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SD大鼠乳鼠原代皮质神经元和小胶质细胞同时提取并培养的实验方法

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1395-1400页

作者：何龙才宋文学明江陈光唐王军浩廖益东崔君拴徐卡娅贵州医科大学贵州省贵阳市550004 贵阳市第一人民医院贵州省贵阳市550002 贵州医科大学附属医院神经外科贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属医院高压氧科贵州省贵阳市550004

背景:原代皮质神经元和小胶质细胞在探索神经系统疾病细胞疗法中起着至关重要的作用,而目前获得2种细胞的方法大多较繁琐,需分别单独提取。因此找到一种便捷、快速可同时提取2种细胞的方法十分关键。目的:探索一种新型同时提取原代皮质... 详细信息

背景:原代皮质神经元和小胶质细胞在探索神经系统疾病细胞疗法中起着至关重要的作用,而目前获得2种细胞的方法大多较繁琐,需分别单独提取。因此找到一种便捷、快速可同时提取2种细胞的方法十分关键。目的:探索一种新型同时提取原代皮质神经元及小胶质细胞的方法。方法:取24 h内新生SD大鼠乳鼠,将大脑取出放入装有DMEM的培养皿中,去除软脑膜后备用。同一脑组织,先提取原代神经元,再将剩余脑组织用于提取小胶质细胞,整个过程在冰上操作。原代皮质神经元提取培养步骤:镊子夹取2.0-3.0 mm厚度大脑皮质组织置于培养皿,用木瓜蛋白酶消化20 min,中止消化后吹打组织呈互相粘连的组织悬液,吸上清细胞悬液,过滤、分装到15 mL离心管中,离心并重悬后将细胞接种于左旋多聚赖氨酸包被的6孔板爬片上放入细胞培养箱,每隔1 d观察神经元形态,第7天进行MAP2和β-Tubulin免疫荧光染色鉴定。小胶质细胞提取培养步骤:夹取上一步取皮质后剩余脑组织,厚度8-10 mm,置于培养皿,用胰酶消化20 min,中止消化后吹打组织呈匀浆,然后将匀浆转移到培养瓶中培养,第14天将培养瓶封口后进行恒温水平摇床振荡2 h,小胶质细胞脱落于上清中;取纯化后的小胶质细胞继续培养3 d进行Iba1免疫荧光染色鉴定。结果与结论:(1)神经元培养24 h后贴壁、胞体变大,部分神经元长出突触;培养到第3,5天时胞体进一步增大,大部分神经元已呈突触形态,部分神经元成团生长;第7天时,神经元突触延长增粗并互相连接成网。经β-Tubulin、MAP2免疫荧光染色鉴定为神经元。(2)小胶质细胞培养第1天换液后可见细胞贴壁生长;第3,5,7天时细胞密度均较小,细胞形态呈高亮椭圆或圆形,但已基本成团块状生长于其他细胞上层;第10天时小胶质细胞密度明显增大;第14天时小胶质细胞呈致密团块状生长于其他细胞上层,此时可进行分离纯化。取分离纯化后细胞再培养至第3天,经Iba1免疫荧光鉴定为小胶质细胞,且纯度大于95%。(3)结果表明,经此法提取并培养获得的原代皮质神经元和小胶质细胞纯度高、形态好、成活率高。

关键词：原代皮质神经元小胶质细胞 SD大鼠细胞提取细胞培养

罗库溴铵用于快速气管插管肌松效应的临床观察

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第三军医大学学报 2005年第23期27卷 2387-2387,2395页

作者：王一雄李扬亿谢文钦杨玉欣王雅端福建省泉州市第一医院麻醉科泉州362000

罗库溴铵(rocuronium)近年来在快速诱导气管插管中应用较广。本研究通过不同的给药方法观察罗库溴铵用于快速气管插管时的肌松效应,为临床提供资料。1资料与方法1.1一般资料将本院30例ASAⅠ~Ⅱ级、年龄18~65岁、无神经肌肉系统疾病和肝... 详细信息

