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钉螺血淋巴细胞提取及其形态观察

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2013年第3期31卷 211-213页

作者：许勇黄春兰周书林刘辉皖南医学院医学一系皖南医学院医学寄生虫学教研室皖南医学院医学微生物学与免疫学教研室芜湖241002

利用软体组织破碎过滤法提取湖北钉螺(Oncomelania hupensis)血淋巴细胞,加入柠檬酸葡萄糖溶液作为抗凝剂,经吉氏染色和美兰染色后,用Motic B5计算机成像系统观察其形态。提取单只钉螺的血淋巴细胞,统计细胞数。结果共观察54个血淋巴细... 详细信息

利用软体组织破碎过滤法提取湖北钉螺(Oncomelania hupensis)血淋巴细胞,加入柠檬酸葡萄糖溶液作为抗凝剂,经吉氏染色和美兰染色后,用Motic B5计算机成像系统观察其形态。提取单只钉螺的血淋巴细胞,统计细胞数。结果共观察54个血淋巴细胞,可见3种形态:圆形有颗粒大细胞,直径(21.59～31.97)μm,细胞核呈卵圆形,有颗粒,核质比0.38±0.08,约占细胞总数35.95%(19/54);圆形无颗粒小细胞,直径(13.24～20.77)μm,细胞核呈卵圆形,无颗粒,核质比0.38±0.90,约占细胞总数51.63%(28/54);梭形细胞,大小(17.60～25.47)μm×(27.19～30.25)μm,细胞核呈长椭圆形,无颗粒,核质比0.44±0.20,约占细胞总数12.42%(7/54)。用过滤法提取单只钉螺血淋巴细胞均数约为19.46万个。该法是提取钉螺血淋巴细胞的一种有效方法。

关键词：湖北钉螺血淋巴细胞过滤法

结核分枝杆菌Rv3529c蛋白的生信分析及原核表达

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中国感染控制杂志 2023年第6期22卷 621-628页

作者：陈瑞枫王瑄马枫茜李祥芳丁寿鹏吴利先大理大学基础医学院医学微生物学与免疫学教研室云南大理671000 南昌大学玛丽女王学院江西南昌330031

目的通过生物信息学软件预测结核分枝杆菌Rv3529c基因编码蛋白的结构和功能,并对其进行原核表达。方法利用UniproKB数据库、PredictProtein服务、AlphaFold系统、SWISS-MODEL服务、ProtParam蛋白分析工具、ProtScale、DeepTMHMM服务和... 详细信息

目的通过生物信息学软件预测结核分枝杆菌Rv3529c基因编码蛋白的结构和功能,并对其进行原核表达。方法利用UniproKB数据库、PredictProtein服务、AlphaFold系统、SWISS-MODEL服务、ProtParam蛋白分析工具、ProtScale、DeepTMHMM服务和SignalP-5.0服务、ProtCompB方法、IEDB数据库和STRING数据库等生物信息学预测软件对Rv3529c编码蛋白的二级和三级结构、理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区、亚细胞定位及免疫表位进行分析预测。利用分子克隆技术构建表达质粒载体pET-32a-Rv3529c并进行原核表达,运用UniprotKB数据库的Blast工具对氨基酸序列进行比对,采用MEGA 11软件构建进化树,进行系统进化分析,运用STRING数据库分析蛋白间相互作用。结果 Rv3529c基因全长1 155 bp,共编码384个氨基酸。Rv3529c基因编码蛋白分子量为43.35 kDa,等电点为6.04,二级结构以α-螺旋为主,该蛋白为稳定的亲水性蛋白,无跨膜区、无信号肽,预测该蛋白亚细胞定位在细胞质中或细胞膜上,存在多个抗原抗体表位,与多个蛋白质有相互作用。经克隆、表达、鉴定、纯化后获得浓度和纯度较高的Rv3529c蛋白。结论成功克隆、表达、纯化结核分枝杆菌Rv3529c蛋白,并初步预测其结构及功能。

关键词：结核分枝杆菌 Rv3529c蛋白原核表达生物信息学表位

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以思政教育的大格局致力于医学微生物学实践

产业与科技论坛 2021年第12期20卷 119-120页

作者：潘中武桂琳杨成刘辉皖南医学院皖南医学院医学微生物学与免疫学教研室

医学院校加强构建三全育人的格局,将社会主义核心价值观融入到课程思政教育中。医学微生物学是一门与临床联系紧密的医学基础课程,是进行课程思政教育的良好阵地。本文从医学微生物学融入思想政治教育的必要性、具体举措、教学反思和展... 详细信息

医学院校加强构建三全育人的格局,将社会主义核心价值观融入到课程思政教育中。医学微生物学是一门与临床联系紧密的医学基础课程,是进行课程思政教育的良好阵地。本文从医学微生物学融入思想政治教育的必要性、具体举措、教学反思和展望等方面进行阐述和探讨,旨在提升医学微生物学的思想政治育人效果,增强医学生的职业操守,为新时代培养德才兼备的医学高素质人才。

