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表面活性素杀螺活性实验研究

中国血吸虫病防治杂志 2023年第4期35卷 394-397页

作者：杨成汤兴丽潘中武皖南医学院微生物学与免疫学教研室安徽芜湖241002

目的观察表面活性素对钉螺的影响,以期为应用芽胞杆菌杀灭钉螺提供实验基础。方法 2022年9月,于芜湖市血吸虫病流行区现场采集钉螺。剔除血吸虫感染阳性钉螺后,采用室内浸杀法,以2、1、0.5、0.25、0.125 mg/mL和0.062 5 mg/mL表面活性... 详细信息

目的观察表面活性素对钉螺的影响,以期为应用芽胞杆菌杀灭钉螺提供实验基础。方法 2022年9月,于芜湖市血吸虫病流行区现场采集钉螺。剔除血吸虫感染阳性钉螺后,采用室内浸杀法,以2、1、0.5、0.25、0.125 mg/mL和0.062 5 mg/mL表面活性素于26℃分别浸泡60只钉螺24、48 h和72 h,同时设超纯水对照组,观察表面活性素杀螺效果,计算钉螺半数致死浓度(LC_(50))。参考上述浸泡杀螺活性实验结果选择表面活性素实验浓度,分别以0.5 mg/mL浓度表面活性素(实验组)和超纯水(对照组)浸泡处理钉螺,采用碘化丙啶(PI)荧光法于荧光显微镜下观察钉螺血淋巴细胞PI摄取情况。结果经0.062 5 mg/mL表面活性素浸杀24 h,钉螺死亡率为5.0%(3/60);2 mg/mL表面活性素浸杀72 h,钉螺死亡率为100.0%(60/60);而对照组未发现钉螺死亡,不同组间钉螺死亡率差异有统计学意义(χ^(2)_(24h)=180.150,χ^(2)_(48h)=176.786,χ^(2)_(72h)=216.487,P均学意义(χ^(2)=150.264,P<0.05)。表面活性素浸杀钉螺24、48 h和72 h LC_(50)值分别为0.591、0.191 mg/mL和0.054 mg/mL。荧光显微镜下可见,经0.5 mg/mL表面活性素浸杀24 h后,实验组钉螺摄入PI染料的血淋巴细胞数显著高于对照组(χ^(2)=6.690,P<0.05)。结论表面活性素具有杀灭钉螺活性,可能与其改变钉螺血淋巴细胞膜完整性有关。

关键词：钉螺表面活性素杀螺活性血淋巴细胞

低HMGB1含量的肿瘤细胞裂解物增强树突状细胞的抗肺癌作用

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南方医科大学学报 2023年第6期43卷 906-914页

作者：潘中武李思琪王耀辉刘海军桂琳董博翰皖南医学院医学微生物学与免疫学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院生物化学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院药学院安徽芜湖241002

目的探讨低含量高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的肿瘤细胞裂解物(TCL)对树突状细胞抗肺癌作用的影响。方法反复冻融的方法制备Lewis肺癌细胞TCL。Western blot检测TCL中HMGB1蛋白的表达情况。用30 nmol/L甘草酸(GA)抑制Lewis肺癌细胞中HMGB1... 详细信息

目的探讨低含量高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的肿瘤细胞裂解物(TCL)对树突状细胞抗肺癌作用的影响。方法反复冻融的方法制备Lewis肺癌细胞TCL。Western blot检测TCL中HMGB1蛋白的表达情况。用30 nmol/L甘草酸(GA)抑制Lewis肺癌细胞中HMGB1的表达,进而制备低含量HMGB1的TCL(LH-TCL)。用未处理的Lewis肺癌细胞制备正常含量HMGB1的TCL(NH-TCL)。分为不同剂量NH-TCL负载DC组、LH-TCL负载DC组及PBS对照组,用流式细胞术检测体外诱导的小鼠树突状细胞(DC)表面CD11b、CD11c、CD86表达或细胞凋亡,用酶联免疫吸附试验检测DC细胞IL-12分泌情况。分为NH-TCL刺激DC活化的脾细胞组、LH-TCL刺激DC活化的脾细胞组及PBS对照组,用流式细胞术检测小鼠脾细胞表面CD69的表达情况,酶联免疫吸附试验检测小鼠脾细胞TNF-β的分泌。分为NH-TCL刺激DC活化的脾细胞组、LH-TCL刺激DC活化的脾细胞组及PBS对照组,并设5∶1、10∶1、20∶1三个效靶比进行体外杀伤实验,采用CCK8法检测小鼠脾细胞杀伤肿瘤细胞的活性。分为未活化DC组、NH-TCL活化的DC组、LH-TCL活化的DC组及PBS对照组,通过体内抑瘤实验,评估DC过继免疫细胞疗法抑制小鼠皮下移植瘤生长的效果。结果GA作用后的Lewis肺癌细胞制备的TCL中,HMGB1的含量显著降低(P免疫作用(P免疫负载LH-TCL的DC可明显抑制肿瘤组织生长(P免疫作用,提高DC过继免疫细胞治疗的疗效,为该免疫治疗方法的改进提供了一个新的途径。

