肿瘤浸润深度为SM是影响早期胃癌淋巴结转移的相关因素;404例患者总体生存率为96.29%(389/404),腹腔镜组生存率(96.31%)与ESD组生存率(96.24%)差异无统计学意义;符合ESD绝对适应证而行腹腔镜D2根治术与ESD治疗的5年生存率分别为96.00%和96.55%,差异无统计学意义;符合ESD扩大适应证而行腹腔镜D2根治术与ESD治疗的5年生存率分别为94.74%和91.67%,差异无统计学意义。经分层回归分析调整病变大小、病理分化程度、肿瘤浸润深度等临床特征后,早期胃癌患者手术方式与远期疗效依然相关(β=1.173,P=0.003)。结论肿瘤浸润深度、分化程度与早期胃癌患者淋巴结转移密切相关。符合ESD绝对适应证和扩大适应证患者行腹腔镜D2根治术与ESD治疗的效果相当。

关键词：早期胃癌淋巴结转移腹腔镜D2根治术内镜黏膜下剥离术

谷氨酰胺对结直肠癌HT-29细胞放射敏感性的影响及机制探讨

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陆军军医大学学报 2024年第9期46卷 1007-1014页

作者：卢亨倪向敏于生财梁馨予朱文艺李忠俊王建陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院营养科重庆1400037 陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院输血科重庆1400037

目的观察不同浓度谷氨酰胺(glutamine,Gln)对结直肠癌HT-29细胞放射敏感性的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养HT-29细胞,将对数生长期的HT-29细胞按照Gln不同浓度设置对照组(2 mmol/L,培养基基础浓度)、实验组Ⅰ(4 mmol/L)、实验组... 详细信息

目的观察不同浓度谷氨酰胺(glutamine,Gln)对结直肠癌HT-29细胞放射敏感性的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养HT-29细胞,将对数生长期的HT-29细胞按照Gln不同浓度设置对照组(2 mmol/L,培养基基础浓度)、实验组Ⅰ(4 mmol/L)、实验组Ⅱ(6 mmol/L)、实验组Ⅲ(8 mmol/L),预处理2 h后给予Co 60源放射。通过CCK-8法检测未放射与放射后不同浓度Gln对细胞活力的影响;克隆形成实验检测放射后不同浓度Gln对细胞放射敏感性的影响;活性氧(ROS)试剂盒检测放射后24 h细胞ROS水平;流式细胞仪检测放射后48 h细胞凋亡率;蛋白印迹法测定放射后各组细胞Nrf2、HO-1、cleaved-Caspase3蛋白的表达水平。结果未放射的HT-29细胞在Gln干预24 h后实验组Ⅱ、实验组Ⅲ细胞活力明显高于对照组、实验组Ⅰ(P<0.05)。HT-29细胞放射24 h后,各实验组细胞活力明显高于对照组(P<0.05);放射后14 d,各实验组细胞克隆形成数均高于对照组(P<0.05);放射后24 h,各实验组ROS水平均低于对照组(P<0.05);放射后48 h,各实验组细胞凋亡率均低于对照组(P<0.05)。实验组ⅠNrf2表达高于对照组(P<0.05);实验组Ⅱ、ⅢNrf2、HO-1表达均高于对照组和实验组Ⅰ(P<0.05),cleaved-Caspase3表达均低于对照组和实验组Ⅰ(P<0.05);实验组Ⅲcleaved-Caspase3表达低于实验组Ⅱ(P<0.05)。结论谷氨酰胺能显著降低HT-29细胞的放射敏感性,其机制与减轻氧化应激损伤和减少细胞凋亡有关,这可能不利于结直肠癌患者放疗。

关键词：谷氨酰胺 HT-29细胞氧化应激损伤细胞凋亡放射敏感性

食品添加剂羧甲基纤维素钠通过破坏肠内环境加剧辐射对小鼠肠道的损伤

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陆军军医大学学报 2024年第6期46卷 522-534页

作者：刘绍庭李忠俊陈立向阳相丽欣张薇薇冉茜王建陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院营养科重庆400037 陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院输血科重庆400037

目的探究食品添加剂羧甲基纤维素钠(CMC-Na)的长期摄入对小鼠辐射耐受性的影响及其机制研究。方法通过饲饮水中添加不同浓度CMC-Na(对照组,0.25%低剂量组,1%高剂量组)对小鼠进行饮食干预,而后建立辐射损伤模型(7 Gy, Co60γ射线)。在... 详细信息