罗库溴铵(rocuronium)近年来在快速诱导气管插管中应用较广。本研究通过不同的给药方法观察罗库溴铵用于快速气管插管时的肌松效应,为临床提供资料。1资料与方法1.1一般资料将本院30例ASAⅠ~Ⅱ级、年龄18~65岁、无神经肌肉系统疾病和肝肾功能障碍的择期手术全麻病人随机分成3组(各10例):A:常规插管剂量罗库溴铵0.6mg/kg(2ED95)组,即对照组;B:增大剂量罗库溴铵0.9mg/kg(3ED95)组;C:预注组(先给予常规插管剂量的1/10,3min后再给予常规插管剂量的9/10)。1.2麻醉方法所有病人入室前半小时均肌注阿托品0.5mg,鲁米那钠0.1g。入室后常规行心电、无

关键词：罗库溴铵气管插管肌松效应给药方法

STRO-1阳性与阴性骨髓间充质干细胞成骨能力的对比

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中国组织工程研究 2025年

作者：周万林何斌申雄成黄坤田仁元袁野黄文良遵义医科大学第三附属医院(遵义市第一人民医院)骨科遵义市红花岗区人民医院骨科贵州省茅台医院骨科

背景：随着年龄增长，骨髓间充质干细胞的再生能力和分化功能逐渐下降，导致骨组织修复效果减弱。因此，探索成骨潜能更高的骨髓间充质干细胞亚群对骨组织工程的发展具有重要意义。目的：评估STRO-1阳性和阴性骨髓间充质干细胞在成骨诱... 详细信息

背景：随着年龄增长，骨髓间充质干细胞的再生能力和分化功能逐渐下降，导致骨组织修复效果减弱。因此，探索成骨潜能更高的骨髓间充质干细胞亚群对骨组织工程的发展具有重要意义。目的：评估STRO-1阳性和阴性骨髓间充质干细胞在成骨诱导培养条件下的成骨分化能力差异。方法：分离并培养SD大鼠骨髓间充质干细胞，采用流式细胞术和免疫荧光鉴定CD29、CD45、CD90和STRO-1的表达；利用免疫磁细胞分选技术分离STRO-1阳性和阴性骨髓间充质干细胞，将两组细胞分别进行成骨诱导7,14 d，采用qPCR和Western blot分析两组细胞成骨相关基因(Ⅰ型胶原、Runt相关转录因子2、骨保护素、骨钙素)及蛋白表达水平差异，采用茜素红染色和碱性磷酸酶染色观察钙结节形成情况。结果与结论：流式细胞术显示CD29和CD90高表达，CD45低表达，STRO-1的阳性表达率为12.8%，免疫荧光结果与流式细胞术一致。磁细胞分选后发现STRO-1阳性细胞的集落形成率高于STRO-1阴性细胞；STRO-1阳性细胞在第14天的成骨分化能力显著高于第7天，且在第14天时成骨相关标志物的表达水平显著高于STRO-1阴性细胞，差异有显著性意义(P 一种潜在的治疗手段。

关键词： STRO-1 骨髓间充质干细胞成骨分化免疫磁细胞分选骨缺损修复种子细胞骨组织工程工程化干细胞

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童年逆境与成年期高血压患病的研究进展

中国全科医学 2025年第3期28卷 358-364页

作者：姜申吴静周佳丽蒋德楠孙炜迪程思清朱思雨侯乐莹宋培歌浙江大学公共卫生学院浙江省杭州市310058 福建省三明市疾病预防控制中心免疫规划科 365500 浙江大学医学院附属第二医院临床大数据与统计中心浙江省杭州市310006

童年逆境(ACEs)是指发生在儿童时期(18岁以前)的各种创伤事件或情况。长期并持续的ACEs可能对儿童身心健康造成终身影响。目前,欧美地区的多项研究证实了ACEs可增加个体成年期高血压的患病风险,然而不同分型的ACEs与成年期高血压的关联... 详细信息