关键词：肿瘤细胞裂解物小鼠脾细胞肺癌细胞抗肿瘤免疫高迁移率族蛋白B1

贝莱斯芽孢杆菌Y6杀螺活性及其机制的初步研究

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中国血吸虫病防治杂志 2021年第3期33卷 248-253,261页

作者：杨成乔云龙刘辉潘中武皖南医学院微生物学与免疫学教研室芜湖241002 皖南医学院药学院

目的评价芽孢杆菌Y6实验室内杀螺活性,初步探讨其杀螺作用机制。方法应用形态学、生理生化特性及16S r DNA基因序列同源性分析,对菌株Y6进行生物学鉴定。配制浓度分别为0.005、0.010、0.015 g/m L的芽孢杆菌Y6悬液,采用浸泡法评价其室... 详细信息

目的评价芽孢杆菌Y6实验室内杀螺活性,初步探讨其杀螺作用机制。方法应用形态学、生理生化特性及16S r DNA基因序列同源性分析,对菌株Y6进行生物学鉴定。配制浓度分别为0.005、0.010、0.015 g/m L的芽孢杆菌Y6悬液,采用浸泡法评价其室内杀螺效果。检测芽孢杆菌Y6悬液浸泡后钉螺软体组织内Y6菌体含量和糖原含量变化,初步探讨其杀螺机制。结果 Y6菌落呈乳白色、不透明,在营养琼脂培养基表面有菌膜形成;革兰氏染色呈阳性,杆状;芽孢位于菌体中间,呈无色透明折光小体,被菌体包裹;卵磷脂酶试验呈阳性,Y6菌体16S r DNA基因序列与多株贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensisis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)同源性均为100%,将菌株Y6鉴定为贝莱斯芽孢杆菌。0.005、0.010、0.015 g/m L芽孢杆菌Y6悬液浸泡24、48、72 h后,钉螺死亡率分别为28.3%、31.7%和81.6%,43.3%、58.3%和93.3%及63.3%、78.3%和98.3%;随着悬液浓度增加、浸泡时间延长,菌株Y6悬液杀螺效果提高。采用染色镜检法和平板菌落计数法观察发现,菌株Y6悬液浸泡后的死螺体内Y6菌体含量最高、活螺体内最低;经芽孢杆菌Y6悬液浸泡后,死螺、濒死螺和活螺软体组织内平均糖原含量分别为(0.68±0.06)、(1.09±0.16)μg/mg和(2.56±0.32)μg/mg(F=59.519,P <0.05),活螺软体组织内平均糖原含量显著高于死螺(t=14.073,P <0.05)和濒死螺(t=10.027,P <0.05),而濒死螺软体组织内平均糖原含量显著高于死螺(t=5.983,P <0.05)。结论贝莱斯芽孢杆菌Y6对钉螺具有较好杀灭效果,其杀螺机制可能是菌体侵染致螺体内糖原代谢紊乱而引起钉螺死亡。

关键词：钉螺贝莱斯芽孢杆菌杀螺效果糖原

自然杀伤（NK）细胞应对结核分枝杆菌感染的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2024年

作者：任芹杨国平大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室

结核病（TB）是由结核分枝杆菌（MTB）感染引起的严重威胁人类健康的慢性传染病。自然杀伤（NK）细胞作为先天免疫的重要组成部分，在应对MTB感染时，NK细胞可分化出不同亚群，表现出受体和功能的多样性；并通过分泌细胞因子，串联其他... 详细信息

结核病（TB）是由结核分枝杆菌（MTB）感染引起的严重威胁人类健康的慢性传染病。自然杀伤（NK）细胞作为先天免疫的重要组成部分，在应对MTB感染时，NK细胞可分化出不同亚群，表现出受体和功能的多样性；并通过分泌细胞因子，串联其他免疫细胞发挥对MTB的抗感染作用，从而增强机体的抗MTB免疫应答反应。