目的探究食品添加剂羧甲基纤维素钠(CMC-Na)的长期摄入对小鼠辐射耐受性的影响及其机制研究。方法通过饲饮水中添加不同浓度CMC-Na(对照组,0.25%低剂量组,1%高剂量组)对小鼠进行饮食干预,而后建立辐射损伤模型(7 Gy, Co60γ射线)。在辐射干预前后,每周称量小鼠体质量变化,记录各组小鼠的死亡情况;干预8周后,检测血生化指标;ELISA、RT-qPCR和Western blot技术检测肠道相关细胞因子和蛋白变化情况;HE、免疫荧光及免疫组化染色切片观察肠道组织细胞形态的改变并进行病理评分;流式细胞术检测肠道干细胞比例。结果通过流式细胞术检测发现,与对照组比较,两组饮食干预组的肠道干细胞比例均出现下降(P<0.05),下降程度与饮水中添加剂浓度呈正相关,且干细胞下降趋势在受到辐射损伤后持续存在。其中高剂量组死亡率显著升高(P<0.05),体质量大幅下降(P<0.000 1)。进一步实验发现肠道屏障功能受损,抑炎因子白介素-10(IL-10)含量下降。同时,高剂量组小鼠肠道中出现了TLR4、NF-κB、TNF-α以及IL-1β等炎症因子的高表达(P<0.05),并且在辐射损伤后进一步加剧;低剂量组小鼠部分炎症因子(NF-κB、TNF-α以及IL-1β)相较于对照组表达增高(P<0.05),但低于高剂量组。结论长期摄入含有CMC-Na添加剂的饮食,会降低肠道内干细胞群的比例,加剧了辐射对肠道的损伤,降低了小鼠对辐射耐受性。

关键词：羧甲基纤维素钠辐射肠道屏障肠道干细胞炎症

嗜酸乳杆菌缓解LPS诱导的急性肺炎小鼠肺部炎症及机制研究

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陆军军医大学学报 2024年第5期46卷 450-457页

作者：解浪浪王宗华王伟罗月黎宁陈陵陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院第958医院消化内科重庆400020 陆军军医大学(第三军医大学) 临床护理学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院烧伤研究所重庆400038

目的探究嗜酸乳杆菌对脂多糖(LPS)诱导的急性肺炎小鼠的炎症的影响及可能的机制。方法将21只小鼠分为对照组(NC)、模型组(LPS)和嗜酸乳杆菌处理组(Probiotics)。NC组(n=6)小鼠正常喂养,LPS组(n=8)和Probiotics组(n=7)小鼠采用LPS(10 mg/... 详细信息

目的探究嗜酸乳杆菌对脂多糖(LPS)诱导的急性肺炎小鼠的炎症的影响及可能的机制。方法将21只小鼠分为对照组(NC)、模型组(LPS)和嗜酸乳杆菌处理组(Probiotics)。NC组(n=6)小鼠正常喂养,LPS组(n=8)和Probiotics组(n=7)小鼠采用LPS(10 mg/kg)气管滴注法建立急性肺炎小鼠模型,Probiotics组小鼠给予嗜酸乳杆菌,7 d后处死小鼠。通过HE染色、肺组织湿/干质量比(W/D)评估肺组织的病理学改变;采用ELISA检测支气管肺泡灌洗液中的炎症因子水平和肺组织中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性;16S rDNA测序检测肠道菌群的多样性;免疫组织化学染色评估ZO-1和TRPV4的表达。结果与LPS组相比,Probiotics组的W/D、炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平降低,IL-10升高(P<0.05);MPO活性减弱(P<0.05);结肠和肺组织中TRPV4表达下调,结肠组织ZO-1表达上调;同时螺杆菌属和脱硫弧菌属的丰度显著改变。结论嗜酸乳杆菌能显著减轻LPS诱导的小鼠肺部炎症,可能与肠道内脱硫弧菌属丰度、TRPV4通道活性和肠黏膜屏障通透性有关。

关键词：急性肺炎嗜酸乳杆菌脂多糖肠道菌群脱硫弧菌

非瓣膜性心房颤动患者左心耳封堵术后心包填塞的发生及相关因素分析

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陆军军医大学学报 2024年第7期46卷 768-774页