童年逆境(ACEs)是指发生在儿童时期(18岁以前)的各种创伤事件或情况。长期并持续的ACEs可能对儿童身心健康造成终身影响。目前,欧美地区的多项研究证实了ACEs可增加个体成年期高血压的患病风险,然而不同分型的ACEs与成年期高血压的关联仍存在争议。本文对不同分型的ACEs与成年期高血压相关研究进行综述,探讨童年期不同分型逆境对成年期高血压患病的影响及其发生、发展机制,归纳总结两者间的研究现状并提出展望,为改善儿童早期发展环境、预防其成年期高血压研究提供依据。

关键词：童年不良经历童年逆境成年期高血压高血压疾病负担综述

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聚乙二醇洛塞那肽注射液与恩格列净治疗2型糖尿病早期糖尿病肾病的疗效比较

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临床合理用药 2025年第1期18卷 21-24+28页

作者：王脉桃宋卫红张亚萍周华张成梅万倩惠辉湖南省郴州市第一人民医院内分泌科

目的比较聚乙二醇洛塞那肽注射液（PEX168）与恩格列净治疗2型糖尿病（T2DM）早期糖尿病肾病（DKD）的临床疗效。方法选取2020年2月—2021年2月入住郴州市第一人民医院内分泌科的T2DM早期（G2A2期）DKD患者60例，采用随机数字表法分为... 详细信息

目的比较聚乙二醇洛塞那肽注射液（PEX168）与恩格列净治疗2型糖尿病（T2DM）早期糖尿病肾病（DKD）的临床疗效。方法选取2020年2月—2021年2月入住郴州市第一人民医院内分泌科的T2DM早期（G2A2期）DKD患者60例，采用随机数字表法分为PEX168组（n=30）和恩格列净组（n=30）,分别给予聚乙二醇洛塞那肽注射液与恩格列净治疗，2组均治疗24周。比较2组治疗前、治疗12周、24周后血糖指标[空腹血糖（FPG）、餐后2 h血糖（2 hPG）、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）]、血压[收缩压（SBP）、舒张压（DBP）]、肾功能指标[尿白蛋白—肌酐比值（UACR）、估算肾小球滤过率（eGFR）]、体质指数（BMI）、内脏脂肪面积，不良反应。结果治疗12周、24周后，2组血糖指标(FPG、2 hPG、HbA1c、HOMA-IR)、血压（SBP、DBP）均低于治疗前，且PEX168组治疗12周、24周后的SBP和治疗24周后的HOMA-IR、DBP均低于恩格列净组（P0.05）。治疗12周、24周后，2组eGFR高于治疗前，UACR、BMI及内脏脂肪面积低于治疗前，且PEX168组治疗24周后eGFR高于恩格列净组，UACR、BMI及内脏脂肪面积低于恩格列净组（P0.05）。2组均无严重不良反应发生。结论聚乙二醇洛塞那肽注射液与恩格列净均有明显的降糖及肾脏保护作用，但聚乙二醇洛塞那肽注射液对超重及腹型肥胖的T2DM早期DKD患者的肾脏保护作用更好。

关键词： 2型糖尿病糖尿病肾病聚乙二醇洛塞那肽注射液恩格列净肾小球滤过率尿白蛋白—肌酐比值

C型切开法内镜黏膜下剥离术在直肠神经内分泌肿瘤中的应用研究

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中华消化内镜杂志 2023年第1期40卷 53-57页

作者：吴秋丽苏怀盈林淑莹何壬松陈相波福建省泉州市第一医院内窥镜室泉州362000 福建省泉州市第一医院影像科泉州362000

目的评价C型切开法内镜黏膜下剥离术(C-type endoscopic submucosal dissection,C-ESD)治疗直肠神经内分泌肿瘤(neuroendocrine tumors,NEN)的临床效果。方法回顾性分析2018年1月—2021年7月期间在福建省泉州市第一医院内窥镜室行ESD治... 详细信息