关键词：思想政治教育核心价值观医学微生物学

细胞因子在非结核分枝杆菌(NTM)病中的作用研究进展

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中国病原生物学杂志 2021年第3期16卷 368-370页

作者：高婧华吴利先大理大学基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

非结核分枝杆菌(Non-tuberculous Mycobacteria)进入机体后,机体免疫功能的一系列变化导致不同细胞因子的改变,从而在NTM病的发病机制中发挥重要作用。本文就不同细胞因子在NTM病中的作用做一综述,为细胞因子变化在非结核分枝杆菌感染... 详细信息

非结核分枝杆菌(Non-tuberculous Mycobacteria)进入机体后,机体免疫功能的一系列变化导致不同细胞因子的改变,从而在NTM病的发病机制中发挥重要作用。本文就不同细胞因子在NTM病中的作用做一综述,为细胞因子变化在非结核分枝杆菌感染中的预测、诊断、疗效观察、预后评估等提供依据。

关键词：细胞因子非结核分枝杆菌发病机制综述

鸟分枝杆菌MAV-2052蛋白的生物信息学分析

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中国病原生物学杂志 2021年第2期16卷 150-154页

作者：高婧华陈晓文陈越吴利先大理大学基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

目的应用生物信息学分析软件预测鸟分枝杆菌MAV-2052蛋白的结构和功能。方法利用在线uniprot蛋白数据库、ProtParam蛋白分析网站、在线Protcale、TMHMM(TMHMM Server V 2.0)和SignalP 5.0、Softberry和PSORTⅡ Server,以及SOPMA和SWISS-MODEL等生物信息学预测软件对MAV-2052蛋白的理化性质、疏水性分析、信号肽、跨膜区、亚细胞定位及二级结构进行分析预测并对其三级结构进行模型构建;登录网站http://www.***.dtu.dk/services/netrhos/对蛋白磷酸化位点进行预测,运用uniprot蛋白数据库的Blast工具对氨基酸进行比对,采用MEGA-X软件构建进化树。结果MAV-2052基因全长933 bp,编码310个氨基酸的蛋白质。该蛋白与鸟分枝杆菌亚型起源于同一物种,与结核分枝杆菌的半胱氨酸合酶k1同源性较高。MAV-2052为稳定的疏水性蛋白,无跨膜区、无信号肽;预测该蛋白亚细胞定位在细胞质中,蛋白序列中存在13个丝氨酸磷酸化位点,二级结构以α-螺旋为主且有两个结构域;三级结构模型显示该蛋白可形成同源二聚体,但无其他配体结合空间位置。MAV-2052蛋白为半胱氨酸合酶,属于半胱氨酸合酶/半胱氨酸β合成酶家族,是调控鸟分枝杆菌生长中的重要蛋白之一。结论生物信息学预测鸟分枝杆菌MAV-2052为半胱氨酸合成酶,是调控细菌生长的重要蛋白,可为鸟分枝杆菌的靶向治疗提供新思路。

关键词：鸟分枝杆菌结构功能生物信息学分析

芍药苷通过抑制脊髓Akt-NF-kB信号通路及小胶质细胞激活缓解炎症性疼痛

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中国生物化学与分子生物学报 2018年第3期34卷 325-333页

作者：洪嘉琪史家欣敖欢章鉴东翁依佳朱佳嘉兴学院医学院微生物学与免疫学教研室浙江嘉兴314000

芍药苷具有抑制炎症和镇痛的作用,在治疗炎症疼痛方面具有重要价值,但其作用机制尚不明确。本研究发现,弗氏完全佐剂诱导小鼠炎症疼痛模型,用80 mg/kg芍药苷腹腔注射能有效缓解疼痛。检测发现芍药苷治疗后,小鼠机械性痛阈与热板痛阈均... 详细信息

芍药苷具有抑制炎症和镇痛的作用,在治疗炎症疼痛方面具有重要价值,但其作用机制尚不明确。本研究发现,弗氏完全佐剂诱导小鼠炎症疼痛模型,用80 mg/kg芍药苷腹腔注射能有效缓解疼痛。检测发现芍药苷治疗后,小鼠机械性痛阈与热板痛阈均明显升高(机械性痛阈值:由6.38±1.00 g提高至8.31±0.81 g;热板痛阈值:由5.78±0.76 s提高至9.90±1.58 s);同时抑制外周炎症因子TNF-α等的释放(由708.71±46.55 pg/m L降低至588.65±16.02 pg/m L);免疫组织化学检测发现,芍药苷能有效抑制脊髓背角小胶质细胞的激活;NO检测结果发现,脊髓部位NO合成降低(3.55±0.28μmol/L·g-1Pro降至2.25±0.71μmol/L·g-1Pro);Western印迹检测证实,脊髓部位i NOS在使用芍药苷后,表达恢复正常水平。同时发现,Akt-NF-κB信号可能参与芍药苷的镇痛作用。上述结果提示,芍药苷缓解慢性炎症疼痛可通过抑制炎症因子释放,也通过抑制脊髓小胶质细胞的激活,而此过程依赖抑制Akt-NF-κB信号的激活。