作者：王斌斌许祥王兴鹏李华康姚青黄海韵王文婷万陈刘锋郭燕丽宋治远陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院心血管内科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院超声科重庆400038

目的观察非瓣膜性心房颤动(nonvalvular atrial fibrillation,NVAF)患者左心耳封堵术后(left atrial appendage closure,LAAC)心包填塞(pericardial tamponade,PT)的发生率,探讨其相关因素及转归。方法选择2014年8月至2023年3月在我院心血管内科住院并接受LAAC治疗的1192例NVAF患者为研究对象,通过医院病案管理系统收集患者一般临床资料、术前经胸超声心动图(transthoracic echocardiography,TTE)和经食道超声心动图(transesophageal echocardiography,TEE)检测资料、术前常规化验检查、术中资料及随访资料,根据LAAC后是否发生PT分为无PT组(n=8)和PT组(n=1184)。统计分析PT的发生率、相关因素及转归。结果1192例患者中,有男性639例(53.6%)、女性553例(46.4%),年龄(68.10±9.65)岁,CHA 2 DS 2-VASc评分(4.51±1.72)分,HAS-BLED评分(3.36±1.09)分。共发生PT 8例(0.67%),其中6例发生于LAAC后1~33 h,2例发生在LAAC后第19、27天。与无PT组比较,PT组中,TEE检测与左心耳造影测量左心耳最大口径较大(P=0.025,P=0.015),而左心耳最大深度则较小(P=0.028,P=0.031),PT组封堵器一次放置成功率较显著降低(P=0.031);PT组封堵器压缩率明显大于无PT组(P=0.046)。多因素分析结果显示,左心耳最大口径较大、左心耳平均有效深度较小、封堵器压缩率较大是发生PT的主要危险因素。8例PT患者均经停用抗栓药物、心包穿刺/手术引流后治愈。随访(39±27)个月,PT组患者未发生器械相关血栓形成(device-related thrombosis,DRT)、缺血性卒中/系统性栓塞等并发症。结论LAAC术后PT发生率低,其发生与左心耳口径较大、深度相对不足、封堵器压缩率较大相关,PT可经停用抗栓药物、心包穿刺/手术引流后治愈。

关键词：心房颤动左心耳封堵术心包填塞

血小板/血红蛋白比值预测糖尿病足溃疡严重程度

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陆军军医大学学报 2024年第9期46卷 1057-1062,F0003页

作者：李双江卞士柱王红迁李恒欣彭桂亮郭黎陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院内分泌科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院心血管内科全军心血管病研究所重庆400037 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院医学大数据与人工智能中心重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院学员管理中心重庆400038

目的探讨血小板/血红蛋白比值(platelet/hemoglobin, PHR)与糖尿病足溃疡(diabetic foot ulcer, DFU)严重程度的关系及其对DFU进展的预测价值。方法纳入陆军军医大学第一附属医院内分泌科2018年3月至2023年3月住院的345名DFU患者,收... 详细信息

目的探讨血小板/血红蛋白比值(platelet/hemoglobin, PHR)与糖尿病足溃疡(diabetic foot ulcer, DFU)严重程度的关系及其对DFU进展的预测价值。方法纳入陆军军医大学第一附属医院内分泌科2018年3月至2023年3月住院的345名DFU患者,收集患者的一般人口学资料,采血样本送本院检验科检测糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)、血生化、血常规相关指标,并依据公式计算PHR。根据Wanger分级分为轻度溃疡组(n=145)和重度溃疡组(n=200)。比较2组患者基线资料的差异;多因素Logistic回归分析确定DFU重度溃疡的独立预测因子;绘制受试者工作特性曲线,以评估PHR预测DFU进展的价值。结果重度溃疡组患者的HbA1c、FPG、血小板计数(PLT)和PHR等均显著高于轻度溃疡组(P<0.05)。多因素Logistic回归发现PHR、男性比例是DFU患者进展为重度溃疡的独立危险因素(P<0.05),而HDL-C是其保护因素(P<0.05)。PHR预测DFU患者发生重度溃疡的曲线下面积为0.701(95%CI:0.646~0.756)。结论 PHR与DFU的严重程度密切相关,且PHR对重度糖尿病足溃疡具有一定的预测价值。

关键词：血小板/血红蛋白比值糖尿病足溃疡炎症预测因子