目的评价C型切开法内镜黏膜下剥离术(C-type endoscopic submucosal dissection,C-ESD)治疗直肠神经内分泌肿瘤(neuroendocrine tumors,NEN)的临床效果。方法回顾性分析2018年1月—2021年7月期间在福建省泉州市第一医院内窥镜室行ESD治疗的55例直肠NEN患者资料,按治疗方案分为C-ESD组(28例)与传统ESD组(27例),比较两组剥离时间、剥离速度、黏膜下层注射次数、整块切除率、治愈性切除率及术后并发症发生率情况。结果两组基本资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。C-ESD组剥离时间(13.8±4.2)min,传统ESD组为(19.9±3.9)min,差异有统计学意义(t=5.649,P一种安全有效的治疗策略。

关键词：神经内分泌瘤直肠内镜黏膜下剥离术 C型切开法

单细胞转录组测序技术在骨质疏松症研究中的应用与进展

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中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2812-2821页

作者：孙成涛孙广江戚晓楠程茗姚啸生辽宁中医药大学辽宁省沈阳市110847 辽宁中医药大学附属第二医院骨伤一科辽宁省沈阳市110034 辽宁中医药大学附属医院骨伤一科辽宁省沈阳市110032 中国医科大学沈阳市第四人民医院辽宁省沈阳市110031

背景:骨质疏松导致的脆性骨折发病率逐年上升,亟需探索其病理生理、潜在生物标志物、治疗靶点及有效药物。骨微环境中存在多种细胞,对骨代谢的维持至关重要。近几年,单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术被开发用于表征单个细胞的转录组,并逐... 详细信息

背景:骨质疏松导致的脆性骨折发病率逐年上升,亟需探索其病理生理、潜在生物标志物、治疗靶点及有效药物。骨微环境中存在多种细胞,对骨代谢的维持至关重要。近几年,单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术被开发用于表征单个细胞的转录组,并逐步应用到骨质疏松症防治的研究。目的:综述单细胞转录组测序技术在骨质疏松症研究中的应用与进展。方法:由第一作者使用计算机检索Web of Science,PubMed和中国知网数据库中2009-2023年出版的文献,英文检索词为:“single-cell RNA sequencing,bone marrow derived stromal cells,osteoblasts,osteocytes,osteoclasts,immune cells,Bone marrow vascular endothelial cells”;中文检索词为:“单细胞转录组测序,骨髓间充质干细胞,成骨细胞,骨细胞,破骨细胞,免疫细胞,骨髓血管内皮细胞”;通过阅读筛选相关文献,最终纳入89篇文献进行综述分析。结果与结论:①单细胞转录组测序技术能够深入了解细胞发育、增殖、分化的轨迹及其调控机制。②影响骨密度的候选基因主要富集在骨髓间充质干细胞亚群,其中Sox9是关键的转录因子。③成骨细胞不同亚群中差异表达Runx2控制骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化。④破骨细胞分化过程中RAB38与组蛋白修饰和转录调控动态变化有关。⑤单细胞层面研究证实,骨微环境中存在多种细胞间通讯,破骨细胞可能通过CD160-TNFRSF14配体-受体结合进行细胞间通讯;中性粒/单核细胞与成骨细胞间可能通过RESISTIN通路进行交互;浆样树突状细胞与成骨细胞系通过表皮生长因子通路进行交流;均可以为靶点预测和药物研发提供方向。⑥新的骨髓毛细血管内皮细胞亚群,称为S型内皮细胞,完全起源于骨骺次级骨化中心,甚至比H型血管更具有可塑性。⑦文章从细胞角度总结单细胞转录组测序技术在表征不同骨组织细胞的分化命运和分化轨迹、识别新的细胞亚群、鉴定细胞调控因子及明确细胞间通讯的研究进展,为探讨骨质疏松症的病理机制、筛选潜在诊断标志物、预测治疗靶点及探究药物作用机制提供细胞层面的信息。⑧未来单细胞测序技术将向单细胞多组学(基因组、蛋白组学及代谢组学)方向及结合其他诸如空间转录组技术为骨组织细胞变化提供更有价值的信息。

关键词：单细胞转录组测序骨质疏松骨代谢骨髓间充质干细胞骨细胞破骨细胞骨免疫学骨髓血管内皮细胞

杆状病毒凋亡抑制蛋白5和胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9表达水平对尖锐湿疣患者的诊断价值