关键词：自然杀伤(NK)细胞感染与免疫 NK细胞表型与受体抗结核免疫综述

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大蒜素对白色念珠菌生物被膜形成的作用

菌物学报 2020年第2期39卷 343-351页

作者：熊延靖吴艳红皖南医学院医学微生物学与医学免疫学教研室安徽芜湖241002

生物被膜的形成是白色念珠菌产生耐药性的重要原因之一。本研究首先构建白色念珠菌体外生物被膜模型,通过倒置显微镜和甲基四氮盐(XTT)法检测大蒜素对白色念珠菌生物被膜形成的影响,同时采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)对白色念珠菌生... 详细信息

生物被膜的形成是白色念珠菌产生耐药性的重要原因之一。本研究首先构建白色念珠菌体外生物被膜模型,通过倒置显微镜和甲基四氮盐(XTT)法检测大蒜素对白色念珠菌生物被膜形成的影响,同时采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)对白色念珠菌生物被膜相关基因ALS1、ALS3、HWP1、MP65、SUN41的表达水平进行检测。结果显示,当大蒜素浓度≥12.5μg/mL时,白色念珠菌生物被膜的生长被抑制,并且在生物被膜形成的早期,大蒜素干预能有效抑制其形成;大蒜素能下调白色念珠菌生物被膜相关基因ALS1、ALS3、HWP1、MP65、SUN41的表达水平。研究结果提示,大蒜素可有效抑制体外白色念珠菌生物被膜的形成,可能与其下调生物被膜相关基因的表达有关。

关键词：白色念珠菌生物被膜大蒜素

疫情期间医学免疫学“线上翻转”教学实践与思考

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中国免疫学杂志 2020年第19期36卷 2334-2338,2342页

作者：刘辉吴艳红厉荣玉朱涛董博翰皖南医学院医学微生物学与免疫学教研室芜湖241002

本文以疫情期间针对皖南医学院2018级临床医学专业本科学生开展的医学免疫学"线上翻转"教学为例,阐述了疫情背景下从教学准备、教学设计到教学实施的"线上翻转"教学全过程及由线上教学实践引发的对教学理念、教学模式、教学方法的思考... 详细信息

本文以疫情期间针对皖南医学院2018级临床医学专业本科学生开展的医学免疫学"线上翻转"教学为例,阐述了疫情背景下从教学准备、教学设计到教学实施的"线上翻转"教学全过程及由线上教学实践引发的对教学理念、教学模式、教学方法的思考。医学免疫学"线上翻转"教学,既是对特殊时期"停课不停学"的响应,更是对"以学习为中心"理念的主动呼应,为线上线下融合教学拉开序幕。

关键词：线上教学翻转课堂医学免疫学课程思政

香菇多糖抑制乳腺癌4T1细胞小鼠移植瘤增殖机制研究

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中华肿瘤防治杂志 2021年第2期28卷 111-116页

作者：徐文琴吴艳红余方流高云星皖南医学院微生物学与免疫学教研室安徽芜湖241002

目的观察香菇多糖对乳腺癌小鼠的脾脏、肿瘤组织及外周血中白细胞介素-35(IL-35)表达影响,探讨香菇多糖抑制乳腺细胞癌的可能作用机制。方法 30只雌性Balb/c小鼠分为对照组、模型组和香菇多糖给药组(200mg/kg),每组10只。注射4T1细胞建... 详细信息

目的观察香菇多糖对乳腺癌小鼠的脾脏、肿瘤组织及外周血中白细胞介素-35(IL-35)表达影响,探讨香菇多糖抑制乳腺细胞癌的可能作用机制。方法 30只雌性Balb/c小鼠分为对照组、模型组和香菇多糖给药组(200mg/kg),每组10只。注射4T1细胞建立4T1乳腺癌小鼠模型,给药组持续灌服给药香菇多糖,每只小鼠给药剂量200mg/kg,1次/d,对照组和模型组同时给予等量的生理盐水,共24d。每隔2d测量体质量和瘤体体积,治疗结束后剖取肿瘤组织和肺脏分别用于记录肿瘤质量和肺表面转移结节数;采用酶联免疫吸附法检测血清中γ-干扰素(IFN-γ)、IL-4和IL-35水平;采用定量PCR检测肿瘤组织和脾组织中IL-35mRNA相对表达水平;蛋白质印迹法检测脾组织中IL-35蛋白表达。采用SPSS 23.0对数据进行统计学分析,2组比较采用t检验,荷瘤小鼠肿瘤生长曲线采用双因素方差分析,多组比较采用单因素方差分析,多重比较采用LSD法;不符合正态分布,采用非参数检验。结果给药组肿瘤生长速度减缓并在第24天后肿瘤大小低于模型组肿瘤大小,差异有统计学意义,F=6.313,P学意义,U=18.00,P学意义,F=18.517,P学意义,F=28.180,P学意义,t=5.607,P学意义,t=3.433,P学意义,F=12.052,P学意义,F=17.618,P学意义,F=11.901,P学意义,F=9.207,P免疫功能密切相关。