关键词：芍药苷弗氏完全佐剂疼痛小胶质细胞炎症核因子κB

大蒜素对白色念珠菌感染小鼠神经内分泌免疫系统调节作用的研究(英文)

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天然产物研究与开发 2012年第7期24卷 888-891,919页

作者：熊延靖董群皖南医学院微生物学与免疫学教研室芜湖241002

本研究旨在探讨大蒜素对白色念珠菌感染小鼠神经内分泌免疫系统(NEI)的调节作用。将小鼠随机分为三组:正常对照组、模型组、大蒜素组。除正常对照组外,模型组、大蒜素组分别建立小鼠白色念珠菌感染模型。大蒜素组小鼠给予大蒜素灌胃,其... 详细信息

本研究旨在探讨大蒜素对白色念珠菌感染小鼠神经内分泌免疫系统(NEI)的调节作用。将小鼠随机分为三组:正常对照组、模型组、大蒜素组。除正常对照组外,模型组、大蒜素组分别建立小鼠白色念珠菌感染模型。大蒜素组小鼠给予大蒜素灌胃,其余组给予等量生理盐水。连续用药14 d后,各组小鼠取血测定促肾上腺激素(ACTH)、皮质酮(CORT)、β-内啡肽(β-EP)、5-羟色胺(5-HT)的水平,测定胸腺指数及脾脏淋巴细胞增殖活性。实验结果显示,模型组小鼠NEI功能发生紊乱,与正常对照组相比,ACTH、CORT、β-EP水平均明显升高,5-HT、胸腺指数及脾脏淋巴细胞增殖活性均明显下降,差异有显著性(P<0.05)。而大蒜素组小鼠ACTH、CORT、β-EP水平较之模型组明显下降,5-HT、胸腺指数及脾脏淋巴细胞增殖活性明显升高,差异有显著性(P<0.05)。综上所述,本研究提示大蒜素对白色念珠菌感染小鼠紊乱的NEI具有明显的调节作用。

关键词：白色念珠菌 NEI 大蒜素

贝莱斯芽孢杆菌Y6抗菌肽抑制白念珠菌活性的研究

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中国真菌学杂志 2022年第3期17卷 183-187,194页

作者：杨成乔云龙厉荣玉熊延靖汤兴丽皖南医学院微生物学与免疫学教研室芜湖241002 活性生物大分子研究安徽省重点实验室(皖南医学院) 芜湖241002 皖南医学院药学院芜湖241002

目的对贝莱斯芽孢杆菌Y6代谢物抑制白念珠菌活性及其作用机理进行初步研究。方法采用平板结合牛津杯研究贝莱斯芽孢杆菌Y6发酵上清液对白念珠菌抑制活性,梯度稀释法测定了最小抑菌浓度(MIC),通过薄层色谱法对代谢物的活性成分进行筛检;... 详细信息

目的对贝莱斯芽孢杆菌Y6代谢物抑制白念珠菌活性及其作用机理进行初步研究。方法采用平板结合牛津杯研究贝莱斯芽孢杆菌Y6发酵上清液对白念珠菌抑制活性,梯度稀释法测定了最小抑菌浓度(MIC),通过薄层色谱法对代谢物的活性成分进行筛检;同时比较抗菌肽处理前和处理后菌体胞内大分子释放量及荧光染料PI的摄入量的变化,考察抗菌肽对胞膜通透性影响。结果贝莱斯芽孢杆菌Y6代谢物能有效抑制白念珠菌生长繁殖,测试浓度为10 mg·mL^(-1)时,抑菌圈直径达到(38.2±0.5)mm,其MIC浓度为0.625 mg·mL^(-1);通过薄层色谱结合茚三酮显色对活性组分筛检发现Y6代谢物中有2个抗菌组分,其中主要活性组分遇茚三酮显紫色,推测为肽类组分;经抗菌肽处理后的白念珠菌胞内大分子释放量及PI摄入量明显高于对照组,表明菌株Y6抗菌肽对白念珠菌胞膜完整性具有一定的损伤作用。结论贝莱斯芽孢杆菌Y6产肽类抗菌物质,且对白念珠菌细胞膜存在一定的损伤作用,从而产生明显的抗菌活性。

关键词：贝莱斯芽孢杆菌白念珠菌抗菌肽抗菌活性

抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌天然药物研究进展

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中草药 2016年第20期47卷 3742-3748页

作者：王鑫刘奇大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理671000

以抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)天然药物为对象,检索了近年来对其天然药物研究的相关文献,并进行归纳整理。来源于植物、动物、微生物的能有效抗MRSA的化合物,包括植物中的黄酮类、... 详细信息

以抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)天然药物为对象,检索了近年来对其天然药物研究的相关文献,并进行归纳整理。来源于植物、动物、微生物的能有效抗MRSA的化合物,包括植物中的黄酮类、萜类、蒽醌类等,动物中的抗菌肽及毒素,以及部分微生物的代谢产物等。部分化合物可作为未来抗MRSA的候选药物。目前抗MRSA的天然药物研究已经成为该领域的研究热点之一,但是多数研究仅停留在对活性药物的筛选上,缺少对候选药物的毒理、药理等深入研究。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌天然药物动物植物微生物