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中国现代医学杂志 2025年第02期 7-12页

作者：李佳瑶王世宁赵旭明河北北方学院附属第一医院皮肤科

目的探讨杆状病毒凋亡抑制蛋白5(BIRC5)和胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(CASP9)表达水平对尖锐湿疣（CA）患者的诊断价值。方法选取2021年9月—2023年10月在河北北方学院附属第一医院就诊的78例CA患者作为CA组，另选取同期该院50例皮肤健康... 详细信息

目的探讨杆状病毒凋亡抑制蛋白5(BIRC5)和胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(CASP9)表达水平对尖锐湿疣（CA）患者的诊断价值。方法选取2021年9月—2023年10月在河北北方学院附属第一医院就诊的78例CA患者作为CA组，另选取同期该院50例皮肤健康者作为对照组。比较各组皮损组织BIRC5、CASP9相对表达量，分析两者表达水平与CA患者临床病理参数的关系。采用Spearman法分析CA患者皮损组织BIRC5与CASP9表达水平的相关性。采用受试者工作特征（ROC）曲线评估皮损组织BIRC5、CASP9表达水平对CA的诊断效能。结果 CA组皮损组织BIRC5相对表达量高于对照组（P 一型感染患者（P 一型感染患者（P 0.05）。Spearman相关性分析结果显示，CA患者皮损组织中BIRC5与CASP9表达呈负相关（rs=-0.344,P <0.05）。皮损组织中BIRC5、CASP9表达水平诊断CA的曲线下面积分别为0.872(95%CI:0.813,0.932)、0.935(95%CI:0.893,0.977)，敏感性分别为85.9%(95%CI:0.762,0.927)、92.3%(95%CI:0.840,0.971)，特异性分别为72.0%(95%CI:0.575,0.838)、84.0%(95%CI:0.709,0.928)。BIRC5、CASP9表达水平联合诊断CA的曲线下面积为0.974(95%CI:0.950,0.997)，敏感性、特异性分别为91.0%(95%CI:0.824,0.963)、94.0%(95%CI:0.835,0.987)。结论 BIRC5、CASP9联合使用诊断CA效果显著，BIRC5和CASP9可以作为诊断CA的有效生物标志物，有助于提升诊断的准确性和效率。

关键词：尖锐湿疣杆状病毒凋亡抑制蛋白5 胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9 诊断

彩超引导下穿刺置管引流术治疗重症急性胰腺炎并积液的疗效研究

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中国普通外科杂志 2014年第9期23卷 1166-1170页

作者：曾志雄姚玉珍余卫峰张长青费洪江福建省泉州市第一医院超声科福建泉州362000 福建省泉州市第一医院消化内科福建泉州362000 福建省泉州市第一医院肿瘤外科福建泉州362000

目的:探讨彩超引导下穿刺置管引流术治疗重症急性胰腺炎(SAP)并腹腔积液的临床疗效。方法:收集131例SAP且病程中确定存在液体(II型)腹腔高压患者的临床资料,其中65例行超声引导下经皮穿刺置管引流冲洗治疗(观察组),66例行保守治疗(对照... 详细信息

目的:探讨彩超引导下穿刺置管引流术治疗重症急性胰腺炎(SAP)并腹腔积液的临床疗效。方法:收集131例SAP且病程中确定存在液体(II型)腹腔高压患者的临床资料,其中65例行超声引导下经皮穿刺置管引流冲洗治疗(观察组),66例行保守治疗(对照组)。比较两组患者相关临床指标、疗效评价指标、并发症发生率及病死率。结果:两组患者治疗前一般资料具有可比性。观察组患者在症状体征消失时间、血淀粉酶恢复正常的时间、恢复饮食的天数及总住院天数等疗效指标上均优于对照组(均P0.05)。结论:早期腹腔穿刺引流可以降低SAP并腹腔积液患者的腹腔内压力,缩短病程,降低并发症发生率,但未能明显降低病死率。

关键词：胰腺炎急性坏死性引流术超声检查介入性