关键词：香菇多糖乳腺癌白细胞介素-35 γ-干扰素

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大蒜素对白色念珠菌毒力因子作用机制的研究

中成药 2020年第11期42卷 2964-2970页

作者：熊延靖吴艳红陈京皖南医学院医学微生物学与医学免疫学教研室安徽芜湖241002

目的探讨大蒜素对白色念珠菌毒力因子的作用机制。方法采用CLSI-M27-A3微量液基稀释法检测大蒜素对白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC);通过时间-杀菌曲线检测大蒜素的杀菌作用;Spider液体培养基中观察大蒜素对白色念珠菌菌丝生长的影响;qRT... 详细信息

目的探讨大蒜素对白色念珠菌毒力因子的作用机制。方法采用CLSI-M27-A3微量液基稀释法检测大蒜素对白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC);通过时间-杀菌曲线检测大蒜素的杀菌作用;Spider液体培养基中观察大蒜素对白色念珠菌菌丝生长的影响;qRT-PCR法检测大蒜素对白色念珠菌菌丝相关基因表达的影响;卵黄乳液琼脂平板法检测大蒜素对白色念珠菌细胞外磷脂酶活性的影响。结果大蒜素对白色念珠菌的MIC值为12.5~25μg/mL;时间-杀菌曲线显示2 MIC、4 MIC浓度的大蒜素对白色念珠菌生长保持有效的抑制作用;在Spider液体培养基中,1 MIC、2 MIC、4 MIC浓度的大蒜素能明显抑制白色念珠菌菌丝的生长;qRT-PCR结果显示,在1 MIC、2 MIC、4 MIC浓度的大蒜素作用下,白色念珠菌菌丝相关基因表达下调;当大蒜素浓度≥1/2 MIC时,白色念珠菌细胞外磷脂酶的活性降低。结论大蒜素可通过抑制白色念珠菌菌丝生长、调节菌丝相关基因的表达,以及抑制细胞外磷脂酶活性等,发挥抑制白色念珠菌毒力因子的作用。

关键词：大蒜素白色念珠菌菌丝作用机制

白芍总苷对EAT小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响

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基础医学与临床 2019年第8期39卷 1157-1162页

作者：童芳刘辉董群王萍皖南医学院医学微生物学与免疫学教研室

目的建立实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)小鼠模型,观察不同剂量白芍总苷(TGP)治疗组小鼠脾细胞中调节性T细胞(Treg)和Th17细胞比例及其功能的变化。方法将EAT模型小鼠随机共分为模型(model)组、高剂量TGP(THD)组、中剂量TGP(TMD)组、低... 详细信息

目的建立实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)小鼠模型,观察不同剂量白芍总苷(TGP)治疗组小鼠脾细胞中调节性T细胞(Treg)和Th17细胞比例及其功能的变化。方法将EAT模型小鼠随机共分为模型(model)组、高剂量TGP(THD)组、中剂量TGP(TMD)组、低剂量TGP(TLD)组和雷公藤多苷(TII)组共5组;real-time PCR检测脾细胞中Foxp3 mRNA和RORγt mRNA的表达;流式细胞计量术检测脾细胞中Treg和Th17细胞的比例;ELISA检测血清中TGF-β1和IL-17的水平;化学发光法检测血清中抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)的水平。结果TGP处理组(包括低、中和高剂量组)Th17细胞比例较模型组明显降低(P免疫平衡,有利于EAT疾病的转归,其中以中和高剂量TGP组疗效显著。

关键词：实验性自身免疫性甲状腺炎抗甲状腺球蛋白抗体白芍总苷 Treg/Th17免疫平衡雷公藤多苷